INTRODUCCIN A LA

FISIOLOGA MOLECULAR

GUIA DE TRABAJOS PRCTICOS

2015

SEGUNDA PARTE
 IFM 2015
TP 4: Fisiologa del reposo

Bibliografa complementaria: captulos 20 y 26 de Medical Physiology, Boron y

Boulpaep, Ed. Elsevier Science, 2005.

Objetivos

- Adquirir familiaridad con la medicin y anlisis de variables fisiolgicas.

- Abordar de manera prctica el concepto de homeostasis y su alcance.
- Estudiar variables centrales de la fisiologa (temperatura corporal, variables
respiratorias y cardiovasculares) durante distintas condiciones.

Introduccin

La homeostasis es un conjunto de fenmenos de autorregulacin, que conducen

al mantenimiento de la constancia en la composicin y propiedades del medio interno
de un organismo. sta es ejercida de manera simultnea y redundante por el
organismo, en una serie de parmetros vitales. Como se ha visto en clases anteriores,
el control de los parmetros fisiolgicos recae mayormente en mecanismos fisiolgicos
de retroalimentacin negativa. La presin arterial y el volumen sanguneo, la presin
parcial de O2 y CO2, la concentracin en plasma de H+, K+, Na+, Ca++, glucosa y la
temperatura corporal, son ejemplos fundamentales de variables fisiolgicas
estrechamente controladas.
En este trabajo prctico estudiaremos el comportamiento de distintas variables
biolgicas en condiciones de reposo (a diferencia del TP6, donde mediremos las
mismas variables durante el desarrollo de ejercicio fsico).

Materiales y Mtodos

El trabajo prctico se desarrollar en hemiturnos, divididos en cuatro grupos.

Cada grupo dispondr de una computadora equipada con un conversor analgico-
digital, que permitir la obtencin de electrocardiogramas, volumen y frecuencia
respiratoria, y la presin parcial de CO2 en el aire espirado. Adems cada grupo contar
con un tensimetro para medir la presin arterial, y con un termmetro infrarrojo para
medir la temperatura corporal.

NOTA

En el trabajo prctico se medirn distintas variables en un sujeto experimental.

Por el nmero de grupos, lo ideal es que un alumno del propio grupo sea el sujeto
experimental de su grupo. Sin embargo, si ningn alumno desea ser sujeto
experimental, un docente tendr ese rol. Ningn alumno est obligado a prestarse como
sujeto experimental.
Tanto el sensor de ECG como el espirmetro son de uso educativo
exclusivamente. Los mismos no fueron ni diseados ni evaluados para uso mdico.

1
Tratamientos y protocolo experimental

1. Obtencin de un electrocardiograma (ECG)

El ECG es un mtodo tradicional para medir la actividad elctrica del corazn. El

mtodo se basa en medir la depolarizacin e hiperpolarizacin coordinada de las fibras
de msculo cardaco. El potencial elctrico originado en esta actividad muscular se
propaga pasivamente por el medio extracelular a lo largo de todo el cuerpo
(fundamentalmente agua, que acta como medio conductor, e iones, que son los
portadores de carga). As, colocando electrodos superficiales en distintos puntos del
cuerpo se puede medir el resultante elctrico correspondiente a las distintas fases de
contraccin y relajacin del corazn (figura 1).

1 2

Figura 1. A la izquierda se ilustra la disposicin de los electrodos que usaremos para realizar el
electrocardiograma. 1, cable verde; 2, cable rojo; 3, cable negro. A la derecha, un electrocardiograma que
muestra dos ciclos de contraccin y sus fases. Las figuras de la gua son de Medical Physiology, Boron y
Boulpaep, 2003.

Metodologa

Para realizar el electrocardiograma colocaremos un electrodo en cada brazo a la

altura del bceps y un electrodo de referencia a la altura de la mueca (brazo derecho)
tal como se indica en la Figura 1. Usaremos un sensor de diferencia de potencial y un
sistema de adquisicin comercial para tomar los registros con una computadora. Para
conocer ms detalles respecto a la realizacin e interpretacin de un ECG pods
consultar cualquier libro de fisiologa general.

Nota: Al momento de realizar las mediciones es importante que los brazos se

encuentren apoyados, ya que si los brazos estn colgando o en movimiento los
electrodos registran seales elctricas originadas por las contracciones musculares del

2
 brazo (aunque algunas no sean evidentes) que ensucian el registro. Tambin es
importante que el sujeto no est mirando su propio registro.

2. Sistema respiratorio

El oxgeno requerido para el metabolismo oxidativo pasa de la atmsfera a la

mitocondria de las fibras musculares en tres etapas: 1) incorporacin de O 2 a nivel
pulmonar, 2) provisin de O2 por el flujo sanguneo al msculo y 3) extraccin de O 2 de
la sangre por el msculo. Aqu obtendremos un registro de la respiracin con un
espirmetro y mediremos la liberacin de CO2 con un sensor apropiado.
En cada sujeto mediremos dos variables experimentales: el flujo de aire durante
la inspiracin y la espiracin y la concentracin de CO2 en el aire espirado. A partir de
medir el flujo ventilatorio podremos calcular el volumen tidal y la frecuencia respiratoria
(Figura 2). El volumen tidal es el volumen de aire movilizado en un ciclo inspiracin-
espiracin normal (no forzado) y lo calcularemos como el rea bajo la curva durante la
inspiracin. El nmero de ciclos inspiracin-espiracin realizados durante 1 minuto es la
frecuencia ventilatoria.

Flujo ventilatorio
inspiracin
10 segundos
1 volumen tidal

0,5
litros/seg

-0,5

-1
espiracin minuto
-1,5 10 segundos

Figura 2. Aqu se grafica el flujo respiratorio (l/s) en funcin del tiempo (s). El volumen tidal lo calcularemos
como el rea bajo la curva durante la inspiracin. El nmero de ciclos inspiracin-espiracin realizados
durante 1 minuto es la frecuencia ventilatoria.

Para medir el flujo ventilatorio usaremos un espirmetro acoplado a un sistema

de adquisicin comercial para adquirir los registros con una computadora. Cmo
funciona un espirmetro?

Desarrollo

Cada grupo contar con una computadora conectada a una interfase que
registrar datos de ECG y frecuencia respiratoria a travs de respectivos sensores.
Comprobar que los mdulos de ECG y respiracin estn conectados. Todas las
mediciones se realizarn en el mismo sujeto experimental. Se le colocarn los
electrodos (stickers) para el ECG segn la figura 1. Un compaero sostendr durante el
experimento el espirmetro a una altura conveniente para que el sujeto experimental

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est cmodo. Es importante que el sujeto experimental no mire sus registros
durante el experimento.
Comprobar que est todo bien conectado antes de empezar. El programa
DataStudio debe mostrar dos ventanas: una con tres registros temporales (dos de flujo
del espirmetro y uno de voltaje del ECG), otra con dos valores (frecuencia respiratoria,
ritmo cardaco).

2.1. Valores basales

Con el sujeto experimental sentado cmodamente, realizar las siguientes

mediciones basales: ECG y respiracin hasta observar tres ciclos respiratorios
completos. Es importante dejar el espirmetro sobre la mesa hasta que deje de
parpadear la luz roja (Wait) y se prenda la verde (Ready). Tomar el espirmetro con una
mano, colocarlo entre los dientes, tratando de formar un sello con los labios. De ser
necesario, el sujeto experimental puede taparse la nariz.
Cada registro de ECG se realizar a una tasa de adquisicin de 200 Hz durante
10 segundos, o hasta ver 3 ciclos consistentes. Una vez adquirido el registro (voltaje)
ser guardado en un archivo .txt llamado ECG-nombre del grupo-fecha (Archivo-
Exportar datos-Voltaje).
El registro de ventilacin (flujo total) ser exportado como .txt Resp-nombre del
grupo-fecha (Archivo-Exportar datos-Flujo total).

2.2. Inspiracin y espiracin forzada

Volver a adquirir con el programa datos del sujeto. Luego de que el resto del
grupo vea que se estabiliza en los ciclos, le pedirn que haga una mxima inspiracin,
seguida de una mxima espiracin. Luego el sujeto volvera a respirar normalmente por
algunos ciclos. Volver a exportar los datos de ECG y respiracin (guardar como ECG2-
nombre del grupo-fecha y Resp2-nombre del grupo-fecha).

3. Anlisis de datos

3.1. Anlisis del ECG

Los archivos sern abierto en Excell y los datos copiados a la segunda columna
del archivo A.ECG. Guardar el archivo como ECG-nombre del grupo-fecha. Se
tomarn 3 ciclos consecutivos en los que la onda P est bien definida. En ellos med el
tiempo correspondiente a:

1) Mximo onda P
2) Mnimo onda Q
X3
3) Mnimo onda S
4) Mximo onda T
5) Mximo onda R
6) Mximo ondas P y R del 4to ciclo

A partir de estos datos, calcul:

- La frecuencia cardaca, usando el intervalo R-R (promediar los 3 intervalos, y
expresarlo en latidos por minuto).
- Los intervalos P-Q, Q-S y Q-T (promediar los 3 ciclos).

4
Complet con estos datos la planilla Excel provista con los registros, la que debers
entregar completa a los docentes. La planilla ser autograficable para que puedan
verificar los resultados obtenidos. Por favor, no modifiques el formato de la planilla.

Se realizar el mismo anlisis de los registros obtenidos durante la respiracin

forzada. Para ello los 3 ciclos
sern seleccionados durante la
inspiracin forzada (observar que
existe un aumento de la lnea de
base durante la inspiracin
forzada). Qu sucede con la
frecuencia cardaca durante la
respiracin forzada? Qu
variables son las ms afectadas?

3.2. Anlisis de respiracin

Los archivos sern abierto en Excell y los datos copiados a la segunda columna del
archivo B.Ventilacion. Guardar el archivo como Ventilacion-nombre del grupo-fecha.
Se tomarn 3 ciclos consecutivos en los que el volumen tidal sea constante.

Figura 3. Registro de un
espirgrado. Se indican
los parmetros que
mediremos en los
registros obtenidos
durante el TP. En la tabla
se muestran los valores
tpicos para estas variable.
Las figuras de la gua son
de Medical Physiology,
Boron y Boulpaep, 2003.

Calcular segn corresponda los siguientes parmetros respiratorios (ver Figura 3):

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 Volumen tidal (TV): es el volumen de una respiracin o la cantidad de aire que
se mueve adentro o afuera de los pulmones durante una respiracin tranquila.
Capacidad inspiratoria: es la mxima cantidad de aire que puede ser inspirada
luego de una espiracin normal.
Volumen de reserva inspiratorio (IRV): es la cantidad de aire que se mueve
hacia los pulmones durante una inspiracin forzada, ms all del nivel de la
inspiracin tidal.
Volumen de reserva espiratorio (ERV): es la cantidad de aire que se mueve
hacia fuera de los pulmones durante una espiracin forzada, ms all del nivel
de una espiracin tidal.
Capacidad vital (VC): es la mxima cantidad de aire movible contenida en los
pulmones (VC = TV + IRV + ERV).

De qu factores depende el IRV? Y el ERV?

An luego de una espiracin forzada mxima, queda aire remanente en los
pulmones, al cual se denomina Volumen residual (RV en la figura 3). Se puede medir
esta variable con el espirmetro? Cmo/Por qu? Cul es la ventaja de que quede air
residual en el pulmn?

4. Efecto de la respiracin forzada sobre la presin parcial de CO2 espirada

La presin parcial de CO2 la mediremos utilizando un sensor comercial de CO2

tambin acoplado con la computadora. El sensor mide la absorcin infrarroja (4260 nm)
del CO2 y se calibra respecto a la atmtsfera de manera que el valor registrado es
directamente la presin parcial de CO2 en la muestra. Desconectar los otros mdulos y
conectar el de CO2.
Comenzar a adquirir. Comprobar que el valor atmosfrico de CO 2 est entre 400
y 450 ppm. Calibracin: si no est, apretar el botn de calibrar por 3 seg, la luz verde
quedar estable, indicando que se est calibrando (1min aprox) Una vez que la luz
verde empieza a titilar, est listo para medir.
Basal: Espirando normalmente el sujeto llenar una bolsa, que ser luego
puesta en el sensor. Se esperar hasta que la medicin se estabilice (mantenga
oscilaciones en ambos sentidos), y se anotar ese nmero.
Retencin de la respiracin: el sujeto aguantar la respiracin lo mximo posible
y luego espirar en la bolsa. Se proceder como en el punto anterior, hasta registrar el
valor de CO2.
Hiperventilacin: el sujeto realizar una serie de inspiraciones y espiraciones,
hiperventilando. Al final exhalar el aire en la bolsa. NOTA: no exagerar, puede causar
mareo. Se anotar el valor de CO2 obtenido.
Qu resultados esperara obtener en condiciones de hipoventilacin, cuando la
ventilacin no alcanza a cubrir las demandas metablicas de los tejidos?

5. Presin sangunea

5.1 Otras fuentes de presin

Si bien la principal fuente de presin arterial es el corazn, otras fuentes que

contribuyen a generar presin son la gravedad, la distensibilidad (compliance) de los

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 vasos, la viscosidad y la velocidad del fluido. Es decir que la presin es una variable
dependiente de mltiples factores. La gravedad afecta directamente la presin
hidrosttica en una columna de lquido cuando hay una diferencia de altura entre dos
puntos del sistema. Aqu intentaremos poner de manifiesto la influencia de la gravedad
sobre la presin sangunea en un sujeto experimental que an no haya realizado el
protocolo de ejercicio. Para ello, a un sujeto sentado colocale el manmetro en la
mueca y medle la presin arterial:

a) con el brazo extendido horizontalmente hacia el costado a la altura del corazn.

b) con el brazo extendido verticalmente hacia arriba.
c) con el brazo extendido verticalmente hacia abajo.

En todos los casos dej pasar 1 minuto entre mediciones. Ahora, repet las
mediciones de a-c pero con el sujeto acostado. As, los registros se hacen siempre a la
altura del corazn. En esta condicin el brazo debe estar extendido y completamente
apoyado: en a) el brazo quedar perpendicular al cuerpo y en b) y c) paralelo al
cuerpo.
Qu diferencias observs en los distintos tratamientos? Cul es la diferencia
de presin (sistlica y diastlica) en cada condicin? Extrapolando estos resultados,
Cmo crees que se modifica la presin sangunea en los pies cuando una persona
est acostada en relacin a cuando est parada? Y en la cabeza? A partir de estos
resultados, entends por qu la presin se mide siempre a la altura del corazn
independientemente de la posicin del sujeto?

5.2 Efecto del fro sobre la presin arterial

Dado que es difcil medir directamente el fenmeno de vasodilatacin perifrica

en respuesta al calor (al menos en ausencia de una ducha caliente), intentaremos medir
la vasoconstriccin en respuesta al fro. La aplicacin de fro sobre una parte del cuerpo
debera provocar una disminucin en la irrigacin de la piel de manera de evitar una
prdida excesiva de calor. Una disminucin repentina en el continente por el que circula
la sangre llevara aparejada, para el mismo gasto cardaco, un aumento transiente de la
presin sangunea arterial. Intentaremos ahora simular esta situacin. A un sujeto
medile normalmente la presin (anot tambin la frecuencia cardaca registrada por el
manmetro) segn el siguiente protocolo:

fro

1min

a) Med dos veces la presin arterial con un intervalo de 1 min (indicado con las
flechas).
b) Coloc su mano derecha en un balde con agua a cero grados por 1 min. Antes de
que retire la mano medile la presin.
c) Con la mano ya fuera del balde hac dos mediciones ms con un intervalo de 1
min.

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 Qu ocurri con la presin sangunea a lo largo del protocolo? Se recuper el
valor normal de la presin en los tiempos medidos? Qu ocurri con la frecuencia
cardaca a lo largo del protocolo? La aplicacin de fro, provoc en la mano otros
efectos que el sujeto experimental pueda referir? En estas condiciones el efecto que el
sistema nervioso autnomo ejerce sobre la presin sangunea es en el mismo sentido
que el cambio observado en la presin? A la vista de esta nueva hiptesis reinterpret
el efecto que tuvo el fro sobre la presin. En este mismo sentido, te parece sencillo
disear un experimento, el que fuera, donde efectivamente puedas controlar las
variables experimentales? Este ejercicio sumamente sencillo pone de manifiesto que es
sumamente difcil aplicar estmulos controlados.

6. Las temperaturas del cuerpo

El que un organismo sea clasificado como homeotermo puede hacernos pensar

que la temperatura en todo su cuerpo es la misma. Lejos de ser as, a lo que se refiere
el concepto es a que la temperatura corporal (tronco/cabeza) para un mismo individuo
se mantiene aproximadamente constante (en humanos en un rango que va de 35 a 37
C aproximadamente). En cambio, la temperatura en extremidades como piernas y
brazos generalmente es menor. Adems, en las extremidades la temperatura disminuye
cuanto ms distal sea el punto de la extremidad respecto al tronco. De manera general,
la temperatura de la extremidad en cuestin depender de factores muy diversos tales
como: la temperatura exterior, la necesidad de disipacin o de conservacin de calor
por parte del cuerpo, la cantidad de abrigo, el estado metablico general o particular de
la extremidad, etc.
Para poner de manifiesto este fenmeno mediremos la temperatura en 5 puntos
del cuerpo: frente, abdomen, brazo, antebrazo y pantorrilla. Para ello, usaremos el
termmetro infrarrojo ya que en condiciones de reposo la temperatura de la piel tiende
a la temperatura del volumen subyacente (de ah su uso comercial). Cabe considerar
que la menor temperatura que se puede medir con este termmetro es de 32 C y la
temperatura en las extremidades puede ser menor an que este valor. Si este fuera el
caso consider la mejor estimacin posible de la temperatura, es decir, 32 C. Si bien
este procedimiento nos conducir a sobreestimar la temperatura de la extremidad, y por
ello no podremos determinar el valor de la temperatura en el punto, de todas maneras
nos permitir poner a prueba la hiptesis (errnea) de que la temperatura es la misma
en todo el cuerpo.

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 IFM 2015
TP 5: Fisiologa del ejercicio

Bibliografa complementaria: captulos 58 y 59 de Medical Physiology, Boron y Boulpaep, Ed.

Elsevier Science, 2003.

Objetivos

A partir de la respuesta fisiolgica frente al ejercicio fsico se busca:

- Abordar de manera prctica el concepto de homeostasis y su alcance.

- Estudiar variables centrales de la fisiologa (temperatura corporal, variables respiratorias y
cardiovasculares) durante distintos estados de demanda metablica.
- Adquirir familiaridad con la medicin y anlisis de variables fisiolgicas.

Introduccin

El ejercicio fsico es una de las actividades cotidianas que generan mayor estrs
fisiolgico. El msculo en reposo tiene una tasa metablica baja (1,5 ml de O2/(min X kg)) en
comparacin con la mayora de los tejidos (2 ml de O2/(min X kg)). La contraccin y la relajacin
muscular sostenida llegan a provocar un aumento de la tasa metablica de 100 veces la tasa basal
(150 ml de O2/(min X kg)). Para soportar este aumento, el cuerpo debe hacer ajustes fisiolgicos
rpidos e integrados, a nivel celular y sistmico, de manera de satisfacer no slo la demanda
metablica sino tambin las necesidades trmicas y de fluidos originadas en la conversin de
energa qumica en trabajo mecnico.
En este trabajo prctico estudiaremos cmo evolucionan distintas variables sistmicas
cuando un individuo pasa de un estado metablico de reposo a un estado metablico activo como
el que tiene lugar durante el ejercicio fsico. En particular estudiaremos, cmo algunos
parmetros fisiolgicos se modifican por el ejercicio, mientras que otros permanecen constantes
justamente por estar sujetos a mecanismos de control.

Materiales y Mtodos

El trabajo prctico se desarrollar en hemiturnos, divididos en cuatro grupos. Cada grupo

dispondr de una computadora equipada con un conversor analgico digital, que permitir la
obtencin de electrocardiogramas, volumen y frecuencia respiratoria, y la presin parcial de CO2
en el aire espirado. Adems, cada grupo contar con un tensimetro para medir la presin arterial,
y con un termmetro infrarrojo para medir la temperatura corporal.

NOTA
En el trabajo prctico se medirn distintas variables en un sujeto experimental. Por el nmero de
grupos, lo ideal es que un alumno del propio grupo sea el sujeto experimental de su grupo. Sin
embargo, si ningn alumno desea ser sujeto experimental, un docente tendr ese rol. Ningn
alumno est obligado a prestarse como sujeto experimental. Tanto el sensor de ECG como el
espirmetro son de uso educativo exclusivamente. Los mismos no fueron ni diseados ni
evaluados para uso mdico.
Tratamientos y protocolo experimental

Los tratamientos sobre los que se estudiarn las distintas variables fisiolgicas sern: en
posicin horizontal, posicin sentado en reposo, ejercicio y recuperacin. Tanto el ejercicio como
la recuperacin los discriminaremos en dos tiempos. El protocolo experimental es el que se indica
en la Figura 1: acostado, sentado, ejercicio (I y II), caminata (recuperacin I) y finalmente
sentado nuevamente (recuperacin II). Para cada una de las fases experimentales se medir la
temperatura en distintas partes del cuerpo, la presin arterial, el volumen de aire ventilado, la
frecuencia ventilatoria, la concentracin de CO2 en el aire espirado y el ciclo cardaco a partir del
ECG.
En todos los casos las mediciones se realizarn al completar el mdulo de 5 min segn lo
indicado en la figura.
Salvo cuando el sujeto est acostado, en el resto de los casos las mediciones se realizarn
con el sujeto sentado (no confundir con el tratamiento sentado!).

acostado sentado correr

saltar saltar
correr caminar sentado
Protocolo 5 min 5 min 5 min 5 min 5 min 5 min

Tratamientos horizontal reposo ejerc I ejerc II recup I recup II

Figura 1. Protocolo experimental. Una vez que el sujeto haya pasado 5 min acostado recin entonces se sentar en una
silla. Despus de permanecer 5 min sentado comenzar la fase de ejercicio. Una vez finalizados los dos mdulos de
ejercicio, cada uno de 5 min, el sujeto caminar lentamente por 5 min comenzando la fase de recuperacin. Finalmente,
volver a permanecer sentado por 5 min finalizando la fase de recuperacin. Las flechas indican el momento en que se
realizarn las mediciones.

Este protocolo experimental incluye implcitamente la secuencia basal-tratamiento-basal.

Este es un diseo clsico en el cual se mide una variable en condiciones basales (sentado), se
aplica un tratamiento (ejercicio) y luego se estudia la recuperacin de la respuesta en las
condiciones basales (sentado). As se comprueba que: a) el tratamiento es reversible, b) la
respuesta observada al tratamiento es especfica, c) el sistema permanece ntegro despus del
tratamiento. Adems, este protocolo incluye el tratamiento acostado ya que se sabe que al menos
algunas variables hemodinmicas dependen de esta condicin (recordar TP 4).

Ejercicio

Si bien sera deseable que los sujetos experimentales realizaran la misma cantidad de
trabajo a una potencia similar, en las condiciones disponibles en el laboratorio nos
conformaremos con que salten en el lugar con los dos pies juntos durante los 5 min que duran las
fases de ejercicio. Record, sin embargo, que el trabajo es el producto de la fuerza por la distancia
sobre la que se aplica la fuerza (newton X metro = joule) y que la potencia es el trabajo hecho por
unidad de tiempo (joules / seg = watt).
En caso que los sujetos experimentales se sintieran cansados no duden en descansar!
Actividad cardaca

Durante el ejercicio el sistema circulatorio debe proveer de un flujo adicional de sangre a

los msculos en actividad para entregarles O2 y eliminar metabolitos. A la vez, debe irrigar la piel
de manera de disipar el calor generado (ver Temperatura). Para ello, debe aumentar tanto el
volumen efectivo de sangre circulante (a expensas del reservorio venoso) como el gasto cardaco.
El volumen efectivo circulante depende del volumen total de sangre y de su distribucin en el
sistema circulatorio. En esta seccin estudiaremos algunas de las variables involucradas directa o
indirectamente en el gasto cardaco. Para ello, analizaremos la actividad del corazn en el reposo
y en el ejercicio mediante un electrocardiograma (ECG).

Desarrollo
Para realizar el electrocardiograma colocaremos un electrodo en cada brazo a la altura del
bceps y un electrodo de referencia a la altura de la mueca (brazo derecho) tal como se hizo en el
TP 4. Las mediciones se harn segn el protocolo experimental de la Figura 1. Cada registro se
realizar a una tasa de adquisicin de 200 Hz durante 10 segundos. Una vez adquirido el registro
ser guardado en un archivo indicando el nombre del grupo y el tiempo correspondiente al
tratamiento.

Nota: Record que al momento de realizar las mediciones es importante que los brazos se
encuentren apoyados, no colgando.

Anlisis del ECG

Para cada una de las mediciones tom 3 ciclos consecutivos en los que la onda P est bien
definida, y med el tiempo correspondiente a:

1) Mximo onda P
2) Mnimo onda Q
3) Mximo onda R X3
3) Mnimo onda S
4) Mximo onda T
5) Tiempo de la onda P y mximo de la onda R del 4to ciclo.

Una vez realizado el protocolo experimental, en clase, calcul:

- La frecuencia cardaca, usando el intervalo S-S (promediar los 3 intervalos, y expresarlo en
latidos por minuto).
- Los intervalos P-Q, Q-S, Q-T y T-P (promediar los 3 ciclos).

Complet con estos datos la planilla Excel provista, la que debers entregar completa a los
docentes al finalizar la clase. Por favor, no modifiques el formato de la planilla.

Presin arterial

A los fines de mantener la provisin de nutrientes, O2 y evacuar los desechos metablicos

que produce el organismo, el sistema circulatorio modifica y redistribuye el flujo sanguneo en
funcin de las necesidades metablicas de los distintos tejidos. En la seccin anterior
mencionamos que durante el ejercicio se debe aumentar el gasto cardaco y, adems de
redistribuirse el flujo sanguneo, se debe aumentar el volumen efectivo de sangre circulante. Si
estos ajustes no se realizaran integrada y coordinadamente tendran efectos notables sobre la
presin sangunea. Aqu estudiaremos, entonces, el efecto sobre la presin sangunea arterial que
imponen las necesidades metablicas originadas en el ejercicio.

Desarrollo

Una vez que el sujeto experimental se encuentre sentado (salvo en primer fase), coloc el
manmetro en su mueca izquierda. Es importante que en las mediciones sucesivas coloques el
manmetro en la misma posicin de la mueca. Para ello, antes de realizar la primera medicin
hac una marca en la piel en torno al manmetro para volver a colocarlo luego en la misma
posicin. Tras ajustarlo debe caber un dedo entre la correa y la mueca. Es importante, tambin,
que el sujeto experimental no hable ni se mueva durante el registro.

Sistema respiratorio

La energa que utiliza el msculo tanto para la contraccin como para la relajacin es
provista por la hidrlisis de ATP. Sin embargo, la cantidad de ATP que puede almacenar el
msculo no alcanza ms que para unos pocos segundos de actividad muscular sostenida. En
consecuencia el msculo tiene que regenerar ATP. Esta sntesis de ATP puede ocurrir por vas
metablicas aerbicas o anaerbicas (Figura 2). La obtencin de energa por vas anaerbicas,
adems de ser ineficiente, no puede sostenerse por tiempos prolongados ya que los metabolitos
resultantes son txicos y al acumularse conllevan a la fatiga muscular.
Las fuentes aerbicas, en cambio, permiten mantener importantes niveles de actividad
fsica de modo sostenido. Estas fuentes involucran la oxidacin completa de glucosa, cidos
grasos o cuerpos cetnicos en las mitocondrias de las fibras musculares. Como se seal ms
arriba las necesidades metablicas del msculo aumentan cerca de 100 veces durante el ejercicio
intenso. As, la provisin de O2 al msculo se convierte en un factor limitante de la actividad
fsica.
El oxgeno requerido para el metabolismo oxidativo pasa de la atmsfera a la mitocondria
de las fibras musculares en tres etapas: 1) incorporacin de O2 a nivel pulmonar, 2) provisin de
O2 por el flujo sanguneo al msculo y 3) extraccin de O2 de la sangre por el msculo. Aqu
estudiaremos como se modifica la ventilacin durante el ejercicio de manera de satisfacer la
demanda de O2 y el consiguiente aumento en la liberacin de CO2.

Figura 2. Vas metablicas aerobias

y anaerobias del msculo
esqueltico.
Desarrollo

En cada sujeto mediremos dos variables experimentales: el flujo de aire durante la

inspiracin y la espiracin y la concentracin de CO2 en el aire espirado. A partir de medir el
flujo ventilatorio podremos calcular el volumen tidal y la frecuencia respiratoria. A partir de la
concentracin de CO2 medida y conociendo el volumen ventilado por minuto podremos calcular
la cantidad de CO2 producido en ese tiempo. Qu fuentes de energa utiliza normalmente el
msculo?
El flujo ventilatorio se medir respirando normalmente por la boca a travs del
espirmetro. El registro durar 30 segundos y ser guardado en un archivo indicando el nombre
del grupo y el tiempo correspondiente al tratamiento. La concentracin de CO2 se medir
exhalando normalmente (volumen tidal) en una bolsa plstica especialmente adaptada al sensor
de CO2.

Temperatura

La eficiencia de conversin de la energa qumica almacenada por el msculo en las

reacciones bioqumicas y biomecnicas involucradas en la realizacin de trabajo mecnico es de
aproximadamente un 24%. El resto de la energa transformada durante el ejercicio es liberada en
forma de calor. As, en cuanto comienza el ejercicio se produce, primero, un aumento de la
temperatura del msculo que inmediatamente se disipa por el torrente sanguneo hacia el resto del
cuerpo (Figura 3, izquierda). Cul es el efecto del calor sobre la afinidad de la hemoglobina?
El aumento de temperatura es sensado por termoreceptores hipotalmicos. El hipotlamo
compara, entonces, este valor de entrada de la temperatura con la temperatura de referencia del
comparador (recordar el seminario 1) y activa mecanismos fisiolgicos de disipacin de calor de
manera de mantener la temperatura corporal (fundamentalmente del tronco y la cabeza) en torno
al valor de referencia (Figura 5, derecha). Cabe notar que este valor de referencia no tiene un
correlato fsico o neuroanatmico sino que es una conceptualizacin que permite explicar y dar
sentido a la repuesta integrada de mltiples componentes involucrados en el sistema de
regulacin de la temperatura.
Figura 3. Izquierda, la figura ilustra los mecanismos de disipacin del calor originado en la actividad muscular.
Derecha, el esquema sintetiza las vas y los mecanismos principales de control de la temperatura corporal.
Los mecanismos fundamentales de disipacin de calor durante el ejercicio son el aumento
de flujo sanguneo en la piel y la evaporacin de H2O por sudoracin. La modulacin por parte
del sistema autnomo del tono del msculo liso de las arteriolas subcutneas controla la irrigacin
sangunea de la piel y as la disipacin por conveccin de calor del cuerpo hacia el medio
ambiente. Cuando este mecanismo no es suficiente para disipar la carga de calor, el sistema
nervioso autnomo activa las glndulas sudorparas (exocrinas) que liberan sudor sobre la
superficie del cuerpo contribuyendo a la disipacin de calor por la evaporacin de agua.
Por la funcin en la que estn involucradas qu parte del sistema autnomo cres que
activa las glndulas sudorparas? Cmo se puede explicar entonces que la sudoracin est
mediada por acetilcolina actuando directamente sobre estas glndulas? Sobre qu estructura de
la glndula acta la acetilcolina de modo de que se libere sudor?
Bajo condiciones extremas de ejercicio la prdida de agua por la piel puede alcanzar los
30 ml/min y la prdida de agua por la espiracin unos 2 ml/min. Por lo tanto, en 1 hora de
ejercicio intenso una persona de unos 70 kg habr perdido cerca de 2 litros de agua. Es decir,
cerca del 5% del agua total del su cuerpo (esto es asumiendo que el cuerpo est compuesto por
60% de agua). La pregunta es, de donde salieron esos dos litros de agua?

Desarrollo

En cada sujeto mediremos la temperatura corporal en el odo y la temperatura de la piel

en la frente y en el brazo. Como es importante realizar las sucesivas mediciones en el mismo
lugar, previo a comenzar a tomar la temperatura se delimitar el rea de la piel a medir con un
marcador deleble.

Planilla final de resultados

Antes de finalizar la clase, cada grupo deber volcar en la planilla del turno las siguientes
variables:

Electrocardiograma: frecuencia cardaca y perodos P-Q, Q-S, Q-T y T-P.

Presin sistlica y diastlica.
Sistema respiratorio: volumen tidal, frecuencia ventilatoria, y concentracin de CO 2 en el aire
espirado.
Temperatura en el odo, frente y brazo.

No olvides llenar la planilla Excel adicional (Informacin general).

Con los resultados obtenidos debern calcular, adems, el volumen ventilado por minuto y
cantidad de CO2 producido por minuto del sujeto experimental del grupo.

Informe

El informe debe incluir una introduccin mnima, una descripcin general del protocolo
experimental realizado, los resultados obtenidos y una discusin o conclusiones sobre los
resultados obtenidos en el trabajo prctico.
En cuanto a la presentacin de los resultados se espera que hagan un grfico de la media
el error estndar de cada una de las variables medidas en funcin de la fase experimental.
Debern realizar un anlisis estadstico de los resultados obtenidos (ver abajo el instructivo). En
cada grfico debern incluir, tambin, los resultados obtenidos por su grupo trabajo, dentro del
grfico o en el texto como discusin respecto a la figura correspondiente. Se espera que
interpreten los resultados grupales obtenidos y, en caso de que hubiera diferencias entre los
resultados grupales y los obtenidos por su grupo, a qu pueden deberse.

Gua para el anlisis estadstico y uso de R

R es un entorno de software libre que permite programar algoritmos y utilizar herramientas
desarrolladas por otros para anlisis estadsticos y grficos. Corre bajo una gran variedad de
sistemas operativos y se baja gratuitamente de la pgina www.r-project.org. Existen una variedad
de manuales para la utilizacin, y a diferencia de otros programas comerciales, necesita que el
operador sepa lo que est haciendo.
En este TP no esperamos que aprendas a utilizar todo el R, ya que como lenguaje de
programacin su potencialidad es muy grande. Esperamos que puedas realizar los anlisis
estadsticos necesarios para el informe y comprender por qu y cmo se realizan.
Es importante primero comprender con qu tipo de datos estamos trabajando y cul es el
anlisis que queremos realizar. Para cada sujeto experimental hemos medido en el TP distintas
variables fisiolgicas en distintas etapas. As tenemos un factor que es la Etapa del ejercicio,
aplicada sucesivamente al mismo sujeto. Como se utiliza el mismo sujeto, las mediciones
sucesivas no son independientes (por ejemplo la frecuencia cardaca en la primera etapa de
recuperacin va a depender de la frecuencia cardaca de ese sujeto en la segunda etapa de
ejercicio). Este tipo de diseo puede analizarse mediante un ANOVA de un factor con medidas
repetidas.
Para realizar el anlisis:
1. Abrir el programa R.
2. En el menu Packages&Data seleccionar Package Manager. Esto abrir la lista de paquetes
disponibles en la computadora. Seleccionar los paquetes multcomp y nlme. Estos paquetes
nos permitirn generar el modelo lineal con los datos. Al cargar el paquete se detallan en la
pantalla inferior las funciones que contiene.
3. Para cargar los datos escribir en la R Console
> Datos <- read.csv("F:/Datos2014.csv")
Reemplazando F:/ por la ubicacin del archivo. Esto permite cargar los datos y asignarlos a una
tabla llamada Datos.
4. Para verificar que la tabla se haya cargado correctamente, escribir
> Datos
5. Para generar el modelo de ajuste de los datos, escribir
> FC<-lme(Frec_card~Etapa,data=Datos,random=~1|Sujeto)
Esta funcin genera un modelo lineal de efectos mixtos, con la frecuencia cardaca dependiente
de la etapa y con el Sujeto como un factor random, a partir de los datos en la tabla Datos.
6. Podemos analizar el ajuste de este modelo realizando un ANOVA:
> anova(FC)
Este comando dar como resultado una tabla del tipo
numDF denDF F-value p-value
(Intercept) 1 50 501.1687 <.0001
Etapa 5 50 26.2987 <.0001

El rengln de (Intercept) no es muy interesante, slo nos dice que la media de todos los datos es
distinta de cero. En este ejemplo, el rengln Etapa nos dice que el estadstico F calculado con 5
grados de libertad del numerador (etapas-1) y 50 del denominador (en este caso 66 datos en 6
etapas y 11 individuos) tiene un valor de 26.3 y es significativo (p<0.0001). Esto quiere decir que
hay diferencias entre las etapas, pero dnde estn las diferencias?
7. Para poder evidenciar las diferencias entre etapas, realizaremos un anlisis posthoc, bajo la
hiptesis de que las etapas se diferencian del control (Sentado), realizando una prueba de Dunnett
y viendo los resultados:
> dun<-glht(FC,linfct=mcp(Etapa="Dunnett"),data=Datos)
> summary(dun)

Como resultado obtendremos una tabla como:

Simultaneous Tests for General Linear Hypotheses

Multiple Comparisons of Means: Dunnett Contrasts

Fit: lme.formula(fixed = FC ~ Grupo, data = Datos, random = ~1 | Sujeto)

Linear Hypotheses:
Estimate Std. Error z value Pr(>|z|)
Ejercicio1 - Control == 0 0.34082 0.05348 6.372 < 1e-04 ***
Ejercicio2 - Control == 0 0.42845 0.05348 8.011 < 1e-04 ***
Recostado - Control == 0 -0.03329 0.05348 -0.622 0.957991
Recuperacion1 - Control == 0 0.25917 0.05348 4.846 < 1e-04 ***
Recuperacion2 - Control == 0 0.20124 0.05348 3.763 0.000797 ***
---
Signif. codes: 0 *** 0.001 ** 0.01 * 0.05 . 0.1 1
(Adjusted p values reported -- single-step method)
Esta tabla as da el valor de significancia de la diferencia entre las medias de la variable en cada
etapa respecto al control (Sentado).
8. Este tipo de anlisis requiere el cumplimiento por parte de los datos de una serie de supuestos,
entre ellos el de normalidad. Para verificar visualmente la normalidad, realizaremos un grfico
QQ, que es una representacin de los cuantiles de distribucin de una variable respecto a los
cuantiles de una distribucin normal.
> qqnorm(resid(FC))
Si los datos siguen una distribucin ms o menos normal, esperamos que se ubiquen sobre una
recta; sino se alejarn de la misma.

9. Finalmente pueden probar las funciones de grficos de R, como por ejemplo:

> boxplot(Frec_card~Etapa,data=Datos)
10. Debern repetir los puntos 5-9 para cada variable. Importante: anotar las significancias
observadas tanto para el ANOVA como los contrastes. Las primeras debern ser informadas en el
texto del informe, las segundas como asteriscos en los grficos.
Datos a tener en cuenta
El diseo de medidas repetidas no admite que falten valores en una de las repeticiones de
un sujeto.
El R distingue entre maysculas y minsculas.
Hay que cerrar todos los parntesis abiertos.
 IFM 2015
TP6: Fisiologa del sistema renal.

A. Gua de simulacin de factores responsables de la funcin excretora de los riones

B. Observacin histolgica

Introduccin a la fisio-morfologa del rin.

Los riones son responsables del control de la osmolaridad y volumen plasmticos, el equilibrio
cido-base y de electrolitos, as como la excrecin de desechos metablicos.
Cada rin humano contiene 1,2 millones de nefrones (las unidades funcionales del sistema
renal). Cada nefrn se compone de un corpsculo renal y de un tbulo renal. El corpsculo renal
consiste en un penacho de capilares, denominado glomrulo, que est rodeado por una cpsula
llena de lquido denominada cpsula de Bowman. La sangre entra en el glomrulo desde la
arteriola aferente. Las fuerzas de Starling (generadas por los gradientes de presin hidrosttica
y osmtica de la sangre u onctica) conducen al plasma sin protenas desde la sangre, a travs
de las paredes de los capilares glomerulares, hasta la cpsula de Bowman. Despus, la arteriola
eferente drena el glomrulo de la sangre restante.
A continuacin el lquido filtrado fluye desde la cpsula de Bowman hasta los tbulos
colectores proximales (Figura 1, parte proximal) compuestos por el tbulo contorneado
proximal, despus al tbulo recto proximal seguido por el asa de Henle. En la parte proximal,
se secretan creatinina, antibiticos, cido rico y algunos diurticos mientras que se reabsorben
NaCl, K+, H2O, HCO3-, glucosa, aminocidos, Mg2+ y Ca2+.
Por otro lado, el lquido filtrado que pasa por el asa de Henle fluye luego al tbulo contorneado
distal antes de alcanzar el conducto colector, donde se recoge la orina. En esta parte, ejercen su
accin las hormonas aldosterona y ADH (hormona antidiurtica). Esta ltima se considera la
hormona ms importante del organismo para regular el equilibrio hdrico.

Diagrama ilustrativo de la filtracin glomerular

1
Parte A. Gua de simulacin de factores responsables de la funcin excretora de los
riones

Se utilizar el programa de simulacin: PhysioEx 6.0.

Iniciar el programa PhysioEx. Del Men Principal, seleccion Renal System Physiology
(Fisiologa del Sistema renal).

El programa se abre automticamente en la seccin que nos interesa, pero por las dudas les
aviso que toda esta primera parte corresponde a Experiment: simulating glomerular filtration.

Puls ayuda (Help) en la parte superior de la pantalla y seleccion despus Globos Activos
(Balloons On). De esta manera, moviendo el mouse por la parte amarilla de la pantalla,
aparecern etiquetas describiendo las distintas partes del nefrn.
Una vez que hayas identificado todo el equipo, hay que pulsar de nuevo Ayuda (Help) y
seleccionar Globos Inactivos (Balloons Off) antes de comenzar el experimento.

En esta simulacin, va a ser necesario guardar los datos y luego copiar la tabla para
realizar el anlisis de cada ejercicio.

Ejercicio 1: Efecto del dimetro de la arteriola sobre el filtrado glomerular.

Los diferentes dimetros de las arteriolas aferentes y eferentes que conducen sangre hacia y
desde el glomrulo, respectivamente, pueden afectar la magnitud de filtracin glomerular, y por
lo tanto, la cantidad de orina producida por el rin.

Pasos a seguir:
1. Los indicadores de radio aferente (Afferent Radius) y eferente (Efferent Radius) se deben
fijar, usando los botones (+) o (-), a 0.50 y 0.45 mm, respectivamente. Asimismo, antes de
comenzar la actividad puls el botn rellenar (Refill, si no se puede pulsar significa el sistema
ya estara preparado para comenzar). Finalmente, el indicador de presin (Pressure, mm Hg)
del recipiente de la izquierda debe marcar 90 mm Hg.
2. Puls el botn iniciar (Start) y luego de que el recipiente de drenaje se haya llenado de
sangre, puls guardar datos (Record Data).
3. Aument el radio aferente en intervalos de 0.02 mm (hasta un mximo de 0.60 mm) y repetir
los pasos 1 y 2, asegurndote de Guardar Datos al final de casa ensayo. Record que debes
rellenar para que te permita iniciar cada ensayo.

Represent (usando Excel) los valores de volumen de orina en funcin del radio aferente como
se modifica la filtracin glomerular al modificar el radio aferente? Qu pas con la presin
glomerular? Representalo, de ser posible en el mismo grfico anterior.
Si se reduce el radio aferente a 0.3 mm, sigue fluyendo el lquido a travs del nefrn? Se sigue
formando orina? Interpret este resultado en relacin a los obtenidos anteriormente. Explic las
diferencias encontradas.

Realiz el mismo experimento con los rangos descritos en los pasos 1 al 3, aumentando y
disminuyendo ahora el radio de la arteriola eferente (desde 0.45 hasta 0.3 a intervalos de 0.05
mm) manteniendo constante el de la aferente. Represent los datos obtenidos y compralos con
el grfico anterior. Qu conclus?
Cul podra ser la causa fisiolgica de un cambio en el radio de la arteriola aferente o eferente?
Explic tus razonamientos.

Ejercicio 2: Efectos combinados de la presin arterial y el radio aferente sobre el filtrado

glomerular.

1. Bajo la ventana de conjunto de datos (Data sets) resalt combinado (Combined). Esto
permitir guardar los datos de este ejercicio en una nueva ventana de conjunto de datos.

2
2. Fij la presin inicial a 90 mm Hg, y los radios aferentes y eferentes a 0.50 y 0.45 mm,
respectivamente. Si es necesario, puls rellenar para comenzar. Luego el botn Iniciar y guard
los datos.
3. Realiz el mismo experimento disminuyendo la presin hasta 70 mm Hg (a intervalos de 10
mm Hg) y luego aumentndola de una sola vez hasta 100 mm Hg manteniendo constante los
radios aferentes y eferentes. Asegurate de guardar datos y pulsar rellenar despus de cada
experimento.

Qu sucedi con la filtracin glomerular y con el volumen de orina despus de cambiar la

presin? Razon tu respuesta.

Usando el programa, cmo podras ajustar el radio aferente o eferente para compensar el efecto
de los cambios de presin sobre la filtracin glomerular y sobre el volumen de orina? Intent
modificarlo. Registr los datos obtenidos y verific si la modificacin realizada pudo compensar
el efecto del cambio de presin.

Ejercicio 3: Simulacin de la formacin de orina durante la modulacin de la reabsorcin

renal.

La reabsorcin es el movimiento de solutos y agua desde la luz de los tbulos renales hacia el
plasma sanguneo. Este movimiento depende del gradiente de concentracin entre ambos
compartimentos y adems est regulado por hormonas, las cuales actan sobre el conducto
colector. En el presente ejercicio vamos a considerar las dos ms importantes, ADH (hormona
antidiurtica) y aldosterona. La ADH est influenciada por la osmolaridad. Incluso un cambio
del 1% en la osmolaridad corporal hace que se secrete esta hormona. La aldosterona es una
hormona secretada por la corteza suprarrenal que est bajo el control del sistema renina-
angiotensina. Una disminucin de la presin arterial es detectada por las clulas de la arteriola
aferente y desencadena la liberacin de renina.
En este ejercicio examinaremos el proceso de reabsorcin que se produce mientras el lquido
filtrado viaja a travs de un nefrn hasta la formacin de orina.

Ejercicio 3A: Efecto del gradiente de soluto sobre la formacin de orina.

1. Puls experimento (Experiment) en la parte superior de la pantalla y seleccion simulando

la formacin de orina (Simulating Urine Formation). En el centro debajo de la pantalla
seleccion gradiente (Gradient) y usa los botones (+) o (-) a su izquierda para ajustarlo a 300
mOsm y puls aplicar (Dispense) para aadir el gradiente de concentracin de 300 mOsm al
fluido intersticial.
2. Puls iniciar (Start) y dej que la sangre atraviese el sistema. Cuando el detector (Probe)
situado a la izquierda debajo de la pantalla empiece a estar rojo, puls con el mouse sobre l y
arrastralo hasta encima del depsito que recoge la orina para medir la concentracin de solutos
en ella (dicho valor aparecer en la ventana de concentracin, a la izquierda de la ventana de
osmolaridad). Tomar los datos de concentracin a lo largo de los tbulos renales (en los
conductos proximales, asa de Henle y distales) y finalmente en la orina. Realizar el mismo
procedimiento aumentando la osmolaridad a 600 y 1200 mOsm (es necesario pulsar aplicar
para cada gradiente). Guardar Datos al final de cada experimento.
3. Repetir los pasos anteriores, aadiendo ADH (puls y arrastr con el mouse el tapn
cuentagotas de la botella de ADH e introducilo por el tapn gris que se encuentra encima del
lado derecho del nefrn). Cada vez que se cambie la osmolaridad hace falta repetir el agregado
de ADH (y no olvides pulsar aplicar). Guardar los datos al final, y represent el valor de la
concentracin de solutos de la orina frente a los valores de osmolaridad en ausencia y presencia
de ADH.

3
Qu le pas al volumen de orina a medida que se aument el gradiente de concentracin? Por
qu?
Cmo cambia la osmolaridad a medida que se atraviesa el tbulo renal? En qu parte del
conducto se ve el efecto de ADH?

Ejercicio 3B: Reabsorcin de glucosa. Concentracin de glucosa en la orina.

Este ejercicio tiene como objetivo entender el papel de los transportadores de glucosa Qu tipo
de transportadores son?

1. Resalt glucosa (Glucose) en la ventana de conjunto de datos (Data sets) y fij el gradiente
de concentracin (Conc. Grad.) en 1200. Puls aplicar (Dispense) e iniciar (Start). Puls
guardar datos (Record data) al terminar la simulacin.
2. Repetir el punto 1 aumentando el nmero de transportadores de glucosa (parte superior de
la pantalla, Glucose Carriers) de 100 en 100 hasta el mximo de 500. Recordar pulsar aadir
transportadores (add carriers) a la izquierda de la pantalla indicativa en la parte superior
izquierda del simulador.

Qu le sucede a la concentracin de glucosa en orina a medida que se aaden transportadores

de glucosa? Con qu cantidad de transportadores la concentracin de glucosa en la orina es
cero?Qu zonas del nefrn estarn libres de glucosa?
Sabiendo que las personas diabticas sin tratamiento (tanto tipo I y II) presentan glucosa en
orina, qu explicacin pods dar para este fenmeno?

Ejercicio 3C: Efecto de las hormonas ADH y aldosterona sobre la reabsorcin.

1. Resalt hormona (Hormone) dentro de la ventana de conjunto de datos (Data sets). Fij el
nmero de transportadores de glucosa en cero y el gradiente de concentracin en 1200. A
continuacin puls aplicar, inicio y luego guardar datos. Estos datos van a ser los datos
control de este ejercicio.
2. Repet el paso 1 aadiendo (arrastar con el mouse el tapn cuentagotas respectivo) slo
aldosterona, slo ADH o las dos juntas.

Cmo afectaron las hormonas ADH y aldosterona, individualmente y en combinacin: a) la

concentracin de la orina, b) el volumen de orina y c) la concentracin de potasio? Explica
claramente tus respuestas. En base a los resultados, plantear los mecanismos de accin de las
dos hormonas.

Parte B: Observacin histolgica de los distintos elementos del sistema renal.

Tincin hematoxilina-eosina
Con esta tincin se colorean los componentes del ncleo en azul-violeta, mientras que casi todas
las estructuras del citoplasma toman color rosado.

Tincin tricrmica de Masson

Tincin modificada que lleva como colorantes hematoxilina de Carazzi, fucsina ponceau de
xilidina y azul de anilina. Con esta coloracin los ncleos se ven violetas rojizos, los
citoplasmas de acuerdo al tipo celular pueden ser rojos (epitelios y msculo por ej.), naranjas
(glbulos rojos), azul (fibras colgenas), celeste claro (mucingeno de clulas mucosas).

A. Observacin de rin

Se observar un corte longitudinal de rin teido con tincin hematoxilina-eosina.

4
1) Microscpicamente el rin est compuesto en su cara ms superficial por dos regiones: una
parte plida llamada corteza o crtex, situada en la parte ms externa del rin, y otra ms
interna y oscuro denominada mdula.
Utilizando el aumento de 5X reconozca estas zonas y realice un esquema. Describa los
elementos del sistema renal presentes en cada zona.
Como puede ver existe una fuerte correlacin entre el sistema renal y el circulatorio. Reconozca
los distintos elementos (capilares, arteriolas, arterias, venas) e indique a qu zonas se encuentran
asociadas.

2) Utilizando el aumento de 40X identifique los distintos componentes del nefrn. El

corpsculo renal (cpsula de Bowman + glomrulo) y rodendolo se pueden ver distintas
estructuras tubulares que corresponden al tbulo proximal, asa de Henle, tbulo distal y tbulo
colector. Esquematice y nombre las distintas partes del corpsculo renal. Recorra distintos
corpsculos tratando de identificar las arteriolas aferente/eferente y el tbulo proximal puede
reconocerlos? Cmo?

B. Observacin de vejiga

La orina pasa del urter a la vejiga, desde donde es eliminada a travs de la uretra. Se
observarn cortes de vejiga coloreados con la tincin tricrmica. La pared de las vas urinarias
excretoras se compone de tres capas:
1. La tnica mucosa: est revestida de epitelio de transicin (poco permeable) rodeado de
lmina propia. Qu le sugiere la forma de la luz de la vejiga? Cmo se dispone el
epitelio? De qu protena est compuesta la lmina propia?
2. La tnica muscular: est compuesto por msculo liso longitudinal interno y circular
externo. Qu le permite esta distribucin de las clulas musculares?
3. La tnica adventicia.