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Cromatografia de Gases PDF
Cromatografia de Gases PDF
INSTITUTO DE BIOTECNOLOGA
METODOS EN BIOTECNOLOGIA
CROMATOGRAFA DE GASES
CONTENIDO
Antecedentes/Historia 1
Mecanismos de la cromatografa 2
Fundamentos tericos 2
Nomenclatura 5
Fase mvil 6
Puerto de inyeccin 6
Horno de la columna 7
Fase estacionaria 8
Soporte 9
Columna cromatogrfica 10
Detectores 15
Mtodos 20
Anlisis cualitativo 20
Mtodos de coincidencia 21
Aplicaciones 31
Comida, saborizantes y fragancias 31
Qumicos y petrleo 34
Ambientales 35
Mdicas y biolgicas 35
Industria 37
Otras aplicaciones 38
Aplicaciones prcticas 38
Cromatografa de gases como mtodo principal 40
Innovaciones 41
Pginas web 45
Bibliografa 45
1
Antecedentes/Historia
La primera tcnica cromatogrfica fue ideada por el botnico ruso Mikhail Tswett en 1906,
quien utiliz almina para separar los pigmentos coloreados de las hojas de las plantas.
Tswett en su experimento original, meti dentro de un tubo de vidrio un fino polvo
(sacarosa) para producir una columna de una altura deseada. Posteriormente, extrajo los
pigmentos de hojas y los coloc en un solvente (ter de petrleo) y agreg un poco de la
solucin dentro de la columna. Cuando toda la solucin haba pasado a travs de la
columna se form una estrecha zona inicial bajo la capa inicial del adsorbente. Despus
agreg ms solvente y aplic presin en la parte de arriba de la columna. Mientras el
solvente iba pasando a travs de la columna, los pigmentos se iban separando
individualmente (Fig. 1). La clave del xito de la columna de Tswett, fue la aplicacin de la
mezcla dentro de la columna en una zona inicial estrecha y la posterior aplicacin del
solvente fresco.
En 1931, fue redescubierta por Richard Kuhn al utilizarla para el anlisis de polienos. Los
primeros en utilizar un gas como fase mvil fueron A. T. James y A. J. Martin en 1952,
para separar cidos grasos cortos. Posteriormente Dabrio, en 1971, la utiliz para separar
metilaminas, aminas alifticas y homlogos de piridina.
Mecanismos de la cromatografa
Fundamentos tericos
Se han propuesto muchas teoras con complejos modelos matemticos para explicar el
comportamiento de los solutos en las columnas cromatogrficas. Las ms estudiadas son:
La principal es la teora de las placas tericas (theoretical plates theory), la cual plantea
que una columna cromatogrfica est constituda por una serie de placas contenidas en la
fase estacionaria. Supone como constante el volumen de la fase estacionaria en cada placa;
que el volumen de fase mvil entre placas es constante; que las dos fases estn en equilibrio
en cada placa, y que el valor de coeficiente de distribucin es constante e independiente de
la concentracin del soluto. Desventaja: adems de que se basa en muchas suposiciones, la
principal desventaja es la falta de conexin entre la eficiencia de la columna y las
propiedades fisicoqumicas de la partcula.
3
N=16(tr/w)2
Variaciones en las velocidades de flujo, debido a las diferentes rutas que puede tomar el
analito durante su migracin a travs del empaque.
Difusin axial o longitudinal del soluto en la fase mvil.
Resistencia a la transferencia de masas entre la fase mvil y la fase estacionaria.
HETP o H=A+B/u+Cu
En la teora para las columnas capilares se considera que la difusin aparente no contribuye
de manera apreciable al ensanchamiento de los picos en este tipo de columnas. El
coeficiente relacionado con la difusin molecular tiene un valor de uno debido a que la
distancia que recorre la partcula es igual a la longitud de la columna. El trmino
relacionado con la transferencia de masas viene dado en funcin del dimetro de la
columna, pues en este tipo de columna es ms importante que el tamao de partcula de
relleno.
La ley de Darcy1 correlaciona la velocidad lineal de un gas que circula por una columna
con el gradiente de presin.
Las respectivas integraciones de la ecuacin permiten obtener una que relaciona el valor de
la presin con la posicin de la columna, otra que indica la velocidad media, la
compresibilidad o factor de obstruccin
Depende de las propiedades termodinmicas del sistema (K) y adems es funcin de las
caractersticas de la columna en particular. Probabilidad de encontrar una molcula
determinada de soluto en la fase estacionaria o en la fase mvil
La relacin frontal y el factor de capacidad son dos maneras de medir el mismo fenmeno.
Representa la relacin entre las velocidades medias del soluto y la fase mvil en su
recorrido por la columna.
Conservan las propiedades del coeficiente de reparto y son fciles de calcular, su manejo se
dificulta al momento de elegir un patrn adecuado. Se utiliza para disminuir el efecto de
errores, sobre todo, en el conocimiento del peso de la fase estacionaria en la columna.
Resolucin
Cada sustancia se desplaza a una velocidad caracterstica dada por el valor de su relacin
frontal en dichas condiciones. Altura equivalente a una placa terica. Por tratarse de un
mtodo donde se separa por elucin es mejor referirse a tiempo de elucin ms que a
distancias recorridas.
Eficacia
Una columna ser ms eficaz mientras mayor sea el nmero de placas tericas que tenga.
Para poder hacer comparaciones entre columnas es necesario establecer condiciones
similares de trabajo.
Nomenclatura
Desde el primer cromatgrafo de Tswett hasta los cromatgrafos de ahora siguen utilizando
la misma nomenclatura para sus componentes:
Un tubo de metal o vidrio se llena con un slido activo (adsorbente) para formar una
columna cromatogrfica. La mezcla a separar es aplicada en una zona inicial y es lavada
con un solvente, lquido de lavado o revelador. La serie de resultados se denomina
cromatograma, y el lavado de la zona inicial para formar el cromatograma es la formacin
o desarrollo del mismo.
Cuando el agente a detectar se trata con un agente qumico para formar un color, se dice
que la cromatografa est siendo revelada. La combinacin del solvente, la mezcla y el
adsorbente son llamados sistema cromatogrfico. Cada sistema cromatogrfico est
compuesto por una fase mvil (solvente) y una fase estacionaria (la columna).
6
La cromatografa de gases es una tcnica analtica que puede ser utilizada para separar
compuestos orgnicos basada en sus volatilidades. Tambin provee informacin cualitativa
y cuantitativa de los componentes presentes en una mezcla. Los componentes son
separados por sus diferencias de particin entre la fase mvil gaseosa y la fase estacionaria
en la columna, permitiendo que sean separados en tiempo y espacio.
1. Fase mvil.
2. Puerto de inyeccin.
3. Horno de la columna.
4. Columnas
5. Fase estacionaria.
6. Detector.
7. Sistema de registro de datos.
Horno de la columna
Percha de
la columna
Columna de
capilaridad
Para obtener la mejor resolucin de dos substancias dentro de la columna, se requiere tener
una fase estacionaria donde su retencin relativa sea mayor a la unidad. Esto depende del
punto de ebullicin y el coeficiente de actividad de los solutos en dicha fase. De aqu que
en series homlogas el orden de elucin sea el de los puntos de ebullicin crecientes,
independientemente de la fase empleada, salvo en casos especiales. Por otra parte, dos
sustancias de punto de ebullicin idntico, pero de estructura qumica diferente, podrn
separarse fcilmente con base en su distinta solubilidad.
tipo de material es la temperatura mxima a la que se puede trabajar. Las fases se pueden
clasificar en:
No polares: para separar sustancias poco o nada polares. El ms utilizado son las
gomas de silicona OV-1, OV-101 o SE-30, para trabajar hasta ms de 300C donde
se consiguen eficacias de columna extraordinarias.
Columnas con fase mixta: para resolucin de separaciones parciales con dos o ms lquidos.
Posibilidad de separar hasta 50 sustancias mezclando dos, tres y cuatro lquidos para formar
la columna final. Aunque es ms laboriosa y poco prctica la representacin grfica esto ha
sido simplificado al utilizar programas computacionales.
Soporte (Support)
La funcin bsica del soporte slido es sostener la fase estacionaria. El soporte debe de
tener elevada superficie por unidad de volumen, estabilidad trmica, dureza mecnica,
inactividad qumica y baja resistencia al paso de un gas.
Fundente carbonato sdico, productos blancos utilizados para filtracin. Celita, Celatom.
Tiene menor actividad superficial residual. El cromosorbo G es utilizado en columnas con
poca fase estacionaria y se obtienen mejores eficacias. El cromosorbo A es utilizado en
escala preparativa.
Sin fundente y a mayor temperatura, productos rosados utilizado para ladrillos refractarios.
Sil-O-Cel, Sterchamol, C-22. Son de mayor superficie y mejor resistencia mecnica, pero
son los que presentan mayor actividad superficial residual.
Todos los soportes porosos tiene cierta actividad residual debida a la presencia de iones
metlicos o defectos de superficie, y a los grupos OH de las molculas. Esta actividad
modifica el desarrollo normal del cromatograma, por lo tanto este efecto debe ser
disminiudo desactivando el soporte.
Una manera es cubrirlos con la misma fase estacionaria, la cua se adsorbe fuertemente en
estos puntos y el efecto sobre el soluto es menor. Tambin se puede hacer por lavado cido
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Columna cromatogrfica
Las columnas estn hechas de cobre, acero inoxidable o tubos de vidrio, dobladas o
enrrolladas. Excepto para las de vidrio, las columnas son empacadas mientras se estn
doblando. Las columnas analticas tienen una longitud de 1-6 m. de longitud y de 2-4 mm.
de dimetro. Segn se encuentre en ella distribuida la fase estacionaria y el valor que
alcance la relacin de fases se originan los diferentes tipos de columnas. La separacin de
la mezcla se realiza dentro de la columna, por lo tanto, es la parte ms importante del
cromatgrafo.
La primera columna utilizada fue una de relleno (James & Martin, 1952), posteriormente
fue introducida la columna capilar, siendo as los dos extremos en la gama de columnas
utilizadas en la cromatografa de gases. El criterio para la diferenciacin de columnas es
con base en dos propiedades de stas:
Con base en estas dos caractersticas se encuentran los siguientes tipos de columnas, en las
que Vm/Vs y k aumetan en orden progresivo1:
1. Clsicas de relleno
2. Capilares rellenas
3. Capilares de capa porosa
4. Capilares abiertas
Las columnas empaquetadas contienen un soporte slido inerte con una cubierta delgada de
la fase lquida. El soporte slido es frecuentemente tierra de diatomeas. La fase lquida
puede tener una viscosidad baja y una alta solubilidad para la mezcla de componentes.
Las columnas de capilaridad originalmente contenan una pelcula del lquido cubriendo la
pared interna de la columna de vidrio o metal. Las columnas de capilaridad ahora contienen
una capa de revestimiento slido dentro de ella con poro en el centro. Estas columnas son
mejores porque se les puede aplicar una velocidad ptima de flujo ms rpida (aprox. de 2-
5 ml por min en lugar de 1 ml por min). Debido a este tipo de columnas, los anlisis han
podido ser ms sensibles.
La cantidad de muestra que admite una columna capilar sin que sufra sobrecarga es mucho
menor que en una columna clsica. La sobrecarga se alcanza cuando la concentracin de
soluto en la fase estacionaria es tan grande que la isoterma de distribucin deja de ser
lineal.
Constitudas por un tubo de metal o vidrio con relleno de soporte granular con la superficie
recubierta por una pelcula de la fase estacionaria.
Longitud 1-10 m
Dimetro interno 2-4 mm hasta 5 cm en escala preparativa
Tamao de la partcula de relleno diez veces menor que el dimetro del tubo
Capacidad de carga grande
Relacin de fases pequea
Permeablilidad baja
A mayor tamao de partcula del relleno mayor ser su permeabilidad, cuanto ms rugosa
sea su superficie mayor capacidad de carga se obtendr. Por esta razn es el nico tipo de
columna que se usa a escala preparativa.
Se distinguen de las columnas clsicas de relleno por le dimetro interno del tubo, no
excede un milmetro. Adems, la relacin entre los dimetros del tubo y de la partcula de
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relleno es del orden de tres a cinco veces. Esto hace que sea un relleno ms irregular y una
permeabilidad del orden de diez veces superior.
Longitud de 10-50 m.
Dimetro interno de 1 mm.
Tamao de la partcula de relleno de 3 a 5 veces
Capacidad de carga pequea
Relacin de fases grande
Permeablilidad mayor que las clsicas
Al ser mayor la permeabilidad pueden construirse columnas ms largas (10-50 m). Guichon
(1966) y Halasz (1967) han hecho estudios muy detallados de este tipo de columna.
En este caso el soporte es depositado en la pared interior del tubo, despus es recubierto por
la fase estacionaria y la parte central del capilar permanece vaca.
Longitud de 25-200 m
Dimetro interno de 0.1-0.5 mm
Tamao de la partcula de relleno vara entre el de un soporte clsico y las partculas de
carbono producidas por la pirlisis de una sustancia orgnica.
Permeablilidad valores mximos (al igual que las capilares abiertas)
Tambin conocidas como columnas Golay, quien fue el primero en utilizarla (Golay, 1958).
La fase estacionaria va depositada en la pared interior del tubo que acta como soporte.
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La naturaleza del tubo y el procedimiento seguido para su limpieza son de gran importancia
en este tipo de columnas, ya que la pared del mismo sirve como soporte y su capacidad de
retencin del solvente influir notablemente en la uniformidad de la pelcula formada. Uno
de los mtodos consiste en llenar el tubo con una disolucin diluida de la fase estacionaria
en un disolvente voltil, cerrar un extremo e introducirla en una estufa con una temperatura
superior al punto de ebullicin del solvente, la fase quedar depositada sobre la pared del
capilar.
Los flujos del gas portador que se utilizan en columnas capilares suelen ser del orden de
0.5-3 ml/min, mientras que en una columna clsica ascienden a un orden de 30-100 ml/min.
Para poder utilizar la columna capilar con xito ser necesario intoducir entre el inyector y
la columna un dispositivo denominado divisor de flujo, cuya finalidad es permitir la entrada
en la columna de una pequea fraccin solamente del flujo que pasa por el sistema de
inyeccin. La relacin de divisin (flujo al exterior/flujo que pasa por la columna) suele
oscilar entre 50 y 120. Esto permite disminuir la cantidad de muestra que pasa por la
columna (que queda reducida a la fraccin que indica la relacin de divisin) y aumentar la
velocidad lineal del gas portador en el sistema de inyeccin en la cantidad indicada por la
relacin de la divisin (la difusin molecular en esta parte del instrumento se hace muy
pequea).
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Tubo
o
Fase estacionaria
Grano de soporte
Detectores
Los detectores son dispositivos que indican y miden los solutos en la corriente del gas
acarreador, convirtiendo una seal no medible directamente en una seal elaborable de
una propiedad fsica. Esta seal es elaborada por una comparacin entre el gas acarreador
puro (blanco) y el mismo gas llevando cada uno de los componentes previamente
separados en la columna, esto es traducido en una seal elctrica que es amplificada y
registrada al momento de salir de la columna.
Consiste de dos celdas metlicas idnticas, cada una conteniendo un filamento de alambre
de tungsteno o de tungsteno con lmina de oro. El efluente fluye a travs de una celda y el
gas portador (He o H2) fluye a travs de la otra. En un lado de la muestra el gas fluye por el
filamento mientras que en el lado de referencia el gas puede pasar sobre el alambre del
filamento y difundir a travs de l. Los filamentos son calentados por una corriente
elctrica. La temperatura del elemento censor depende de la conductividad trmica del gas
que fluye alrededor. Cambios en conductividad trmica, como cuando las molculas
orgnicas desplazan un poco al gas portador, provocan un incremento en la temperatura del
elemento el cual est siendo monitoreado como un cambio en la resistencia.
Dos pares del TCD son utilizados en cromatgrafos de gases, un par localizado en la salida
de la columna para detectar los componentes separados mientras van saliendo, el otro par
localizados antes del inyector o en una columna de referencia separando las resistencias de
los dos pares y estn acomodados en un circuito de puente.
conductividad trmica (la mayora de los gases orgnicos tienen calores de conductividad
bajos).
El FID consiste de una flama hidrgeno/aire y una placa colectora. Las muestras que salen
de la columna pasan a travs de la flama, la cual rompe las molculas orgnicas y produce
iones. Los iones son colectados en un electrodo parcial y produce una seal elctrica. Es
extremadamente sensible en un amplio rango dinmico. La nica desventaja es que
destruye la muestra.
La muestra debe ser un combustible, esta entra en la base del detector, se mezcla con el
hidrgeno y entra a la flama. Hay compuestos con poca o sin respuesta al FID, compuesto
como el NH3, CS2, Nox, CO, CO2, O2, H2O, N2, compuestos perhalogenados, etc. La
respuesta est basada en el nmero de carbonos y otros elementos tales como halgenos y
el oxgeno presentes que reducen la combustin.
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Los filtros para FPD pueden ser seleccionados para diferentes componentes, pero los ms
comunes son para la deteccin de sulfurados y fosforados en mezclas complejas. La
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selectividad de FPD clsicos (como una porcin por peso del carbono) es 105 para
sulfurados y 106 para fosforados.
La cromatografa de gases con FPD puede ser usada para detectar componentes sulfurados
en extractos crudos de aceite y en contaminantes de gas natural. Tambin puede ser
utilizado para detectar pesticidas y herbicidas organofosforados, as como de componentes
sulfurados voltiles en el anlisis de alimentos.
Este es un mtodo destructivo dependiente de flujo de masa, con selectividad para S, P, Sn,
B, As, Ge,Se, Cr; con un lmite de deteccin de ~ 100pg/seg. Su modo de deteccin es
debido a la produccin longitudes de onda particulares resultando en una corriente que
puede ser medida.
Este tipo de detector es muy selectivo para los compuestos con hidrocarburos aromticos o
con heterotomos, los cuales tienen potenciales de ionizacin. Utiliza luz ultravioleta para
ionizar un analito, la longitud de onda oscila entre 106-150 nm. Los iones producidos son
colectados por electrodos siendo la corriente generada una medida de la concentracin del
analito.
Mtodos
Anlisis cualitativo
En la siguiente tabla se resumen los procedimientos utilizados para identificar los picos
cromatogrficos. No existe un mtodo general aplicable a todos los problemas prcticos, la
informacin cromatogrfica cualitativa depende del conocimiento previo de la composicin
de las muestras y casi siempre se han de combinar varias de las operaciones incluidas en la
tabla para seguir identificaciones fiables. A pesar de los inconvenientes del mtodo, la
cromatografa de gases en combinacin con otras tcnicas es el instrumento ms eficaz
conocido hasta la fecha para determinar la composicin cualitativa de mezclas complejas de
compuestos orgnicos.
Mtodos de coincidencia
Al estudiar la probabilidad de que el pico que coincide con el patrn sea el patrn, la
certeza es la identificacin de que un pico depende de sustancias eluidas cerca del mismo
con las que puede confundirse. Expresando cuantitativamente esta observacin intuitiva se
tiene2:
= h/(V1r-V2r)/Vr
pn = e-pn/n!
pesA+B = pesA*pesB
como pesB <1 se deduce que pesA+B < pesA; y por ello la separacin en dos columnas ha
reducido la probabilidad de identificacin errnea debida a la elucin simultnea.
Retencin relativa
de referencia y su seleccin queda a disposicin del especialista, por lo que existe gran
nmero de datos de poca aplicacin a problemas particulares.
La resolucin y separacin de los picos son dos de los factores ms importantes para la
resolucin de la columna. Resolucin es la capacidad de la columna para separar dos picos
adyacentes, dependientes de la selectividad y eficiencia. La eficiencia es la relacin entre la
longitud del tiempo que gasta el soluto en salir de la columna y la anchura del pico sobre la
elucin. Esto es determinado por el nmero efectivo de placas tericas las cuales son
secciones ideales de la columna donde los solutos se equilibran entre la fase estacionaria
lquida y la fase gaseosa mvil. Expresado como4:
N = 5,54 [(tr-to)/w1/2] 2
Un valor alto de N indica una gran capacidad de retencin del soluto de la fase estacionaria
y una gran eficiencia de la columna. La presencia de un volumen muerto grande (to)
esconde la eficiencia de la columna pero puede ser reducido incrementando la velocidad
lineal del flujo del gas acarreador. La asociacin entre la velocidad lineal y eficiencia de
25
.
Fig.10 Efectos de usar diferentes gases acarreadores en el punto Van Deemeter4.
Antes de marcar el uso de flujo de acarreadores, se ajusta la fuente del acarreador que es
por lo menos 20 psi ms grande que la presin de la cabeza de la columna. Esto es para
minimizar la resistencia del flujo de la columna para suplementar lneas y garantizar una
velocidad de flujo volumtrico constante entre el inyector, la columna y el detector. Para
medir la velocidad lineal, se inyecta una sustancia no retenible a la temperatura donde hay
mayor elucin. Si a esto se le optimiza la temperatura, estar arriba del 50 % de la
eficiencia que puede ser perdida cuando se hacen rangos de 50 hasta 200 C. La velocidad
lineal es calculada usando la siguiente ecuacin y entonces un valor promedio se obtiene de
un mnimo de tres mediciones4. Cuando la velocidad lineal se optimiza para el helio ser
aproximadamente 21-40 cm/seg y para el hidrgeno de 50-80 cm/seg.
Por ejemplo, con ECD el detector de gas necesita mantener un equilibrio de concentracin
de electrones trmicos y un barrido efectivo de gas acarreador-soluto. La sensibilidad ECD
es inversamente proporcional al flujo, aunque un flujo fuerte se requiera para el barrido de
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sustancias altamente retenidas para producir picos agudos. Para mantener una sensibilidad
satisfactoria en las velocidades de flujo en el ECD se utiliza 95 % de argn y 5 % de
metano como fuente de gas.
rt2 rt1 es la diferencia en los tiempos de retencin entre los dos picos, w2 es el ancho del
pico 2 y w1 es el ancho del pico 1.
3) La sensibilidad est relacionada con la altura del pico a la base del mismo. Una porcin
de 3:1 indica una sensibilidad adecuada.
Las muestras con splitless son frecuentemente usadas para anlisis de componentes donde
una gran cantidad de muestra es inyectada a la columna. Durante el muestreo con splitless,
la muestra se inyecta dentro de la columna caliente y forma un vapor que consiste de
muestra, solvente y gas. Parte del gas sale por el respirador al pasar en el alineador. El
respirador del split se apaga en ste punto y se vuelve a prender despus de 20 a 60 seg.
para prevenir que los vapores entren en contacto con la cabeza de la columna y sean
retenidos ah. El tiempo de purga, o el tiempo que el respirador del split es abierto despus
de la inyeccin, es crtico para la discriminacin y reproducibilidad del cromatograma.
Sin embargo, con solventes como el cloruro de metileno (punto de ebullicin de 40C), la
concentracin del solvente no es prctica porque la temperatura inicial del horno estar a
menos de la temperatura del cuarto. En este caso, el analizador debe aceptar los picos que
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estn entre los solutos que eluyen al principio o tratar varias tcnicas de inyeccin que sean
compatibles con el muestreo tipo splitless.
Una cabeza del alineador desactivada, sin lana de slica es preferida para una mezcla ligera
de la muestra con el solvente. Ocasionalmente, la lana puede ser usada para ayudar a la
volatilizacin de los componentes de alto peso molecular. Un alineador de cuello de ganso
es una alternativa viable para un alineador delgado, diseado especficamente para mejorar
la eficiencia del splitless y disminuir la degradacin de la muestra. Una columna
moderadamente polar desactivada, puesta 1 o 2 cm abajo del punto de inyeccin, podra ser
utilizada siempre con splitless para minimizar el pegado de los picos y para tener una
migracin uniforme del solvente.
Para tener un tiempo de purga ptimo, se comienza con un rango de purga de 0.2 a 1.5 min.
Si el tiempo es muy corto, menos de 0.1 min. los componentes ms pesados no se
volatilizarn lo suficiente o no se creara la concentracin del solvente. Si hay una gran
diferencia entre el punto de ebullicin del solvente y el del soluto, el tiempo de purga
necesitar estar cercano a 0.2 min. Ajustar el tiempo de purga en incrementos de 0.1 min.
hasta alcanzar el mximo de sensibilidad del soluto sin que haya trazas del solvente.
Para mejorar la velocidad del split, colocar la temperatura del horno a la temperatura inicial
y ajustar flujo del respirador del split hasta que est en 10 a 15 ml/min. El flujo a travs del
respirador de purga pude estar entre 0.5 a 6 ml/min. y el flujo del acarreador en 2 a 5
ml/min. al final del detector.
Pi2 = [(T2/T1)1.7(pi2-po2)1+po2]1/2
Cuando se usa EPC con inyeccin tipo split, la velocidad del split puede ser programada
para cambiar durante la corrida o entre los mtodos en una secuencia. Tambin, puede ser
programado para apagarlo entre corridas para conservar la cantidad de gas acarreador. Si se
aplican pulsos de presin a la inyeccin tipo split, incrementa el flujo el cual podra reducir
la velocidad de split.
El software requiere que dos programas extremos sean usados como un rango 1) Una
presin o temperatura alta con un rampeo rpido y 2) una presin y temperatura inicial con
un rampeo bajo. Los resultados entran al programa, con la longitud de la columna, la
presin sobre el dimetro de la columna, la velocidad lineal, de tiempo muerto y otros
parmetros. Una serie de algormetros determinan los mejores programas basados en la
termodinmica de retencin para ndices y clculos.
Aplicaciones
Un intento para crear una compilacin de aplicaciones deseadas para generar un manual
debe ser selectivo, en consecuencia la compilacin casi siempre puede estar incompleta por
cromatgrafos individuales debido a la omisin de ejemplos que se consideran crticos para
algunos campos especficos. Por otra parte, algunos de los ejemplos incluidos pueden ser
criticados porque los eventos de separacin en la cromatografa de gases pueden ser muy
rpidos y en muchos casos es posible generar resultados que son superiores a los mostrados
en las ilustraciones. Los avances que han permitido mejorar los mtodos incluye a)
mejores mtodos de preparacin y almacenamiento de las muestras, b) mejoras en la
instrumentacin comercial, incluyendo entradas superiores que llevan a cabo un mejor
proceso de inyeccin de la muestra y c) la disponibilidad de mejores columnas desactivadas
en un rango ms amplio de dimetros y cubiertas de una gran variedad de fases
estacionarias. Las guas de aplicaciones para fases estacionarias en los anlisis de las
diferentes reas se muestran en catlogos tales como Supelco, Applied Science, Analabs,
etc.
Otra forma de clasificar las aplicaciones en la cromatografa de gases es dividir los datos de
la literatura en reas de inters, pese a que la sobrelapacin de algunos sea inevitable, una
serie de grados de redundancia puede ser evitada por la asignacin de cuatro grandes
categoras:
cromatografa de gases. El anlisis puede ser complicado debido a que los compuestos de
inters volatilizan usualmente en muy bajas concentraciones, y son frecuentemente
dispersados dentro de una matriz que contiene materiales los cuales podran, si se quedan
dentro de la columna, acortar la vida de la muestra en un grado considerable. La
cromatografa puede ser extremadamente compleja y frecuentemente influenciada por los
mtodos de preparacin de la muestra.
Un ejemplo de esto puede ser el aceite de limn al cual se adulteraba por la adicin de
turpentina. De aqu que la cromatografa de gases es usada no solo para establecer cuales
son los materiales normales que contiene cada muestra, sino tambin aquellos componentes
cuya concentracin aumenta el abuso del aceite (ejemplo: el p-cymeno). La complejidad el
aceite es tan alta que no se podra analizar su composicin por una simple columna
cromatogrfica, por lo que se usan columnas especializadas de polimetilsiloxano con
diferentes fases estacionarias, para producir una mejor separacin de los compuestos as
como un tiempo de vida ms largo.
Los anlisis de productos del petrleo incluyen la separacin de mezclas de gases ligeros
hasta la caracterizacin de aceites crudos y materiales producidos en la licuacin del
carbn. La diferenciacin de hidrocarburos parafnicos, olefnicos y aromticos son metas
normales, y algunas veces se requiere la deteccin de componentes nitrogenados y
sulfurados. Las preparaciones de hidrocarburos derivados de aceites o carbn licuado
pueden ser extremadamente complejas y tambin pueden incluir una variedad de otros
grupos funcionales. La cromatografa multidimensional puede ser requerida para el anlisis
de estas mezclas complejas, la cual da una gran estimacin de ciertos aditivos de octanos.
Las interacciones entre la fase estacionaria y los solutos hidrocarbonados estn limitados
generalmente a fuerzas de dispersin; por ejemplo, la fase estacionaria de
metilpolisiloxano, cuya interaccin con los solutos est limitada a las fuerzas de dispersin,
funciona bien para la separacin de estos componentes. Mooney, et al. (1982) 4 demostaron
la separacin de hidrocarbonos de bajo peso molecular en un sistema de vlvula de entrada,
usando una columna de pelcula apretada en condiciones subambientales. Estas columnas
son especialmente tiles para mezclas de baja ebullicin. Tambin se han diseado
separaciones interesantes utilizando columnas tubulares de capa porosa (PLOT) cubiertas
con almina.
Las pruebas de solventes han sido todo un reto, debido a la cantidad masiva del
constituyente principal que debe ser inyectado a la columna si la deteccin es para los
constituyentes menores; por ejemplo, el rango dinmico del sistema debe ser
suficientemente amplio para acomodar estas diferencias cuantitativas en los componentes.
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Aplicaciones ambientales
Los anlisis cromatogrficos se llevan a cabo por columnas tubulares abiertas, las cuales
dan una excelente precisin y tiempos de anlisis muy cortos pese a la complejidad que
podra presentar la muestra. En estos anlisis cromatogrficos se usan fases estacionarias de
compuestos aromticos para mejorar la separacin de los solutos. Las mismas columnas se
usan para la separacin de pesticidas y compuestos aromticos clorados.
diferentes, una empleando FID y la otra con deteccin de nitrgeno/fsforo (NPD), para
generar los datos de la Fig. 12.
Fig. 11. Anlisis de una droga ilegal en un analizador de detector y columna doble4.
Aplicaciones en la industria
La cromatografa de gases es muy til cuando pretendemos identificar los compuestos que
determinan una caracterstica aromtica conocida. Por lo tanto, es necesario conocer los
umbrales a partir de los cuales mejora o se desvirta nuestro producto, ya sea mediante
estudio bibliogrfico o por deteccin olfatomtrica. Esta informacin es un instrumento til
para el seguimiento del producto en el proceso productivo, as como el control de otros
materiales enolgicos, como son los tapones y las barricas. Algunos controles importantes a
efectuar durante la fase de crianza en vinos y cavas son mtodos especficos para la
determinacin de fenoles voltiles y compuestos azufrados. Concretamente en la cava, a
partir de la evolucin de ciertos compuestos voltiles, entre ellos los vitispiranos, se calcula
el momento en el que tienen lugar las fases de autlisis y postautlisis durante la crianza.
Controlar el momento en que se desarrollan estas fases es importante debido a las
alteraciones organolpticas que conllevan.
En todo caso, el anlisis por cromatografa de gases no nos permite definir el perfil
aromtico del vino analizado. El problema se agrava en aquellos compuestos para los que
no disponemos de patrones sintticos y, por tanto, no es posible conocer sus propiedades
aromticas.
Otras aplicaciones
Aplicaciones prcticas
Abundance
TIC: DBT.D
5500000
5000000
4500000
4000000
3500000
3000000
2500000
2000000
1500000
1000000
500000
4.00 6.00 8.00 10.00 12.00 14.00 16.00 18.00 20.00 22.00 24.00 26.00 28.00
Time
Time-->
A) cromatografa de gases.
Abundance
550000
500000
450000
400000
350000
300000
250000
200000
150000
139
100000
50000 92
63
32 215246281 327 377 429 479 530562 605 659693
0
m/z
m/z-->
50 100 150 200 250 300 350 400 450 500 550 600 650 700
B) espectrometra de masas
Entre las aplicaciones de ms importancia est la del mbito de alimentos, debido a que es
de suma importancia tener conocimiento de los componentes cuya presencia cae dentro de
los parmetros permitidos en ciertos productos, an a pesar de que no formen parte del
contenido original. Para ejemplificar este punto hacemos referencia al siguiente artculo de
divulgacin. Se anexa publicacin al finaldel trabajo.
39
Lpez, M.G. 2001. Una sinfona de aromas. Avance y perspectiva, Unidad Irapuato,
CINVESTAV. vol. 20. p. 421-424
** Qumica atmosfrica
Programa de Ingeniera Qumica Ambiental y de Qumica Ambiental (PIQAyQA)
Facultad de Qumica/UNAM. Distrito Federal
Cromatgrafo de gases Perkin Elmer
http://www.cneq.unam.mx/paidoteca/quimicaambiental/instalaciones.htm
Innovaciones
Debido a que ProSep provee alguna separacin, los componentes inyectados son
organizados en la precolumna de acuerdo a su punto de ebullicin, aqu el solvente, el
analito y la matriz son ordenados en el puerto y los solventes de bajo punto de ebullicin
son rpidamente eluidos (paso 2).
Cuando ya se han transferido todos los solutos de inters, se abre de nuevo el respirador
split se abre de nuevo y la columna de preseparacin aumenta la temperatura para hervir a
los componentes no deseados de la matriz (paso 4). Todos estos pasos son monitoreados
bajo softwares de la marca ProSepTM.
individuales de una mezcla con un alto grado de poder resolutivo, no puede dar, en sentido
riguroso ms que informacin preliminar sobre su estructura. Hay que sealar como
esencial que cualquier columna cromatogrfica no es un instrumento analtico, sino tan solo
un medio de separacin fsica.
Pginas web
Bibliografa
1. Dabrio, M.V. 1971. Cromatografa de gases. Vol. I. Ed. Alahambra, S.A. Espaa.
182pp.
2. Dabrio, M.V. 1971. Cromatografa de gases. Vol. II. Ed. Alahambra, S.A. Espaa.
223pp.
5. Wilson, H.W. & M.S. Klee. 1997. Analysis of sulfur and phosphorus compounds
with a flame photometric detector on the Agilent 6890 Series Gas Chromatograph.
Innovating the HP way Manual. p.1-4
6. http://ull.chemistry.uakron.edu/analytical/GC/
7. http://www.bst.com.au/resources/tutorapp.pdf