GENTICA FORENSE

2016
Angel Carracedo
Instituto de Ciencias Forenses. Universidad de Santiago de Compostela
1. GENETICA FORENSE: De los grupos sanguneos al ADN
La Gentica forense es una especialidad de la Gentica que incluye un conjunto de
conocimientos de Gentica necesarios para resolver ciertos problemas jurdicos. Los tipos de
pericia ms solicitados al laboratorio de Gentica forense por los tribunales son casos de
investigacin biolgica de la paternidad, pericias de criminalstica biolgica (estudio de
vestigios biolgicos de inters criminal como manchas de sangre, esperma, pelos, etc.) y,
finalmente problemas de identificacin.
En Europa hay unos 300 laboratorios de Gentica forense y en Espaa ms de 40, aunque slo
10 estn acreditados con la norma ISO 17025 y hacen pruebas de investigacin criminal
(laboratorios del INT, de la polica, de las policas autonmicas, de la Guardia Civil y el
Instituto de Ciencias Forenses de Santiago). En los Pases Escandinavos, Holanda o Irlanda, la
pericia se realiza en grandes laboratorios estatales (habitualmente un laboratorio para
criminalstica y otro para pruebas de paternidad) y en otros pases como Italia, Portugal o
Alemania est distribuida en laboratorios ms pequeos. En otros pases como Blgica,
Francia o Austria, la situacin es intermedia.
En el Reino Unido gran parte de la pericia oficial se realiza en grandes laboratorios privados
de la clausura del Forensic Science Service 1.
En el resto del mundo existen aproximadamente otros 800 laboratorios, siendo una
especialidad tpica de pases desarrollados econmica y socialmente. Europa tiene una
preponderancia clara en el campo por encima de Estados Unidos, Japn o Australia tanto en
investigacin como en calidad de la pericia y en los ltimos aos est actividad est
experimentado un gran auge en Iberoamrica y Este de Asia.
Una actividad de creciente importancia en este campo son las bases de datos de ADN con
fines de identificacin criminal. Estn legisladas e implantadas en prcticamente toda la
Unin Europea y nicamente no desarrolladas todava en Italia. Tambin estn establecidas
en otros pases del mundo (Estados Unidos, Australia y Nueva Zelanda) y suponen la
introduccin de unos 3 millones de perfiles de ADN por ao.
1 La medida fue enormemente criticada y la presin cientfica salt a los medios de comunicacin
((http://www.thetimes.co.uk/tto/news/uk/article2856148.ece) si bien no logr convencer al gobierno
britnico que ejecut su decisin de privatizarlo.

La Gentica forense comenz con el descubrimiento en el ao 1900 por Karl Landsteiner del
grupo ABO y con la demostracin de su herencia de este grupo en 1910. Poco despus (1912)
fue utilizado ya en casos de investigacin biolgica de la paternidad y pronto en el anlisis de
vestigios biolgicos de inters criminal como manchas de sangre.
Nuevos antgenos eritrocitarios polimrficos, esto es con una proporcin significativa de
variantes allicas en la poblacin, y que se heredan de forma mendeliana simple como el Rh,
MNSs o Duffy fueron progresivamente incorporados al panel de marcadores genticos de
que disponamos los genetistas forenses.
La aparicin de polimorfismos proteicos y enzimticos de eritrocitos y leucocitos analizados
por tcnicas electroforticas y finalmente de los antgenos del sistema mayor de
histocompatibilidad, HLA, se dispusiese de marcadores ms informativos y ms objetivos.
Sin embargo tanto los HLA como los anteriores marcadores genticos presentaban grandes
limitaciones cuando se trataba de analizar muestras degradadas o en minscula cantidad lo
que sucede con mucha frecuencia en el trabajo forense. Particularmente la utilizacin de todos
estos polimorfismos de expresin era muy limitada para el anlisis de manchas o pelos y los
problemas de identificacin, y en la mayor parte de los casos criminales los genetistas
forenses poco o nada podan decir sobre la persona a la que perteneca un vestigio. Esto era
particularmente cierto para el anlisis de esperma o manchas de esperma y pelos o cabellos
donde era excepcional proporcionar algn dato acerca de la correspondencia de un vestigio a
un presunto agresor con lo que la ayuda a la justicia era muy limitada.
Tambin era imposible la realizacin de pruebas de paternidad en muestras degradadas (por
ejemplo a partir de restos seos) y muy difcil en casos complejos como las pruebas realizadas
sin el presunto padre a partir de familiares indubitados del mismo.
Y esta era la situacin cuando se descubrieron en la dcada de 1980 los polimorfismos del
ADN.
2. POLIMORFISMOS DE ADN
1. Concepto de polimorfismo de ADN
El trmino polimorfismo fue definido por Ford en 1940 como la aparicin conjunta en un
lugar de dos o ms formas discontinuas de la misma especie, de tal modo que la ms rara de
ellas no se puede mantener simplemente a travs de la mutacin peridica. Para que un gen
sea polimrfico, se asume que el alelo (es decir, la variante) ms comn para ese locus debe
tener una frecuencia menor del 99%.
El genoma humano haploide contiene aproximadamente 3,2x10 9 pares de bases, aunque no
todas son expresivas en trminos de produccin de protenas. El genoma de los eucariotas

superiores, contiene secuencias de ADN con una funcin determinada (genes que codifican la
secuencia de aminocidos de una protena) denominadas ADN expresivo o codificante y
secuencias de ADN que no son transcritas a protenas y que se conoce como ADN no
codificante.
Slo el 2% del genoma humano corresponde a DNA codificante y el resto (la gran mayora)
es DNA no codificante.
Que sea codificante o no codificante no es sinnimo de funcionalidad. Muchas variaciones en
ADN codificante no son funcionales ni implican ningn cambio en las protenas (por ejemplo
las variaciones que llamamos sinnimas). Al contrario, muchas regiones de ADN no
codificante tienen importancia funcional (por ejemplo, regulan la expresin de genes).
El asociar ADN codificante a funcin y no codificante a neutralidad de informacin es un
error muy comn en muchos textos y en muchas legislaciones.
Un porcentaje importante del ADN no codificante es ADN repetitivo, el cual al no estar sujeto
a presin selectiva intensa, admite unos niveles de variacin muy grandes en comparacin con
las regiones de ADN codificante
Los polimorfismos de ADN de mayor uso en medicina forense se encuentran en el ADN
repetido en tandem y clsicamente se utilizan los denominados minisatlites y microsatlites
que consisten en repeticiones de fragmentos de ADN de nmero variable, por lo que
genricamente se denominan VNTR ("variable number of tandem repeats"). La repeticiones
en el ADN microsatlite son de tamao pequeo (de 2 a 6 pares de bases) por lo que se suelen
denominar STRs ("short tandem repeats"). Las repeticiones en un locus minisatlite tienen un
tamao entre 15 y 50 pares de bases para un total de 300 bp hasta 20 Kb. El tamao total de
los STRs es de 20 bp a 400 bp.
Poniendo un ejemplo, un STR puede tener una estructura como ACTT ACTT ACTT ACTT
ACTT ACTT ACTT ACTT...hasta un nmero n de repeticiones. Los individuos nos
diferenciamos por el nmero de repeticiones de esa secuencia. Un individuo 8-12 para ese
STR significa que tiene 8 veces la unidad de repeticin (ACTT) en un lugar especfico de un
cromosoma (locus gnico) y 12 veces en el locus correspondiente del cromosoma homlogo.
El polimorfismo en los microsatlites y minisatlites se basa principalmente en el nmero de
repeticiones, pero, en algunos casos, tambin existen diferencias puntuales en la secuencia.
Los minisatlites y microsatlites adems de ser extraordinariamente polimrficos, poseen
una herencia mendeliana simple. Esto significa que el individuo 8-12, que antes pusimos de
ejemplo, ha heredado uno de los alelos de su madre y otro de su padre biolgico.
Microsatlites y minisatlites difieren tambin en su distribucin en el genoma humano (son
mucho ms abundantes los microsatlites y estn ms ampliamente distribuidos) y el origen
de su variabilidad es tambin diferente.

En el campo forense utilizamos bsicamente STRs de 4bp y 5bp en la unidad de repeticin.

Los de menos repeticiones son muy propensos a artefactos (bandas tartamudas) lo que
dificulta la interpretacin de perfiles de ADN obtenidos a partir de mezclas de diferentes
individuos. En cuanto a la estructura si bien en un primer momentos se utilizaban STRs
simples hoy la complejidad no es bice para su utilizacin y se prefieren STRs no ligados
entre si, de tasa de mutacin baja y con un buen comportamiento en relacin con posibles
artefactos y muy contrastados (validados) a efectos forenses.
Adems de los STRs en cromosomas autosmicos son de gran importancia los STRs de
cromosoma Y particularmente para el caso de agresiones sexuales.
Tambin, como ya veremos no slo el ADN nuclear es interesante, sino que desde el punto de
vista forense es de gran importancia forense el anlisis de ADN mitocondrial (regiones
hipervariables HV1 y HV2 en el bucle D) pues es ms eficaz en muestras degradadas y es el
nico polimorfismo que se puede analizar en cabellos sin bulbo, que son vestigios que
aparecen con mucha frecuencia en la escena de delitos.
Los SNPs (polimorfimos puntuales de secuencia), tanto de cromosomas autosmicos,
cromosoma sexuales y ADN mitocondrial, tienen, como veremos, una enorme importancia en
la prctica forense. Son polimorfismos muy sencillos y habitualmente (aunque no siempre)
biallicos y son simple variaciones de un solo nuclotido (A y G por ejemplo en una posicin
del genoma).
2. El descubrimiento de la huella gentica
En 1984, el genetista britnico Alec Jeffreys desarrollaba en la Universidad de Leicester junto
con V. Wilson y S.L. Thein un proyecto de Gentica molecular sobre el gen de la mioglobina
en uno de cuyos intrones encontraron una secuencia repetida en tandem de 33bp, que, como
les record las secuencias repetitivas de los satlites clsicos y eran ms pequea las
denominaron minisatlites y partir de este hallazgo desarrollaron un mtodo para analizar
muchos minisatlites de forma simultnea.
Los minisatlites eran enormemente polimrficos, por lo que los distintos individuos
mostraban algo parecido a las barras de identificacin de los productos, absolutamente
caractersticas de cada individuo. Alec Jeffreys se dio cuenta del impacto enorme que tendra
para la gentica en general y para la medicina forense en particular y denomin DNA
fingerprint (Huella gentica de ADN) al perfil de ADN obtenido por estas sondas (que desde
entonces se denominaron sondas multilocus), publicando sus resultados en el ao 1985 en la
revista Nature.
El descubrimiento del DNA fingerprint pronto tuvo un enorme impacto en el mundo
forense aplicndose casi de inmediato, gracias a la colaboracin de Alec Jeffreys con el

Forensic Science Service britnico, en casos de inmigracin y sobre todo en importantes casos
criminales con resultados espectaculares.
Aunque en un primer momento de su aplicacin forense los minisatlites se analizaban tal
como haban sido desarrollados por Alec Jeffreys y su grupo, pronto se limit mucho su uso
principalmente por las dificultades en la estandarizacin del mtodo (lo que imposibilitaba
segundas opiniones) aunque tambin por los problemas bioestadsticos de evaluacin de los
resultados y fueron substitudos por el anlisis de minisatlites no de forma conjunta sino de
forma individual (single locus probes, sondas de locus nico). Incluso esta prueba ms
sencilla presento algunos problemas iniciales, que llevaron a la necesidad lgica de una
estandarizacin obligada de la prueba. Para empezar son cientos los polimorfismos de ADN
minisatlite descritos que pueden ser detectados con decenas de enzimas de restriccin
diferentes. Si cada laboratorio utilizase sus propias sondas y enzimas sera enormemente
difcil poder comprobar un resultado en otro laboratorio y se imposibilitara una necesidad
legal bsica: la realizacin de contrapericias o segundas opiniones. Esto fue muy importante
porque se impuls la estandarizacin a nivel mundial de las pruebas de ADN.
El anlisis de minisatlites mediante sondas prcticamente est abandonado debido a que es
muy difcil analizar ADN degradado o en pequea cantidad y esto dificulta gran parte de las
aplicaciones forenses.
Por fortuna esto fue solucionado con la aparicin de la reaccin en cadena de la polimerasa y
el descubrimiento de los microsatlites.
3. Anlisis de polimorfismos de ADN mediante PCR
Como es sabido, la PCR es una tcnica de amplificacin in vitro de pequeos segmentos de
ADN con la que a partir de una cadena nica se pueden hacer millones de copias, de modo
que el producto amplificado puede ser fcilmente analizado, incluso sin recurrir al uso de
sondas. Al poderse amplificar ADN a partir de un nmero muy pequeo de copias, el inters
forense de esta tcnica es obvio.
El primer sistema analizado por PCR con fines forenses fue un polimorfismo de ADN
codificante de la regin HLA: el locus HLA DQA1, que se detectaba mediante sondas que
reconocen cada alelo del sistema previamente fijadas a una membrana pero

fue

descubrimiento de los microsatlites o STRs lo que abri unas enormes posibilidades a este
campo. Sus ventajas eran notables ya que ofrecan junto a pequeos tamaos (y por lo tanto
ms resistencia a la degradacin), un buen poder de discriminacin y facilidades para ser
amplificados de forma simultnea con PCR multiplex (esto es amplificar varios sistemas STR
simultneamente a partir de la misma muestra).

El anlisis de los productos amplificados se ha facilitado en gran medida gracias al uso de

fluorocromos y sistemas automatizados (secuenciadores automticos de ADN) que permiten
la visualizacin de varios microsatlites simultneamente.
Los polimorfismos analizables por PCR antes de ser aceptados para la prctica forense deben
cumplir una serie de requisitos y pasar sucesivos controles de validacin.
Actualmente se suelen analizar un nmero elevado de STRs estandarizados y validados a
partir de la misma muestra biolgica utilizando secuenciadores automticos y PCR multiplex.
Los muliplexes comerciales actuales contienen un nmero de al menos 16 y un marcador
(amelogenina) para determinar el sexo pero los ms modernos tienen un nmero an superior
e incluyen ms de 20 STRs, incluyendo todos los obligatorios en Estados Unidos y Europa
como se ve en la Figura 1.

Fig. 1 Globalfiler de Life Technologies (22 marcadores obligadorios ms 3 recomendables)

En Europa aunque hay diferencias entre pases en todos es obligatorio usar el denominado
European Standard Set que incluye una docena de STRs.
Para anlisis de criminalstica biolgica se prefiere usar STRs con un pequeo tamao en el
producto amplificado (menos de 200 bp) pues el tamao es inversamente proporcional a la
degradacin y en muestras muy degradadas slo cabe esperar xito con la amplificacin de
estos sistemas. Actualmente se han diseado numerosos multiplexes disponibles
comercialmente con este tipo de STRs que se suelen denominar miniSTRs. Tambin son
muy interesantes las repeticiones de 5 nucletidos (pentanucleotide repeats) cuando se trata
de analizar muestras mezcladas con diferentes individuos pues tienen menos artefactos que
otros STRs. En varios multiplexes disponibles comercialmente se incluyen este tipo de STRs.

4. Los polimorfimos de ADN mitocondrial

Hasta no hace muchos aos, el estudio de los polimorfismos de ADN se haba centrado
mayoritariamente en el anlisis de marcadores nucleares pero el ADN mitocondrial (ADNmt)
se presenta como un marcador con mltiples aplicaciones en el campo de la Gentica Forense
debido fundamentalmente a su modo de herencia y a la existencia de miles de molculas por
clula, lo que permite su estudio en condiciones en las que el material biolgico a analizar se
encuentra en mal estado o en cantidad insuficiente para estudiar cualquier otro marcador
nuclear.
En el contexto de la Gentica de poblaciones humanas, el ADNmt es un marcador ideal para
el estudio evolutivo de las poblaciones humanas debido a su elevada tasa mutacional respecto
al genoma nuclear y a la ausencia aparente de recombinacin. As, a lo largo de un perodo
relativamente corto (edad del hombre anatmicamente moderno) la molcula de ADNmt ha
estado registrando la historia de estas poblaciones y sus migraciones. Su modo de herencia
permite el uso de anlisis filogeogrficos para estudiar movimientos de poblaciones a travs
de la historia.
El ADN mitocondrial presenta las siguientes caractersticas:
a) El ADNmt humano es una molcula ADN circular, cerrado y de doble cadena, lo que le
confiere mayor estabilidad (con respecto al genoma nuclear) frente a fenmenos de
degradacin.
b) Es de pequeo tamao. Mide 16.569 bp y fue secuenciado en su totalidad por primera vez
en 1981 por Anderson y cols.
c) Mientras que el ADNmt representa menos del 1% del ADN celular total, este posee un gran
nmero de copias. Se estima que las clulas de mamferos contienen varios miles de copias de
ADNmt dependiendo del tipo de tejido. Este es el motivo y no otro, por el que funciona mejor
que el ADN nuclear en material degradado.
d) El ADNmt presenta herencia materna y en consecuencia:
.- no recombina (en los cromosomas autosmicos se intercambia el material gentico
de los progenitores)
.- tiene naturaleza haploide. Todas las copias de ADNmt de un individuo son iguales
excepto raras circunstancias (heteroplasma)
.- todos los individuos de un mismo linaje materno exhiben la misma secuencia
(haplogrupo) de ADNmt (exceptuando casos excepcionales en donde exista segregacin de
heteroplasmas en algn individuo del linaje o evidentemente mutaciones puntuales a nivel
germinal).

e) Tasa de mutacin elevada:

La tasa de evolucin del ADN mitocondrial es en promedio 5 a 10 veces superior al ADN
nuclear
La heteroplasma se define como el estado en el que un individuo presenta ms que un
genotipo de ADN mitocondrial. De este modo, cuando una mutacin surge en una de las
molculas de ADNmt dentro de la mitocondria, crea una mezcla intracelular de molculas
mutantes y normales lo que puede dificultar la interpretacin forense.
La identificacin forense mediante ADNmt se basa fundamentalmente en el estudio por
secuenciacin de esta regin control, una regin pequea de 1.2 kb y que contiene dos
regiones hipervariables conocidas como la regin hipervariable I (HVI) y la regin
hipervariable II (HVII).
Los polimorfismos que caracterizan al ADN mitocondrial son:
a) Polimorfismos de secuencia (variaciones en bases individuales)
b) Polimorfismos de longitud:
En el ADNmt existen tractos homopolimricos (la misma base repetida un nmero de veces)
donde es habitual encontrar inserciones o deleciones de una o ms bases nucleotdicas en las
que suele ser frecuente la heteroplasma.
La alta tasa de sustitucin en la regin control posibilita que nos encontremos una o ms
diferencias en la secuencia del ADNmt en la lnea materna de una familia o incluso en
familiares muy cercanos o incluso en distintas muestras de un mismo individuo. El
conocimiento de la tasa de mutacin y los mecanismos mediante los cuales las mutaciones se
transmiten a la descendencia es importante en gentica forense sobre todo para aquellos casos
en los que las diferencias de la secuencias que se estn cotejando son mnimas (diferencias de
una sola base o diferencias en heteroplasmas) para evitar el potencial de falsas exclusiones.
.
Cada vez est cobrando un valor cada vez mayor el estudio de variaciones nucleotdicas
simples en regin codificante (SNPs) del ADNmt que permiten definir con mayor precisin
el haplogrupo al que pertenece una muestra lo que aumenta su valor identificativo. Por
ejemplo un porcentaje importante de las muestras europeas pertencen al haplogrupo H (esto
es a un mismo linaje) sin posibilidad de diferenciar unos individuos de otros si no se recurre
al anlisis de SNPs de regin codificante que aumenta sensiblemente el poder del test.
El ADNmt es importante en gentica forense en dos circunstancias: en el anlisis de pelos y
cabellos y en el anlisis de muestras degradadas. En estos casos, tan solo el ADNmt podr ser
estudiado ya que, debido a sus caractersticas, las probabilidades de xito en la amplificacin
son muy superiores a la amplificacin de marcadores nucleares.

El genoma mitocondrial contiene informacin de gran utilidad y en ocasiones decisiva

judicialmente para el establecimiento de la identidad o fuente de un determinado espcimen
biolgico, jugando un papel crucial en la identificacin criminal.
Por su mejor comportamiento en muestras degradadas el ADNmt es esencial para muchos
casos de identificacin a partir de restos seos. Se han obtenido secuencias de ADNmt en
muestras de miles de aos y la prueba ha servido para solucionar numerosos enigmas
histricos como la identificacin de los restos de la familia Romanov.
La mayora de los laboratorios que de Gentica forense utilizan hoy da el ADNmt, aunque en
casos complicados este tipo de pericia slo la deben realizar laboratorios muy especializados.
Los mayores problemas que la prueba de ADNmt tiene son el control de la contaminacin y la
valoracin estadstica. La Sociedad Internacional de Gentica forense ha publicado
recomendaciones estrictas para el uso apropiado e interpretacin de los perfiles de ADNmt.
La valoracin estadstica exige el que se disponga de bases de datos poblacionales muy
amplias (es decir perfiles de ADNmt totalmente annimos con el fin de estimar su frecuencia)
y en este sentido se est haciendo un esfuerzo colaborativo importante a nivel mundial siendo
la base de datos ms importante EMPOP coordinada por el Instituto de Medicina Legal de
Innsbruck (Austria)
5. Los polimorfimos del cromosoma Y
A pesar de representar solo el 2% del componente cromosmico humano, el cromosoma Y
posee unas caractersticas que le diferencian del resto de los cromosomas y le confieren gran
utilidad desde el punto de vista tanto forense como antropolgico y que son:
a)

Es uno de los cromosomas humanos ms pequeos, con un tamao de aproximadamente

60 millones de pares de bases (Mb).

b)

El 60% de su DNA est constituido por secuencias altamente repetidas

c)

La mayor parte del cromosoma Y no recombina durante meiosis. Esta falta de

recombinacin, determina que todas las secuencias localizadas en la parte que no recombina
son heredadas como un bloque de padres a hijos, por lo que se trasmite exclusivamente por
va paterna. La nica fuente posible de variacin es producida por eventos mutacionales.

d)

Presenta una baja diversidad.

A pesar de la gran escasez de polimorfismos existente en este cromosoma si se compara con
el resto, en la ltima dcada se han incrementado enormemente los estudios realizados sobre
los distintos marcadores especficos de este cromosoma y de todos ellos los ms interesantes a
efectos forense son tambin los microsatlites (STRs).

Actualmente se pueden encontrar en bases de datos genmicas centenares de STRs de

cromosoma Y pero tambin se ha estandarizado su uso. As, los STRs que integran el llamado
haplotipo mnimo (son usados por todos los laboratorios forenses en la actualidad y existen
multiplexes comerciales ampliamente usados, que incluyen un elevado nmero de STRs..
Los microsatlites localizados en el cromosoma Y, han irrumpido con gran fuerza en el
panorama de los marcadores genticos de uso forense, debido a que suponen una ayuda
inestimable para ciertas situaciones forenses especficas como son algunos casos de
investigacin de la paternidad difciles y especialmente casos criminales con mezcla de ADN
masculino y femenino.
As, los polimorfismos de cromosoma Y se emplean cada vez ms en aquellos casos en los
que no hay muestra del presunto padre y sus supuestos hijos son varones. As, si se cuenta con
otro familiar masculino de la lnea paterna, su cromosoma Y ser idntico al del padre no
disponible y su supuesto hijo varn. Pero en estos casos, hay que tener en consideracin que
el resultado basado exclusivamente en microsatlites de Y, no excluye como padre a ningn
otro varn de esa lnea paterna. Por lo tanto, el estudio debe complementarse con marcadores
autosmicos en el caso de que sea necesario eliminar esa posibilidad.
Pero sobre todo, los polimorfismos de cromosoma Y son importantes en el anlisis de
muestras en delitos contra la libertad sexual en las que el esperma u otras clulas del agresor
estn mezcladas con clulas femeninas de la vctima.
En caso de esperma se suelen separar las fracciones masculina y femenina mediante lisis
diferencial posibilitando as la obtencin del perfil gentico del agresor. Pero esta tcnica es
muy laboriosa y no siempre resulta exitosa, al no conseguirse siempre la completa separacin
de las dos fracciones. Lo mismo ocurre cuando hay cualquier mezcla hombre-mujer con un
componente minoritario del varn (por debajo de un 10% de una poblacin celular solo se ve
tras PCR la poblacin mayoritaria). El uso de marcadores de cromosoma Y soluciona este
problema.
A pesar de resultar evidente su capacidad analtica, estos marcadores presentan, como hemos
dicho, una limitacin: todos los individuos de la misma lnea paterna compartirn idntico
perfil haplotpico de cromosoma Y por lo que no podrn ser excluidos como autores de un
delito si se presenta ese problema.
Adems, como ocurre con el ADNmt, la asociacin allica de los STRs de cromosoma Y,
implica que las frecuencias haplotpicas no puedan ser estimadas como producto de las
frecuencias allicas, por lo que el anlisis estadstico de los marcadores microsatlites de
cromosoma Y es ms complejo que el de marcadores autosmicos.
Con todo los polimorfismos de cromosoma Y estn siendo utilizados en todos los laboratorios
forenses actualmente y han servido para arrojar luz sobre casos criminales importantes en
Europa sobre todo relacionados con agresiones sexuales.

10

Tambin est siendo cada vez ms importante el uso de polimorfismos nucleotdicos simples
(SNPs) de cromosoma Y. Estos completan la informacin de los STRs y son importantes para
conocer el origen geogrfico de una muestra.
La Sociedad Internacional de Gentica forense (ISFG) ha publicado recientemente
recomendaciones para el uso correcto de estos polimorfismos, su nomenclatura y
especialmente la valoracin estadstica de los resultados, que comparte los problemas del
ADNmt.
Como en ste, existe la necesidad para los polimorfismos de cromosoma Y de grandes bases
de datos poblacionales para estimar la frecuencia de los haplotipos y se ha realizado un
esfuerzo colaborativo a nivel mundial muy importante en este sentido (www.ystr.org) que est
coordinada por el Instituto de Medicina Legal de la Universidad de Berlin.
STRs y SNPs de cromosoma X tambin estn siendo cada vez ms usados en la resolucin de
casos de paternidad difciles como herramientas complementarias a todas las anteriores.
6. SNPs y los mtodos de futuro
A diferencia de otros campos de la Gentica, los avances tecnolgicos en el rea forense
suelen tener una aplicacin a la realidad pericial relativamente lenta por la necesidad de
validacin previa y de incorporacin a programas de control de calidad.
Los polimorfismos de ms futuro, y ya en la mayora de los casos en una fase de validacin
avanzada son los ms simples, esto es los SNPs de cromosomas autosmicos. Estos poseen
una tasa de mutacin muy baja lo que los hace idneos para pruebas de paternidad.
Frecuentemente, debido a la alta tasa de mutacin de los STRs, aparecen en las pruebas de
paternidad inconsistencias que parecen exclusiones que pero que son debidas a mutaciones.
Al incluirlas en los clculos estadsticos la probabilidad de paternidad baja drsticamente. El
uso de paneles de SNPs est solucionando todos esos casos. Adems est demostrando ser
particularmente til en los casos en los casos de paternidad con relaciones familiares en el
grupo (por ejemplo, que los posibles padres sean dos hermanos), as como en paternidades
que se han de realizar a partir de material degradado (por ejemplo, tras exhumacin de los
restos seos del presunto padre).
Dado que el tamao de los productos amplificados puede ser mnimo, la eficacia de los SNPs
en material degradado y en bajo nmero de copias supera con creces a los STRs.
El nmero de SNPs que se necesitan a efectos forenses es relativamente bajo comparado con
otras aplicaciones de los SNPs en Gentica humana. Unos 50-60 SNPs de frecuencias
equilibradas tienen aproximadamente el mismo nivel de discriminacin que 12 STRs. El
grupo SNPforID (www.SNPforID.org) ha validado un set de 52 SNPs autonmicos que est

11

siendo muy empleado y tambin diversos set de SNPs para otras aplicaciones forenses de los
SNPs.
En este sentido, una de las aplicaciones ms interesantes es el uso de AIMs (marcadores
informativos de ancestros) para predecir el origen geogrfico de la persona que ha dejado una
muestra biolgica. Este tipo de prueba ha sido empleado con xito en los atentados del 11-M
de Madrid para predecir el origen geogrfico de perfiles no identificados encontrados en
objetos importantes para la investigacin judicial del caso. La eficacia del mtodo es muy alta
hasta el punto de poder predecirse con una elevada probabilidad en muchos casos si una
muestra es sureuropea o norteafricana, dos poblaciones tan prximas geogrficamente y con
una larga historia compartida.
Los SNPs son tambin importantes para la prediccin de caractersticas fsicas de un
individuo a partir de una muestra con fines de investigacin policial. As, a partir de un
vestigio biolgico, ya se puede decir con muy elevadas probabilidades el color de los ojos y
se han desarrollado paneles de SNPs al efecto as como herramientas matemticas para la
prediccin.
Por ltimo el uso de microarrays de SNPs de alta densidad (con hasta un milln de SNPs) est
revolucionando tambin la investigacin de relaciones relativamente lejanas de parentesco
(to/sobrino por ejemplo) y est posibilitando comparaciones de relaciones de parentesco que
con los microsatlites no son posibles.
Se est progresando mucho tambin en el anlisis del origen del fluido biolgico hallado (esto
es si es semen, esperma, saliva, sangre menstrual etc) mediante el anlisis de microRNAs o
expresin de mRNA.
Las tcnicas de secuenciacin de nueva generacin tambin estn produciendo una revolucin
al permitir el anlisis simultneo de STRs, SNPs para identificacin, AIMs y anlisis de
marcadores de caractersticas fsicas y tambin abriendo nuevas posibilidades para el anlisis
de ADN no humano (metagenmica, anlisis de suelos, anlisis de polen, trfico ilegal de
especies protegidas, etc). Con estas tecnologas mediante el anlisis masivo de genomas
completo se ha logrado incluso diferenciar gemelos univitelinos, uno de los retos tradicionales
en el campo forense. Tambin un campo emergente es la determinacin de la edad del
individuo que dej una muestra biolgica a la que a travs de marcadores de metilacin nos
hacemos una idea cada vez ms aproximada (el error medio es de ms menos dos aos).

12

3. OTROS ASPECTOS DEL USO DEL ADN EN MEDICINA FORENSE

1. ADN en bajo nmero de copias y mezclas de perfiles de ADN
La sensibilidad de las tcnicas actuales ha hecho posible que se puedan obtener perfiles de
ADN a partir de slo unas pocas copias (agarrar una prenda o un objeto unos pocos segundos
ya es suficiente para dejar un perfil). Por desgracia esto ha hecho ms compleja la
interpretacin al aumentar el nmero de casos en los que existe una mezcla de perfiles de
ADN.
El anlisis de mezclas de ADN es pues una prctica habitual en la rutina forense. Su
interpretacin es delicada dado que se hace imposible diferenciar qu alelos pertenecen a cada
contribuyente a la mezcla. Si adems la mezcla est desequilibrada (uno de los contribuyentes
aport ms cantidad de fluido biolgico que el otro u otros) podemos cometer errores al
asignar alelos que en realidad son artefactos de la amplificacin (sttuters) o al no detectar
alelos que realmente existen en la mezcla (drop out allico).
Para solucionar los problemas de interpretacin de mezclas de perfiles se han creado
programas informticos que nos ayudan a la interpretacin de mezclas cuando no existe la
posibilidad de la separacin fsica de los perfiles genticos.
2. Automatizacin y rapidez del anlisis forense
Uno de los principales problemas hoy en los laboratorios forenses es el gran nmero de datos
electrnicos que se generan regularmente. Desde que una muestra llega al laboratorio hasta
que se escribe el informe pericial son muchos los pasos que se dan y los resultados analticos
que se producen. Hemos de tener en cuenta el carcter judicial de las muestras que
analizamos, y como tales han de estar controladas en todo momento, siguiendo una cadena de
custodia tanto de los efectos como de las sub-muestras que se generan de ellos. Por tanto, en
los ltimos aos ha sido necesario desarrollar sistemas informticos que permitieran el
manejo fcil y seguro de toda esta informacin generada, los LIMS (Laboratory Information
Management Systems). Estos sistemas nos permiten saber dnde estn en cada momento las
muestras que se analizan y en qu fase del anlisis se encuentran (trazabilidad), nos
proporcionan las herramientas necesarias para las revisiones administrativas de cada caso y
contienen mdulos analticos para estudios de ADN (comparacin y almacenamiento de
perfiles genticos, anlisis estadsticos, etc).
Las tcnicas de anlisis en s tambin estn automatizndose. Existen hoy en da robots para
extraer ADN de un elevado nmero de muestras en un par de horas, aunque an no estn
preparados para muestras crticas.

13

Los sistemas miniaturizados compactos (lab-on-a-chip) estn actualmente en fase de diseo y

experimentacin. Han sido de muy difcil desarrollo al basarse aun actualmente la
identificacin en STRs lo que exige recorridos electroforticos de cierta distancia pero han
cobrado un nuevo auge con la potencial aplicacin de los SNPs. En el futuro prximo se
dispondr de sistemas que se puedan llevar a la escena del crimen y estn conectados de
forma directa con bases de datos. En algunos pases dada la insuficiencia actual de este tipo
de aproximaciones se utilizan laboratorios mviles que se llevan a la escena del crimen para
tratar de minimizar el tiempo de respuesta
4. APLICACIONES MDICO-LEGALES DE LOS POLIMORFIMOS DE ADN.

1. Aplicaciones en investigacin de la paternidad, identificacin y criminalstica

Como hemos dicho en la introduccin, el anlisis de los polimorfismos de ADN ha supuesto
un cambio radical en las posibilidades del laboratorio de Gentica forense.
En la investigacin de la paternidad antes del desarrollo de esta nueva metodologa, se
solucionaban la casi totalidad de los casos con los marcadores clsicos. Sin embargo, el uso
de polimorfismos del ADN ha simplificado la prueba, la ha hecho ms barata y ofrece,
adems, mayor posibilidades en casos difciles como aquellos en los que el presunto padre
ha fallecido y hay que realizar la investigacin de la paternidad a travs de restos cadavricos
o de familiares directos del mismo, o en los diagnsticos prenatales de paternidad (en casos de
violacin, por ejemplo). Todos estos casos eran difcilmente abordables con la metodologa
anterior al descubrimiento de los polimorfismos de ADN repetitivo.
En identificacin de restos seos la revolucin ha sido tambin notable ya que la mayora de
los casos se pueden resolver a travs del anlisis del ADNmt y en muchos casos se pueden
incluso obtener datos con STRs. As se han resuelto numerosos casos de gran importancia en
todo el mundo como la identificacin de desaparecidos en la dictadura argentina, y muchos
desastres de masas y enigmas histricos han sido y estn siendo investigados.
En criminalstica biolgica la revolucin ha sido total, particularmente en el anlisis de
manchas de esperma, de pelos y cabellos, saliva, o manchas minsculas de sangre, dado que,
en estos vestigios, se poda dar muy poca informacin sobre la persona a quien pertenecen
utilizando marcadores clsicos.
Hoy a partir de un nico cabello o de un mnimo nmero de espermatozoides recogidos en
cavidad bucal o una mancha envejecida y minscula de sangre se puede, en muchas
ocasiones, aportar datos de gran valor sobre la individualidad de ese vestigio, lo que era
totalmente impensable hace pocos aos.
Est siendo especialmente importante la aplicacin del polimorfismo del ADN en los delitos
contra la libertad sexual, delitos en los que ante la negativa del presunto culpable no suelen
14

existir ms pruebas indiciarias que las proporcionadas por posibles restos de esperma en
prendas y en cavidad vaginal o anal. El esperma es un vestigio idneo para el anlisis de ADN
y los marcadores clsicos apenas aportaban datos de utilidad salvo en casos excepcionales.
Y sobre todo se pueden analizar ADN a partir del simple contacto con un objeto aunque la
baja cantidad de ADN y la contaminacin hacen muchas veces difcil la interpretacin de los
hallazgos.
2. Las bases de datos de ADN con fines de identificacin criminal
El potencial del ADN como medio de identificacin hizo que pronto se propusiese la
realizacin de bancos de datos de perfiles de ADN de delincuentes.
El primer pas con bases de datos de perfiles de ADN y en el que son ms amplias es el Reino
Unido. As se implantaron en Inglaterra en 1995, seguido de Irlanda del Norte y Escocia en
1996, Nueva Zelanda tambin en 1996, Holanda, Eslovaquia y Austria en 1997 y Estados
Unidos, Alemania y Eslovenia en 1998 fueron los siguientes pases y poco a poco todos los
dems pases avanzados las fueron implantando y desarrollando una legislacin especfica.
Hay legislacin especfica sobre bases de datos de ADN en la mayora de los pases de la
Unin Europea con la excepcin de Italia. En Espaa estn reguladas por Ley Orgnica
10/2007, de 8 de octubre, reguladora de la base de datos policial sobre identificadores
obtenidos a partir del ADN. Tambin recientemente (diciembre 2008) se aprob la creacin de
la Comisin Nacional para el uso forense del ADN.
La primera base de datos y la ms amplia es la del Reino Unido. Es muy amplia y contiene
unos tres millones de perfiles de ADN, introducindose ms de 1000 perfiles diarios de
sospechosos, convictos o muestras encontradas en el lugar de los delitos.
Existe una gran diversidad legislativa entre pases europeos en relacin con quien puede ser
incluido en las bases de datos, el tiempo que deben permanecer los perfiles en la base de datos
despus de la puesta en libertad de los individuos, sobre si se conserva muestra de ADN o
slo perfil de ADN, etc.
En Espaa se incluyen en las bases de datos delitos contra las personas (homicidios, delitos
contra la libertad sexual, narcotrfico, terrorismo y robo con violencia). Solo se puede
obtener muestras por orden judicial o con consentimiento informado con asistencia letrada.
Las bases de datos han demostrado su eficacia en la investigacin de delitos con alta tasa de
reincidencia y particularmente delitos contra la libertad sexual y delitos contra la propiedad y
la limitacin de uso obedece al necesario equilibrio entre seguridad y libertad individual (en
el sentido de autodeterminacin de la informacin y control del ciudadano).
Las bases de datos de ADN incluyen perfiles de ADN de loci microsatlites que previamente
se han estandarizado. En Europa se incluye en todos las bases por lo menos todos los

15

marcadores ESS (European Standard Set). Las bases de datos estn muy protegidas en el
acceso a la informacin y se separan en ficheros para garantizar el anonimato excepto de
aquella coincidencia de perfiles que se est buscando.
En cualquier caso si bien de los perfiles de ADN no se pueden derivar ninguna informacin
mdica sobre las personas u otros datos de carcter personal, si contienen informacin
sensible (se pueden obtener datos de parentesco por ejemplo) por lo que deben siempre ser
legisladas y protegidas adecuadamente.
5. EL VALOR DE LA PRUEBA DE ADN

Introduccin. El concepto de probabilidad

Seguramente el avance ms importante en la historia de las Ciencias Forenses haya
sido la introduccin de la valoracin estadstica de la prueba en los informes forenses.
En la ciencia hay cambios que son aditivos, y que suponen un avance sobre una idea
establecida (por ejemplo los STRs sobre los minisatlites o la reciente introduccin de
los SNPs) y hay cambios disruptivos que son ms trascendentes y que suponen un
cambio total de paradigma (como ocurri con el descubrimiento y aplicacin forense
de los polimorfismos de ADN) y que son ms difciles de introducir pues suponen
cambios importantes en las organizaciones y en los conceptos.
La valoracin estadstica de la prueba es uno de estos ltimos y supuso el paso de una
medicina forense artesanal basada en la intuicin y experiencia, que aplica modelos
heursticos y que da un valor absoluto a la opinin del perito, a una medicina forense
basada en la evidencia, en la que la opinin se basa en datos, en el razonamiento y en
el que la incertidumbre de la opinin se cuantifica de forma probabilstica.
Porque efectivamente cualquier opinin y decisin tiene incertidumbre y la
probabilidad no es ms que una medida de la incertidumbre de un suceso. Es como
una escala en la que de acuerdo con la primera ley de la probabilidad se le otorga un
valor 0 a un suceso imposible y 1 a un suceso que es seguro que ocurrir. 0,5 sera un
suceso tan probable como improbable.
Es frecuente en textos jurdicos asimilar probabilidad con incertidumbre, cuando en
realidad se trata de una medida de esa incertidumbre, que no siempre se puede
calcular en la diversidad de pruebas periciales pero que, afortunadamente, en el caso
de la prueba de ADN hemos aprendido a hacerlo.

16

La idea de probabilidad surgi hace muchos siglos ligada a los juegos de azar y se
introdujo pronto un concepto clsico de probabilidad como un cociente entre los casos
favorables y casos posibles de un suceso (por ejemplo un lanzamiento de un dado).
Pronto se vio que no siempre un suceso se poda ensayar pero si, a veces, se poda
contar las veces que ocurra (por ejemplo para determinar la probabilidad de que
nazca un nio o una nia contar el sexo en un nmero de nacimientos) y as se
introdujo un concepto de probabilidad basado en frecuencias.
Sin embargo las probabilidades que utilizamos a diario no entran en ninguno de estos
conceptos y lo que hacemos es estimar la probabilidad de un suceso, que es
modificada por una serie de circunstancias que nos van sucediendo o por una serie de
pruebas que vamos obteniendo.
El matemtico ingls Bayes elabor un teorema genial (Teorema de Bayes) 2 que
permite calcular la probabilidad a posteriori de un suceso, a partir de una probabilidad
inicial (que se denomina a priori) y que tiene en cuenta las probabilidades de
circunstancias que influyen y que se denominan condicionadas.
La estadstica bayesiana es la base de la teora de la decisin y es el principio lgicomatemtico que utilizamos en Gentica Forense y que debe utilizar el juez si quiere
combinar la probabilidad que indica el perito en su informe con el valor a priori que
sobre la culpabilidad e inocencia del acusado tenga antes de la prueba pericial.
Pero el juez tiene que utilizar probabilidades? No tiene que tomar una decisin
fuera de toda duda razonable?
Lo que muchas veces se ignora es que la sola idea de duda razonable implica
probabilidad. El juez toma decisiones puramente probabilsticas y solo cuando la
incertidumbre sobre la culpabilidad es tan baja que en un contexto determinado (que
no es independiente de la magnitud de la pena) pasa un umbral concreto es cuando se
pronuncia a favor de la culpabilidad.
La interpretacin de la prueba biolgica
Cundo se analizan polimorfismos genticos en manchas biolgicas y se trata de ver
si corresponden a un individuo, cuya sangre tambin es analizada, pueden suceder dos
situaciones: que no coincidan varios marcadores analizados o que coincidan todos.
2 Bayes, Thomas (1763). An Essay towards solving a Problem in the Doctrine of
Chances. Philosophical Transactions of the Royal Society of London 53: 370418

17

En el primer caso podemos decir que la mancha analizada no corresponde al individuo

con un margen de error prcticamente despreciable y que depende, en todo caso, de la
seguridad analtica del laboratorio, de ah la importancia de la acreditacin y los
controles de calidad.
El problema se presenta cuando coinciden los grupos analizados en el individuo y la
mancha.
Antes de nada hay que aclarar que aunque coincidan varios marcadores, siempre
existir una incertidumbre sobre si la mancha pertenece al individuo, que, en muchas
ocasiones, puede ser mnima, pero siempre es cuantificable y no puede hablarse en
ningn caso de incriminacin o seguridad absoluta. Siempre se ha de proceder a la
valoracin probabilstica de la coincidencia de perfiles de ADN.
La necesidad de la valoracin probabilstica es clara: Imaginemos que una mancha de
sangre es encontrada en la escena del crimen, y que existe un acusado cuya sangre se
analiza. En ambos, mancha y acusado, se estudia el grupo AB0 y los dos poseen el
grupo A. Como quiera que el grupo A lo posee cerca del 50% de los individuos,
intuitivamente ya se entiende que esa coincidencia tiene escaso valor probatorio.
Pero imaginemos que se analiza un polimorfismo de ADN, y que tanto la mancha
como el acusado tienen el genotipo 9-11, que lo posee una persona de cada cien.
Intuitivamente ya se entiende que la prueba cientfica tiene ahora un valor superior
que en el caso anterior. Pero en este ltimo caso la prueba se puede presentar ante el
juez, como ahora veremos, de forma muy diferente.
La acusacin puede presentar el caso as: "El anlisis del laboratorio forense tiene en
este caso una enorme importancia. El grupo encontrado lo posee slo el uno por cien
de la poblacin, de modo que slo hay un uno por ciento de probabilidades de que la
sangre provenga de otro que no sea el acusado. Es decir, solo hay el uno por ciento de
probabilidades de que algn otro haya cometido el crimen, de modo que el acusado
tiene un 99% de probabilidades de ser culpable".
La defensa puede al contrario decir: "La prueba del laboratorio forense tiene una
importancia muy escasa. Slo el uno por ciento de la poblacin posee ese grupo de
ADN, pero en una ciudad como esta...(supongamos que el crimen se cometi en
Madrid), con al menos 500.000 personas en edad de cometer el crimen, ese grupo
sera encontrado en 5000. El ADN muestra pues que el acusado es una de las 5000
personas de la ciudad que pudo haber cometido el crimen. Con slo una posibilidad en

18

5000 no solo es que no se pueda condenar a nadie sino que tiene muchsimas ms
posibilidades de ser inocente".
Ninguno de estos argumentos es correcto de forma aislada y han sido denominados la
falacia del fiscal y la falacia de la defensa, por Thompson y Schumann 3 quienes,
adems, demostraron que presentando la prueba de forma aparentemente asptica
(esto es que el perito diga escuetamente que el grupo lo posee el uno por ciento de la
poblacin), un elevado porcentaje de individuos cae espontneamente en una de las
dos falacias. Si adems se presenta simplemente uno de los dos argumentos la
mayora de las personas piensan que es correcto.
Pero, cul es la posicin correcta?
La verdad es que la solucin dista mucho de ser intuitiva y la manera correcta de
valorar la prueba necesita ser analizada y comprendida y se necesita una valoracin
estadstica que debe de ser presentada y comunicada de forma adecuada.
Una posibilidad podra ser utilizar porcentajes, pero no se debe porque a menudo en
este caso se confunden los porcentajes entendidos como frecuencia con el porcentaje a
posteriori de culpabilidad. Por ejemplo se podra escuchar: Este perfil de ADN lo
tiene el 1% de la poblacin, de modo que solo uno de cada 100 tiene ese perfil por lo
que el acusado tiene el 99% de posibilidades de ser culpable.
Esta es la tpica falacia del fiscal. Que el perfil de ADN lo tenga el 1% de la
poblacin no significa ni mucho menos que el acusado tenga el 99% de probabilidad
de ser culpable. En la falacia el 1% se est refiriendo nicamente a la medida de una
caracterstica (gentica en este caso) en la poblacin y en el 99% (deducido al restar el
1% al 100%) se estn teniendo en cuenta hechos que ni mucho menos estn probados
con slo el anlisis gentico (que el acusado estuvo en la escena, que dej su sangre y
que adems cometi el delito). Por tanto, con este razonamiento incorrecto el perito
est suplantando al juez, est afirmando que por el hecho de la coincidencia el
acusado es culpable sin tener ninguna otra prueba, en definitiva, est estimando un a
priori de culpabilidad que el perito no puede ni tiene porqu saber.
Cuando un perito dice por ejemplo (que nunca debera) que la probabilidad de
paternidad es del 99,99% lo hace partiendo de una probabilidad a priori del 50% (tan
posible que sea el padre como que no lo sea), pero si el a priori es ms bajo (si el juez
3 Thompson W, Schumann E (1987) Interpretation of statistical evidence in criminal
trials. Law and Human Behavior 11 : 167-187.

19

tiene pruebas claras de la no paternidad) la probabilidad a posteriori, despus de la

prueba de ADN sera tambin considerablemente ms baja. Desgraciadamente an se
utiliza la probabilidad a posteriori en pruebas de paternidad y aunque se especifica en
el informe que se calcula con una probabilidad a priori de 0,5 poca gente entiende la
importancia del valor a priori, de modo que, con frecuencia, se comprende mal ese
valor.
Por fortuna en materia penal se consigui evitar su uso (aunque no sin esfuerzos).
Tambin podramos utilizar una presentacin de la probabilidad de coincidencia de
perfiles en forma de frecuencias (esto es, uno de cada 100 o uno de cada milln tienen
ese perfil de ADN) pero no lo hacemos porque est demostrado que con su empleo es
es muy fcil caer en la falacia del fiscal y de hecho se incurre en ella intuitivamente4.
Para poder realizar una valoracin correcta es necesario recurrir al teorema de Bayes
que, como dijimos, sirve para conocer las probabilidades finales de un suceso a partir
de las probabilidades iniciales, dada cierta informacin o informaciones adicionales
obtenidas. El mtodo proporciona una forma adecuada de incorporar informacin
previa de un suceso adems de permitir incorporar informacin posterior cuando sta
sea accesible y as con ella, adems, el perito es capaz de ofrecer al juez los resultados
de la prueba gentica de una forma ms cmoda para l, con el fin de que ste pueda
combinar la informacin obtenida en la prueba de ADN con otras informaciones no
genticas obtenidas durante el proceso.
Todo ello solo es posible valorando la prueba con una lgica bayesiana que permite,
adems, evaluar los resultados de la analtica desde la perspectiva equilibrada de la
acusacin y de la defensa, mediante un cociente llamado Razn de verosimilitud
(RV) o cociente bayesiano de probabilidad5.
Para ello es necesario enunciar dos hiptesis sobre los hechos, por ejemplo:
Ha (hiptesis de la acusacin) = la mancha de sangre hallada en la
escena del crimen pertenece al acusado

4 . Carracedo, F. Barros, M.V. Lareu, C. Pestoni, M.S. Rodrguez-Calvo. The

evaluation of the evidence in DNA typing. Science and Justice 36(3) 695-699

5 En algunos informes LR (del ingls Likelihood Ratio)

20

Hd (hiptesis de la defensa) = la mancha de sangre hallada en la

escena del crimen NO pertenece al acusado6.
La RV nos mide la probabilidad de haber obtenido los resultados del anlisis gentico
de la prueba y de la muestra del acusado (sea cual sea este resultado, es decir,
coincidan sus perfiles genticos o no)

bajo las dos hiptesis mencionadas. En

trminos ms entendibles, nos mide cuntas veces es ms probable haber obtenido los
resultados genticos si suponemos que el acusado dej la prueba en comparacin al
supuesto de que otro individuo dej la mancha en la escena del delito. Y se formula de
la siguiente forma:
P(E/Ha)

probabilidad del hallazgo cientfico suponiendo que la sangre es del acusado

RV

---------

------------------------------------------------------------------------------------P(E/Hd)

probabilidad del hallazgo suponiendo que la sangre NO es del acusado

siendo E = prueba (el resultado gentico en la muestra hallada en la escena y en la

muestra del acusado) y P = probabilidad.
Supongamos que el perfil gentico hallado en la mancha de la escena coincide
perfectamente con el perfil hallado en la muestra indubitada del acusado.
Evidentemente, bajo el supuesto de que el acusado dej la mancha de sangre (Ha),
encontraremos su perfil gentico en la evidencia con probabilidad 1 (con probabilidad
del 100% en forma de porcentaje, es decir, siempre) pues no puede aparecer en la
mancha un perfil gentico distinto al del acusado si es l el dueo de la sangre que
apareci en la escena. Por tanto, el numerador del cociente de la RV ser 1 en este
caso: P(E/Ha) = 1.
Pero bajo el supuesto de que la mancha de la escena NO pertenece al acusado, la
probabilidad de la evidencia cambia. Si la mancha no es del acusado tiene que
6 Este enunciado se ha simplificado con el fin de hacer entendible la explicacin, pero
en realidad, si el acusado NO dej la sangre en la escena, en la hiptesis de la defensa
se debe definir con ms precisin quin dej la mancha en la escena: un individuo al
azar de la poblacin?, de qu poblacin?, espaola?, o un individuo relacionado
familiarmente con el sospechoso?

21

pertenecer a alguien de iguales caractersticas al acusado (con el mismo perfil

gentico) y por tanto esta probabilidad se traduce en la frecuencia con que ese perfil
gentico aparece en la poblacin (por ejemplo 6 de cada 100 personas ). Por tanto, el
denominador del cociente de la RV ser en este ejemplo: P(E/Hd=0,06)
Ahora slo tenemos que calcular la RV total: RV = 1/0,06 = 16,6.
Pero qu significa realmente este resultado? Significa que es 16,6 veces ms
probable hallar el perfil gentico encontrado en la mancha de la escena si suponemos
que la mancha la dej el acusado (Ha) que si suponemos que la dej otra persona
(Hd). Es decir, la evidencia muestra un resultado a favor de la hiptesis de la
acusacin (16,6 veces ms a favor de la acusacin respecto a la defensa).
Cuando el resultado de la RV es igual a 1, la evidencia es neutra, es decir, apoya por
igual la hiptesis de la acusacin y la de la defensa. Y finalmente, cuando la RV es
menor que 1, la evidencia apoya la hiptesis de la defensa. Por tanto, por medio de la
RV, el juez puede hacerse una idea del significado real de la prueba gentica. En
muchos casos, las RV obtenidas con la prueba gentica van a ser abrumadoras (RV del
orden de millones, es decir muy a favor de la hiptesis de la acusacin), pero veremos
en apartados posteriores que esto no es siempre as, pues no siempre se logran buenos
resultados en el anlisis de la evidencia biolgica (por el mal estado de conservacin
del ADN o por la poca cantidad que contienen). Por otro lado, a veces el genetista
forense se ve obligado a analizar otros tipos de ADN distintos a los analizados
rutinariamente, y como veremos, estos otros tipos de ADN no tienen un poder de
discriminacin tan elevado.
Pero no acaban aqu las ventajas de la valoracin de la prueba desde el punto de vista
bayesiano. Apuntbamos al principio de este apartado que esta manera de evaluar la
prueba permite al juez combinar los resultados del anlisis gentico con otros
resultados no genticos obtenidos tras todo el proceso. Se logra simplemente
multiplicando el valor obtenido en la RV por la probabilidad de la culpabilidad antes
de la prueba pericial (llamada probabilidad a priori). Esta multiplicacin resulta en lo
que llamamos probabilidad a posteriori y representa la probabilidad de la
culpabilidad teniendo en cuenta la prueba pericial, es decir, exactamente lo que el
juez quiere saber. Su formulacin es muy sencilla:
Pa posteriori = Pa priori x RV
Para poder calcular la probabilidad a priori, el juez tiene que pensar en toda la
informacin de la investigacin en forma de apuesta. Al llegar la prueba pericial el
22

juez tiene una idea de la culpabilidad o no culpabilidad del acusado despus de

todo el proceso y pruebas testificales y otras pruebas periciales. Se puede plasmar esta
informacin en forma numrica, por ejemplo en forma de apuesta (1000 a 1 a favor de
la inocencia si el juez considera que el acusado es inocente con muchas posibilidades,
100 a 1 a favor de la culpabilidad por ejemplo) 7.
Para valorar, de forma objetiva, la prueba cientfica, el juez no tendra ms que
multiplicar- y aqu es donde el teorema de Bayes se aplica- su grado de creencia
previo sobre la culpabilidad del acusado, expresado en forma de apuesta, por la razn
de verosimilitud (RV) como se ve a continuacin:
A priori
RV
1000 a 1 a favor de 100

A posteriori
10 a 1 a favor de inocencia

inocencia

(0,001 x 100 = 10)

posibilidades
culpabilidad

(mismas 100
de

100

favor

de

culpabilidad (1 x 100)

inocencia)
1000 a 1 a favor de 100

100000 a 1 a favor de

culpabilidad

culpabilidad (1000 x 100 =

100000)

As, por ejemplo, si el juez piensa que el acusado es bastante ms culpable que
inocente (por ejemplo 1000 a 1 a favor de la culpabilidad) y adems se analiza una
mancha de sangre hallada en la ropa de un acusado y el perfil gentico coincide con el
de la vctima (por ejemplo con una RV= 1 milln), la probabilidad a posteriori de
culpabilidad se ve muy incrementada y es de mil millones a favor de la culpabilidad).
Por el contrario, si no existe prueba alguna que incrimine al acusado, solo una
coincidencia fortuita en la base de datos y el juez estima que no hay realmente
ninguna prueba para acusarlo y estima que puede haber al menos 10 millones de
personas en edad de cometer el crimen con ese perfil, si el perito indica que la RV es
de 5 millones a 1 a favor de la hiptesis de la acusacin (lo que podra parecer una
7 No hace falta saber exactamente el valor. Puede utilizarse un rango de
posibilidades. Solo el ejercicio de hacerlo le permitira al juez entender y valorar
correctamente la prueba de ADN.

23

prueba abrumadora a favor de la culpabilidad), multiplicando ambos factores el

acusado tiene el doble de posibilidades de ser inocente.
Otra de las ventajas de este enfoque es que delimita perfectamente el papel del juez y
del perito. El juez es el que debe valorar la prueba en conjunto; y con la aproximacin
bayesiana se evita que el perito haga las funciones de juez. El perito genetista no
dispone de la informacin no gentica que el juez conoce y no es su funcin del
experto emitir una opinin sobre la culpabilidad o inocencia del acusado.
La valoracin que realiza de la prueba gentica mediante la RV es asptica, y ello
garantiza que no est influenciada por opiniones o informaciones que puedan llegarle
por otros medios (por ejemplo prensa o televisin).
Pero no es siempre la probabilidad altsima en la prueba de ADN en caso de
coincidencia de perfiles?
En la mayor parte de los casos es ciertamente elevadsima pero no siempre. Cuando se
utiliza ADN mitocondrial o polimorfismos de cromosoma Y es muchas veces ms
baja y sobre todo puede ser baja en el caso de perfiles obtenidos de muestras
mezcladas, con muy poca cantidad de ADN o de mala calidad, que representan una de
la mayores dificultades para el clculo estadstico para los peritos.
Los efectos estocsticos que se producen en la PCR (un mtodo para multiplicar la
cantidad de ADN de la que se dispone) producen artefactos que complican la
evaluacin estadstica de los perfiles. Sin embargo, en los ltimos aos, fruto de un
gran esfuerzo cientfico se ha desarrollado un marco matemtico muy robusto de
interpretacin de este tipo de perfiles, lo que unido al desarrollo de software libre y de
un esfuerzo enorme de estandarizacin, hace que seamos capaces en la actualidad de
proporcionar una razn de verosimilitud (esto es, una probabilidad de coincidencia de
perfiles equilibrando la visin de la acusacin y la visin de la defensa) en muchos de
estos casos complejos, pero, ciertamente, no siempre se consiguen probabilidades
(RV) altas8.

8 Para entender cmo se valoran e interpretan perfiles complejos, se puede ver

L.Prieto, M.Montesino, A.M. Rodrgguez, C.Arvalo,R. Herrez, A. Carracedo.
Valoracin e interpretacin de perfiles genticos problemticos. Monogrfico
Gentica forense. Boletn Galego de Medicina Legal y Forense. 2014.

24

Ha mejorado mucho la capacitacin de los peritos en el clculo probabilstico, y la

valoracin estadstica es hoy una parte fundamental de los controles de calidad.
Tenemos que mejorar en la comunicacin de los resultados, en las que a veces
afortunadamente cada vez ms infrecuentemente- se cometen errores.
En conclusin, tan importante como la revolucin que ha producido en el campo
forense el estudio del ADN, ha sido el dar el paso de cuantificar estadsticamente el
valor de la prueba cientfica.
No todas las pruebas forenses, ni en todas las pruebas incluso de gentica forense
podemos dar un valor de probabilidad, pero cuando la podemos dar (que es en la
mayora de los casos de las pruebas de ADN) se pasa de una opinin de un experto a
lo que denominamos una evidencia cientfica, esto es unas conclusiones cuya
incertidumbre inherente siempre a cualquier opinin- puede ser objetivamente
calculada.
El valor de la opinin de un experto depende de muchos factores, entre ellos la
cualificacin y experiencia del mismo. En una evidencia cientfica el valor de la
opinin es siempre objetivable y cuantificable.
El valor que la prueba de ADN es habitualmente muy elevado pero en algunas
ocasiones no tanto, y es esencial que los peritos calculen correctamente ese valor y lo
comuniquen correctamente, y del mismo modo es esencial que lo jueces lo entiendan
correctamente y lo puedan valorar de forma adecuada en el conjunto de las pruebas.
La valoracin correcta de la prueba contiene muchos matices como la poblacin de
referencia, el uso en algunos tipos de pruebas de valores a priori y es especialmente
fcil caer en paradojas lgicas que llevan a una mala interpretacin.
Esto no se puede hacer sin una preparacin adecuada y por ello es clave tanto el
entrenamiento de los peritos en el clculo correcto de la probabilidad como en su
comunicacin y por parte de los juristas

y especialmente los jueces en la

interpretacin de ese valor y en conocer como incorporarlo de forma correcta a otras

pruebas para la toma final de una decisin.
Solo as y trabajando conjuntamente peritos y jueces podremos conseguir sacar el
mximo partido de una prueba tan eficaz en tantos casos penales y civiles.

5. LA ESTANDARIZACIN Y EL CONTROL DE CALIDAD

25

Ms importantes que todo el desarrollo cientfico de la prueba de ADN ha sido en mi opinin

el profundo cambio conceptual que ha experimentado la Ciencia forense de mano de la
Gentica forense en las dos ltimas dcadas.
Este cambio conceptual afecta a dos aspectos: uno, el acabamos de comentar, de valoracin
estadstica de la prueba y el segundo la necesidad de una estandarizacin no slo para hacer
posible la comparacin de resultados entre los laboratorios sino para probar la calidad del
laboratorio y de sus resultados.
Este cambio representa el paso del forense tradicional con opiniones basadas en la experiencia
y en la intuicin y que dan un valor absoluto a las mismas, al cientfico moderno con
opiniones basadas en la evidencia cientfica, en el razonamiento y que sabe que todas tienen
incertidumbre y que sta se puede cuantificar.
Pero, por qu son los estndares tan importantes en Gentica forense?
1. Controles de calidad
Sin un acuerdo en estndares es imposible gestionar controles de calidad y estos son cada vez
ms necesarios en todos los laboratorios forenses.
2. Segundas opiniones o contrapericias
Si cada laboratorio utiliza los marcadores que quiere o les denomina de forma diferente a
otros laboratorios, no habra forma de valorar los datos que un laboratorio emite,
impidindose la posibilidad de una contrapericia.
3. Validacin de procedimientos
Un procedimiento es vlido cuando la comunidad cientfica as lo establece. Los
procedimientos han de ser comprobados por los cientficos, validados por las comisiones
apropiadas y establecidos estndares para su uso.
4. Experiencia
Una de las mayores ventajas en ponerse de acuerdo y establecer estndares comunes, es el
conocimiento que se deriva del uso de sistemas concretos que redunda en beneficios
indudables para su aplicacin en la prctica.
As, gracias al uso comn de marcadores, podemos tener una mejor estima de frecuencias
poblacionales y conocer la existencia o no de problemas gentico-poblacionales para sistemas
concretos, se puede conocer con mayor exactitud la tasa de mutacin o la existencia de alelos
raros y una estima eficaz de su frecuencia, acumularemos ms datos sobre la estructura de
esos sistemas, etc.
5. Comparacin de bases de datos poblacionales e integracin de bases de datos
criminales comunes

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El establecimiento de estndares comunes permite comparar datos y permite usar e integrar

bases de datos de frecuencias.
Adems la mayor movilidad internacional de los delincuentes especialmente en delitos como
terrorismo y crimen organizado hace conveniente el establecimiento de bases de datos con
fines de identificacin criminal comunes que slo se lograr con el establecimiento de los
estndares adecuados.
Los estndares en el laboratorio forense pueden ser agrupados en estndares tcnicos y de
procedimiento.
Los estndares tcnicos incluyen el tipo de marcadores genticos que deben de ser usados, su
nomenclatura, la metodologa vlida para su anlisis, los mtodos estadsticos utilizados para
la valoracin de la prueba, la elaboracin del informe final y su comunicacin.
Las estndares de procedimiento incluyen todos aquellos necesarios para una acreditacin de
laboratorios e incluyen aspectos como la organizacin del laboratorio, el personal (su
formacin entrenamiento especfico, experiencia, responsabilidades, etc), la documentacin y
control de las pruebas, los protocolos de laboratorio, el calibrado y mantenimiento de los
equipos, los controles externos e internos, las auditoras externas y su frecuencia, etc.
En cuanto a los estndares tcnicos y a pesar del nmero de marcadores y estrategias que hoy
da existen para el anlisis de polimorfismos de ADN existe en una tendencia hacia el uso
comn de marcadores. Esto es posiblemente debido a los esfuerzos de estandarizacin de
algunos grupos, a la existencia de kits comerciales para el anlisis de ADN con fines forenses,
a la influencia de algunos grupos lderes en el campo y tambin al decidido esfuerzo de los
genetistas forenses por conseguir estndares comunes y

a las pruebas de suficiencia

(proficiency testing) que slo admiten un nmero determinado de sistemas.

La mayora de los laboratorios en el mundo siguen las recomendaciones de la Sociedad
Internacional de Gentica Forense (ISFG, International Society for Forensic Genetics),
sociedad que agrupa a la casi totalidad de peritos a nivel mundial,

lo que facilita

enormemente la estandarizacin y lo que implica que todos los laboratorios usen la misma
nomenclatura.
La estandarizacin tcnica est ya contemplada por el Consejo de Europa en su
Recomendacin R (92)1 de 10 de febrero de 1992 sobre El uso de anlisis de ADN en el
marco de la Justicia Penal establece en su artculo 10:
Los estados miembros promocionarn la estandarizacin de los mtodos de ADN tanto
a nivel nacional como internacional. Esto lleva involucrado la adecuada colaboracin
interlaboratorial en la validacin de los procedimientos analticos y de control
Todos los grupos de trabajo de la ISFG (www.isfg.org) contribuyen de forma decisiva a la
estandarizacin y al control de calidad, pero sin duda el Grupo de Espaol y Portugus
(GHEP-ISFG) es uno de los ms activos y el que mejor sistema de pruebas de suficiencia

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posee a nivel mundial. En el se integran ms de 100 laboratorios de Espaa, Portugal y de la

totalidad de los pases iberoamericanos.
De los grupos de estandarizacin ms globales destacan en Norteamerica el grupo SWGDAM
(Scientific Working Group for DNA Analysis and Methods) y en Europa los grupos EDNAP
(European DNA Profiling Group) y grupo de trabajo de ADN de ENFSI (European
Network of Forensic Science Institutes).
En este sentido la Comisin de ADN de la ISFG trata de coordinar estos esfuerzos y emite
regularmente recomendaciones para el uso de polimorfismos de ADN en la prctica forense.
La comisin de ADN de la ISFG est integrada por el board de la ISFG junto con
representantes de los principales grupos de estandarizacin (EDNAP-STADNAP y
SWGDAM) y expertos externos elegidos segn los aspectos concretos que se traten. Un
listado de las recomendaciones de la Comisin de ADN pueden encontrarse en la web de la
ISFG (http:/www.isfg.es).
Bibliografa
Bogusz MJ (2008) Handbook of Analytical Separations. Forensic Science, vol. 2.
Amsterdam: Elsevier, Academic Press.
Butler JM (2010) Fundamentals of Forensic DNA Typing, ch. 3. New York: Elsevier
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Butler JM (2012) Advanced Topics in Forensic DNA Typing: Methodology. New York:
Elsevier Academic Press.
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