Laboratorio N5: Determinacin espectrofotomtrica

de una constante de equilibrio.

Nicols Franco Takehisa, Torres Olea, Ingeniera en biotecnologa molecular,
nicolas.torres.olea@ug.uchile.cl, laboratorio realizado el jueves 12 de octubre de 2017.

Esta sesin practica tiene como objetivo encontrar Ka, para ello Adems, usaremos el valor de Ka obtenido en la bibliografa [6]
se medir pH y absorbancia de varias mezclas de 2,4-DNF y buffer (8,51*10-5) para calcular el error de nuestro calculo.
citrato a diversos pH. El valor de pKa obtenido es 4,68, con un
error de 13,76%. Finalmente se calcula un Ka de 2,09*10-5, con un
error del 75,44%.
II. MATERIALES.
Buffer citrato a diferentes pH.
I. INTRODUCCIN. 2,4-DNF
En este laboratorio se determinar la constante de ionizacin Probeta y pipeta
(Ka) del 2,4-DNF. Para ello mediremos el pH y absorbancia de Vaso precipitado
diferentes mezclas de dicho acido con un buffer en diferentes Cubeta
valores de pH. Espectrofotmetro
Ya teniendo el pH y absorbancia de la mezcla, calcularemos la pH-metro
concentracin del anin en solucin con la siguiente ecuacin
[5]: III. PROCEDIMIENTOS.
1. Usar el pH-metro para comprobar el pH del buffer
Despejamos: citrato a pH 3,3.
2. Mezclar dicho 50 mL de dicho buffer con 5 mL de
2,4-DNF.
3. Medir pH de la mezcla con el pH-metro y luego su
absorbancia en el espectrofotmetro.
Donde: A es la absorbancia; es el coeficiente de extincin; l la 4. Realizar el mismo procedimiento con los otros buffers a
distancia por la que pasa la luz. diferentes pH.
La distancia l corresponde al ancho de la cubeta que en nuestro 5. Anotar todos los datos obtenidos y realizar una tabla, la
caso mide 1 cm. cual se comparar con los datos proporcionados por el
Ya calculados los valores de [A-] de las diferentes mezclas, docente.
podemos, en conjunto a [HA] y el pH, realizar un grfico que
nos permita conocer el valor de pKa (el pH se midi IV. DATOS BRUTOS.
directamente con el pH-metro). Dentro de este grfico nuestro
Por recomendacin del docente se proceder a usar los datos
valor requerido corresponder a la interseccin de la recta con
proporcionados en laboratorio, ya que no se obtuvieron buenos
el eje y (es decir, cuando x = 0). Esta forma de anlisis fue
valores con las mediciones realizadas. Los siguientes valores
extrada de la literatura [3].
corresponden a la tabla escrita en la pizarra del laboratorio:
Luego de obtener el pKa, calcularemos el porcentaje de error
utilizando como valor real 4,114 [2]. Buffer Buffer + DNF Absorbancia
citrato (Ph) (nm)
Finalmente, para conocer la constante de ionizacin 3,35 3,90 0,216
utilizaremos la ecuacin [4]: 3,54 4,04 0,240
3,73 4,25 0,254
3,92 4,46 0,269
Despejamos Ka: 4,05 4,56 0,270
4,32 4,82 0,274
4,51 4,94 0,282
4,70 5,12 0,287
Figura 1. Tabla de medicin de pH y absorbancia de mezclas de 2,4-DNF con
buffer a diferentes pH.

1
 V. TRANSFORMACIN DE DATOS. 5,4

Para los clculos realizados en este trabajo practico no ser 5,2

necesario realizar conversin de unidades, de manera que todos 5,0

los datos se mantendrn tal cual se tomaron.

4,8

VI. CLCULOS Y GRFICOS. 4,6

pH
Sabiendo que el coeficiente de extincin molar del anin es 4,4

1.085*104M-1cm-1, y que el anin absorbe radiacin 4,2

electromagntica a 400 nm, podemos medir su absorbancia, y
4,0
con eso usar la ecuacin (1) para calcular [A-], al mismo tiempo,
con la concentracin total podemos calcular [HA]. Debemos 3,8
-0,20 -0,15 -0,10 -0,05 0,00 0,05 0,10
recordar que la solucin original del cido a 1*10-3M fue diluida log([A-]/[HA])
a una concentracin de 5*10-5M. Los valores de [A-] y [HA] se Figura 4. Grfico de los datos de la tabla 1 (crculos negros), y su
muestran a continuacin: correspondiente ajuste lineal en rojo (el cual posee un ajuste de pendiente, con
B=1).

[A-] [HA] Linear Regression for DATA1_B:

1,99E-05 3,01E-05 Y=A+B*X
2,21E-05 2,79E-05
Parameter Value Error
2,34E-05 2,66E-05 ------------------------------------------------------------
2,48E-05 2,52E-05 A 4,54284 0,12819
B 1 --
2,49E-05 2,51E-05
------------------------------------------------------------
2,53E-05 2,47E-05
2,60E-05 2,40E-05 R SD N P
------------------------------------------------------------
2,65E-05 2,35E-05
Figura 2. Concentraciones de [A-] calculadas con absorbancia y [HA] 0,94275 0,36256 8 0,12519
calculadas por diferencia con la concentracin total (diluida) y [A-]. ------------------------------------------------------------

Para hacer el grafico calcularemos log([A-]/[HA]): A partir de estos datos Podemos deducir que la ecuacin que
define el ajuste lineal es:
log([A-]/[HA])
-0,17942943
-0,10051414 Sabemos por literatura que el pKa corresponde a la interseccin
-0,0553121 de la recta con el eje y. Por lo tanto, con los datos
proporcionados obtenemos que:
-0,00720505
-0,00400274
0,00880627
Con este valor, calcularemos el porcentaje de error, el cual es:
0,03444138
0,05049099
Figura 3. Calculo de log([A-]/[HA]) para la ejecucin del grfico.
Para finalizar, calcularemos la constante de ionizacin con la
ecuacin (2). El valor obtenido para dicha constante es:

El error obtenido para Ka es:

VII. DISCUSIN.
Grafico para obtener pKa: En este trabajo practico se logr determinar la constante de
ionizacin del 2,4-DNF usando absorbancias y pH.
 Como sabemos, se puede medir la absorbancia de [A-] a 400
nm, siendo fundamental para el clculo, con esto tambin
podemos, por diferencia, calcular la concentracin de [HA],
conociendo la concentracin inicial del cido. Es muy
importante notar que, al realizar la mezcla, el cido se diluye, lo
cual fue considerado en los clculos. Para calcular el pKa, se
hizo un grfico de pH vs log([A-]/[HA]), y tomamos la
interseccin en y como el valor requerido, esto se fundamenta
en la ecuacin de Henderson-Hasselbalch:
[3] Adamson, R. & Parks, P.C. (1971). An experiment in coupled
equilibria. Journal of Chemical Education.
[4] https://en.wikipedia.org/wiki/Acid_dissociation_constant
[5] https://en.wikipedia.org/wiki/Absorbance
[6] Haynes, W. (2016). Handbook of Chemistry and Physics.
CRC Press.

Podemos notar en la ecuacin, que cuando log([A-]/[HA])

tiende a cero el pH es igual al pKa, y como es una funcin lineal
es fcil determinar la interseccin con y. Adems, se puede
apreciar la homologa de esta ecuacin con la ecuacin de la
recta, siendo pH el eje y, log([A-]/[HA]) es n (interseccin con
y), y pKa corresponde a x. Notamos que pKa no posee un
coeficiente que represente a B, por lo tanto, se infiere que es 1,
lo que genera e ajuste de pendiente presente en el grafico.
Podemos notar que los datos proporcionados arrojaron un
error de 10,35%, lo cual es poco, sin embargo, puede acarrear
un gran error ms adelante.
Para el clculo de Ka se utiliz una ecuacin simple extrada
de la literatura. El valor obtenido tubo un error muy grande,
correspondiente al 66,11%, lo que deja este valor
completamente inhabilitado para ser usado en algn otro
experimento que lo requiera. Como se mencion anteriormente,
un pequeo error en el clculo de pKa puede alterar
significativamente el resultado de la constante de ionizacin,
esto ocurre debido a que la ecuacin para calcular dicha
constante a partir del pKa es un antilogaritmo, lo que
corresponde a una funcin exponencial, implicando a cualquier
cambio en el exponente, un gran cambio en el resultado final.
Sabemos que la escala de pH indica que mientas mayor sea el
nmero, ms bsica es la solucin, y mientras menos sea, la
solucin es ms acida. El punto de exponer un mismo acido a un
buffer en distintos pH permite apreciar el grado de disociacin
que tiene este acido, al ser un cido dbil no se disociara
completamente, y la liberacin de sus protones depender del
pH de la solucin en la que se encuentre el cido. Podemos
notar en los datos, que a medida aumenta el pH de la solucin, la
absorbancia detecta mayor concentracin de A-, lo que a su vez
se interpreta como una liberacin mayor de protones, por lo que
se infiere que si el cido se encontrara en un medio acido, es
decir, con gran concentracin de protones libres, este no cedera
su propio protn al medio, aun as la disociacin ocurre a un pH
bastante acido, por lo tanto, este acido requiere un pH
extremamente acido para que exista muy poca disociacin.

REFERENCIAS
[1] https://pubchem.ncbi.nlm.nih.gov/compound/2_4-dinitrophe
nol#section=Substances-by-Category
[2] https://en.wikipedia.org/wiki/2,4-Dinitrophenol