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Federacin Nacional de Cafeteros de Colombia

COMIT NACIONAL
Perodo: 1 de enero de 2003 a 31 de diciembre de 2006
Ministro de Hacienda y Crdito Pblico
Ministro de Agricultura y Desarrollo Rural
Ministro de Comercio, Industria y Turismo
Director del Departamento Nacional de Planeacin
Juan Camilo Restrepo Salazar
Mario Gmez Estrada
Csar Eladio Campos Arana
Danilo Cabal Cano
Fabio Villegas Ramrez*
Carlos Alberto Gmez Buenda
Floresmiro Azuero Ramrez
Carlos A. Martnez Martnez
Javier Bohrquez Bohrquez
Jaime Garca Parra
* Renunci el 8 de marzo de 2005

Gerente General
GABRIEL SILVA LUJN
Gerente Administrativo
LUIS GENARO MUOZ ORTEGA
Gerente Financiero
CATALINA CRANE ARANGO
Gerente Comercial
ROBERTO VLEZ VALLEJO
Gerente Tcnico
DGAR ECHEVERRI GMEZ
Director Programa de Investigacin Cientfica
Director Centro Nacional de Investigaciones de Caf
GABRIEL CADENA GMEZ

Los trabajos suscritos por el personal tcnico del Centro Nacional de Investigaciones de Caf son parte de las investigaciones realizadas por la Federacin
Nacional de Cafeteros de Colombia. Sin embargo, tanto en este caso como
en el de personas no pertenecientes a este Centro, las ideas emitidas por los
autores son de su exclusiva responsabilidad y no expresan necesariamente las
opiniones de la Entidad.

UNA PUBLICACIN DE CENICAF


Editores:

Diseo y
Diagramacin:
Fotografa:

Hctor Fabio Ospina Ospina, I.A., MSc.


Sandra Milena Marn Lpez, I.A.
Mara del Rosario Rodrguez L.
Nelson Rodrguez V.
Carmenza Jaramillo L.
Gonzalo Hoyos Salazar.

Fotografa cartula:


Tomada por :

Fructificacin de Shiitake sobre


subproductos de caf.
Gonzalo Hoyos Salazar.

Editado en Noviembre de 2005


3.500 Ejemplares
Copyright FNC - Cenicaf - 2005

FEDERACIN NACIONAL DE CAFETEROS DE COLOMBIA


GERENCIA TCNICA
PROGRAMA DE INVESTIGACIN CIENTFICA
CENTRO NACIONAL DE INVESTIGACIONES DE CAF
"Pedro Uribe Meja"

Cultivo de hongos medicinales


en residuos agrcolas de la zona cafetera

Nelson Rodrguez Valencia1


Carmenza Jaramillo Lpez2

Asistente de Investigacin. Qumica Industrial. Centro Nacional de Investigaciones de Caf, Cenicaf. Chinchin,
Caldas, Colombia.
2
Ingeniera Qumica. Investigadora en Proyectos Especiales, hasta diciembre de 2003. Centro Nacional de Investigaciones
de Caf, Cenicaf. Chinchin, Caldas, Colombia.
1

Chinchin - Caldas - Colombia

CONTENIDO
INTRODUCCIN ............................................................................................................................. 5
CARACTERSTICAS GENERALES DE LOS HONGOS MEDICINALES ESTUDIADOS. ....... 6
1. SHIITAKE (Lentinula edodes (Berk.) Pegler). ............................................................................. 6
1.1. Descripcin de la especie. .................................................................................................. 7
1.2. Tcnicas para el cultivo. ...................................................................................................... 7
1.3. Manejo del cultivo. ............................................................................................................... 9
1.4. Tratamiento postcosecha. ................................................................................................... 9
1.5. Valor nutritivo. ....................................................................................................................... 10
1.6. Propiedades medicinales. .................................................................................................... 10
1.7. El shiitake como control biolgico. ................................................................................... 12
1.8. Mercado mundial. ................................................................................................................. 12
2. GANODERMA (Ganoderma lucidum (Wm. Curtis. Fries) Karsten). .................................... 12
2.1. Descripcin de la especie. .................................................................................................. 13
2.2. Tcnicas de cultivo de G. lucidum. ................................................................................... 13
2.3. Manejo del cultivo. ............................................................................................................... 15
2.4. Tratamiento postcosecha. ................................................................................................... 16
2.5. Valor nutritivo de G. lucidum. ............................................................................................ 16
2.6. Propiedades medicinales. .................................................................................................... 16
2.7. Mercado mundial de hongos medicinales. ..................................................................... 17
3. USO DE RESIDUOS AGRCOLAS DE LA ZONA CAFETERA PARA EL CULTIVO
DE SHIITAKE Y GANODERMA. ................................................................................................. 18
3.1. Produccin de la semilla de los hongos. ......................................................................... 18
3.2. Preparacin de los sustratos. ............................................................................................. 21
3.3. Esterilizacin de los sustratos. ........................................................................................... 28
3.4. Etapa de inoculacin. .......................................................................................................... 30
3.5. Etapa de incubacin. ............................................................................................................ 32
3.6. Etapa de fructificacin y cosecha. ................................................................................... 38
3.7. Evaluacin de la produccin (29). .................................................................................... 44
3.8. Manejo postcosecha. .......................................................................................................... 54
3.9. Anlisis bromatolgico y de minerales de los hongos medicinales. ........................ 58
4. TRATAMIENTO Y DISPOSICIN DE LOS RESIDUOS DEL CULTIVO .............................. 61
5. MANEJO DE ENFERMEDADES Y PLAGAS ............................................................................. 65
6. PROBLEMAS EN EL CULTIVO Y SOLUCIONES .................................................................... 67
7. CONCLUSIONES .......................................................................................................................... 69
8. LITERATURA CITADA
AGRADECIMIENTOS

................................................................................................................. 70
..................................................................................................................... 72

Cultivo de hongos medicinales

en residuos agrcolas de la zona cafetera

INTRODUCCIN

En 1994, el valor de la
produccin mundial de hongos
y productos medicinales
extrados de ellos fue estimado
alrededor de los 14 millardos
de dlares. Las propiedades
medicinales han sido
reconocidas como el segundo
atributo, en importancia, de
los hongos comestibles en los
pases orientales. En este ao
se estimaron ventas del orden
En 1997 la produccin mundial de 3,6 millardos de dlares en
de hongos comestibles y medicinas y tnicos extrados
medicinales fue del orden de estos hongos (3).
de 6.158.000 toneladas (3),
destacndose el cultivo de los En Colombia, el cultivo de
gneros Agaricus (champin), los hongos comestibles y
Lentinula (shiitake), Pleurotus medicinales tuvo sus inicios
(orellanas) y Auricularia( oreja alrededor de 1950, con la
produccin del champin
de Judas).
( Agaricus bisporus ) e n
El alto contenido de protena Bogot, posteriormente el
de los gneros cultivados, hongo shiitake ( Lentinula
que oscila entre 15 y 30% edodes) comenz a cultivarse
en peso seco, sumado a a principios de la dcada
las propiedades medicinales de los ochenta, con una
descubiertas en stos, han produccin en pequea
influido en el incremento escala y comercializada como
del mercado internacional y medicamento, y en los aos
en los precios de venta. Por noventa se inici la etapa
ejemplo, en Estados Unidos, el experimental del cultivo de
kilogramo de shiitake fresco al hongos del gnero Pleurotus
productor tiene, en promedio, (18).
un precio de 6,30 dlares (41),
y para el consumidor el precio En el mbito nacional, las
oscila entre 7 y 16 dlares por experiencias en el cultivo
kilogramo de producto fresco, de hongos se han limitado
dependiendo de la calidad y el por el escaso consumo y la
poca tradicin que se tiene
tamao del mismo (21).
Mediante el cultivo de hongos
se realiza la bioconversin
de materiales agrcolas
en alimentos y medicinas,
solucionando de esta manera,
al menos parcialmente, tres
de los problemas ms graves
que afronta la poblacin
mundial: la escasez de
alimentos, las enfermedades y
la contaminacin ambiental.

Cultivo de hongos medicinales

en residuos agrcolas de la zona cafetera

por este tipo de alimentos.


De las ocho especies que
se cultivan mundialmente a
escala industrial, en nuestro
pas slo se han realizado
investigaciones de cultivo
con Pleurotus, Lentinula y
Ganoderma (Figura 1).
En Cenicaf, las investigaciones relacionadas con el
cultivo de hongos se iniciaron
en 1990, con diferentes especies del gnero Pleurotus,
con el propsito de encontrar
alternativas para el manejo
ecolgico de la pulpa de
caf, que fueran fcilmente
aplicables por los productores,
evitando que este subproducto
generara un impacto ambiental
adverso (33).
Entre los aos 1998 y 2003
se desarrollaron en Cenicaf,
investigaciones relacionadas
con el cultivo integral de
los hongos medicinales
shiitake y ganoderma en
los subproductos ms
abundantes generados en
el proceso de cultivo del
caf, con el propsito de
generar alternativas atractivas
para los productores que
les permitieran diversificar
su ingreso, en un perodo
caracterizado por los bajos
precios del caf en el mercado
internacional.

c.
b.

a.

Figura 1. Hongos: Pleurotus spp (a), Lentinula edodes


(b) y Ganoderma lucidum (c), cuyas tcnicas de
cultivo se han investigado en Colombia.
La gran fortaleza que
presenta la caficultura
para la produccin de los
hongos medicinales es que
los dos subproductos ms
abundantes generados en el
cultivo, la pulpa y los tallos,

con cantidades aproximadas


a 2 toneladas/subproducto
por hectrea por ao (30),
pueden emplearse como
componentes de los sustratos
para el cultivo de este tipo de
hongos, permitiendo de esta

manera, que los productores


puedan diversificar
su ingreso mediante la
comercializacin de los
hongos o utilizarlos para su
beneficio como alimento o
como medicina.

CARACTERSTICAS GENERALES DE LOS HONGOS MEDICINALES


ESTUDIADOS.
1. SHIITAKE (Lentinula edodes (Berk.) Pegler).
Este hongo es considerado
de especialidad en la
gastronoma de Japn, Corea
y China. Tradicionalmente, se
cultiva en troncos de rboles
en las regiones montaosas
de Asia. Su nombre cientfico
es Lentinula edodes, pero es
conocido comnmente como
shiitake u hongo japons.

Es cultivado extensivamente
en Japn y en otros pases
asiticos por su agradable
sabor y sus propiedades
medicinales (8). Adems, figura
entre los hongos ms populares
entre los gastrnomos y
ocupa el segundo lugar en
la produccin mundial de
hongos comestibles (4).

Cultivo de hongos medicinales

en residuos agrcolas de la zona cafetera

El shiitake es una especie capaz


de degradar la celulosa, las
hemicelulosas y las ligninas
(Figura 2). Al cultivarlo sobre
materiales como paja, tusas de
maz y troncos de camo es
posible obtener rendimientos
equivalentes o superiores a
los encontrados en troncos
naturales (10).

Figura 2. Carpforo de
Lentinula edodes cultivado
en subproductos de caf.
1.1. Descripcin de la En agar nutritivo el micelio es
blanco al principio y luego se
especie.
torna marrn oscuro, tomando
Los hongos tienen sombreros apariencia algodonosa. Es
de 5 a 25 cm de dimetro, nativo de Japn, Corea y China.
hemiesfricos, convexos y Esta especie se encuentra en
eventualmente, planos en peligro de extincin debido
la madurez. Al inicio de su a la deforestacin de su
desarrollo los sombreros son hbitat natural. Existen cepas
de color marrn oscuro hasta adaptadas a un amplio rango
casi negros, y posteriormente de temperaturas y a diferentes
se tornan de coloracin marrn sustratos (40).
ms clara, debida a la edad o
al secado del hongo. El borde
del sombrero es de parejo a 1.2. Tcnicas para el cultivo.
irregular, al principio ondulado
y luego curvado, achatndose
con la madurez. Las laminillas Los pasos bsicos en el cultivo de
son blancas y con la edad shiitake son: la obtencin de un
adquieren forma irregular o medio de cultivo, la utilizacin
aserrada. El tallo es fibroso de cepas productivas y el
y se encuentra normalmente manejo apropiado de las
unido al centro del sombrero condiciones ambientales que
intervienen en el crecimiento
y de textura spera (40).
y el desarrollo de los cuerpos
Es un hongo saprfito y slo fructferos (25). En las ltimas
crece en tejidos necrosados d c a d a s l a t e c n o l o g a
de rboles de madera dura del cultivo de shiitake en
y hojas anchas. Sus esporas condiciones controladas se
son blancas, de 5 a 6,5 m x ha perfeccionado y se usan
3 a 3,5 m, de forma ovoide a sustratos a base de aserrines
oblongo-elipsoide. Los basidios suplementados y esterilizados
mediante calor (40).
soportan cuatro esporas.

Cultivo de hongos medicinales

en residuos agrcolas de la zona cafetera

Existen dos mtodos de


cultivo:
Cultivo en leo natural (34).
Tradicionalmente el shiitake
se cultiva en el Japn sobre el
rbol Castanopsis cuspidata;
sin embargo, en Estados
Unidos la mayor produccin se
obtiene sobre leos de roble
( Quercus spp.), chinkapin
( Castanopsis spp.), roble
color canela (Lithocarpus spp.)
y carpe (Carpinus spp.).
Los leos se cortan en troncos
de 1 metro, en el otoo y se
inoculan con la semilla de este
hongo despus de 15 a 30
das. El dimetro que parece
ser el ms eficaz para el cultivo
es de 7 a 15 cm. Cuando
los leos tienen un dimetro
mayor de 25 cm deben cortase
longitudinalmente en dos
mitades.
La semilla se prepara en
madera o aserrn formando
aglomerados a manera de
cuas de 2,5 cm de dimetro.
En los leos se hacen agujeros
con taladro que correspondan
al dimetro y la longitud de las

cuas y espaciados cada 15


cm. Finalmente, la semilla se
introduce en los agujeros con
la ayuda de un martillo y se
cubre con cera caliente para
prevenir el secado excesivo.
El micelio empieza a crecer
entre 6 y 18 meses despus,
dependiendo de la especie
maderable empleada, el
tamao del leo, la cepa, la
humedad y la temperatura del
ambiente.
Despus de la incubacin, los
leos se transfieren al sitio de
fructificacin, en condiciones
de menor temperatura y
mayor humedad que las
reas de incubacin, donde
se encuentra un ambiente
ptimo para su crecimiento
y desarrollo. La eficiencia
biolgica alcanzada bajo
esta tcnica est alrededor
del 33%, con el mayor pico
de produccin despus del
segundo y el tercer ao. Luego
el sustrato conformado por
los leos se agota y finaliza la
produccin del hongo.
Cultivo en bloques sintticos.
Las tcnicas de cultivo

comercial del shiitake en


aserrn suplementado fueron
desarrolladas hace 20 aos
en Japn, Taiwn y la China.
Los sustratos son una mezcla
de maderas duras picadas
mezcladas con suplementos
como el salvado de cereales
(26).

En la tcnica asitica se
utilizan bolsas de polipropileno
alargadas, con una argolla
en la parte superior y un
tapn de algodn, o bolsas
alargadas con filtros hechos
con esparadrapo y adheridos
en forma tal que permitan
el intercambio gaseoso (26)
(Figuras 3a).

Los aserrines de madera


y de cortezas confieren
buenas propiedades fsicas
a los sustratos. Un aserrn
demasiado fino puede
compactarse o una corteza
demasiado gruesa afecta a
la red micelial tornndola
frgil, por lo cual se aconseja
utilizar aserrines o cortezas
no fermentados. La mezcla
de 2/3 partes de corteza y
1/3 de aserrn de madera
es apropiada como sustrato
(10). Luego se adiciona agua
para conseguir una humedad
del sustrato entre el 55-68%,
para finalmente empacarlo en
bolsas de polipropileno, segn
la tcnica de cultivo a seguir,
bien sea la tcnica asitica o
la americana.

En la tcnica americana se
utilizan bolsas de polipropileno
resistentes al calor, con un
parche hecho de plstico
microprico, que permite la
salida de CO2 y la entrada
de aire (Figuras 3b y 3c).
Despus de llenar, las bolsas
se esterilizan en una autoclave
a 121C. Posteriormente,
los bloques se inoculan por
la parte superior y se llevan
al cuarto de incubacin. En
los mtodos modernos en
pocas semanas se producen
entre dos y cuatro cosechas,
dependiendo de la cantidad
de sustrato que oscila entre 1
y 3 kg (40).
c.

b.

a.

Figura 3. Tipo de bolsas utilizadas para el cultivo del


shiitake. Tcnica asitica (a); Tcnica americana
(b y c).

Cultivo de hongos medicinales

en residuos agrcolas de la zona cafetera

1.3. Manejo del cultivo.

desde la superficie, que exige


que el bloque se mantenga en
condiciones de niebla, con el
100% de humedad, hasta que
se forme aproximadamente
una docena de primordios
(Figura 4) (8).

Durante la etapa de incubacin


la superficie del sustrato se
observa plana y blanca. La
colonizacin ocurre en dos
semanas, tiempo ptimo para
que se forme la red del micelio Despus de la primera cosecha,
y se produzcan estructuras de los bloques de sustrato deben
ptima calidad (40).
trasladarse a un cuarto
aparte para que pierdan
Entre 30 y 35 das despus de la humedad durante una semana,
siembra los bloques presentan manteniendo la temperatura
apariencia irregular, debido del cuarto entre 20 y 21C y
a la formacin de agregados bajando la humedad relativa
miceliales precursores de los a 30-50%. Posteriormente, los
primordios. En los 30 das bloques se sumergen en agua a
siguientes, los aglomerados 7-14C de temperatura, durante
se tornan de color marrn 48 horas; si la temperatura
y de consistencia blanda, y es mayor de 15C, deben
ejercen presin en el plstico, sumergirse durante 24 horas
momento en el cual los (8). Despus de la inmersin,
bloques deben trasladarse a la los bloques se llevan de nuevo
zona de fructificacin, donde a la zona de fructificacin. Por
se les retira la bolsa de plstico lo menos una o dos veces por
que los cubre. No obstante, da, los bloques se asperjan con
en este momento ocurre una agua a presin y una semana
masiva evaporacin de agua despus comienza la segunda
cosecha.
a.

Para el cultivo en bolsas se


debe controlar la fructificacin
dejando slo de 10 a 12
primordios; si hay ms de
doce en un bloque de 1 kg
o si se desarrollan primordios
debajo del plstico se afecta
la calidad y la rentabilidad,
debido a la proliferacin de
hongos de menor tamao, lo
que aumenta el costo de la
cosecha (8). Al final del cultivo,
los bloques tendrn entre
y de su tamao original
y normalmente se vern de
color marrn oscuro. En este
momento puede reciclarse
el sustrato para el cultivo del
hongo Pleurotus spp.
1.4. Tratamiento
postcosecha.
La cosecha se realiza cuando
el borde del carpforo
est enrollado o cuando el
sombrero se extiende entre
un 60 y un 70%, estado que
se considera adecuado para
la comercializacin en el

b.

c.

Figura 4. Aspecto de los bloques de sustrato durante la


etapa de incubacin y fructificacin del cultivo
de shiitake. A los 30 das (a), los 60 das (b) y los
90 das (c).

Cultivo de hongos medicinales

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mercado asitico, uno de los


mayores consumidores de este
producto. Los hongos pueden
cosecharse con la mano
realizando una ligera torsin
y presionando el tallo sobre
el bloque de sustrato.
La forma ms comn de
conservar estos hongos es
deshidratndolos mediante
liofilizacin, aire caliente a
60C o exponindolos al
sol, segn los recursos del
productor (5).
1.5. Valor nutritivo.
El shiitake es fuente de protena,
potasio, zinc y polisacridos,
algunos de ellos conocidos
como potenciadores del
sistema inmunolgico (14).
El shiitake ha sido reconocido
en Japn y China como un

alimento y una medicina por


miles de aos. De acuerdo
con los registros histricos, en
el ao 199 A.C. al emperador
japons Chuai le fue ofrecido
el shiitake por los Kyusuyu, una
tribu nativa del Japn (12). Su
contenido de protena vara
entre 2,22 y 2,60% en peso
fresco (25,9% en peso seco),
lpidos (principalmente el
cido linoleico), carbohidratos
solubles en agua (0,450,72g/100g de peso seco),
minerales (especialmente
calcio) y vitaminas B2 y C
(12).
Los cuerpos fructferos tienen
altas cantidades de ergosterol,
provitamina que se convierte
en vitamina D en presencia
de luz solar. Algunos estudios
demuestran que la exposicin
de los carpforos a los rayos
solares durante 3 horas/da
incrementa los contenidos
de vitamina D2 hasta en

cinco veces. El contenido de


minerales depende de los
sustratos de cultivo (12).
Este hongo es el segundo
gnero comestible ms
cultivado en el mundo,
considerado un producto
extico, ms apetecido que
el champin (A. bisporus),
con propiedades medicinales
sustentadas en un gran nmero
de investigaciones (12). En las
Tablas 1, 2 y 3 se presenta la
informacin relacionada con el
valor nutritivo de los cuerpos
fructferos del shiitake.
1.6. Propiedades
medicinales.
En la medicina oriental el
shiitake es considerado
un alimento que activa la
sangre. Es utilizado para tratar
problemas de salud tanto en
nios como en adultos. En

Tabla 1. Descripcin nutricional de los cuerpos fructferos del hongo shiitake.

Cultivo de hongos medicinales

en residuos agrcolas de la zona cafetera

10

Tabla 2. Anlisis bromatolgico del shiitake fresco.

Tabla 3. Aminocidos esenciales del shiitake.

Japn, se utiliza para tratar


enfermedades del corazn,
lceras, presin sangunea,
problemas de visin, alergias,
hemorroides y neuralgias,
entre otras (14).
Dos extractos se obtienen del
shiitake con fines teraputicos:
el Extracto Micelial (LEM) y
el Lentinan. Actualmente,

estas sustancias se utilizan


en tratamientos mdicos
contra tumores en animales y
humanos, mediante ingestin
oral o por va intravenosa (12).
El Lentinan es un constituyente
de la pared celular y se extrae
tanto del micelio como de
los cuerpos reproductores.
Es un polisacrido de alto
peso molecular en triple

Cultivo de hongos medicinales

en residuos agrcolas de la zona cafetera

11

estructura de hlice, que


contiene solamente molculas
de glucosa (12).
Hobbs (12), presenta una
revisin sobre estudios clnicos
realizados en pacientes a los
cuales se les suministr el
hongo para el tratamiento
de diferentes enfermedades
y analiza los efectos

antitumorales, antivirales,
inmunoregulatorios,
hepatoprotectores,
cardiovasculares, y su
utilizacin en el tratamiento
de infecciones bacterianas, en
la prevencin del cncer y en
el tratamiento del SIDA.
1.7. El shiitake como control
biolgico de patgenos.
El uso excesivo de pesticidas
en la agricultura para el control
de insectos y enfermedades
tiene efectos nocivos sobre
el suelo, el agua, el medio
ambiente y la salud humana,
por este motivo es necesario
desarrollar programas de
control biolgico mediante la
utilizacin de microorganismos
como hongos, bacterias y
virus.
En este campo, el lixiviado
micelial de shiitake puede ser
una alternativa para el control
de bacterias fitopatgenas,
debido a sus propiedades
como antibitico. En un
estudio realizado por
Pacumbaba et al .(23), se

utilizaron diferentes cepas


de bacterias para evaluar en
el laboratorio el efecto del
lixiviado micelial de shiitake
como control biolgico de
las mismas. Experimentaron
con Ralstonia solanacearum
que produce marchitamiento
en tomate, Curtobacterium
flaccumfaciens
pv
flaccumfaciens causante de
marchitamiento en frjol y soya,
Pseudomonas syringae pv
glycinea, P. syringae pv. tabaci,
Xanthomonas campestris pv
glycines, X. campestris pv
campestris, Erwinia amylovora,
Bacillus cereus, Escherichia
coli, Listeria monocytogenes,
Salmonella typhimurium y
Staphylococcus aureus. Se
observ que el lixiviado
micelial de shiitake inhibe el
crecimiento de estas bacterias,
y que cuando es aplicado al
suelo previene los sntomas
de marchitamiento en tomate
y frjol, en condiciones de
laboratorio. Sin embargo,
faltan estudios de campo para
determinar si los resultados
obtenidos in vitro son
reproducibles, y as poder
realizar las recomendaciones
para la utilizacin del lixiviado

como controlador biolgico


de bacterias fitopatgenas.
1.8. Mercado mundial.
La produccin mundial de
hongos comestibles cultivados
ha crecido consistentemente
durante las cuatro dcadas
pasadas, pero la produccin
y el consumo se concentran
principalmente en Asia, donde
en 1994 representaba todava
el 69,3% de la produccin
mundial (24).
Una comparacin de las
especies de hongos cultivados
en los ltimos aos demuestra
que el abastecimiento est
aumentando, especialmente
el cultivo del hongo Lentinula
edodes. Se espera que esta
tendencia en la produccin
contine debido, tanto a los
avances en el conocimiento
bsico de la biologa de los
hongos como a la tecnologa
prctica asociada con su cultivo.
El consumo en la China est
aumentando en forma rpida
y fuerte, lo que ofrece nuevas
oportunidades en el mercado
internacional de los hongos.

2. GANODERMA (Ganoderma lucidum (Wm. Curtis. Fries)


Es un hongo que recibe muchos
nombres: los japoneses lo
llaman Reishi o Mannetake,
mientras que los chinos y
coreanos, Ling Chi o Ling Zi,
que en espaol significa, el
hongo de la inmortalidad o

el poliporo panacea, siendo medicinales. Esta especie tiene


casi reverenciado en sus la forma de un rin, es de
textura leosa, de 5 a 20 cm
respectivos pases (40).
de dimetro y presenta una
G. lucidum es uno de los superficie brillante cuando
representantes poliporales ms est humedecido (Figura 5)
conocido por sus propiedades (40). El cultivo artificial de

Cultivo de hongos medicinales

en residuos agrcolas de la zona cafetera

12

este hongo se logr con xito


en el ao 1970 y a partir de
1980 se desarroll de manera
rpida, particularmente en la
China (3).
2.1. Descripcin de la
especie.
Existen varias especies del
gnero Ganoderma. Las ms
importantes comercialmente
son: G. curtisii, G. oregonense,
G. tsugae y G. lucidum. Esta
ltima, es la de mayor inters
y crece sobre robles y otras
maderas duras, mientras que
G. tsugae y G. oregonense
crecen principalmente sobre
conferas. En el suroeste de
Norteamrica, G. tsugae crece
sobre abetos blancos (40).
El sombrero del hongo puede
ser rojo plido y algunas
veces muestra tonalidades
cercanas al negro; tiene
poros blanquecinos en la
parte inferior que al contacto
se tornan de color marrn.
Las reas de crecimiento
nuevo son blancas y se
oscurecen de amarillo marrn
a marrn-rojizo cuando el
hongo llega a la madurez de
cosecha, stas se observan
frecuentemente en zonas
concntricas como patrn
de crecimiento. Las esporas
son de color marrn-rojizo,
elipsoidales, con un extremo
romo, de 9 a 12 m x 5 a 6 m.
Las esporas se dispersan desde
la parte inferior del hongo,

Figura 5. Carpforo de Ganoderma lucidum


cultivado en subproductos de caf.

recolectndose en la superficie
de los sombreros. El pie es
de color blanco a amarillo, y
eventualmente se oscurece a
marrn o negro, y est unido
en el centro o de manera lateral
al sombrero; es usualmente
sinuoso y puede tener entre 5
y 10 cm de longitud (40).
2.2. Tcnicas de cultivo de
G. lucidum.
Para el cultivo desarrollado en
condiciones de laboratorio,
Stamets (40), reporta un ciclo
rpido para el cual se usa una
mezcla 50:50 de aserrn de
madera dura, con virutas de
madera, que puede contener
un 5% de salvado de arroz
o sorgo, y as incrementar el
rendimiento. La mezcla del
aserrn y las virutas de aliso/

Cultivo de hongos medicinales

en residuos agrcolas de la zona cafetera

13

roble, se sumerge en 15 L de
agua enriquecidos con 50 ml
de melaza, durante tres o cuatro
das y luego se deposita en
bolsas de 5 kg de capacidad,
pero slo se colocan dentro
de ellas 3 kg de sustrato
hmedo compactado..Luego,
las bolsas se esterilizan en
autoclave durante 2 horas
a 15 psi y, finalmente, se
incuban y se disponen para la
fructificacin.
Para obtener un crecimiento
p t i m o d e G. lucidum
deben tenerse en cuenta
las condiciones de cultivo
descritas en la Tabla 4.
En su ciclo de cosecha se
obtienen dos recolecciones,
durante un perodo de tiempo
comprendido entre los 90 y
los 120 das despus de la
inoculacin (8).

Tabla 4. Condiciones de cultivo para obtener los ptimos de crecimiento y produccin de


G. lucidum.

Existen dos mtodos de cultivo, Quercus acutissima, Quercus


aliena y Quercus serrata. Para
que son:
sembrar el hongo es necesario
Cultivo en leos (15). El cultivo secar los leos hasta un
puede hacerse en leos largos 40% de humedad, condicin
o en leos cortos. El cultivo de que se logra despus de
Ling zhi en los leos largos es 40 a 60 das con secado y
muy laborioso y la cosecha ventilacin adecuados. La
se obtiene despus de un inoculacin debe realizarse
ao de inoculado el hongo. en un sitio limpio, libre de
Por otro lado, el cultivo contaminantes. En las etapas
sobre leos cortos demora de incubacin y fructificacin
solamente de 4 a 5 meses para deben controlarse las variables
la incubacin del micelio y el medioambientales del lugar
cuerpo fructfero puede ser donde se desarrolla el
cosechado en el mismo ao. proceso.
El cultivo en leo corto es el
Son factores esenciales para
ms utilizado.
el crecimiento de los hongos
Ganoderma lucidum, es un la temperatura, la humedad
hongo saprfito. Para su y el oxgeno. En particular, la
cultivo se utiliza madera seca formacin de los primordios
de robles del gnero Quercus: requiere una temperatura de

Cultivo de hongos medicinales

en residuos agrcolas de la zona cafetera

14

30C y una humedad relativa


del 95%. La luz y otros factores
medioambientales pueden
manipularse dependiendo del
estadio de crecimiento del
hongo, as:
- Incubacin: el crecimiento
micelial ocurre entre los
10 y los 38C, con una
temperatura de incubacin
ptima entre 25 y 32C. El
contenido de humedad en el
sustrato de aserrn debe ser
de 65-70% y el del leo del
40%. Los valores ptimos de
pH deben estar entre 4,2 y
5,3. Durante el crecimiento
micelial no se necesita
iluminacin.
-

Fructificacin: las
fructificaciones de Ling zhi,

se desarrollan entre 20 y
34C, con el ptimo de
temperatura entre 27 y
32C. Si la temperatura est
fuera del rango de formacin
puede abortar el cuerpo
fructfero; en particular, si
la temperatura es inferior a
20C se producen cuerpos
fructferos con sombreros
deformes.

fructfero debe estar entre 50


y 450 lux. Despus de formado
el sombrero debe ventilarse
completamente el cuarto.

Cultivo en leos sintticos.


Para el cultivo de Ganoderma
lucidum, se emplea el tipo
de bolsas de polipropileno
descritas para shiitake, sea para
la produccin de ganoderma
por la metodologa asitica
La humedad relativa en el (bloque en forma de leo)
cuarto de crecimiento debe o la americana (bloques
mantenerse por encima del cuadrados).
90% durante la induccin de
los primordios, entre el 70 y el
80% para la formacin de los 2.3. Manejo del cultivo.
sombreros, y entre 30 y 40%
en el estadio final del desarrollo
del cuerpo fructfero. La luz La etapa de incubacin toma
requerida durante la formacin entre 14 y 21 das a 24C,
y el desarrollo del cuerpo y las primeras estructuras,

a.

aparecen despus de 30 40
das de inoculado el sustrato.
Para el da 50 los tallos se
encuentran ramificados, tienen
una longitud aproximada de
10 cm y emergen del sustrato
(Figura 6a). En este momento
deben abrirse las bolsas
para favorecer la formacin
del sombrero y disminuir
la concentracin de CO 2
(~ 350 ppm), de lo contrario
ste no crece. El repentino
cambio en la concentracin
de CO2 estimula el crecimiento
del sombrero o pleo. Los
sombreros se orientan hacia
la luz y una indicacin del
crecimiento es la aparicin
de una banda blanquecina
en el borde (Figura 6b).
El tiempo de cosecha est
usualmente indicado por la
ausencia de este margen y
la produccin de esporas,
de color marrn xido, que
tienden a acumularse en los
sombreros (Figura 6c) (8).

b.

c.

Figura 6. Aspecto del desarrollo de un cultivo de


G. lucidum. (a) 50 das despus de la
inoculacin, (b) 80 das despus, (c) 110 das
despus de la inoculacin.

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15

Para obtener carpforos de


G. lucidum de estipe corto
y forma de rin se requiere
que una vez el tallo tenga
una longitud de unos 5 cm,
exponerlo a un ambiente con
alta humedad, ventilacin y
luminosidad.

2.5. Valor nutritivo de


G. lucidum.
El carpforo de ganoderma
contiene carbohidratos
(azcares reductores y
polisacridos), aminocidos,
una pequea cantidad de
protena e iones inorgnicos,
esteroides, triterpenos, lpidos,
alcaloides, aceites voltiles,
riboflavina y cido ascrbico.
Analizando los iones
inorgnicos, especficamente
los del sombrero, se encuentra
que contiene Mg, Ca, Zn, Mn,
Fe, Cu y Ge. De igual forma,
contiene ergosterol y proteasa
cida (12).

Estos hongos contienen


usualmente un 80% de agua,
10% menos que otros hongos
carnosos. Los rendimientos
obtenidos en una primera
cosecha pueden alcanzar un
15% de eficiencia biolgica
entre los 30 y los 60 das
despus de la emergencia del
tallo, para el cultivo rpido. La
segunda cosecha representa
entre un 25 a un 50% de la
En extracciones de carpforos
anterior.
de G. lucidum en agua caliente
se encontr el 51% de los
2.4 Tratamiento polisacridos y el 5% de
la protena presentes en el
postcosecha.
cuerpo reproductor. El micelio
contiene esteroles, lactones,
Despus de la cosecha no alcaloides, polisacridos y
deben almacenarse los hongos triterpenos (12).
en lugares hmedos, calurosos
y sucios. stos pueden secarse En el mercado de Oriente
al sol o en estufas a 60C, tradicionalmente se vende
durante 2 3 das, disponiendo seco, sin embargo se encuentra
los cuerpos fructferos con la tambin en forma de pldoras,
parte inferior del carpforo cpsulas y t (6).
hacia abajo. El sobresecado
deteriora la calidad del Aunque este hongo es
producto, debido a que la parte relativamente duro, puede
inferior de la superficie porosa usarse en algunos platos
se oscurece o se contamina especialmente sopas, o puede
prepararse en infusin (t),
con mohos (6).

Cultivo de hongos medicinales

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16

con el hongo fresco, en


trozos pequeos, en agua
hirviendo durante 5 minutos y
dejndolo en reposo durante
30 minutos(12). Las cepas
amarillas generalmente son
ms amargas que las rojas y
las negras. El sabor amargo
se debe a su contenido de
terpenoides (8).
2.6. Propiedades
medicinales.
Los extractos de esta seta
poseen efectos antivirales,
debido al germanio orgnico,
componente activo de
Ganoderma lucidum. Este
componente aumenta en un
50% la habilidad de la sangre
para absorber el oxgeno,
favorece el equilibrio del
metabolismo y previene
la degeneracin del tejido
celular. Adems, G. lucidum
reduce el porcentaje del
colesterol y el excedente
de grasa contenidos en
la sangre, disminuye el
nivel de azcar, restaura
las funciones naturales del
pncreas, estabiliza las
paredes celulares de los
glbulos rojos, reduce la
aglutinacin de las plaquetas
sanguneas, mejora las
funciones del crtex y de
las glndulas suprarrenales
(19).

realizados en pacientes a
los cuales se les suministr
el hongo para el tratamiento
de diferentes enfermedades.
En su libro analiza los
efectos analgsicos, antialrgicos, anti-inflamatorios,
antibacteriales, antioxidantes,
antitumorales, antivirales,
inmunoregulatorios,
hepatoprotectores, al igual la
utilizacin del hongo para el
tratamiento de la bronquitis,
de la presin sangunea, as
Existen dos clases principales como su accin cardiotnica,
de compuestos presentes en expectorante y su empleo en
ganoderma con actividades el tratamiento del SIDA.
farmacolgicas, stos son los
triterpenos y los polisacridos. Este hongo se consume por
Los primeros, disminuyen va oral, en forma de infusin
la presin sangunea y o mezclado en el caf (Figura
son benficos como anti- 7). En el mercado internacional
i n f l a m a t o r i o s y c o m o se consiguen sobres de caf
antivirales. Los polisacridos
tienen efectos estimulantes
en las clulas sanguneas
que conllevan a la liberacin
de citoquinos y linfoquinos,
lo que explica los efectos
antitumoral, hipoglicmico
e inmunopotenciador.
Actualmente, en diferentes
investigaciones se est
examinando el modo de accin
especfico de los diferentes
compuestos aislados de los
cuerpos reproductores (12).

Tambin tiene propiedades


hipertensivas e hipotensivas
(homeostasis), dadas por
un peptido-glucano; estos
compuestos tienen una
actividad antitrombosis, ya
que son inhibidores de la
agregacin plaquetaria (20). Se
conocen otros estudios donde
se demuestra la actividad
antitumoral de las esporas de
ganoderma contra el hepatoma
y sarcoma 180 (17).

instantneo con extracto de


ganoderma.
2.7. Mercado mundial de
hongos medicinales.
El mercado mundial de los
hongos medicinales se ha
estimado en 3,9 millardos
de dlares en 1995 (de
los cuales 1,6 millardos
correspondieron a productos
derivados de G. lucidum),
cifras relacionadas con la
produccin y consumo de
los hongos en el continente
Asitico; no obstante, en los
mercados de Europa y Estados
Unidos, la demanda de stos
ha aumentado debido a sus
propiedades medicinales y
alimenticias (24).

Hobbs (12), hace una revisin


sobre los estudios clnicos
Figura 7. Ganoderma lucidum puede consumirse en
infusin con caf caliente.

Cultivo de hongos medicinales

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17

3. USO DE RESIDUOS AGRCOLAS DE LA ZONA CAFETERA PARA EL CULTIVO


DE SHIITAKE Y GANODERMA.
La metodologa para el cultivo
de los hongos shiitake y
ganoderma, difiere de la
utilizada para los hongos del
gnero Pleurotus, conocidos
como orellanas. La diferencia
radica en que las especies
del gnero Pleurotus tienen
la habilidad de crecer sobre
un amplio rango de sustratos,
con relaciones C/N que van
desde 50 hasta 500 (44), lo
que no sucede con los hongos
medicinales evaluados en
este estudio. Por tanto, para
los hongos medicinales es
necesario utilizar tratamientos
trmicos en la fase de
adecuacin del sustrato con
el fin de romper estructuras
y eliminar microorganismos
competidores, y en la etapa de
prefructificacin para estimular
la formacin de primordios.
El cultivo de los hongos
medicinales comprende las
siguientes etapas:
-Preparacin de la semilla de
siembra.
-Formulacin y preparacin de
los sustratos.
-Esterilizacin de los
sustratos.
-Etapa de inoculacin.
-Etapa de incubacin.
-Choque trmico de los
sustratos ya incubados.
-Etapa de fructificacin y
cosecha.
-Manejo postcosecha.

3.1. Produccin de la semilla gentico. A partir de stos,


se obtienen los cultivos de
de los hongos.
trabajo que consisten en tubos
de ensayo con agar nutritivo
Para la preparacin de sobre el cual se establece el
la semilla de los hongos hongo en su fase micelial y
medicinales se utiliza la misma cuya conservacin se realiza
metodologa empleada para la refrigerndolos a 4C. Luego es
produccin de semilla de los necesario transferirlos cada 3
hongos comestibles del gnero meses a otros tubos de ensayo
con agar nutritivo fresco, que
Pleurotus spp.
garantice la supervivencia
La produccin de la semilla del hongo. A esta forma de
de los hongos medicinales conservacin se le denomina
es una actividad de sumo transferencia seriada y al
cuidado y en su proceso se material biolgico obtenido
corre el riesgo de perder el se le denomina cepa(Figura
material por el establecimiento 8); sta es la forma en la que
de hongos competidores, los laboratorios especializados
por tanto, se recomienda a comercializan el hongo para
los pequeos productores que los productores inicien
comprarla en laboratorios la produccin de la semilla
comerciales que certifiquen comercial.
su calidad y sanidad; pero,
si los productores desean Una vez se adquiere la cepa,
elaborarla es necesario que el primer paso es refrigerarla
sigan de forma detallada y cada 3 meses transferirla
los procedimientos que se a tubos de ensayo con agar
describen a continuacin, nutritivo fresco. Para ello
teniendo un especial cuidado se utilizan tubos de ensayo
en todo lo relacionado con las bien lavados y desinfestados,
los cuales se llenan hasta la
prcticas de higiene.
mitad de su volumen con
La semilla inicial se obtiene el medio de cultivo caliente
a partir de cultivos puros (preparado de acuerdo con
de los hongos, los cuales las recomendaciones del
se encuentran en su fase fabricante), se tapan y luego se
micelial sobre diferentes esterilizan a 121C, utilizando
tipos de agar nutritivo y una autoclave pequea.
crioprotectores almacenados Despus de retirar los tubos del
en nitrgeno lquido a -196C, autoclave, stos deben dejarse
para preservar su potencial en una posicin inclinada

Cultivo de hongos medicinales

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18

Figura 8. Cepas de Lentinula edodes


conservadas por transferencia
seriada.
para aumentar la superficie
de contacto agar micelio, y
finalmente, se hace la siembra
con el micelio contenido en
el tubo inicial. Se recomienda
que el traspaso del micelio no
sea superior a 6 repiques (un
ao y medio como mximo).
Una vez cumplido este tiempo
es necesario volver a iniciar
el cultivo con el material
crioconservado o aislado a
partir de un carpforo sano y
de excelente calidad.
La siembra del micelio debe
hacerse en una cmara de flujo
laminar o en su defecto, en un
cuarto cerrado, completamente
limpio y desinfestado, junto
a mecheros de alcohol.
Para la desinfestacin de las
reas de trabajo se utiliza el
hipoclorito de sodio con una
concentracin del 10%, a partir
de lmpido comercial y cloruro
de benzalconio al 5%. En lugar
de lmpido tambin puede
utilizarse alcohol de 70 (alcohol
antisptico comercial).

indicadas anteriormente, con


el micelio contenido en cada
uno de los tubos de ensayo
(un tubo contiene el micelio
suficiente para sembrar 10
botellas planas). Por ltimo, las
botellas se incuban en un lugar
cerrado, oscuro y desinfestado
(Figura
9).
Por botella se adicionan
60 ml del medio nutritivo Diariamente, debe evaluarse
(extracto de malta agar), el crecimiento micelial en
que se prepara segn las los tubos de ensayo y en
indicaciones de la etiqueta las botellas. Tambin, se
del producto. Posteriormente, debe retirar y esterilizar el
se tapan las botellas con un material contaminado para su
tapn de algodn y luego se disposicin final, para evitar
esterilizan a 121C en una la contaminacin cruzada y
autoclave. Paso seguido, el riesgo de enfermedades
stas se enfran en posicin respiratorias debidas a
horizontal y se siembran, las esporas de los hongos
teniendo las precauciones contaminantes.
A partir de las cepas conservadas
en los tubos de ensayo se
multiplica el micelio en botellas
planas, como las que se utilizan
para la produccin artesanal
del hongo entomopatgeno
Beauveria bassiana.

Figura 9. Multiplicacin micelial de


Lentinula edodes en botellas
planas.

Cultivo de hongos medicinales

en residuos agrcolas de la zona cafetera

19

Cuando el micelio muestre un


crecimiento mayor del 90%
sobre los medios de cultivo,
deben refrigerarse los tubos
o las botellas por un tiempo
no mayor de 3 meses, para
emplearlos en la preparacin
de la semilla primaria.
El micelio contenido en las
botellas planas se multiplica
en granos de cereal (trigo,
millo, sorgo, cebada, centeno,
maz o arroz) o sobre aserrines
de madera, para conformar
la semilla madre o semilla
primaria, la cual es usada para
preparar la semilla de siembra
o inculo secundario, tambin
llamada semilla comercial.
Esta semilla se prepara en
frascos de vidrio esterilizados
de boca ancha y con tapa
metlica la cual se perfora
en su parte central, con una
broca, y se sella con algodn
para permitir el intercambio
gaseoso. Los frascos se llenan
hasta partes con cereal
hidratado, con humedad entre
el 40 y el 45% o con un sustrato
a base de aserrn de madera
dura con una humedad entre
el 60 y el 65%.
Cuando se utilizan cereales,
para que stos alcancen la
humedad necesaria para la
obtencin de la semilla madre
debe lavarse el grano comercial
con agua de grifo hasta
retirarle el material flotante, y
despus escurrirlo. Al cereal
limpio se le adicionan 0,5 L
de agua/kg de grano inicial, y
se coloca en un recipiente al

fuego hasta eliminar el agua desarrollado en las botellas


planas, las cuales deben
totalmente.
retirarse desde el da anterior
Cuando la semilla madre se del refrigerador.
prepara sobre aserrines de
madera es necesario conocer El agar con el micelio se
la humedad inicial de los divide en ocho trozos y cada
materiales que forman parte uno se corta en otros diez
del sustrato. Una formulacin trozos, con una asa estril, y
apropiada debe contener, en por frasco se adicionan diez
base seca, entre un 75 y un trozos sobre el sustrato. Este
80% de aserrn de madera proceso debe hacerse en una
dura (roble, eucalipto, tallo cmara de flujo laminar o junto
de cafeto) con un tamao de a varios mecheros para evitar la
partcula inferior a 0,5 cm, contaminacin del sustrato. El
salvado de trigo entre el 18 y el cuarto para la incubacin de los
25%, azcar (1%), carbonato frascos debe estar desinfestado,
de calcio (1%) y la cantidad de seco y oscuro.
agua que permita obtener una
humedad del sustrato entre El crecimiento micelial en la
semilla madre debe evaluarse
60 y 65%.
diariamente (Figura 10). As
Despus de llenar los frascos, mismo, es necesario retirar
stos se envuelven en papel y el material contaminado
se esterilizan en una autoclave. que puede llevarse a los
Una vez esterilizado el sustrato, l o m b r i c u l t i v o s p a r a s u
se enfran los frascos en tratamiento y de esta manera
mesones desinfestados y evitar la contaminacin
se inoculan con el micelio cruzada.

Figura 10. Semilla primaria de Lentinula edodes sobre aserrn


de madera.

Cultivo de hongos medicinales

en residuos agrcolas de la zona cafetera

20

El paso siguiente es preparar


la semilla de siembra, la cual
se utiliza para la inoculacin
de los sustratos. Para la
produccin de 1 kilogramo
de semilla se recomienda
utilizar bolsas de polipropileno
termorresistentes de 20 cm
de ancho x 50 cm de largo y
0,20 cm de espesor. Dentro de
las bolsas se adiciona 1 kg de
cereal hidratado y en el extremo
superior de stas se les coloca
un anillo de PVC de de
dimetro y 0,5 cm de longitud,
que sirve para sostener un
tapn de algodn y de esta
forma permitir el intercambio
gaseoso, necesario para el
desarrollo micelial.
Una vez esterilizado el material,
las bolsas se enfran y se
inoculan con la semilla madre a
una tasa del 10% (100 gramos
de semilla madre para cada
bolsa de semilla de siembra).
La inoculacin debe hacerse
en cmara de flujo laminar
o junto a mecheros. Cuando
el crecimiento de la masa

micelial llegue al 95 al 100%, la produccin de hongos


deben refrigerarse las bolsas y comestibles y medicinales.
utilizarse mximo en los 15 das
siguientes (Figura 11).
Con base en los resultados de
los contenidos de carbono (C)
y nitrgeno (N) de las materias
3.2. Preparacin de los primas se calcula la relacin
C/N, parmetro importante
sustratos.
para la formulacin de los
sustratos utilizados para
El primer paso en la preparacin el cultivo de los hongos
de los sustratos consiste en comestibles y medicinales.
determinar la cantidad de cada
una de las materias primas El porcentaje de carbono
que formarn parte de los (%C) se calcula dividiendo el
mismos; esto se conoce con contenido de materia orgnica
el nombre de formulacin. (M.O.) entre 1,8, la cual se
Por tanto, debe conocerse la determina previamente con
caracterizacin bromatolgica la siguiente frmula:
de los materiales que
conformarn los sustratos y M.O = 100 - Porcentaje de
cenizas.
las necesidades nutricionales
de las cepas de los hongos
De los subproductos generados
que van a cultivarse.
durante los procesos de cultivo,
En la Tabla 5 se presenta la beneficio e industrializacin
caracterizacin bromatolgica del caf, los que presentan las
de los subproductos de algunos menores relaciones C/N son: la
cultivos de la zona cafetera pulpa y la borra, con valores de
que se han utilizado en la 31 y 33, respectivamente.
preparacin de sustratos para
La pulpa de caf (Figura 12),
es el primer producto que se
obtiene despus del beneficio
del fruto de caf y representa,
en base hmeda, alrededor
del 40% del peso del fruto
fresco (2).
La borra de caf (Figura 13), es
el subproducto que se genera
despus de la extraccin de los
solubles presentes en el grano
torrefacto.

Figura 11. Semilla comercial de hongos medicinales.

Cultivo de hongos medicinales

en residuos agrcolas de la zona cafetera

21

Tabla 5. Caracterizacin de las materias primas utilizadas en el cultivo de L. edodes y


G. lucidum

Cultivo de hongos medicinales

en residuos agrcolas de la zona cafetera

22

Figura 12. Pulpa de caf.

Figura 13. Borra de caf.


El aserrn del tronco del cafeto
presenta una relacin C/N de
74, la cual es inferior a la que
presentan la mayora de las
maderas duras, debido a que
el contenido de nitrgeno en
el tallo del caf es superior al
encontrado en otros aserrines
de madera.

La adicin de compuestos
de calcio al sustrato como
el sulfato (CaSO4) tambin
conocido como yeso, y del
carbonato (CaCO3), tiene como
finalidad el acondicionamiento
del pH del medio y el
suministro de iones Ca++, los
cuales desempean un papel
importante en la estimulacin
Los salvados de trigo y maz se del crecimiento hifal.
utilizan en las formulaciones
como suplemento para Royse y Snchez (35),
equilibrar la relacin C/N, realizaron un estudio para
por su alto contenido de determinar el porcentaje
N disponible y su facilidad apropiado de compuestos de
de consecucin en la zona calcio que deben adicionarse
cafetera; stos presentan al sustrato. Encontraron que
una relacin C/N de 21 y 34, con cantidades de CaCO3 o
respectivamente.
CaSO4 superiores a 0,6% se

Cultivo de hongos medicinales

en residuos agrcolas de la zona cafetera

23

estabiliza la produccin, por


lo que es importante adicionar
como mnimo esta cantidad
a los sustratos. Cantidades
mayores de carbonato se
utilizan cuando es necesario
acondicionar el valor del pH
del sustrato entre 4,5 y 5,5;
rango apropiado para el cultivo
de los hongos (31).
Teniendo en cuenta los valores
C/N de las materias primas, se
calculan las formulaciones que
permitan tener los sustratos
para el cultivo de las diferentes
cepas de los hongos L. edodes y
G. lucidum, con relaciones C/N
entre 40 y 60, consideradas como
apropiadas para su cultivo.

En la Tabla 6 se observan los


porcentajes, en peso seco,
de las materias primas que
conformaron los sustratos
evaluados para el cultivo de
los hongos medicinales con el
propsito de encontrar el ms
productivo para las diferentes
cepas utilizadas.

vez establecida la formulacin


y calculadas las cantidades de
materias primas necesarias,
consiste en la adecuacin del
tamao de la partcula de cada
uno de los materiales.

obtenida o ensilada, tal como


se indica en el Avance Tcnico
313 Ensilaje de la pulpa de
caf (27), proveniente de un
despulpado y un transporte sin
agua (1), y prensada con el fin
de disminuir la humedad hasta
el 70% (Figuras 14 a y b). La
borra de caf puede utilizarse
con el tamao de partcula con
el cual se genera.

Es recomendable que el tamao


de partcula de los sustratos
est entre 0,5 y 2 cm (29),
En la Tabla 7 se establecen las debido a que con este tamao
cantidades de materias primas se han encontrado los mejores
necesarias en cada formulacin rendimientos del cultivo.
El tallo de caf debe molerse
para obtener 100 kg de sustrato
para obtener un tamao de
de siembra, teniendo en cuenta La pulpa de caf tiene partcula inferior a 0,5 cm, pero
la humedad promedio con que un tamao de partcula superior a 0,1 cm, lo cual se logra
se consiguen los diferentes promedio entre 1 y 2 cm, en un desintegrador picador,
subproductos.
que es apropiado para la que tambin puede utilizarse
conformacin del sustrato para adecuar el tamao de
El siguiente paso en la (27). Debe utilizarse fresca, partcula de otros materiales
preparacin del sustrato, una con menos de dos das de fibrosos (Figura 15).
Tabla 6. Formulaciones de sustratos evaluados para el cultivo de los hongos L. edodes y
G. lucidum.

Cultivo de hongos medicinales

en residuos agrcolas de la zona cafetera

24

Tabla 7. Cantidades de materiales frescos necesarios para conformar 100 kilogramos de sustrato
de siembra con 62,5% de humedad en las diferentes formulaciones.

Royse y Snchez (36),


encontraron rendimientos
muy similares en la produccin
de L. edodes con sustratos que

contenan aserrn de madera el rendimiento del cultivo


con tamaos de partcula en disminuy.
el rango entre 0,85 y 4,0 mm;
pero por debajo de 0,85 mm,

Cultivo de hongos medicinales

en residuos agrcolas de la zona cafetera

25

a.

b.

Figura 14. Operacin de prensado de


la pulpa (a) aspecto de la
pulpa prensada, humedad
aproximada del 70% (b).

a.

b.

c.

Figura 15. Obtencin (a), molienda (b) y aspecto del aserrn


de tallos de caf (c).
El siguiente paso en la
preparacin de los sustratos,
consiste en pesar las materias
primas y posteriormente,
mezclar los materiales sobre
un piso de cemento o sobre
un plstico si el piso es de
tierra.

Primero, se extiende el
subproducto de la formulacin
que est en mayor cantidad y a
continuacin los que le siguen
en peso, finalizando con el que
est en la menor cantidad (Figura
16). La mezcla se realiza con una
pala hasta que el material quede

Cultivo de hongos medicinales

en residuos agrcolas de la zona cafetera

26

homogneo. A continuacin se
adiciona, de manera uniforme,
agua a la mezcla de materiales
y se homogeneiza el material,
teniendo en cuenta que la
humedad final del sustrato
debe estar prxima a 62,5%
(Figura 17).

Figura 16. Disposicin de los materiales del


sustrato.

Figura 17. Sustrato listo para ser


embolsado.
El sustrato preparado se empaca
en bolsas de polipropileno bioorientado, de calibre 2 y de 12
cm de ancho x 30 cm de largo.
Las bolsas se amarran con fibra
plstica en los dos extremos,
simulando la forma de leos,
cuando se utiliza la tcnica
asitica (Figura 18).
El sustrato tambin puede
empacarse en bolsas
rectangulares de polipropileno
orientado, de 38 cm de largo
x 20 cm de ancho y calibre 2,
para la produccin de acuerdo
con la tcnica americana.
Estas bolsas vienen con un
filtro microprico de 3 x 3
cm, localizado a 30 cm de la
base y centrado, para permitir
el intercambio de aire. En este

tipo de bolsa se adicionan


2 kg de sustrato que ocupa
aproximadamente el 50%
de la capacidad de la bolsa,
quedando un colchn
de aire para permitir el
crecimiento del micelio.
Las bolsas se amarran en el
extremo superior utilizando
fibra plstica.

Estas bolsas pueden elaborarse


de forma artesanal utilizando
un sacabocados de 1 de
dimetro que permita perforar
el plstico de la bolsa a la altura
antes descrita. Luego se tapa
con un trozo de interln
fijado a la bolsa con cinta de
enmascarar o esparadrapo
delgado (Figura 19).

Figura 18. Empaque del sustrato en bolsas (tcnica asitica).

Cultivo de hongos medicinales

en residuos agrcolas de la zona cafetera

27

Figura 19. Empaque del sustrato en bolsas


con filtro (tcnica americana).

Cuando se utiliza la tcnica


asitica, luego de amarradas
las bolsas, se hacen dos
perforaciones en cada cara,
distribuidas uniformemente,
para facilitar la inoculacin
e incubacin. Para ello, se
utiliza un sacabocados No 10
y los agujeros se tapan con
esparadrapo (Figura 20).

3.3 Esterilizacin de los medicinales, y facilitar la


sustratos.
absorcin de los nutrimentos
del sustrato por las hifas del
Una vez empacado el sustrato hongo.
en las bolsas el siguiente paso
es la esterilizacin del material. La esterilizacin puede
El proceso tiene dos objetivos: realizarse en autoclaves (Figura
eliminar microorganismos 21), o en forma artesanal
competidores que interfieran utilizando vapor a presin
con el desarrollo de los hongos atmosfrica (Figura 22).

Figura 20. Acondicionamiento de


los bloques en la tcnica
asitica.

Figura 21. Esterilizacin de los sustratos en


autoclave.

Cultivo de hongos medicinales

en residuos agrcolas de la zona cafetera

28

Figura 22. Esterilizacin de los sustratos


utilizando vapor a presin
atmosfrica.
El tiempo de esterilizacin
depende de la cantidad de
material a esterilizar, de la
naturaleza y contenido de
humedad del sustrato, y de
la presencia de aire en las
bolsas.
En autoclaves pequeas (de
20 litros) pueden esterilizarse
6 kg de sustrato, durante
una hora a 121C, mientras
que en autoclaves medianas,
con capacidad de 144 litros,
pueden esterilizarse 24 kg de
sustrato, durante tres horas a
121C. Es importante estibar
las bolsas, de tal manera
que el vapor pueda circular
libremente alrededor de las
mismas.

9 cm de altura y un dimetro
de 47,5 cm, que soporte el
material y evite el contacto
directo de ste con el agua
que se adiciona para generar
el vapor.
Es conveniente poner entre
las bolsas y la parrilla una
tela gruesa para evitar el
contacto entre el metal y el
polipropileno de la bolsa,
debido a que el calor generado
puede romper los bloques del
sustrato (Figura 23).
Las bolsas deben estibarse
verticalmente y una vez

acomodado el primer nivel,


se coloca encima del mismo
una segunda parrilla de 4,5
cm de altura, con su respectiva
tela y sobre sta se acomoda
el segundo nivel de bolsas
(Figura 24). Paso seguido, se
pone a la olla una tapa con
un termmetro incorporado
para registrar la temperatura
del vapor y se le adiciona
un sobrepeso para reducir
las prdidas de vapor. Una
cinta de neumtico alrededor
de la tapa puede hacer ms
eficiente el proceso trmico
(Figura 25).

Para la esterilizacin artesanal


se utilizan ollas o recipientes
metlicos. Ollas metlicas
comerciales con un dimetro
de 64 cm y una altura de 59,5
cm, de 190 litros, tienen una
capacidad mxima de carga
de 60 kg de sustrato. A cada
olla es necesario adicionarle
25 litros de agua e incorporarle
Figura 23. Detalle del sistema de esterilizacin artesanal.
una parrilla metlica de

Cultivo de hongos medicinales

en residuos agrcolas de la zona cafetera

29

a.

b.

Figura 24. Primer nivel de bolsas (a),


segundo nivel de bolsas (b).

Figura 25. Termmetro para registrar la


temperatura en sistemas a
presin atmosfrica.
Una vez dispuesto el material
sobre una fuente de calor
(estufa de gas o lea), la
esterilizacin del sustrato
toma cinco horas, contadas
desde el momento en el cual
la temperatura registrada en
el termmetro sea igual a la
temperatura de ebullicin del
agua a las condiciones del sitio
de trabajo, que para la zona

cafetera vara entre 90 y 96C, aire (Figura 26). Tambin


es necesario colocar sobre
aproximadamente.
la mesa de inoculacin un
plstico a manera de mantel,
desinfestado previamente con
3.4. Etapa de Inoculacin
alcohol al 70%.
Para realizar la siembra, se
recomienda acondicionar
un lugar fcil de limpiar,
aislado y sin corrientes de

Cultivo de hongos medicinales

en residuos agrcolas de la zona cafetera

30

La semilla para la siembra debe


tener un color uniforme, pues
las vetas que se presentan en
algunas semillas son seal

de contaminacin. Adems,
sta no debe tener ms de
15 das de elaborada y si
est conservada en nevera
debe retirarse un da antes
de la siembra, con el fin de
que alcance la temperatura
ambiente.
Si el sustrato se esteriliz en
autoclave se aconseja utilizar
un recipiente desinfestado para
transportar el material hasta el
cuarto de inoculacin, y si fue

esterilizado artesanalmente,
puede llevarse el recipiente
hasta el cuarto de inoculacin
el da anterior a la siembra y
dejarlo tapado. De esta forma,
se enfra y se disminuyen los
riesgos de contaminacin por
microorganismos presentes en
el cuarto (Figura 27).
El operador debe utilizar
delantal, tapaboca, gorro y
guantes de ciruga limpios y la
siembra se hace en presencia

de un mechero de alcohol
encendido.
Los sustratos en forma de leo
deben sembrarse utilizando un
inoculador fabricado en acero
inoxidable, de 30 cm de largo,
con una cmara dosificadora
de 3 cm de alto y 2 cm de
dimetro (Figura 28). Antes de
su uso, ste debe esterilizarse
empacado en una bolsa de
polipropileno, junto con el
sustrato.

Figura 26. Aspecto del cuarto de


inoculacin

Figura 27. Material esterilizado y listo


para la siembra.

Figura 28. Inoculador utilizado para bloques


en forma de leo.

Cultivo de hongos medicinales

en residuos agrcolas de la zona cafetera

31

Las bolsas rectangulares se


inoculan con una cuchara
esterilizada previamente. Se
utiliza una tasa del 3,6% (36
gramos de semilla comercial
por cada kilogramo de sustrato
estril). El inoculador descrito
para sustratos en forma de leo
tiene capacidad de dispensar
4,5 gramos por aplicacin,
lo que implica realizar una
doble inoculacin en cada
una de las perforaciones de la
bolsa que contiene el sustrato
(Figura 29).
Tasas de inoculacin mayores
facilitan el establecimiento
de los hongos de inters,
p e r o r e s u l t a n costosas
cuando se compra la semilla
en laboratorios particulares.
Sin embargo, si el mismo

productor elabora la semilla


es aconsejable emplear tasas
de inoculacin entre el 5 y el
7,5%.
Para el caso de las bolsas
rectangulares la inoculacin se
realiza por la parte superior de
la bolsa utilizando una cuchara
(Figura 30).
En el presente trabajo se
e v a l u a r o n e n l a s 1 4
formulaciones de sustrato
(Tabla 6) tres cepas de shiitake:
dos cepas chinas (L13 y L54),
donadas por el Dr. S. T. Chang
(Investigador Chino); una cepa
coreana (L4055), donada
por el Dr. Porfirio Martnez
(Investigador Mexicano); y una
cepa de Ganoderma lucidum,
donada por el Dr. S. T. Chang.

3.5. Etapa de Incubacin


Durante esta etapa debe
facilitarse el crecimiento
micelial del hongo sobre el
sustrato. La incubacin debe
realizarse en un cuarto limpio y
previamente desinfestado con
solucin de formol comercial
al 0,3%. Posteriormente,
al cuarto se le espolvorea
carbonato de calcio en el piso
y en los anaqueles, para reducir
los riesgos de contaminacin
por hongos e insectos.
Es recomendable ubicar las
bolsas en estanteras metlicas,
plsticas o de madera (Figura
31).

Figura 29. Inoculacin de bloques con


forma de leo

Figura 30. Inoculacin de bloques con forma


rectangular.

Cultivo de hongos medicinales

en residuos agrcolas de la zona cafetera

32

Figura 31. Bolsas inoculadas con hongos


medicinales en la etapa de
incubacin.
Los cuartos utilizados para
la incubacin y fructificacin
de los hongos medicinales
son muy variados (Figura 32).
Muchas de las construcciones
existentes en las fincas pueden
adaptarse como reas de
incubacin y fructificacin,
debido a que el clima de
la zona cafetera permite
la utilizacin de cuartos
de cultivo sin aislamientos
trmicos, siempre y cuando
el productor tenga presente
las necesidades fsicas de la
cepa con la cual va a trabajar
(luminosidad, temperatura,
humedad relativa y ventilacin)
y la oferta ambiental del sitio
seleccionado.
Dentro de las construcciones
sin aislamiento trmico
se pueden utilizar las
denominadas construcciones
pesadas, fabricadas en ladrillo
o en placas de fibrocemento,
con techos en fibrocemento.
Estas construcciones deben
utilizarse necesariamente
en climas con temperaturas
medias superiores a los 27C,
donde tambin se requieren

sistemas de ventilacin forzada


(ventiladores), para proveer al
cultivo aire fresco durante la
incubacin y la fructificacin.

Los cuartos de construcciones


livianas deben tener ventilacin
natural, que se logra con
ventanillas inferiores forradas
en malla mosquitera que
permiten la entrada del aire
pero evitan el ingreso de
insectos, y un falso techo que
permite la salida del aire.

Un segundo tipo, son las


denominadas construcciones
livianas, fabricadas en guadua,
con paredes y techos de esterilla,
plstico o telas impermeables.
Cuando se utiliza plstico El tamao de los cuartos debe
deben seguirse las siguientes conservar una relacin de 1m3
de volumen de cuarto por cada
recomendaciones:
34,7 kg de sustrato de cultivo.
En zonas clidas, con
t e m p e r a t u r a s m e d i a s No se recomienda realizar
mayores de 23C, los la etapa de fructificacin
salones de incubacin en los mismos cuartos de
y fructificacin deben incubacin, dado que no todo
ser de plstico blanco el material puesto a incubar
(para reflexin de la luz) alcanza las condiciones de
y tener una capa de pasto fructificacin al mismo tiempo.
seco sobre el techo para Por ello, es importante dividir
regular la temperatura en la construccin en un rea
para la incubacin y otra
su interior.
En zonas fras con una para la fructificacin; stas
temperatura media entre reas deben estar separadas
12 y 18C, los salones por paredes de material,
de incubacin pueden esterilla o plstico (Figura
construirse con plstico 33). No deben mezclarse
negro y los salones de en las reas de incubacin
fructificacin en plstico y fructificacin hongos de
diferentes gneros.
transparente.

Cultivo de hongos medicinales

en residuos agrcolas de la zona cafetera

33

Figura 32. Cuartos utilizados en


el cultivo de hongos
medicinales.

Figura 33. Separacin de las reas de


incubacin y fructificacin.
3.5.1.Incubacin de shiitake.
La duracin de esta etapa
depende de la cepa utilizada y
oscila entre uno y cuatro meses.
En esta etapa no se requiere
luz; sin embargo, la exposicin
a cuatro horas de luz al da, al
final de la incubacin estimula
la formacin de los primordios
(5).

cortina de plstico negro que


se retira durante las horas en las
que es conveniente suministrar
luz a los bloques. Todas las
cepas de este hongo muestran
un crecimiento micelial ptimo
a una temperatura de 25C,
pero tambin crecen de
manera adecuada entre 21 y
27C (5).

crecimiento micelial, formacin


del abrigo micelial, formacin
de protuberancias de micelio,
pardeamiento del abrigo
micelial y ablandamiento del
bloque pigmentado.

Inmediatamente despus
de la inoculacin, el micelio
empieza a crecer en el sustrato
hasta colonizarlo (Figura
Es aconsejable ubicar las bolsas La incubacin de shiitake 34). Durante esta fase las
en estanteras cubiertas con una consta de cinco fases: enzimas del micelio se activan

Cultivo de hongos medicinales

en residuos agrcolas de la zona cafetera

34

rompiendo y transformando
las estructuras ms complejas
del sustrato (celulosa,
hemicelulosa, lignina) en
molculas ms simples que
son absorbidas por el hongo
como nutrimentos para su
crecimiento y propagacin
(5).

pueden causar problemas, si las


bolsas no estn perfectamente
selladas por las costuras, ya
que se generan corrientes de
aire que pueden transportar
los contaminantes presentes
en el ambiente, penetrando
a travs de las costuras de la
bolsa (25).

Durante esta etapa deben


controlarse dos factores
primordiales: la temperatura
y el tiempo de incubacin.
El micelio no soporta
temperaturas superiores a
28C (10). De igual forma, las
fluctuaciones de temperatura

El shiitake soporta los altos


contenidos de CO2 inducidos
por su propia actividad, sin
embargo, para su desarrollo
hace falta oxgeno suministrado
por el aire externo. En la prctica,
para bajar la temperatura debe
suministrarse aire suficiente

a.

el cual adems elimina el gas


carbnico (10).
En esta fase la humedad relativa
del cuarto de incubacin debe
mantenerse entre 80 y 85%,
para evitar que el sustrato se
reseque (10).
La segunda fase de la etapa
de incubacin corresponde
al abrigo micelial y consiste
en la formacin de una capa
gruesa de micelio blanco sobre
la superficie del sustrato (Figura
35). Esta fase ocurre entre
30 y 45 das despus de la
inoculacin y se favorece por
las altas concentraciones de
CO2 (5).

Figura 34. Fase de crecimiento micelial del shiitake durante


la etapa de incubacin. (a) 8 das despus de la
incubacin (ddi); (b) 15 ddi y (c) 30 ddi.
b.

c.

Figura 35. Formacin del abrigo micelial.

Cultivo de hongos medicinales

en residuos agrcolas de la zona cafetera

35

La tercera fase de la etapa de


incubacin corresponde a la
formacin de protuberancias
de varios tamaos sobre la
superficie del abrigo micelial, en
la mayora de las cepas (Figura
36). Los primordios aparecen
en estas protuberancias; sin
embargo, muchas se malogran
y no generan cuerpos
reproductores (5).

y la temperatura de incubacin.
Para las cepas evaluadas en
este trabajo el tiempo fluctu
entre 15 y 30 das despus de
la formacin del abrigo. Los
cambios de temperatura y las
altas concentraciones de CO2
estimulan la formacin de las
protuberancias. No obstante,
es necesario disminuir la
concentracin de CO2 dentro
del bloque cuando se observan
El tiempo de formacin de las demasiadas protuberancias,
protuberancias vara con la haciendo cortes en la bolsa.
cepa, la naturaleza del sustrato El CO2 afecta el tamao de

los hongos y la calidad de la


cosecha. En ningn caso debe
airearse el cuarto de incubacin,
por que se descompensara
la concentracin de CO2 al
interior de las bolsas (5).
La cuarta fase de la etapa
de incubacin corresponde
al pardeamiento del abrigo
micelial (Figura 37). Despus
de la pigmentacin del micelio
debe retirarse la bolsa que
cubre el bloque. El tiempo de
remocin de la bolsa es crucial,

Figura 36. Formacin de protuberancias en la


superficie del sustrato.

Figura 37. Pardeamiento del abrigo


micelial.

Cultivo de hongos medicinales

en residuos agrcolas de la zona cafetera

36

debido a que los rendimientos Existen varias formas de realizar


pueden afectarse si la bolsa se el choque trmico:
retira temprana o tardamente.
As mismo, la humedad relativa 1. Sumergiendo los bloques en
del cuarto de incubacin debe
agua a 12C durante dos a
mantenerse entre el 70 y el 80%
cuatro horas (5). Este es el
para evitar la contaminacin de
mtodo ms comn, ya que
los bloques despus de retirar
permite la disminucin de la
la bolsa. El aire aumenta el
temperatura de los bloques
pardeamiento de los bloques
y a su vez, su hidratacin. En
por la oxidacin (5).
la prctica, esta temperatura
se consigue adicionando
La quinta fase de la etapa de
trozos de hielo al agua de
incubacin se inicia cuando los
inmersin.
bloques se exponen al aire. El
micelio cambia a caf rojizo 2.Nebulizando agua en los
y eventualmente se forma
bloques (Watanabe citado
una superficie dura, seca, caf
por Chen) (5).
oscura con funciones similares
a las de las cortezas de los 3 . H a c i e n d o f l u c t u a r l a
rboles. El interior del sustrato
temperatura de los
comienza a ablandarse y se
bloques (5). Se consigue
humedece hasta alcanzar
refrigerando los bloques (6un 80%, humedad ideal
8C) o exponindolos a las
para la formacin de los
temperaturas nocturnas.
cuerpos fructferos (5). En este
momento debe estimularse la En el presente trabajo se
formacin de primordios en e n c o n t r a r o n r e s p u e s t a s
los bloques, por medio de un similares en la induccin
choque trmico.
de primordios, cuando se

disminuy la temperatura de
los bloques por refrigeracin
y exponindolos al aire
durante la noche. Una vez
realizado el choque trmico
los bloques se llevan al rea
de fructificacin.
3.5.2.Incubacin de
ganoderma. Los bloques de
sustrato pueden acomodarse
sobre las estanteras en
posicin horizontal o vertical.
Las estanteras deben permitir
el intercambio de aire (Figura
38).
Los factores ambientales como
la humedad, la luz, el oxgeno
y la temperatura son claves
para el desarrollo del hongo
(7). El crecimiento micelial
de ganoderma requiere unas
condiciones ambientales muy
diferentes a las que requiere
el hongo para la emisin
del cuerpo reproductor. Es
aconsejable que la incubacin
ocurra en ausencia de luz

De las tres cepas de shiitake


evaluadas, la cepa L54 tuvo el
menor tiempo de incubacin
(60 das en los mejores
sustratos), seguida de L13
(65 das) y finalmente, la cepa
L4055 (120 das). Esta ltima
se caracteriz porque adquiri
un muy bajo porcentaje de
pigmentacin en el sustrato.
Choque Trmico. Con este
proceso se busca inducir la
formacin de primordios,
disminuyendo la temperatura
de los bloques en 5C (30).

Figura 38. Disposicin de los bloques de


ganoderma.

Cultivo de hongos medicinales

en residuos agrcolas de la zona cafetera

37

para promover la formacin


y acumulacin de reservas
alimentarias para el hongo
como el glicgeno y los lpidos
(6).

Para la cepa de ganoderma


empleada en la presente
investigacin y para las
formulaciones de sustratos
que generaron cuerpos
reproductores, el tiempo de
La duracin de esta etapa incubacin vari entre 30 y
est limitada por la calidad 45 das.
de la cepa, la naturaleza del
sustrato y las condiciones A partir de este momento, el
ambientales. Ganoderma debe tiempo en el cual adquiere la
incubarse entre 20 y 30C. La tonalidad amarilla (indicativo
humedad relativa del cuarto del inicio de la etapa de
de incubacin entre 60 y 70%. fructificacin) fue variable
Para este hongo se alcanzan para los diferentes sustratos
tiempos de incubacin de (Figura 40).
dos meses como mnimo
(Figura 39). En esta etapa no Una vez adquieran la tonalidad
se necesita luz ni se requieren amarilla los bloques de
cambios de aire en el cuarto. sustrato se llevan al cuarto

de fructificacin para iniciar


la etapa de desarrollo del
cuerpo fructfero. Los bloques
de sustrato no requieren de
choque trmico.
3.6. Etapa de fructificacin
y cosecha.
3.6.1. Fructificacin y cosecha
de shiitake. La formacin del
basidiocarpio de shiitake
comprende las siguientes fases:
formacin de los primordios
(Figura 41), desarrollo del
primordio en un hongo joven
(Figura 42), elongacin del
estipe y crecimiento del pleo

Figura 39. Incubacin de los bloques de


ganoderma.

Figura 40. Bloques de ganoderma listos para


iniciar fructificacin.

Cultivo de hongos medicinales

en residuos agrcolas de la zona cafetera

38

(Figura 43), crecimiento del


hongo y desarrollo de la
coloracin parda (Figura 44), y
apertura del sombrero (punto
de cosecha, cuando el borde
del sombrero an conserva
su curvatura hacia el interior)
(Figura 45).

sustrato una vez se encuentren


los bloques en el rea de
fructificacin (Figura 46), con
el fin de exponerlos al aire.
La temperatura del ambiente
debe estar entre 13 y 20C y
la humedad relativa del cuarto
entre 85 y 95%, para evitar
la deshidratacin del bloque
Las altas concentraciones de (25).
CO 2 inhiben la formacin
de los primordios; por Despus de la eliminacin de
tanto, es necesario retirar el las bolsas, los bloques deben
polipropileno que cubre el humedecerse abundantemente

(Figura 47).Enestaetapatambin
es necesaria la luz, por tanto,
los hongos deben iluminarse las
24 horas; en la noche pueden
utilizarse lmparas tipo luz da
(alrededor de 100-200 lux).
La temperatura afecta la
velocidad de desarrollo y el
nmero de hongos alcanzados
en cada flujo de cosecha;
mientras que la luz es necesaria
para el desarrollo del color de
los sombreros.

Figura 41. Formacin de los primordios


de shiitake.

Figura 42. Hongo joven.

Figura 43. Alargamiento del pie.

Cultivo de hongos medicinales

en residuos agrcolas de la zona cafetera

39

Figura 44. Crecimiento del hongo


shiitake.

Figura 45. Hongos shiitake listos


para ser cosechados.

Figura 46. Bloques sin bolsa expuestos en


el cuarto de fructificacin.

Figura 47. Riego de los bloques expuestos


en el cuarto de fructificacin.

Cultivo de hongos medicinales

en residuos agrcolas de la zona cafetera

40

El CO2 generado por la actividad


del micelio puede inhibir
o deformar los carpforos,
por tanto, debe ingresar aire
nuevo en el cuarto a razn
de 50 a 70 m3 de aire nuevo/
hora/tonelada de sustrato,
y la humedad relativa debe
alcanzar niveles entre 90 y
98%. Es recomendable para
una buena distribucin del aire
utilizar un ducto fabricado con
plstico tubular, que atraviese
el cuarto por la parte central
superior y que est perforado
a lo largo del mismo.
En cultivos pequeos donde el
volumen ocupado por las bolsas
sea menor al 5% del volumen
del cuarto de incubacin, una
ventana permite el intercambio
natural del aire. Esta debe

estar cubierta por una malla


mosquitera. El aire se renueva
abriendo la ventana dos o tres
veces al da durante una hora
cada vez.
El estadio de prefructificacin
dura alrededor de ocho a diez
das, y los primeros hongos
aparecen entre los cuatro y
cinco das siguientes.

torsin en la base del estipe del


hongo para desprenderlo del
bloque. De esta forma se evitan
posibles contaminaciones en
el sustrato sobre el rea donde
creci el cuerpo fructfero.

Los bloques cosechados se


dejan en reposo durante 8
das en un sitio seco (Figura
48), con una humedad relativa
entre 30-50% y temperatura
Para recolectar los hongos, es media de 21C.
necesario reducir la humedad
relativa del cuarto al 60%, P o s t e r i o r m e n t e , a l o s
entre 6 y 12 horas antes de la bloques se les realiza un
cosecha, con el fin de favorecer segundo choque trmico,
la vida de anaquel de los sumergindolos en agua
hongos cosechados (5).
durante 24 horas para
estimular de nuevo la
La cosecha de los hongos formacin de primordios
se realiza manualmente, (Figura 49). Despus, se
ejerciendo una fuerza de t r a s l a d a n a l c u a r t o d e
fructificacin para promover
la segunda cosecha, que se
maneja de forma idntica a
la primera (Figura 50).

Figura 48. Bloques en reposo para


segunda cosecha.

Figura 49. Inmersin de los bloques en agua


durante 24 horas.

Cultivo de hongos medicinales

en residuos agrcolas de la zona cafetera

41

3.6.2. Fructificacin y cosecha


de ganoderma. La formacin
de los cuerpos fructferos
requiere de temperaturas
mayores de 20C y una
humedad relativa cercana
al 95%. Las necesidades de
oxgeno y de luz dependen
de las diferentes etapas de
crecimiento del carpforo. ste
se desarrolla a temperaturas
entre 20 y 34C, y de manera
ptima entre 27 y 32C.
Figura 50. Aspecto de los carpforos de
Temperaturas menores a 20C
shiitake de segunda cosecha.
o superiores a 34C pueden
Una vez recolectada la segunda La cosecha de las diferentes
deformar los sombreros o
cosecha se llevan los bloques cepas de L. edodes evaluadas
inhibir el crecimiento (6).
nuevamente a reposo durante en el trabajo, se realiz 5 das
una semana y se realiza un tercer despus del choque trmico.
El cuarto de fructificacin
choque trmico, sumergiendo No se observaron diferencias
los bloques en agua durante en la formacin de primordios debe mantener una humedad
24 a 48 horas y se contina sobre los bloques, cuando estos relativa entre 90 y 95%
con el manejo del cultivo tal se sometieron a inmersin durante la induccin de
los primordios (Figura 51),
como se hizo para la segunda durante 24 y 48 horas.
entre el 70 y 80% durante el
cosecha. El procedimiento se
repite hasta obtener la cuarta Los bloques de sustrato de crecimiento del estipe (Figura
o quinta cosecha dependiendo 1 kilogramo absorben en 52), entre el 85 y 95% durante
de la productividad de la cepa promedio de 250 mL de agua/ el crecimiento del sombrero
y del sustrato. El material final bloque para las diferentes (Figura 53) y entre 50 y 60% en
se dispone de acuerdo a las cepas evaluadas y para las 14 la etapa final de desarrollo del
recomendaciones que se dan formulaciones de sustrato, en cuerpo reproductor (Figura
cada choque trmico.
54).
en el Captulo 4.

Figura 51. Induccin de primordios de


G. lucidum.

Cultivo de hongos medicinales

en residuos agrcolas de la zona cafetera

42

Figura 52. Crecimiento del estipe de


G. lucidum.

Figura 53. Crecimiento del sombrero


de G. lucidum.

Figura 54. Fase final de formacin del


carpforo de G. lucidum.

Cultivo de hongos medicinales

en residuos agrcolas de la zona cafetera

43

Durantelaformacin del cuerpo


fructfero es indispensable
suministrar luz, entre 50 y 450
lux, con lmparas de luz-da
o mediante ciclos da/noche;
sin embargo, debe evitarse la
luz directa sobre el cultivo.
Intensidades de luz cercanas
a 450 lux permiten obtener
cuerpos reproductores con
estipes cortos y crecimiento del
sombrero en menor tiempo, en
contraste, intensidades de luz
en el rango bajo (cercano a 50
lux) permiten la elongacin del
pie y se requiere un tiempo
mayor para la formacin del
sombrero (6).

medad relativa del cuarto es


alta, de tal manera que se disminuyan la humedad relativa al
40%. En la Tabla 8 se presentan
los requerimientos ambientales
de ganoderma durante la etapa
de fructificacin.
En general, el tiempo que
transcurre desde la siembra
hasta la cosecha del cuerpo
fructfero para el hongo
ganoderma, est entre tres y
cinco meses.
3.7. Evaluacin de la
produccin.

En la fase final de crecimiento


del hongo debe contarse con Para evaluar la produccin de
muy buena ventilacin del las diferentes cepas de hongos
cuarto, sobre todo si la hu- medicinales sobre los diversos

sustratos, se consideraron los


parmetros de precocidad,
eficiencia biolgica media,
rendimiento medio y prdidas
del proceso.
La eficiencia biolgica media
se define como la media
aritmtica de la relacin entre
el peso fresco de los hongos
cosechados y el peso seco
del sustrato de las bolsas
productivas, multiplicada por
cien. Este parmetro es de
gran importancia en el cultivo
de los hongos, debido a que
permite determinar el potencial
biolgico de los sustratos para
producir hongos, pues en
muchos casos las prdidas de
cultivo se presentan por causas
externas al sustrato y al material
biolgico.

Tabla 8. Parmetros ambientales adecuados para el crecimiento de G. lucidum durante la


etapa de fructificacin

Cultivo de hongos medicinales

en residuos agrcolas de la zona cafetera

44

La precocidad se define como


el tiempo que transcurre entre
la inoculacin de los sustratos
y el momento en que aparecen
los primeros carpforos. Esta
variable determina la duracin
de los ciclos de cultivo.
El rendimiento medio se define
como la media aritmtica de
la relacin entre el peso fresco
de los hongos cosechados y
el peso seco del sustrato de
todas las bolsas sembradas,
multiplicado por cien. Las
prdidas del proceso se
definen como la relacin
entre el nmero de bolsas no
productivas y el nmero total de
bolsas inoculadas, multiplicado
por cien. Estos dos parmetros
proporcionan informacin
sobre la rentabilidad del
cultivo.

experimentales, cada una de


las cuales estuvo conformada
por un bloque de sustrato
inoculado, de un kilogramo
de peso (29).
3.7.1. Evaluacin de la
produccin de shiitake. A
continuacin se presentan los
resultados del cultivo de tres
cepas de shiitake: L13, L54 y
L4055, sobre 14 formulaciones
de sustrato esterilizado en
autoclave a 121C o con
tratamiento trmico en forma
artesanal a 94,5C.

En la Tabla 9, se presentan
los resultados relacionados
con los valores medios del
rendimiento, la eficiencia
biolgica, las prdidas de
proceso y la precocidad,
para la cepa L13, slo en las
formulaciones productivas
Para cada formulacin y cada en los dos procesos de
cepa se evaluaron 30 unidades esterilizacin.

Los tratamientos T1, T2 y T7,


tuvieron mayores rendimientos
medios cuando el sustrato se
someti a tratamiento trmico,
que cuando se esteriliz.
Para el caso del tratamiento
T3, se obtuvo un mayor
rendimiento medio con el
sustrato esterilizado. Los
rendimientos medios por
encima del 50%, definido
como el valor lmite para el
establecimiento de cultivos
comerciales, se obtuvieron con
las formulaciones T2 (57,6%)
y T1 (49,6%), con tratamiento
trmico.
El mayor rendimiento medio
entre tratamientos lo tuvo
el T2, (que contena 28%
de aserrn, 50% de borra y
19% de salvado de maz),
con un valor de 57,6%, en
la formulacin sometida a
tratamiento trmico (Figura
55).

Tabla 9. Evaluacin del cultivo de L. edodes (L13), sobre diferentes formulaciones de


sustrato.

Cultivo de hongos medicinales

en residuos agrcolas de la zona cafetera

45

Figura 55. Carpforos de L13 sobre la


formulacin del sustrato T2.
De acuerdo con la relacin
C/N, los mayores rendimientos
para esta cepa se obtuvieron
en las formulaciones de los
sustratos con una relacin C/N
de 40 (T1, T2 y T3).
En la Tabla 10, se presentan los
resultados relacionados con
las variables de produccin
evaluadas para la cepa L54, en
las formulaciones productivas
sometidas tanto a tratamiento
trmico como esterilizadas.

El mayor rendimiento medio


entre tratamientos, lo obtuvo
el tratamiento T7 (que
contena 58% de aserrn, 30%
de borra y 10% de salvado
de maz), en la formulacin
esterilizada (Figura 56). Para
las formulaciones productivas
se observ que en los
tratamientos T3 y T11, los
rendimientos medios fueron
superiores cuando el sustrato
se someti a tratamiento
trmico a 94,5C, que cuando

se esteriliz. Para el caso de


los tratamientos T2 y T7 se
obtuvo un mayor rendimiento
medio con el sustrato
esterilizado, y para T1 los
rendimientos medios fueron
similares en ambos casos.
Para esta cepa se encontraron
seis formulaciones con
rendimientos medios por
encima del 50%, establecido
como el valor mnimo para el
establecimiento de cultivos
comerciales.

Tabla 10. Evaluacin del cultivo de L. edodes (L54), sobre diferentes formulaciones de
sustrato.

Cultivo de hongos medicinales

en residuos agrcolas de la zona cafetera

46

Figura 56. Carpforos de L54 sobre la


formulacin de sustrato 7,
esterilizada.
Para esta cepa los rendimientos
fueron superiores al 50% en las
formulaciones con relaciones
C/N de 40 y 50. De igual
manera, se observ que
contenidos de borra de caf
inferiores al 50% mezclados
con contenidos de aserrn del
tallo del caf superiores al 28%
permiten alcanzar los mayores
rendimientos.
Los resultados de los valores
medios de rendimiento,
la eficiencia biolgica, las
prdidas de proceso y la
precocidad para la cepa L4055,

slo en las formulaciones similares en ambos procesos


productivas se observan en la trmicos del sustrato.
Tabla 11.
Los mejores rendimientos se
Para la cepa L4055, el mayor obtuvieron en los sustratos
rendimiento medio entre con una relacin C/N de
tratamientos se obtuvo con 40 (Tratamientos 1, 2 y 3) y
el T2 (que contena 28% de dentro de esta relacin, los
aserrn, 50% de borra y 19% de rendimientos fueron ms altos
salvado de maz) con un valor cuando la borra de caf estuvo
de 75,7%, en la formulacin en una mayor proporcin que
esterilizada (Figura 57). Los las otras materias primas en el
tratamientos T1 y T3 mostraron sustrato.
rendimientos medios superiores
cuando el sustrato se esteriliz. Rendimientos medios: Al
Para el caso de T2, T7 y T11, comparar los rendimientos
los rendimientos medios fueron medios de las tres cepas de

Tabla 11. Valores medios de rendimiento, eficiencia biolgica, prdidas de proceso y precocidad
para la cepa L. edodes (L4055).

Cultivo de hongos medicinales

en residuos agrcolas de la zona cafetera

47

con el tratamiento T2(E) con un


valor de 75,7%. Sin embargo,
las cepas y las formulaciones
que presentaron porcentajes
de rendimiento medio mayores
a 50%, tambin son adecuadas
para el establecimiento de
los cultivos comerciales de
shiitake.

Figura 57. Carpforos de L4055 sobre la


formulacin 2, esterilizada.
L. edodes, en las diferentes
formulaciones sometidas tanto
a tratamiento trmico como
a esterilizacin (Figura 58), se
observ que las cepas L4055
y L54, cultivadas sobre las

formulaciones T1, T2, T3 y


T7, alcanzaron rendimientos
medios superiores al 50% en el
cultivo del hongo L. edodes.
El mayor rendimiento medio
se obtuvo con la cepa L4055

De las 14 formulaciones
con las cuales se obtuvo un
rendimiento igual o superior
al 50%, ocho de los sustratos
tuvieron un tratamiento trmico
y el resto se esterilizaron. Esto
muestra la homogeneidad
de los tratamientos trmicos,
pues en el proceso de
esterilizacin durante tres
horas se entregaron 90 Kcal/kg
de sustrato y en el tratamiento

Rendimiento medio de las cepas de Lentinula edodes, con


tratamiento trmico 94,5C y esterilizadas a 121C. Fuente:
Rodrguez (29).

Cultivo de hongos medicinales

en residuos agrcolas de la zona cafetera

48

trmico durante un tiempo


global de 9,25 horas, la
cantidad de Kcal/kg, estuvo
muy cercana a este valor al
promediar todos los ensayos
realizados (97,5 Kcal/kg,
n=14, CV=14,6%)(29).

sustratos con relaciones C/N


de 60, alcanzaron rendimientos
medios superiores al 50%.
Esto indica que la viabilidad
econmica del cultivo de
hongos est condicionada por
la relacin C/N.

Este aspecto es de gran


importancia en el cultivo
artesanal de shiitake pues segn
los resultados obtenidos en los
diferentes trabajos, puede
decirse que los productores
no necesitan de autoclaves
para adecuar los sustratos
para la siembra de los hongos
medicinales.

con los sustratos sometidos a


tratamiento trmico. Aunque
el tiempo global del ciclo
del shiitake fue similar para
el cultivo en los sustratos
en ambos tratamientos. Este
hecho se explica por la mayor
liberacin de azcares que se
presenta en la esterilizacin
que favorece los tiempos de
incubacin y por tanto, la
formacin de primordios.

Precocidad: En la Figura 59 se
muestra la precocidad de las
tres cepas de L. edodes sobre
las diferentes formulaciones,
manejadas con tratamiento
trmico y esterilizadas.
Evaluacin de las materias
primas: Durante la
E n t r m i n o s g e n e r a l e s , investigacin se evalu el
los sustratos esterilizados rendimiento de cultivo en
permitieron una mayor las materias primas utilizadas
precocidad de las cepas para la conformacin de los
Ninguna de las tres cepas de evaluadas, en promedio 15 sustratos (aserrn del tallo de
L. edodes evaluadas en los das antes que las encontradas caf, borra y pulpa de caf).

Precocidad de las cepas de Lentinula edodes, con tratamiento


trmico a 94,5C y esterilizadas a 121C. Fuente: Rodrguez
(29).

Cultivo de hongos medicinales

en residuos agrcolas de la zona cafetera

49

Con los bloques que contenan


aserrn de tallo de caf se
obtuvo una eficiencia biolgica
media de las cepas de L. edodes
del 17,1% con una relacin C/N
de 75, mientras que para la
borra de caf la eficiencia fue
del 16,9% con una relacin
C/N de 31. Para el primer caso
la eficiencia estuvo limitada
por los bajos contenidos de
nitrgeno y para el segundo,
por las caractersticas fsicas
del sustrato, el cual fue muy
denso. En la pulpa de caf no se
obtuvieron fructificaciones.
Zadrazil (44), afirma que sobre
un sustrato de paja de cereal
con una relacin C/N de 100,
el primer cuerpo fructfero se
forma despus de 109 das de
incubacin y puede producir
7,8% del peso seco del sustrato
en el primer flujo de cosecha,
lo que lleva a obtener una
eficiencia cercana al 29%, si se
relaciona con la materia seca
de los sustratos evaluados en
este trabajo. Mientras que en
un sustrato de aserrn (relacin
C/N de 500), la formacin del
cuerpo fructfero toma mayor
tiempo. Esto indica que la
adicin de componentes ricos
en protena podra reducir el
tiempo de cultivo.
Comparacin con otros
trabajos de investigacin. Con
la cepa de shiitake LPB 02, Leifa
et al. (16), reportan eficiencias
biolgicas medias de 85,76%
sobre cascarilla de caf, de
88,64% sobre borra de caf y
de 78,36% sobre una mezcla
1:1 de cascarilla y borra. Varn

(42), obtuvo rendimientos


medios de 38,1% para el
hongo L. edodes (L4055) sobre
un sustrato conformado con
borra de caf, bagazo de caa
y cascarilla de arroz.

y eficiencias del 8% y tiempos


de proceso de 104 das cuando
se emple como suplemento
un 30% de salvado de trigo.

Royse y Snchez (35), utilizando


un sustrato que contena 50%
de aserrn de roble americano,
28% de millo, 11% de salvado
de trigo y 11% de centeno,
reportan eficiencias biolgicas
medias que oscilaron entre el
64,9 y el 86,4% para la cepa
R26 de L. edodes, utilizando
0, 0,2, 0,4 y 0,6% de CaCO3
como suplemento. De igual
manera para el cultivo de
shiitake, Delpech y Oliver (10),
afirman que pueden obtenerse
rendimientos promedios
del 20% (20 kg de hongos
frescos por 100 kg de sustrato
sembrado), equivalentes a
rendimientos del 50% si se
utiliza para el clculo el peso
seco de los sustratos evaluados
en este estudio.

3.7.2. Evaluacin del


cultivo de ganoderma. En
la Tabla 12, se presentan
los resultados relacionados
con los valores medios
de rendimiento, eficiencia
biolgica, prdidas de proceso
y precocidad, para el hongo
Ganoderma lucidum sobre
las formulaciones productivas,
cuando stas se sometieron
tanto a tratamiento trmico
como a esterilizacin.

Para este hongo se encontraron
los mejores rendimientos
medios sobre la formulacin
T12 sometida a tratamiento
trmico (13,1%) (Figura 60),
seguida de T1 esterilizada
(12,07%) (Figura 61), T3
esterilizada (11,10%) (Figura 62)
y finalmente, T12 esterilizada
(10,81%) (Figura 63).

Para la eficiencia biolgica,


Salmones et al.(38), reportan
valores entre 130 y 133% con
el cultivo de cepas de L. edodes
sobre bagazo de caa, entre 83
y 98% sobre hojas de caa y
entre 36 y 37% sobre coronas
de pia. Estos autores no
obtuvieron fructificacin del
hongo cuando lo sembraron
en cascarilla de caf. Sobre
sustratos como corcho, Rui et
al. (37), reportan eficiencias
biolgicas del orden del
24,8% y tiempos de proceso
de 157 das cuando ste se
constituy en el nico sustrato,

Ganoderma puede cultivarse


sobre los subproductos del
cultivo e industrializacin
del caf que presenten una
relacin C/N entre 40 y 60, y
contenidos de pulpa de caf
que no sobrepasen el 15% de
la conformacin del sustrato.
De esta forma, se generan
alternativas viables para los
caficultores en el cultivo del
hongo medicinal, ya que
las formulaciones T12, T13
y T14, son apropiadas para
productores alejados de los
sitios de produccin de borra,
pues el contenido de sta en el

Cultivo de hongos medicinales

en residuos agrcolas de la zona cafetera

50

Tabla 12. Evaluacin del cultivo de G. lucidum, sobre diferentes formulaciones de sustrato y
tratamientos de esterilizacin.

tratamiento T12 es nicamente


del 11,5% y los tratamientos
T13 y T14 no la tienen como
componente del sustrato.
Adems, estas formulaciones
no contienen salvado de maz

pero s pulpa de caf, lo que las de caf permitieron obtener


unas eficiencias biolgicas
hace ms econmicas.
medias del hongo G. lucidum
Evaluacin de las materias del 9,9% (C/N de 75) con
primas. Los bloques que una precocidad de 230 das,
contenan aserrn de tallo mientras que con la borra y la
pulpa de caf no se obtuvieron
fructificaciones del hongo.
A pesar de que con el
aserrn del tronco del cafeto
se obtuvieron eficiencias
biolgicas medias similares a
las conseguidas en las mejores
formulaciones, la precocidad
de los hongos en este sustrato
es tres meses ms tarda,
lo cual es una desventaja
desde el punto de vista de la
rentabilidad del cultivo.

Figura 60. G. lucidum cosechado sobre T12 (TT).

Cultivo de hongos medicinales

en residuos agrcolas de la zona cafetera

51

Figura 61. G. lucidum cosechado sobre


T1 (E).

Figura 62. G. lucidum cosechado sobre T3


(E).

Figura 63. G. lucidum cosechado sobre


T12 (E).
Suplementacin de las
formulaciones. En ensayos
realizados con algunos bloques
de sustrato utilizando una
formulacin con 35% de
aserrn del tronco del caf,
35% de borra de caf, 17%
de salvado de trigo y 10%
de cascarilla de algodn,
se obtuvo una eficiencia
biolgica media de 16,3%
y una precocidad de 180

das. Por tanto, es importante


considerar la adicin de
cascarilla de algodn al sustrato
para mejorar los rendimientos
del cultivo de ganoderma
(13).
Rendimiento medio: En la
Figura 64 se observa que el
mejor rendimiento medio con
ganoderma fue de 13,1%,
valor que se alcanz con

Cultivo de hongos medicinales

en residuos agrcolas de la zona cafetera

52

la formulacin T12 con el


tratamiento trmico. Sin
embargo, las formulaciones
que presentaron porcentajes
de rendimiento medio
mayores al 5%, establecido
como el valor mnimo
para generar rentabilidad,
tambin son adecuadas para
el establecimiento de los
cultivos comerciales de este
hongo.

Eficiencia y rendimiento medio de Ganoderma lucidum, producido


en diferentes formulaciones de sustratos, esterilizados en autoclave
(E) y con tratamiento trmico (TT). Fuente: Rodrguez (29).
De las 17 formulaciones
con las cuales se obtuvo
el 5% de rendimiento,
ocho tuvieron tratamiento
trmico y las restantes se
esterilizaron, resultados que
muestran la homogeneidad
de los tratamientos para la
esterilizacin del material.
Aspecto de gran importancia
en el cultivo artesanal
de G. lucidum, pues los
productores no necesitaran
de autoclaves para adecuar
los sustratos.
Precocidad: En la Figura 65
se muestra la precocidad
de G. lucidum sobre las
diferentes formulaciones. Las
formulaciones productivas T1,

T2, T4 y T7 mostraron una mayor


precocidad del hongo en los
sustratos esterilizados, mientras
que con las formulaciones T8,
T11 y T14 la mayor precocidad
ocurri en los sustratos con
tratamiento trmico. En las
formulaciones T3, T12 y T13 la
precocidad de ganoderma fue
similar para ambos sistemas de
adecuacin del sustrato.
Comparacin con otros
trabajos de investigacin. En
sustratos como el corcho, Rui
et al. (37), reportan eficiencias
biolgicas en el cultivo de G.
lucidum del orden de 0,14%
y precocidades de 165 das,
cuando ste fue el nico sustrato
empleado para el crecimiento

Cultivo de hongos medicinales

en residuos agrcolas de la zona cafetera

53

del hongo, y eficiencias y


precocidades de 0,2% y 145
das, respectivamente, cuando
se suplement con un 30% de
salvado de trigo.
Yang et al. (43), utilizaron grano
de arroz residual de destilera
mezclado con aserrn de Acacia
para el cultivo de G. lucidum
en bolsas de polipropileno,
encontrando que con una
formulacin del 80% de
aserrn de Acacia y 20% de
grano residual de destilera
y una humedad del 60%, se
alcanzan en promedio 23,97
gramos de carpforos secos y 2
cuerpos fructferos por bloque.
Los resultados obtenidos en la
presente investigacin estn

Precocidad de Ganoderma lucidum producido en diferentes


formulaciones de sustratos, esterilizados en autoclave y con
tratamiento trmico. Fuente: Rodrguez (29).

acordes con los reportados


por estos autores, ya que el
mejor tratamiento fue el T12
que contena 78% de aserrn
de tallo de caf, 11,5% de
pulpa de caf y 11,5% de
borra de caf y una humedad
del 59,10%, alcanzando una
produccin media de 18,75
gramos de carpforos secos y 2
cuerpos fructferos/bloque.
3.8. Manejo postcosecha.
El estado de madurez de
cosecha para el shiitake se
alcanza cuando los bordes
del pleo muestran una ligera

inclinacin hacia el interior y en


el caso de ganoderma, cuando
la franja de color amarillo de
los bordes del pleo adquieren
una coloracin ocre. A los
hongos recolectados se les
retir la base del estipe que
contena residuos del sustrato
(Figura 66).

40C hasta alcanzar un peso


constante, momento en el
cual se empacaron en bolsas
de polipropileno selladas
con calor, empaque en el
que los hongos conservaron
su textura hasta despus de
un ao de almacenamiento
(Figura 68). Todos los
carpforos de G. lucidum se
Una parte de los hongos de L.
deshidrataron a 40C, para su
edodes se empac en bandejas
de icopor cubiertas con papel almacenamiento.
vinilpel y se refrigeraron a
4C (Figura 67), alcanzando Medidas biomtricas: El
en promedio una vida til tamao de los hongos es un
de anaquel de 15 das (CV= atributo importante para su
27,5%). La otra parte de comercializacin, sobre todo
los hongos cosechados se cuando se trata de mercados
deshidrataron en una estufa a internacionales.

Cultivo de hongos medicinales

en residuos agrcolas de la zona cafetera

54

Figura 66. Hongos shiitake listos para


empacarlos.

Figura 67. Hongos shiitake empacados en


bandejas de icopor.

Figura 68. Hongos shiitake deshidratados


y empacados.
En la Tabla 13 se presenta
el promedio del peso de los
hongos y el tamao medio
del pleo para las cepas de
L. edodes cultivadas en las
diferentes formulaciones.

En trminos generales, los


hongos de L. edodes que
presentaron los mayores
valores de peso medio y
dimetro medio fueron los
procedentes de la cepa L13
(Figura 69), seguidos de la

Cultivo de hongos medicinales

en residuos agrcolas de la zona cafetera

55

cepa L4055 (Figura 70) y de


la cepa L54 (Figura 71). En
la Figura 72 se compara el
tamao de los carpforos
obtenidos de las tres cepas
de shiitake estudiadas en el
presente trabajo.

Tabla 13. Medidas biomtricas de las cepas de L. edodes, procedentes de las cepas evaluadas
sobre diversas formulaciones de sustratos.

Figura 69. Carpforos de shiitake cepa L13,


de 1a, 2a y 3a cosecha.

Cultivo de hongos medicinales

en residuos agrcolas de la zona cafetera

56

Figura 70. Carpforos de shiitake cepa L4055,


de 1a y 2a cosecha.

Figura 71. Carpforos de shiitake cepa L54,


de 1a, 2a y 3a cosecha.

Figura 72. Carpforos de shiitake cepas L13,


L54 y L4055.
Royse y Snchez (35),
utilizando un sustrato que
contena 50% de aserrn de
roble, 28% de millo, 11%
de salvado de trigo y 11%
de centeno, reportan pesos
medios de los carpforos entre
14,7 y 16,8 gramos, para la
cepa R26 de L. edodes.

En la Tabla 14 se presentan
los valores de las medidas
biomtricas para los hongos
de G. lucidum de todas las
formulaciones productivas.

fue la T12, con un promedio


del peso de los hongos de
39,8 gramos, seguida de las
formulaciones T1 (30,5 g) y
T14 (27, 5 g). De igual manera,
con la formulacin T12 se
De todas las formulaciones, presentaron los hongos con
la que permiti el desarrollo mayor dimetro medio (10 x
de los hongos de mayor peso 5,2 cm).

Cultivo de hongos medicinales

en residuos agrcolas de la zona cafetera

57

Tabla 14. Medidas biomtricas de las cepas de G. lucidum , obtenidos sobre diversas
formulaciones de sustratos.

3.9. Anlisis bromatolgico Para la cepa L13 el mayor


y de minerales de los c o n t e n i d o d e p r o t e n a
hongos medicinales.
se obtuvo en los hongos
producidos sobre la
formulacin T2 (19,00%),
En la Tabla 15, se encuentran los para la cepa L54 en los
resultados de la caracterizacin hongos obtenidos sobre las
bromatolgica y de minerales formulaciones T1 y T2 (18,00%)
realizada a las diferentes y para la cepa L4055 en los
cepas de L. edodes cultivadas hongos que se desarrollaron
sobre las formulaciones T1, sobre la formulacin T1
T2 y T3.
(16,43%). Los valores de

Cultivo de hongos medicinales

en residuos agrcolas de la zona cafetera

58

protena obtenidos estn


dentro del rango reportado por
Rodrguez (31), para hongos
producidos sobre subproductos
de caf, quien encontr valores
entre 17,5 y 18,0% para los
hongos obtenidos sobre la
formulacin T1.
Se encontr un mayor
contenido de protena en
los hongos de la cepa L54

Tabla 15. Anlisis bromatolgico y de minerales del hongo comestible y medicinal L. edodes.

en comparacin con la cepa


L4055, las cuales son las ms
recomendables para instalar
el cultivo en la zona cafetera,
debido a que presentan
rendimientos superiores al
50%. El contenido de protena
de la cepa L54 producida sobre
las formulaciones T1 y T2 fue
de 18,0%, y el de la cepa

L4055 fue del 16,4% sobre la En la variable contenido de


formulacin T1 y del 15,5% grasas se observa que la cepa
sobre la formulacin T2.
L54 tuvo un mayor contenido
de grasa que la L4055 (Tabla
Los valores de fibra encontrados 15). Sin embargo, todas las
para las diferentes cepas de cepas de shiitake presentaron
shiitake fueron superiores a los valores de grasas entre 1,58
reportados por Chang y Miles y 1,99%, inferiores a las
(4), quienes reportan valores reportadas por Chang y Miles
entre 7,3 y 8,0%.
(4), en el rango 4,9 a 8,0%.

Cultivo de hongos medicinales

en residuos agrcolas de la zona cafetera

59

En la Tabla 16 se presentan los


resultados de la caracterizacin
bromatolgica y de minerales
realizada para el hongo
G. lucidum cultivado en
las diferentes formulaciones
de sustratos.

El mayor contenido de protena


se obtuvo en los hongos
producidos en la formulacin
T3 (13,93%), seguido de la
formulacin T1 (12,96%).
Estos valores de protena estn
en el rango reportado por
Rodrguez (31), para hongos

cultivados sobre subproductos


de caf (de 13,8 a 15,7%). Yang
et al. (43), reportan valores
de protena cruda de 18,4 y
15,51% para carpforos de
G. lucidum sembrados sobre
un sustrato a base de aserrn
de Acacia.

Tabla 16. Anlisis bromatolgico y de minerales del hongo medicinal G. lucidum, desarrollados
sobre tres formulaciones de sustratos.

Cultivo de hongos medicinales

en residuos agrcolas de la zona cafetera

60

4. TRATAMIENTO Y DISPOSICIN DE LOS RESIDUOS DEL CULTIVO

El cultivo de los hongos


medicinales busca generar
productos que ayuden a
mantener la salud de las
personas y dada su
caracterstica saproftica,
proteger el medio ambiente
al evitar el impacto negativo
que generaran los residuos
orgnicos slidos cuando no
son aprovechados.

obtenidos a partir de las


formulaciones con una relacin
C/N de 40, fue finalmente de
24, equivalente a un 60% de
la relacin inicial. De acuerdo
con la caracterizacin anterior
y teniendo en cuenta el
alto contenido de nitrgeno
presente en los residuos, estos
sustratos podran reciclarse,
combinndolos con aserrn
de tallo de caf, para alcanzar
relaciones C/N en el rango
entre 40 y 60, y utilizarlos
para el cultivo de hongos
del gnero Pleurotus y de
Ganoderma lucidum.

En la Tabla 17 se observan los


resultados de la caracterizacin
bromatolgica realizada a los
bloques residuales del cultivo
de las cepas de shiitake
L13, L54 y L4055, en las
formulaciones T1, T2 y T3.
Otra alternativa de manejo
de este subproducto es la
El cultivo de las diferentes lombricultura, con la cual
cepas de L. edodes sobre se generan dos
una misma formulacin productos:
tuvo un efecto similar en el a b o n o
sustrato residual al evaluar
los contenidos de protenas
y cenizas. Los contenidos de
fibra fueron mayores en los
sustratos residuales de la cepa
L54, seguido de la cepa L4055
y finalmente, de la cepa L13;
mientras que los contenidos
de grasa fueron similares en
los bloques residuales de las
cepas L13 y L54, e inferiores
en los de la cepa L4055.
En promedio la relacin C/N
de los sustratos residuales

Cultivo de hongos medicinales

en residuos agrcolas de la zona cafetera

61

orgnico y biomasa de
lombrices (9), de importancia
en la agricultura sostenible.
El balance de materia para el
cultivo de las diferentes cepas
de shiitake sobre las diversas
formulaciones productivas
mostr prdidas medias en
materia seca del 45% y para
ganoderma del 54%, es decir
que el sustrato residual en
materia seca represent para
las cepas de shiitake el 55% y
para ganoderma el 46% del
peso inicial (29).

Tabla 17. Anlisis bromatolgico y de minerales de los bloques residuales del cultivo de
shiitake

Cultivo de hongos medicinales

en residuos agrcolas de la zona cafetera

62

Finalmente, los bloques


residuales se desmoronaron y se
utilizaron como alimento para
la lombriz roja (Figuras 73 y 74).
El lombricompuesto obtenido
present una humedad media
del 69% y un pH de 6,7. Los
rendimientos del proceso
de lombricultivo fueron del
67,7% en peso seco y por
cada kilogramo de sustrato
de siembra utilizado para el
cultivo de hongos medicinales
se obtuvieron 400 gramos de
lombricompuesto hmedo.

Otro subproducto generado


en el proceso de cultivo de los
hongos es parte del estipe que
se le retira al cuerpo reproductor
despus de la recoleccin. Los
resultados bromatolgicos
de la caracterizacin de
los tallos residuales de las
diferentes cepas de L. edodes,
se presentan en la Tabla 18.
El valor de protena de los
tallos residuales fue del
11,9%, valor significativo si
se compara con el promedio

encontrado en los hongos


recin cosechados que fue
del 17,3%. Los contenidos de
grasa y cenizas fueron muy
similares a los encontrados
en los hongos y el contenido
de fibra fue mayor.
Los tallos residuales pueden
secarse y molerse, para
utilizarlos como medicina
natural para consumo humano,
o como suplemento en la
alimentacin animal.

Figura 73. Sustrato residual utilizado como


alimento de la lombriz roja.

Figura 74. Lombricompuesto obtenido de


los bloques residuales.

Cultivo de hongos medicinales

en residuos agrcolas de la zona cafetera

63

Tabla 18. Anlisis bromatolgico y de minerales de los residuos de


L. edodes.

Cultivo de hongos medicinales

en residuos agrcolas de la zona cafetera

64

5. MANEJO DE ENFERMEDADES Y PLAGAS


Los principales problemas
encontrados en el cultivo
de los hongos medicinales
sobre residuos agrcolas
de la zona cafetera
estuvieron relacionados
con la contaminacin de

los sustratos por los hongos encontrados e identificados,


de acuerdo a sus caractersticas
competidores.
macro y microscpicas fueron:
La contaminacin se observ, Trichoderma spp. (Figura 75),
en promedio, al octavo da Penicillium spp. (Figura 76),
de realizada la siembra. Neurospora spp. (Figura 77) y
Los hongos contaminantes Aspergillus spp. (Figura 78).

Figura 75. Contaminacin por


Trichoderma spp.
Figura 76. Contaminacin por
Penicillium spp.

Figura 77. Contaminacin por


Neurospora spp.

Figura 78. Contaminacin por


Aspergillus spp.
Cultivo de hongos medicinales

en residuos agrcolas de la zona cafetera

65

Zadrazil (44), afirma que


L. edodes es un hongo
muy sensible a la presencia
de microorganismos
competidores. Si los
microorganismos antagonistas
en el sustrato no son totalmente
eliminados, no se produce el
crecimiento del shiitake. Es
muy difcil definir la causa de
la poca capacidad antagnica
de shiitake, no obstante,
sta puede deberse a que la
produccin de antibiticos
tiene un papel muy especfico,
por ejemplo: la cantidad de
antibiticos formado por
Lentinula es inferior a la
formada por las diferentes
variedades de Pleurotus. Pero
tambin puede deberse a
la produccin de enzimas
que conducen a una fuerte
liberacin de hidratos de
carbono de los sustratos, ya
que Lentinula puede liberar una
mayor cantidad de sacridos
que las variedades de hongos
Pleurotus; probablemente,
sta es la causa de la poca
capacidad de colonizacin
del sustrato.
La susceptibilidad y la afinidad
de los microorganismos a
los sustratos son los factores
ms determinantes en la
contaminacin fngica de los
cultivos de shiitake. Especies
patgenas como Verticillium
sp. y especies caractersticas
de sustratos forestales y
vegetales como Trichoderma
sp., Penicillium sp., Aspergillus
sp. y Neurospora sp., se
encuentran comnmente en
el cultivo de shiitake (22).

Neurospora sp., es un hongo


que suele aparecer despus de
la esterilizacin del sustrato,
especialmente cuando se deja
el sustrato en los recipientes
de esterilizacin durante
algn tiempo despus del
tratamiento. Este hongo
patognico produce una
gran cantidad de esporas de
forma que, una vez el moho
se establece en un cultivo, es
difcil de eliminarlo, debido
a que vuelve a infectarse
rpidamente el cultivo. No
existen medidas especficas
para su control (11).

realizados a tiempo, De esta


forma, se evita un alto recuento
microbiano en ellos, adems
de que se conservan sus
propiedades fsicas, de gran
importancia para el desarrollo
de los hongos medicinales.

Las bolsas utilizadas para


el empaque del sustrato no
deben tener sellos imperfectos,
pues los poros de las costuras
facilitan la penetracin de
los hongos del ambiente.
El aserrn de madera debe
tener un tamao de partcula
inferior a 0,5 cm, debido a
que las partculas ms grandes
Son varias las causas por pueden romper las bolsas y
las cuales se presenta la por all penetrar los hongos
contaminacin en los sustratos, contaminantes.
entre las cuales se encuentran:
la calidad de la semilla de En la esterilizacin debe
siembra, los materiales que tenerse cuidado con los
conforman el sustrato, el tiempos de proceso y la
tipo de bolsa empleado en cantidad de sustrato empleado,
el empaque del sustrato, la pues un desequilibrio en
esterilizacin y las condiciones estos factores pueden generar
sanitarias de inoculacin, sustratos subesterilizados
incubacin y fructificacin.
que son susceptibles a la
contaminacin fngica, o
Una semilla contaminada o con sustratos sobreesterilizados,
mucho tiempo de elaborada los cuales son susceptibles a la
facilita el establecimiento contaminacin bacteriana.
de los microorganismos
contaminantes, ya sea por La inoculacin, la incubacin y la
ser inculo o porque su fructificacin, deben realizarse
lento crecimiento permite la en reas limpias, previamente
colonizacin del sustrato por desinfectadas y en las cuales se
los hongos competidores.
evite la entrada de cucarachas,
ratones o algn otro animal
Los materiales utilizados en la que pueda ocasionar dao a
elaboracin de los sustratos los bloques de sustrato. De
deben ser frescos o haber igual manera deben controlarse
sido almacenados de forma las condiciones ambientales
apropiada mediante procesos de cultivo que requieren los
de ensilado o deshidratacin hongos, de acuerdo a su gnero,

Cultivo de hongos medicinales

en residuos agrcolas de la zona cafetera

66

para evitar el establecimiento es preciso retirar los bloques


de hongos indeseables.
contaminados lejos del
lugar de almacenamiento.
U n a v e z e s t a b l e c i d o s Se recomienda llevarlos a
l o s m i c r o o r g a n i s m o s los lombricultivos para su
contaminantes en el cultivo procesamiento.

Si el punto de contaminacin
es muy pequeo es posible
detener el crecimiento de
los hongos competidores
rociando carbonato o sal sobre
el foco de crecimiento.

6. PROBLEMAS EN EL CULTIVO Y SOLUCIONES

Los principales factores


abiticos que ocasionan
daos en el cultivo de los
hongos medicinales son la
temperatura, la humedad
relativa, la concentracin
de CO2 en los cuartos de
incubacin y fructificacin,
y la humedad excesiva del
sustrato. Estos factores por
s solos o combinados,
cuando se desvan de su nivel
ptimo, pueden ocasionar
un crecimiento micelial
pobre y por consiguiente,
una cosecha escasa o la

deformacin de los hongos en


desarrollo o ya desarrollados,
mostrando sntomas como
pies elongados, sombreros
pequeos o fructificacin en
masa (11).

en sus etapas de incubacin


y fructificacin, al igual que el
contenido de humedad y el
pH del sustrato de cultivo, que
se han descrito en el presente
Boletn Tcnico.

Por tanto, es importante que


el productor recuerde las
necesidades de luz, humedad
relativa, oxgeno y CO2, que los
hongos medicinales requieren

En la Tabla 19 se describen
los problemas ms frecuentes
que se presentan en la etapa
de fructificacin de los hongos
medicinales, sus posibles
causas y la solucin .

Cultivo de hongos medicinales

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67

Tabla 19. Causas y soluciones de los problemas ms frecuentes encontrados en la etapa de


fructificacin de los hongos medicinales.

Cultivo de hongos medicinales

en residuos agrcolas de la zona cafetera

68

7. CONCLUSIONES
1. Es posible realizar el cultivo 5. Se recomienda cultivar en
de hongos medicinales
la zona cafetera colombiana
(shiitake y ganoderma) sobre
las cepas L54 y L4055 de
residuos agroindustriales
L. edodes, sobre sustratos
presentes en la zona
elaborados con los
cafetera colombiana.
subproductos del cultivo e
industrializacin del caf,
2. Un tiempo total de proceso
formulados de manera que
de 9,25 horas para el
tengan una C/N de 40 y
tratamiento trmico de 60
con un contenido en borra
kg de sustrato de manera
inferior al 50% y de aserrn
artesanal, es equivalente a
del tronco del cafeto por
un proceso de esterilizacin
encima del 28%.
en una autoclave a 121C.
Esto simplifica el proceso 6. La mejor seal para colocar
de cultivo de los hongos
los bloques de L. edodes
medicinales y lo hace
en choque trmico, es
asequible a los productores
que la textura del abrigo
de caf.
sea blanda. Algunas cepas
no tienen reacciones de
3. La fructificacin de las cepas
oxidacin y por tanto, no
de L. edodes y G. lucidum
ocasionan pardeamiento de
sobre borra de caf y aserrn
los bloques (cepa L4055 y
de tallo del cafeto cuando
en menor grado L54).
stos se utilizaron como
nico sustrato, evidencian 7. El hongo medicinal G.
su capacidad biolgica
lucidum puede cultivarse
para ser utilizados en
sobre los subproductos del
las formulaciones como
cultivo e industrializacin
componentes principales
del caf, con una relacin
para el cultivo de estos
C/N del sustrato en el rango
hongos.
40 a 60, y con contenidos
de pulpa de caf inferiores
4. La utilizacin de aserrn
al 15% en la conformacin
de tallo de caf con un
del sustrato.
tamao de partcula menor
a 5 mm, evita la ruptura de 8. La utilizacin de la pulpa de
las bolsas de polipropileno,
caf en la conformacin de
disminuyendo as el riesgo
los sustratos para el cultivo
de la contaminacin
del hongo medicinal G.
del sustrato por
lucidum, es importante
hongos competidores
debido a que sta es el
provenientes
del
principal subproducto que
ambiente.
se genera en el proceso

Cultivo de hongos medicinales

en residuos agrcolas de la zona cafetera

69

de beneficio del fruto y


genera, si no se utiliza
adecuadamente, el mayor
impacto ambiental sobre
el ecosistema agrcola
cafetero.
9. Los hongos shiitake y
ganoderma deben
cultivarse en reas
separadas, debido a que las
necesidades ambientales
para su crecimiento son
diferentes.
10. La deshidratacin al sol es
el mtodo de conservacin
ms apropiado para
los hongos shiitake
y ganoderma, adems
que facilita su utilizacin
posterior.
11. Los numerosos estudios
realizados mundialmente,
evaluando las propiedades
medicinales de estos
hongos han determinado
su potencialidad como
medicinas naturales
que pueden utilizarse
directamente por los
productores de hongos.
12. El sustrato residual del cultivo
de los hongos medicinales
puede emplearse como
alimento de la lombriz
roja y obtener de esta
manera, abono orgnico
para utilizarlo en la finca y
biomasa de lombriz para
utilizarla en alimentacin
animal.

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AGRADECIMIENTOS

Los autores hacen un reconocimiento a los profesionales y auxiliares


que formaron parte del equipo de investigacin durante los aos
1998 al 2003: Fernando A. Gmez (Bacterilogo y Laboratorista
Clnico). Ana Luz Arango (tesista de Ingeniera Industrial), Maryeimy
Varn (tesista de Biologa) y a los auxiliares Wilson Vargas,
Humberto Ramrez y Huberto Tobn. Al apoyo de la Dra. Gloria
Ins Puerta, la Dra. Esther C. Montoya, la Dra. Elena Velsquez,
la Tecnloga Qumica y Especialista en alimentos Beatriz Meja,
el Ing. Diego Zambrano, el Tcnico Uriel Lpez, al Dr. Gunter
Pauli (Fundacin Zeri) y al Dr. Mario Caldern (Ex-presidente de
la Cmara de Comercio de Manizales).
Agradecimientos al Doctor S. T. Chang, Profesor Emrito de la
Universidad de Hong Kong y al Dr. Porfirio Martnez (Mxico), por el
suministro de las cepas de hongos evaluadas en el presente trabajo
y a Proexport por su apoyo financiero al trabajo de campo.

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