MEMORIA PRIMER CONGRESO ESTATAL LA INVESTIGACIN EN EL POSGRADO

DETERMINACIN DE PROTENAS DE RESERVA EN SEMILLAS DE SELECCIONES DE GUAYABA (Psidium

guajava L.) DEL ESTADO DE AGUASCALIENTES
SORIA CRUZ JORGE 1, GUEVARA ROMERO ISAAC 3, PADILLA RAMREZ JOS SAUL 2, VASCO MNDEZ NORA LILIA 3
Proyecto financiado por CONACYT y PROMEP
1
Docente ITEL, jorsor777@yahoo.com.mx; 3Investigador Centro Bsico UAA, 2 Investigador INIFAP, jsaulpr@yahoo.com.mx,
Profesora-Investigadora, Centro Bsico, UAA, nlvasco@correo.uaa.mx

INTRODUCCIN
El cultivo de la guayaba es sobresaliente en el Estado de
Aguascalientes por contribuir al producto interno bruto con
su alto valor agregado, genera fuentes de empleo y se
considera como potencial si se industrializaran los frutos y
semillas. Estas ltimas, segn fuentes variadas, asciende en
promedio a 1,275 toneladas anuales, que hasta el momento
son desechadas como basura (1) y de acuerdo con la nueva
ecologa de reutilizar, reciclar y reducir; para el caso, de las
semillas, es posible extraer varios compuestos bioqumicas
que pueden servir en la alimentacin humana o animal,
como protenas, lpidos, carbohidratos, entre otros. El
INIFAP desde 1988 estableci un banco de germoplasma, y
suministr doce selecciones para investigar desde el
enfoque de la bioqumica los contenidos de las mismas (4),
con la finalidad de contribuir a su registro como variedades
de Mxico.
OBJETIVOS
Los objetivos de este trabajo fueron conocer la cantidad de
protenas que se pueden extraer de las semillas de las
selecciones de guayaba, y evaluar las fracciones de
protenas en base a su peso molecular.
MATERIALES Y MTODOS
El trabajo se realiz en el centro bsico de la UAA en abril
del 2004. El INIFAP proporcion las selecciones: 7, 10,
11,12, 20, 46, 47, 48, 106, 113, 118,126, y el testigo 1 se
adquiri en la central de abastos. Para la extraccin de las
fracciones de protenas se utiliz el procedimiento de
Osborne (3), que consiste en someter la harina de semilla
en presencia de diferentes Buffer de extraccin, as para las
albminas se empleo agua a pH de 7, las globulinas se
extrajeron con una solucin 0.5 M de NaCl, las prolaminas
con isopropanol al 70 % y las glutelinas con Brax 0.1 M y
SDS 1 % a pH de 10, se emplearon 2 g de muestra con
tamao de partcula 210 m (tamiz No. 70), en tubo
nalgene para centrifuga de 50 ml. Para cada fraccin de
protena las muestras se colocaron en agitacin por 24 h, a
temperatura de 0 C y despus se centrifugaron a 9000 rpm
por 15 min. Para cuantificarlas se utiliz un ensayo
colorimtrico de Bio rad, se trazaron curvas patrn de
seroalbmina bovina a diferentes concentraciones y se
analizaron en espectrmetro UV a 750 nm. La
concentracin de protenas solubles se determin por
interpolacin con el ensayo de Lowry y Peterson. Para
analizar los resultados de las fracciones de protenas de
reserva se emple un diseo completamente al azar
considerando a cada seleccin como tratamiento con tres
repeticiones. Con los datos registrados se calcul el anlisis
de varianza y para la comparacin de medias se utiliz la
prueba DMS. Por otra parte, para analizar las fracciones de
protenas se emple la tcnica de Laemmli (2) de geles
continuos desnaturalizantes con SDS. Se emplearon 50 mg
de harina de cada seleccin de guayaba, a los cuales se
agregaron 400 ml de buffer de extraccin, despus de la
incubacin, se centrifugaron para separar las protenas de
reserva. Para realizar los corrimientos electroforticos en
los geles de separacin y concentrador se utiliz cmara de
electroforesis con portageles y analizador de imgenes para
visualizar los carriles y bandas de las fracciones de
protenas, asimismo, los marcadores de peso molecular

empleados fueron: thiosephosfato isomerasa, mioglobina,

lactoalbmina y aprotinina.
RESULTADOS Y DISCUSIN
Los resultados de la extraccin y cuantificacin de las
fracciones de protenas de reserva se muestran en la Fig. 1 y
mediante la comparacin de medias, se observ que la S-12
contiene mayor cantidad de albminas 28.81mg, la S-7
valores altos en globulinas 10.48 mg, prolaminas 53.38 mg,
y glutelinas 137.25 mg, (cantidades relacionadas a un gramo
de harina), aunque sta fraccin de protena result
estadsticamente igual a la que exhiben la seleccin 48 y el
testigo. Otra evidencia de la expresin diferencial de
protenas entre selecciones fue el abundante contenido de
glutelinas con referencia al resto de las otras fracciones. De
acuerdo con los datos obtenidos, las fracciones de las
selecciones de guayaba se pareceran ms a los cereales que
a las leguminosas por el contenido de glutelinas y
prolaminas presentes en mayor cantidad que las albminas y
globulinas. Los clculos estadsticos realizados con los datos
obtenidos, de las fracciones de protena extradas de las
semillas de las selecciones de guayaba indicaron diferencias
altamente significativas entre los tratamientos y los
coeficientes de variacin sealan confianza en los
resultados.
SEL ALBUMIN GLOBULIN
PROLAMIN
GLUTELIN
.
AS
AS
AS
AS
T
9.6487 G 6.4600
CD 16.5590 B 132.821 A
7

19.0400 C

10.4765

53.3843

137.3543

10

11.7230

5.1470

BC

98.2340

12.9513

6.9580

DEF
G
BC

15.8443

11

E
F
E

14.4900

DE 119.4020 BC

12

28.8137 A

8.2760

16.5470

121.5137

20

20.7050 B

6.246

CDE

12.2220

GH

91.3053

46

15.5123 D

5.5335

DEF

14.3740

DE 107.1790

47

6.3130

4.4870

FG

12.9647

FG

82.2230

48

9.8993

4.6140

FG

12.3960

GH 143.2310

106

10.7777 G

3.8725

13.0160

FG 112.7097 CD

113

4.9960

4.9685

EFG

13.7933

118

12.1963

5.3525

DEF

15.4027

126

9.3587

E
F
G

7.0500

BC

11.567

EF 119.0600 BC
G
H 108.4781 D

C.
V.

6.43 %

3.82 %

3.86 %

13.28 %

120.2737

Fig. 1. Comparacin de medias de fracciones de protenas

de harina de semillas de selecciones de guayaba (mg/g de
harina).
El perfil electrofortico para las selecciones de guayaba
muestra diferencias entre carriles y bandas, por ejemplo, la
S-18, S-126, S-7 y T-1, mostraron tres fracciones de
protena con pesos moleculares mayores al marcador de
peso molecular tiosephosfato isomeraza (26. 625 kDa); las
selecciones 106, 113 y 118 tienen fracciones de protenas
que varan entre 23 y 6 kDa (aprotinina 6.5121 kDa) y las
selecciones con menor numero de bandas son 46, 47 y 20 y

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su peso molecular oscila entre 23 y 12 kDa (

lactoalbmina 14.437 kDa)
CONCLUSIONES
Las protenas de reserva extradas de harina de semillas de
guayaba,
mostraron
expresin
diferencial
entre
selecciones, y los resultados sealan que la seleccin 7
tiene la mayor cantidad de globulinas, prolaminas y
glutelinas y las S-12 de albminas que las dems
selecciones. Asimismo, se encontr que al sumar las
fracciones de protenas; las semillas de las selecciones
contienen entre 22 % y 17.5 % de protena, lo que
significa la posibilidad y conveniencia de recuperar este
subproducto para emplearlo como alimento.
BIBLIOGRAFA
1. Gonzlez, G. E.; Padilla, R. J. S.; Reyes, M. L.; Perales
de la Cruz, M. A.; Esquivel, V. F. 2002. Guayabo su
cultivo en Mxico. INIFAP. C. E. P. Aguascalientes,
Mxico, 182 p.
2. Laemmli, U. K. 1970. Cleavage of structural proteins
during
the assembly of the head of bacteriophage T. Nature.
227:680:685