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A continuacin, se presenta un listado de equipos utilizados frecuentemente en el laboratorio

de Biotecnologa, consulte sus principales usos y precauciones de manejo.


Micropipetas: La micropipeta es un instrumento de laboratorio empleado para absorber y
transferir pequeos volmenes de lquidos y permitir su manejo en las distintas tcnicas
cientficas. Los volmenes captables por estos instrumentos varan segn el modelo: los ms
habituales, denominados p20, p200 y p1000, admiten un mximo de 20, 200 y 1000 l,
respectivamente.
Cuidados de manejo.
iniciar el da limpiando la parte externa de las pipetas de polvo o suciedad, Use solamente
etanol al 70% para la limpieza de la pipeta. Otro tipo de solvente no es aconsejable, utilizar
las puntas adecuadas a las pipetas y a la cantidad de solucin que se va a medir, el pistn y
el cilindro pueden ser chequeados dos veces al ao si la pipeta es usada diariamente, el
mantenimiento preventivo de la pipeta tiene que ser realizado por personal especializado de
mantenimiento.
Pipetas multicanal: La multidosificacin agiliza el pipeteo repetitivo al calcular cuntas
partes alcuotas se pueden dosificar con una sola recogida.
Centrfuga refrigerada: Equipo que permite la centrifugacin de tubos (0,2-50 ml) para la
separacin de constituyentes de mezclas lquidas o suspensiones, a temperaturas
comprendidas entre 20 y 40 C. Tambin permite la separacin de clulas y macromolculas.
Mantenga la centrfuga limpia de restos de muestras, vidrio o polvo, cuando est
centrifugando mantenga cerrada la tapadera. Si algo se rompe apague inmediatamente el
equipo y no lo abra hasta que se detenga o el indicador de apertura de la tapadera lo indique,
reemplace los recipientes metlicos que estn deformados, pues producen una presin no
uniforme sobre el tubo de muestra, no utilice equipo de vidrio rallado o agrietado, porque la
presin centrfuga puede producir una ruptura en estos puntos, pulverizando el vidrio y
contaminando las otras muestras.
Centrfuga de mesa: mquina que pone en rotacin una muestra para acelerar por fuerza
centrfuga la decantacin o sedimentacin de sus componentes o fases (generalmente una
slida y una lquida), en funcin de su densidad. (Aplican los cuidados nombrados
anteriormente).
Agitador con temperatura: Ideal para realizar todas aquellas aplicaciones en donde se
requiera de agitacin en un ambiente seco con temperatura controlada, tales como cultivos
de microrganismos en medios lquidos. Permite la Circulacin de aire forzado que favorece
la homogeneidad de la temperatura en el interior de la cmara.
Se debe Conectar el dispositivo nicamente a un circuito elctrico con el voltaje
correspondiente al que aparece en la etiqueta del nmero de serie asegurarse de que se puede
acceder con facilidad al interruptor del circuito elctrico y al enchufe durante el uso y
Desconectar la unidad del circuito elctrico antes de moverla. Adems No impida el
movimiento de la plataforma, no ponga la unidad en funcionamiento en instalaciones con
mezclas de productos qumicos explosivos o agresivos, no desconecte el cable de control
del agitador cuando la unidad est encendida.
Cmara de Electroforesis: La electroforesis es un mtodo bsico en el campo de la biologa
molecular para el anlisis (Separacin, purificacin, preparacin) de los cidos nucleicos y
protenas. As como el microscopio permite visualizar microorganismos y estructuras
similares, la electroforesis nos ayuda a observar los cidos nucleicos y protenas. El principio
de la electroforesis consiste en la migracin de las molculas a travs de un gel u otro tipo de
matriz de naturaleza porosa, en el cual, por accin de un campo elctrico, sern separadas de
acuerdo a su tamao o peso molecular. En la electroforesis de tipo vertical, se analizan tanto
molculas de ADN como protenas, mientras que en la electroforesis horizontal generalmente
se trabaja con ADN o ARN.
Los voltajes utilizados en electroforesis pueden proporcionar descargas elctricas letales. El
peligro se incrementa por el uso de soluciones acuosas reguladoras y la posibilidad de trabajar
en ambientes hmedos. La base del aparato debe estar conectada a tierra de tal forma que
cualquier escape de la solucin electrolitos produzca un corto que desactive la fuente de
energa.
Fuente de poder para cmara de electroforesis: Cubren un rango de voltajes y corrientes
necesarios para trabajar con todas las unidades de Electroforesis, el voltaje y la corriente
puede ser ajustados durante la corrida de la muestra.
Transiluminador: El transiluminador es un equipo necesario que usa en principio luz UV
con diferentes longitudes de onda como recurso para observar, analizar y tomar fotografas
de protenas, aminocidos, pptidos, cidos nucleicos en geles de agarosa con colorantes
como el bromuro de etidio
Coloque el instrumento en un lugar en donde no est sujeto a vibraciones, calor excesivo,
humedad o luz directa, proteja el instrumento del polvo. Nunca toque las superficies pticas
tales como lentes y filtros. Siga las instrucciones que da el fabricante para la limpieza de tales
componentes, permita que el instrumento se caliente antes de hacer algn procedimiento, se
debe hacer un chequeo peridico (cada semana) del ajuste de la longitud de onda, cuando se
sospeche que ha variado.
Termociclador: Un termociclador, tambin conocido como mquina de PCR o reciclador
trmico de PCR es un aparato usado en Biologa Molecular que permite realizar los ciclos de
temperaturas necesarios para una reaccin en cadena de la polimerasa de amplificacin de
ADN o para reacciones de secuencia con el mtodo de Sanger. El modelo ms comn
consiste en un bloque de resistencia elctrica que distribuye a travs de una placa una
temperatura homognea durante tiempos que pueden ser programables, normalmente con
rangos de temperatura de 4 C a 96 C. Dado que las reacciones incubadas en el aparato son
en soluciones acuosas, suelen incluir una placa de tapa calentada constantemente a 103 C
para evitar la condensacin de agua en las tapas de los tubos donde ocurre la reaccin, y as
evitar que los solutos se concentren, lo que modificara las condiciones ptimas para la
enzima polimerizante y la termodinmica del apareamiento de los iniciadores.
Muchos instrumentos en los laboratorios pueden provocar ciertos accidentes, y el
termociclador no es la excepcin:
- El calentar las muestras puede provocar explosiones debido a la diferencia de
velocidad de calentamiento produce burbujas que pueden estallar.
- Si no se tiene aflojado el tapn de las botellas o matraces es posible que estos estallen.
- Se debe utilizar la ropa y pantalla facial adecuadas, y controlar la intensidad del
aparato, que solo puede ser la mxima con agua y la mnima si se utiliza gel de
agarosa.
- Deber existir una tabla que muestre los tiempos en cada posicin del potenciometro
y de las cantidades a emplear.
Electroporador: La electroporacin o electropermeabilizacin consiste en provocar un
aumento significativo de la conductividad elctrica y la permeabilidad de la membrana
plasmtica celular mediante un campo elctrico aplicado externamente. La electroporacin
se lleva a cabo en un electroporador, un aparato que crea un campo electromagntico a travs
de la suspensin celular (tpicamente bacterias, aunque se puede aplicar a otros tipos de
clulas, como se ha comentado anteriormente). La suspensin se pipetea en una cubeta de
plstico o vidrio con electrodos de aluminio en los costados.
El tratamiento de electroporacin es totalmente tolerado y seguro a diferencia de otras
tcnicas, no provoca ningn tipo de dao o malestar, su nica contravencin de uso es y no
debe ser utilizado en personas con marca pasos o implantes electrnicos. O Mujeres
embarazadas. para otras referencias de uso por otras afecciones queda a criterio del
profesional que aplique el tratamiento.
Cabinas de bioseguridad: Una cabina de bioseguridad, cabina de seguridad biolgica o
cabina de seguridad microbiolgica es un recinto o espacio de trabajo cerrado y ventilado
para trabajar de modo seguro con materiales contaminados (o potencialmente contaminados)
con agentes patgenos (bacterias, virus...) y forma parte del equipamiento de laboratorio de
muchas unidades biomdicas
- Se llevar a cabo una desinfeccin completa en las siguientes situaciones: a) en caso
de que se haya producido un vertido importante; b) antes de cualquier reparacin; c)
antes de iniciarse los chequeos peridicos; d) siempre que se cambie el programa de
trabajo; e) cuando se substituyan los filtros HEPA y f) al cambiarla de lugar (incluso
dentro del mismo laboratorio).
- Se realizar con vapores de formaldehdo y siempre por personal debidamente
entrenado y con las prendas de proteccin personal adecuadas.
- Por otro lado, debe tenerse en cuenta que una buena limpieza de la zona de trabajo es
una garanta de ausencia de polvo y otros contaminantes. La limpieza tiene por objeto
eliminar la suciedad que se halla adherida a las superficies y que sirve de soporte a
los microorganismos. Al limpiar se elimina tambin la materia orgnica,
contribuyendo de forma decisiva a la eficacia de la posterior descontaminacin.
- Es conveniente una vez a la semana levantar la superficie de trabajo y limpiar y
descontaminar por debajo de ella.
- Nunca se debe utilizar la cabina como almacn transitorio de equipo o material de
laboratorio. Esta mala prctica conduce a una acumulacin de polvo totalmente
innecesaria.
- Evitar introducir en la cabina materiales que emitan partculas fcilmente como
algodn, papel, madera, cartn, lpices.
Cabina de flujo laminar: Una cabina de flujo laminar, cmara de flujo laminar o campana
de flujo laminar es un recinto que emplea un ventilador para forzar el paso de aire a travs
de un filtro HEPA o ULPA y proporcionar aire limpio a la zona de trabajo libre de partculas
de hasta 0.1 micras. Este tipo de equipos se fabrican en forma generalmente prismtica con
una nica cara libre (la frontal) que da acceso al interior, donde se localiza la superficie de
trabajo, que normalmente permanece limpia y estril. El aire es inyectado a la zona de trabajo
a travs de un filtro HEPA o ULPA e insuflado en forma de un flujo laminar o flujo
unidireccional, muy suave, hacia el usuario. La superficie de trabajo de la cabina se construye
generalmente de acero inoxidable grado 304 o superior para facilitar su limpieza y aumentar
su durabilidad por el uso, con acabados sanitarios, sin espacios o juntas donde las esporas
pueden llegar a acumularse.
Una adecuada destreza minimizar el riesgo de derrames accidentales. En caso de escape de
muestra, es necesario actuar con prontitud con el fin de evitar la contaminacin (retirar y
esterilizar la superficie de trabajo, tratar el vertido mediante un agente bactericida adecuado
y eliminarlo mediante material absorbente). Cada da, al finalizar la sesin de trabajo, es
necesaria la limpieza y desinfeccin de la cmara de trabajo. Para este fin se recomienda el
alcohol etlico al 70% o algn desinfectante de probada eficacia para los microorganismos
manipulados. No se deben utilizar derivados del cloro pues ste puede provocar la corrosin
de las superficies de acero inoxidable. La correcta ejecucin de los procedimientos diarios
de desinfeccin y limpieza adecuado hace innecesario el uso de la lmpara U.V, germicida.
Si en cualquier caso se opta por usar la misma, se debe tener en cuenta que unos 30 minutos
de radiacin suelen ser ms que suficientes para lograr el efecto desinfectante que se puede
alcanzar con este tipo de lmpara. El tiempo adicional de encendido solo producir un
desgaste prematuro de los materiales y un consumo energtico intil.
Incubadoras estticas o de agitacin: Una incubadora es un dispositivo que sirve para
mantener y hacer crecer cultivos microbiolgicos o cultivos celulares. La incubadora
mantiene la temperatura, la humedad y otras condiciones en grado ptimo, tales como el
contenido de dixido de carbono (CO2) y de oxgeno en su atmsfera interior. Las
incubadoras son esenciales para una gran cantidad de trabajos experimentales en biologa
celular, la microbiologa y en biologa molecular y se utilizan para cultivos celulares, tanto
bacterianos como de clulas eucariotas.
Autoclave: Las autoclaves funcionan permitiendo la entrada o generacin de vapor de agua,
pero restringiendo su salida, hasta obtener una presin interna de 103 kPa por encima de la
presin atmosfrica, lo cual provoca que el vapor alcance una temperatura de 120 grados
Celsius. Un tiempo tpico de esterilizacin a esta temperatura y presin es de 15-20 minutos.
Las autoclaves ms modernas permiten realizar procesos a mayores temperaturas y presiones,
con ciclos estndar a 134 C a 200 kPa durante 5 min para esterilizar material metlico;
incluso llegan a realizar ciclos de vaco para acelerar el secado del material esterilizado.
Se debe tener en cuenta:
- El lugar en donde el Autoclave permanece debe ser limpio, por el trabajo que hace.
- El Autoclave tiene que ser limpiado por lo menos cada 3 das del tanque y cmara,
as como las partes externas, luego de terminar de ocuparlo cada da, desage el
generador luego de haberlo desocupado, y antes de limpiarlo asegrese que la cmara
este fra.
- Por ningn motivo deje solo al Autoclave cuando est funcionando, siempre viglelo
por cualquier problema.
- No deje que personas ajenas al Autoclave lo estn manipulando, principalmente
cuando est trabajando.
- Cuando termina el ciclo de esterilizacin a ste se le da un tiempo de presecado,
terminado este tiempo usted abrir la puerta, pero teniendo en cuenta que no puede
abrirla en su totalidad si no djela semi-abierta.
- Tambin fjese que el material no salga muy hmedo porque si no este se contamina
muy fcil, vea que ste salga completamente seco as no se contaminar.
- Cuando coloque el material en cmara hgalo en una forma ordenada, paquete sobre
paquete y dejando espacios para que penetre el vapor. El Autoclave lleva un
dispositivo que evita sobre presiones en cmara ste se llama vlvula de seguridad,
sta se dispara automticamente, cuando hay un exceso de presin en cmara, pero
recuerde que para que suceda esto es necesario que sea accionada por el operador una
vez diariamente.
A continuacin, se presenta un listado de reactivos utilizados ampliamente en los laboratorios
de biotecnologa, consulte su hoja de seguridad y determine: qu es, para qu se utiliza,
precauciones de uso, toxicidad y efectos a la salud humana y al medio ambiente.
SDS (Dodecil Sulfato de Sodio): es un compuesto tensioactivo aninico, en los laboratorios,
el SDS se emplea comnmente en la preparacin de protenas para electroforesis en gel de
poliacrilamida (SDS-PAGE). El SDS acta rompiendo enlaces no covalentes en las
protenas, desnaturalizndolas, provocando que estas molculas proteicas pierdan su
conformacin nativa. Esto ocurre porque el SDS se une a las zonas apolares del polipptido.
Adems, la cantidad de SDS unido es similar para muchas protenas: una molcula de SDS
por cada dos residuos aminocidos, correspondiendo a unos 1,4 g SDS/g protena. Ello
proporciona al polipptido una carga negativa que resulta proporcional a la longitud de la
cadena (el nmero de aminocidos) y, por tanto, a la masa molecular de la protena. Este
aporte de carga negativa es sustancialmente mayor que la carga original de la protena. La
repulsin electrosttica creada por la unin del SDS a la protena es una de las causas de que
la protena pierda su conformacin nativa, eliminndose de este modo las diferencias en
conformacin de las diferentes protenas que han de ser separadas en el gel.
La American Cancer Society neg que el SDS fuera carcingeno y apunt que, aunque
indudablemente irritante, la sustancia es peligrosa nicamente a concentraciones ms altas
de las empleadas en los cosmticos. Puede producir irritacin en la piel y membranas
mucosas, debiendo evitarse su inhalacin y contacto con los ojos.
Isopropanol: Su obtencin se da por medio de la oxidacin del propileno con cido sulfrico
o por hidrogenacin de la acetona. Es un solvente que se emplea en los procesos de
extraccin, anticongelantes.
Otras aplicaciones: Se emplea en linimentos, Lociones para la piel, tnico para el pelo,
produccin del glicerol, acetatos de etilo, resinas, sntesis orgnicas, etc.
Ingestin: Somnolencia, inconsciencia, y hasta muerte. A veces dolor gastrointestinal,
calambres, nuseas, vmitos, y diarrea. La dosis mortal para un adulto humano est cerca de
250 ml.
inhalacin: En altas concentraciones puede causar problemas en el sistema nervioso central:
dolor de cabeza, vrtigo, inconsciencia y hasta coma. La inhalacin del vapor puede causar
la irritacin de la zona respiratoria y efectos narcticos.
Piel: Sensibilidad, reaccin alrgica, irritacin con dolor y picazn. El contacto prolongado
o repetido puede causar el desengrase de la piel y dermatitis.
Ojos: Irritacin (ardor, rojez), rasgado, inflamacin, y lesin crnea.
B-mercaptoetanol: se emplea profusamente en el laboratorio para reducir los puentes
disulfuro y puede actuar como antioxidante biolgico, reciclando radicales hidroxilos (entre
otros) Se emplea ampliamente debido a que el grupo hidroxilo le confiere buena solubilidad
en agua, a la vez que disminuye la volatilidad. Debido a su reducida presin de vapor, su
olor, aunque desagradable, es menos molesto que el de otros tioles relacionados.
El 2-mercaptoetanol se considera un veneno "severo", causando irritacin en las vas nasales
y el tracto respiratorio al ser inhalado, vmitos y dolor de estmago al ser ingerido, y
absorcin potencialmente fatal al entrar en contacto con la piel
PVP (polivinil Pirrolidona): La polivinilpirrolidona (PVP), tambin llamado comnmente
polividona o povidona, es un polmero soluble en agua que se obtiene a partir del monmero
N-vinilpirrolidona. El polmero PVP fue utilizado como expansor del plasma sanguneo para
las vctimas de trauma. Durante la Segunda Guerra Mundial y la Guerra de Corea, el plasma
sanguneo (que escaseaba) fue diluido con polivinilpirrolidona, de modo que ms heridos
pudieron ser tratados con las cantidades limitadas de plasma sanguneo. Se utiliza como
aglutinante en muchos comprimidos farmacuticos, simplemente, este, pasa a travs del
cuerpo cuando se toma por va oral. Sin embargo, autopsias han demostrado que la
crospovidona puede contribuir a la lesin vascular pulmonar en unos pocos casos. Los efectos
a largo plazo de crospovidona en el pulmn son desconocidos. El PVP aadido al yodo forma
un complejo llamado povidona yodada, que posee propiedades desinfectantes.
La PVP se emplea desde hace muchos aos en aplicaciones cosmticas y para el cuidado del
cabello. Presenta las siguientes propiedades: no sensibilizante, sin indicios de potencial
mutgeno y no txico para los organismos acuticos.
Bromuro de etidio: El bromuro de etidio (BrEt) es un agente intercalante usado comnmente
como aclarador de cidos nucleicos en laboratorios de biologa molecular para procesos
como la electroforesis en gel de agarosa. Cuando se expone esta sustancia a luz ultravioleta,
emite una luz roja-anaranjada, que se intensifica unas 20 veces despus de haberse unido a
una cadena de ADN. Este efecto es debido al aumento de la hidrofobia del medio, y no a la
rigidificacin del anillo bencnico, no estando ste entre pares de bases del ADN. Como el
bromuro de etidio se intercala en el ADN, esta sustancia tiene un poderoso efecto mutgeno
y, posiblemente puede ser cancergeno o teratgeno. El bromuro de etidio es una sustancia
fuertemente mutagnica y es irritante a los ojos, piel, mucosas y el tracto respiratorio. Los
efectos sanitarios de la exposicin a este compuesto no han sido todava investigados
profundamente. Se sospecha que puede ser cancergeno y teratognico por su cualidad de
mutagenicidad, aunque no hay ninguna prueba concluyente de ninguno de estos efectos. Si
se ingiere, se inhala o se absorbe por la piel, esta sustancia puede tener efectos nocivos.
Acrilamida: Es un compuesto orgnico de tipo amida que se polimeriza fcilmente, y la
poliacrilamida tiene muchas aplicaciones en la industria qumica, por ejemplo, como
floculante para clarificar el agua de bebida, en polimerizacin "in situ" en presas y tneles,
como aglutinante en la industria del papel, en cosmtica, sntesis de genes en laboratorio,
extraccin de metales, industria textil, obtencin de colorantes. Los efectos txicos por una
nica dosis oral solo se dan con dosis superiores a 100 mg/kg, y la dosis letal 50 (DL50) se
encuentra, por norma general, por encima de los 150 mg/kg. Varios estudios en distintas
especies animales, demuestran que el principal rgano daado es el sistema nervioso. La
exposicin repetida a acrilamida causa degeneracin en reas del cerebro (crtex cerebral,
tlamo cerebral e hipocampo) crticas para la memoria, aprendizaje y otras funciones
cognitivas y tambin afecta a los nervios perifricos. En estudios de reproduccin con
roedores, los machos presentan reduccin de la fertilidad, afectando al recuento de esperma
y la morfologa de los espermatozoides.
Luz ultravioleta: El termino luz ultravioleta (UV) es aplicado a la radiacin
electromagntica emitida por la regin del espectro que ocupa la posicin intermedia entre
la luz visible y los rayos X. El espectro ultravioleta est dividido en tres reas designadas:
UV-A, UV-B y UV-C. La longitud de onda que produce el bronceado de la piel est en la
regin UV-A. La percepcin del ojo humano empieza en el violeta, en una longitud de onda
de 380 nanmetros, (la equivalencia de esta unidad de medida con el metro es: 1 nanmetro
(nm) es igual a 0.0000000001 metros) que constituye el lmite superior de la longitud de onda
del espectro de luz ultravioleta. Todas las camas solares utilizan luces ultravioleta para
estimular los efectos de la luz solar contra la piel al descubierto. Al igual que con el bronceado
natural, quienes utilizan las camas solares corren el riesgo de sufrir quemaduras de sol.
Cientficos forenses tambin utilizan las luces ultravioletas para buscar pistas en una escena
del crimen.
Cuidados con el UV
- Limitar o minimizar el tiempo de exposicin a radiacin UV.
- Cumplir con las recomendaciones suministradas por el fabricante sobre el
manejo y cuidado de los equipos.
- Conocer la longitud de onda con la que trabaja, o el tipo de fuente de radiacin
que emplea. (Esta informacin la suministra el fabricante).
- Conservar siempre y leer regularmente la documentacin tcnica de los equipos
que se tengan.
- Verificar que la instalacin sea adecuada y realizada por un especialista en este tipo
de elementos.
- Reducir y controlar el rea de superficie sobre la que inciden estas radiaciones,
encerrndola o limitndola lo mximo posible
- Informar a todo trabajador sometido a radiaciones ultravioletas de los riesgos a que
est expuesto y los medios apropiados de proteccin.
- Las fuentes de UV-C se deben ubicar en compartimientos, o cabinas individuales
o lugares que permitan aislar la fuente en forma adecuada, mediante mamparas
o cortinas especiales, con el fin de evitar la dispersin de radiacin
ultravioleta hacia otras reas. Los compartimientos debern tener paredes
interiores techos y pisos que no reflejen las radiaciones. Se debe garantizar una buena
renovacin del aire en el ambiente de trabajo, pues se pueden generar apreciables
cantidades de ozono, que es un gas obtenido por ionizacin del aire, entre otros
mtodos, al exponerlo a luz ultravioleta. El ozono es un compuesto altamente
oxidante que se descompone muy rpidamente, es txico an en bajas
concentraciones, por esta razn se debe airear adecuadamente un rea que ha
mantenido en funcionamiento UV por un tiempo largo.

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