UNIVERSIDAD PARTICULAR DE CHICLAYO

SONDAS GENICAS
COMERCIALES

INTEGRANTE:
CLAUDIA INGRID WILLIS
SAMAME

2015 EMBRIOLOGA

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FACULTAD DE MEDICINA

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CONTENIDO
INTRODUCCIN................................................................................................... 3
OBJETIVOS:......................................................................................................... 4
MARCO TEORICO:................................................................................................ 5
SONDAS GNICAS............................................................................................ 5
1.1.-

Definicin.......................................................................................... 5

1.2.-

Tipos de sondas................................................................................ 5

1.3.-

Clases de marcaje para visualizacin de las molculas dianas.............6

1.4.-

Preparacin de la sonda....................................................................7

1.5.- Ventajas de las sondas genticas.........................................................10

CONCLUSIONES................................................................................................ 20
BIBLIOGRAFA.................................................................................................... 21

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INTRODUCCIN
Una sonda es un reactivo biolgico constituido por un fragmento de ADN que posee una
secuencia de bases complementaria a la del genoma de un microorganismo.
Las sondas gnicas son molculas de ADN sealadas con un marcador que tienen el
poder de reconocer genes en los cromosomas y establecer si dichos genes son normales
o portadores de alteraciones.
Entre las principales ventajas de las sondas genticas hay que destacar la sencillez de su
manipulacin, que permite su adaptacin a cualquier laboratorio. El principal
inconveniente es su coste. Es una tecnologa muy utilizada en la actualidad en
laboratorios nivel II
Una de sus aplicaciones ms extendida consiste en el establecimiento de diagnsticos
prenatales, que son realizados sobre muestras de clulas fetales. El anlisis gentico del
feto permite establecer si el nio que va a nacer es portador o no de un gen defectuoso o
deletreo.
Por lo tanto, desde el punto de vista tico, el diagnstico prenatal es aceptable y vlido si
respeta la vida e integridad del embrin y del feto humano, y siempre que de su estudio
vayan a derivarse beneficios para su curacin o conservacin. El diagnstico prenatal
debe tener como fin la curacin y no una sentencia de muerte que, irremediablemente,
conduzca al aborto del feto. El portador de una malformacin congnita no pierde por esto
las prerrogativas propias de un ser humano, a quien debe tributrsele el respeto a que
tiene derecho todo paciente.
El diagnstico mediante el empleo de sondas gnicas puede utilizarse tambin despus
del nacimiento, por ejemplo, para precisar la naturaleza y amplitud de una alteracin
gentica; o para el caso de parejas procedentes de familias "de riesgo" en particular para
las mujeres que deseen saber si son "portadoras " de un determinado precursor de
enfermedad (Gros 1993).

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OBJETIVOS:

Determinar que es una sonda y cuntos y cules son los tipos que existen.

Identificar el diseo de una sonda y la forma en la que se prepara.

Determinar el tamao de la sonda y la relacin que tiene con su estabilidad.

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MARCO TEORICO:
1. SONDAS GNICAS
1.1. Definicin
Bioqumicamente una sonda es una molcula de ADN o ARN homologa a una
secuencia de ARN o ADN diana, con la que hbrida de forma estable y especifica (por
asociacin de bases complementarias).
La sonda es una copia fiel de un gen o de un fragmento de ARN o ADN y se unir
exclusivamente esa secuencia de la que es copia. Esto es lo que se llama especificidad
de la sonda.
Una vez que la sonda se une a la secuencia diana se detecta y cuantifica. La
deteccin solo es posible si la sonda se ha marcado con un grupo detectable.
Dependiendo del nmero de estos grupos incorporados y de la seal que emitan la sonda
puede tener diferente sensibilidad.

1.2. Tipos de sondas

Distintos tipos de sondas de cidos nucleicos pueden ser utilizadas para la
hibridacin in situ:
1. Sondas de DNA doble cadena. Pueden ser preparadas utilizando tcnicas como
nick translation, random priming o PCR, en las cuales el nucletido marcado es
incorporado. PCR y random priming proporcionan una buena actividad
especfica. Estas sondas pueden ser desnaturalizadas antes de usar. Cuando se
usan para detectar una cadena simple como mRNA, estas son menos sensibles
debido a que la concentracin de la sonda marcada es reducida.

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2. Sondas de DNA de cadena simple (largas). Pueden ser preparadas utilizando

primer extension en templados de cadena simple o por PCR con un nucletido
marcado. ste ltimo es el ms usado porque es ms fcil de llevar a cabo y las
marcas pueden sintetizarse con poca cantidad de material.
El PCR permite una gran flexibilidad en la eleccin de las secuencias marcadas
por el uso de primers. Estas marcas han sido ampliamente usadas.
3. Oligonucletidos (entre 20 y 40 bases). Son marcados incorporando
oligonucletidos modificados durante la sntesis qumica o adicionando una cola
marcada. Una de las desventajas es que algunos oligonucletidos marcados no
se incorporan y por tanto la sensibilidad disminuye.
4. Sondas de RNA de cadena sencilla. Pueden ser sintetizadas por el uso de una
RNA polimerasa (SP6, T7 o T3 RNA polimerasa). La secuencia de la sonda es
clonada en un vector que flanquear dos sitios distintos de iniciacin.
La cadena de RNA anti sentido (sonda) es sintetizada en direccin opuesta al gen
endgeno. Se recomienda linearizar la sonda de RNA con enzimas que dejen el extremo
5 cohesivo, porque se ha reportado, que el extremo 3 romo promueve la sntesis de
transcritos anormales.

1.3. Clases de marcaje para visualizacin de las molculas dianas

Para visualizar las molculas diana se utiliza una sonda marcada, bien
radiactivamente, o mediante marcaje inmunolgico. Para el uso de ADN de doble cadena
primeramente es necesario desnaturalizarlo mediante calor o en condiciones de alta
alcalinidad. Esta sonda de cadena simple marcada se une a la diana; y los lugares de
unin se detectan porque los mtodos de marcaje dejan una seal detectable mediante
fotografa. En los mtodos ms avanzados se utilizan marcajes mediante fluorescencia
que emiten seales detectadas mediante lser, como el utilizado en la PCR a tiempo real.
1.3.1. Radiactividad
Se puede marcar radiactivamente la sonda utilizado nucletidos que tengan alguno
de sus tomos con un istopo radiactivo.
El istopo ms utilizado es el P32, con alta actividad especfica (9200 Ci/mmol
puro) y emite partculas de alta energa (1'7 MeV) por lo que sondas marcadas con este
elemento tienen un elevado rendimiento y sensibilidad.

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El marcaje puede ser en diferentes posiciones. El P32 tiene un periodo de

semidesintegracin relativamente corto, 14 das, lo que obliga a usar las sondas
marcadas dentro del periodo de una semana despus del marcaje, y adems la emisin
de partculas durante largo tiempo puede alterar la estructura de la sonda.
1.3.2. Marcaje inmunolgico
Aunque el marcaje radiactivo es muy sensible, conlleva el peligro asociado a la
utilizacin de radiactividad. Para evitar este peligro se desarrollaron otros mtodos de
marcaje basados en anticuerpos. Las sondas se marcan utilizando nucletidos que llevan
unida una molcula (digoxigenina), a la solucin se le aaden anticuerpos especficos que
se unen a esa molcula; y estos anticuerpos llevan asociado un compuesto luminiscente o
fluorescente (Como el CDP-Star) que deja impronta fotogrfica.

1.4. Preparacin de la sonda

Para sondas de cadena sencilla, se debe usar la secuencia reversa
complementaria. Cuando las sondas son sintetizadas por transcripcin, involucra generar
mRNA del gen endgeno. Cuando se disean los oligos marcados, es importante recordar
que la secuencia antisentido es la hebra complementaria reversa de la cadena lder y
debe ser leda de 5 a 3.
En general es preferible usar sondas especficas, ya que esto garantiza una buena
hibridacin. Existen situaciones en las cuales esto no puede llevarse a cabo, por ejemplo,
si los genes todava no estn clonados de las especies usadas para la hibridacin o si la
secuencia gnica es muy similar entre especies. Esto puede favorecer una hibridacin
entrecruzada. Para evitar esto, se requiere una alta selectividad que reduzca la presencia
de bases mal apareadas, aumentando de esta manera la especificidad. Si los modelos de
expresin son los mismos, como se pueden ver con una sonda homloga, es un
experimento alentador, aunque no prueba la especificidad. La hibridacin entrecruzada
provee informacin preliminar muy valiosa.
1.4.1. El diseo de la sonda
1. La hibridacin entrecruzada utiliza sondas largas (>100 pb) usadas bajo
condiciones selectivas especialmente despus de la digestin con nucleasas, ya

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que una sonda adems de homloga, debe ser lo suficientemente amplia para
llevar a cabo la hibridacin.
2. Para sondas pequeas (oligonucletidos de 20-30 pb) es muy probable que algn
gen distinto al de inters tenga una secuencia idntica.
Alternativamente se puede hacer un screening y ste puede ser realizado por
bsqueda de secuencias en bases de datos.
3. Los mRNA poseen las secuencias poli(T) y poli(U), al transcribirse a cDNA se evita
que la sonda no incluya esta cola, porque secuencias largas, ricas en GC dan una
gran estabilidad a la sonda por los triples enlaces que se forman entre estas
bases.
Se necesitan dos elecciones ms para la preparacin de la sonda: el tipo de
cidos nucleicos y la marca que se incorpora en la sonda. Algunos mtodos alternativos
estn disponibles para la sntesis de la sonda.
1.4.2. Eleccin de la sonda:
Las sondas largas de cadena simple (RNA o DNA) proporcionan una alta
sensibilidad en la deteccin de cadena sencilla. Los oligonucletidos son muy sensibles y
la seal puede ser incrementada por el uso de un cocktail de sondas que flanquearn en
regiones distintas.
Para estudios de mRNAs estrechamente relacionados, las sondas especficas,
pueden ser obtenidas por sntesis de oligonucletidos. Se disean primers que sern
usados para la amplificacin del fragmento deseado de DNA en el PCR. Estos fragmentos
pueden ser clonados y usados para sintetizar cadenas dobles o sencillas de DNA o RNA.
Alternativamente, para el caso de sondas de RNA, pueden ser marcadas
directamente sin clonacin incluyendo el primer marcado en el sitio de iniciacin de la
RNA polimerasa. Finalmente las sondas de DNA de doble cadena son recomendadas
para blancos de doble cadena y esto puede ser suficientemente sensible para detectar
abundancia de cadena sencilla.
1.4.3. Tamao de la sonda:
Las sondas largas pueden emitir una seal ms fuerte debido a que incorporan
mayor nmero de nucletidos marcados dentro de ella. Sin embargo, las sondas que son
tan largas dan seales dbiles, debido a que la sonda penetra menos eficientemente en el
tejido. La mejor estrategia es usar una secuencia larga como templado para la sntesis de

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la sonda pero asegurar que la sonda generada es lo suficientemente pequea para poder
penetrar. Muchos procedimientos estn basados en que la sonda de 50-150 bases porque
emiten seales ptimas para la hibridacin en secciones de ciertos tejidos. Se ha
encontrado que las sondas de RNA que miden por arriba de 1 kb proveen seales
ptimas para la hibridacin in situ, en embriones fijados en para formaldhedo. La
penetracin est influenciada por el tamao de la sonda aunque tambin depende de la
naturaleza del tejido, de la forma de fijacin y si el pre tratamiento ha sido realizado para
remover las protenas celulares.
El tamao de la sonda puede ser controlado durante la reaccin de sntesis:
a. Sondas de DNA, sintetizadas por nick translation, el largo est determinado por
la cantidad de DNasa en la reaccin.
b. Sondas marcadas por random priming el tamao est determinado por la
concentracin del primer.
c. Primers que puedan ser elegidos para deteminar el tamao de la sonda sintetizada
por PCR.
d. Sondas largas de DNA pueden ser cortadas parcialmente por incubacin a altas
temperaturas.
e. Sondas largas de RNA son parcialmente cortadas por hidrlisis alcalina limitada. Si
el tamao de la sonda es cortada por hidrlisis hay que revisar el tamao de la
sonda, porque si sta es muy pequea, sta no hibridar bajo condiciones
selectivas standard, dando una baja seal.
1.4.4. Estabilidad de la sonda y la interaccin con su blanco:
En experimentos de hibridacin los puentes entra la sonda y la secuencia blanco
juega un rol importante. El largo decrementa la estabilidad en el siguiente orden RNARNA, DNA-RNA, DNA-DNA. La estabilidad de los hbridos est influenciada por las
condiciones de hibridacin, por la concentracin de formamida, sales y la temperatura.
1.4.5. Sondas de doble cadena contra cadena sencilla:
Un nmero de reacciones competentes ocurren durante la hibridacin in situ con
sondas de doble cadena. Las sondas de cadena sencilla proveen las siguientes ventajas:
a. La sonda no se agota porque no se autoliga.
b. No son cadenas largas porque deben penetrar en la seccin de tejido o en los
cromosomas.

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1.5. Ventajas de las sondas genticas

Las ventajas de estas tcnicas son que nos permiten investigar directamente al
microorganismo, sin necesidad de que se encuentre viable, ni de que est en cultivo puro.
Hoy en da se utiliza para identificar microorganismos no cultivables, de lento crecimiento
o difcil y de identificacin compleja. Es posible utilizarlo en cualquier tiempo de muestra
biolgica y permite la identificacin de genes no expresados fenotpicamente. Son
tcnicas muy vlidas, pues el ADN es muy estable.

Los inconvenientes ms importantes son que se necesitan un nmero mnimo de

copias del fragmento de cido nucleico problema que se quiere detectar, por eso en las
muestras con escasos nmero de unidades infecciosas se obtiene una baja sensibilidad.
En ocasiones este problema se resuelve detectando ARN en vez de ADN, pues el primero
suele estar en mayor cantidad.

Otra forma de intentar resolver este problema consiste en aumentar en vitro el

nmero de copias mediante tcnicas de amplificacin.

Actualmente disponemos de sondas (Gen-Probe, Syngene) para identificacin

de M. tuberculosis, M. avium, M. intracellulare, M. kansasii y M. gordonae. Entre las
principales ventajas de las sondas genticas hay que destacar la sencillez de su
manipulacin, que permite su adaptacin a cualquier laboratorio. El principal
inconveniente es su coste. Es una tecnologa muy utilizada en la actualidad en
laboratorios nivel II.

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2. TECNOLOGAS GENTICAS
Los cientficos han desarrollado una serie de tcnicas bioqumicas y genticas mediante
las cuales el ADN puede ser separado y transferido de una clula a otra. Algunos de esos
mtodos de laboratorio ayudan a los investigadores a estudiar las propiedades de los
genes en la naturaleza (permiten, por ejemplo, comparar los ADN de diferentes animales
para establecer distancias evolutivas).
Otras tcnicas de ADN constituyen herramientas bsicas en el campo de la ingeniera
gentica (alteracin de genes de un organismo).

Para localizar un gen especfico en un cromosoma determinado se utiliza una

sonda de ADN, que es un gen clonado o copiado al que se agrega un tomo
radiactivo. La sonda marcada selecciona un segmento de ADN complementario y
se une a dicho segmento; la sonda en cuestin se puede detectar entonces
mediante sofisticadas tcnicas de fotografa. Con este procedimiento se
diagnostica un buen nmero de enfermedades antes del nacimiento o despus del
mismo.

2.1. Southern blot

El Southern blot, denominado as en honor de Ed Southern, que desarroll la tcnica,
consiste en la digestin del ADN mediante una enzima de restriccin y que a continuacin
se somete a electrofororesis en un gel de agarosa. Con ello se consigue separar los
fragmentos de restriccin del ADN por tamaos, siendo los fragmentos ms pequeos los
que corren ms rpido en el gel. Los fragmentos de ADN del gel se desnaturalizan a
continuacin con lcalis, convirtindose en fragmentos de hebra simple. Una copia

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permanentemente de estos fragmentos se transfieren a un filtro de nitrocelulosa que se

une al ADN monocatenario marcado radiactivamente con

32

P que hibridar con el

fragmento de ADN homlogo del Southern blot, el cual a su vez puede ser detectado
mediante autorradiografa.

2.2. Secante de Southern.

Para encontrar una mutacin de un gen determinado en una muestra de ADN los
cientficos usan una sonda de ADN, un tramo de ADN de un solo filamento que coincide
con parte del gen y se une a un tomo radioactivo.
La sonda de un solo filamento busca y se une al gen. Las seales radioactivas de la
sonda aparecen despus en la radiografa, mostrando dnde se emparejan la sonda y el
gen.

2.3. Northern blot

El Northern blot difiere del Southern blot en que utiliza ARN mensajero como cido
nucleico diana en el mismo procedimiento. El ARNm es muy inestable debido a las
ribonucleasas celulares intrnsecas. El uso de inhibidores de ribonucleasas permite el
aislamiento del ARN mensajero que, si se corre en un gel electrofortico, se puede
transferir a un filtro. Hibridando el blot con una sonda de ADN marcada radiactivamente se
puede determinar el tamao y la cantidad del transcrito de mensajero, denominndose a
esta tcnica Northern blot. En una alteracin gnica en la que no se han identificado
mutaciones en la secuencia codificante, una alteracin en el tamao del transcrito sugiera
la posibilidad de una mutacin en una regin no codificante del gen, como la zona de
unin intrn-exn. El Northern blot puede utilizarse tambin para demostrar un modelo de
expresin diferente de un determinado gen en diferentes tejidos o en diferentes estadios
del desarrollo.

2.4. Hibridacin con sondas

Los recientes avances en el campo de la biologa molecular y el conocimiento cada vez

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mayor de los virus que causan infecciones importantes en la comunidad, han hecho
posible que en el momento se disponga de fragmentos de ADN del material genmico
especfico y altamente conservado de un determinado virus que se utiliza como sonda.

Para estudios de ARN se requieren tejidos frescos congelados rpidamente con

nitrgeno lquido y para estudios de ADN se pueden emplear tanto tejidos fijados
como congelados.

Las sondas preparadas a partir del ADN o ARN especfico se pueden purificar por
clonacin o copia en un plsmido del ADN o del ADNc (complementario) obtenido
de transcripciones de ARN. Utilizando el plsmido como vector y bacterias como
huspedes, es posible producir sondas genticas en grandes cantidades.

Los fragmentos de ADN o ARN (sondas) se someten a un anlisis de hibridizacin

(o apareamiento con el complementario que se encuentra en el material que se va
a probar); ste se puede hacer ya sea

con ADN o ARN tisular en solucin, directamente en tejidos o clulas por

hibridizacin in situ, o se puede efectuar sobre ADN o ARN transferidos en
membranas de nitrocelulosa a partir de una electroforesis en gel de agarosa.

La sensibilidad de las sondas depende de la cantidad de material gentico para la

hibridizacin y su especificidad depende de la calidad de la sonda.
Una de las principales limitaciones de esta tcnica se ve cuando existe una baja cantidad
de ADN o ARN y ste no se descubre. Muchas de estas pruebas tienen una sensibilidad
que les permite descubrir 105-106 molculas o aun 103-104 molculas; sin embargo, esto
puede ser insuficiente en muchas situaciones clnicas.

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3. DEMOSTRACIN DEL AGENTE

Pueden ser:

Altamente sensitivos.

Adicionalmente utilizados para una demostracin definitiva de que un organismo

pertenece a una especie particular

Se pueden dar a travs de:

Antgenos: son sustancias moleculares complejas y los anticuerpos especficos

Formados para ellos, reconocen figuras particulares conocidas como determinadores de

antgenos o eptopos.

Eptopos: son cada uno de los sitios discretos de una macromolcula que son
reconocidos individualmente por un anticuerpo especfico o por un TCR especfico.

Anticuerpos: La R.C. son ms comunes para los anticuerpos policlonales que para los
anticuerpos monoclonales.

3.1. Pruebas de deteccin usando anticuerpos

Inmunofluorescencia y Elisa, se usa para la deteccin de antgenos virales en la

preparacin de diagnsticos.

El anticuerpo fluorescente es usado para detectar antgenos en los tejidos.

ELISA, es usado para detectar antgenos en fluidos o extractos crudos de tejidos.

Todos los organismos vivientes poseen ADN excepto los virus q poseen ARN.

S.G. es un pequeo segmento de bases de ADN, el cual se combinara con un

filamento homologo de ADN.

La S.G. puede ser altamente sensible y muy especifica.

El microorganismo de ADN puede ser detectado en las secciones de tejido fijadas

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con un proceso llamado hibridizacion in situ.

3.2. Sondas de ADN y ARN

Para identificar cada fragmento no es necesario determinar la secuencia total de

sus bases los mtodos mas usados para identificar un ADN o un ARN

Las sondas de ADN son muy tiles para fines diagnsticos

Fragmento de cadena simple de ADN o ARN de varios cientos o miles de

nucletidos de longitud, que permite poner de manifiesto la presencia de una
secuencia complementaria en una muestra biolgica

La Hibridacin del ADN por una sonda de ADN se llama tcnica de Southern Blot.
Las sondas gnicas permiten encontrar un determinado trozo de ADN de unas
pocas bases pares en una cadena de 6 x 109 bases pares. y ello lo consigue
gracias al marcaje con P32

Cuando el uso de una sonda gnica, marcada con un producto fluorescente, se

hace sobre una clula, a la tcnica se la denomina "fluorescence in situ
hybridization" (FISH).

El ARN mensajero, procedente del ADN, puede volver a reconstituirse en ADN

mediante la enzima transcriptasa inversa, y ser clonado en una bacteria. Este ADN
no tiene intrones, es decir, equivale a los axones del ADN de la clula. Se le
denomina ADN complementario (ADNc), siendo utilizado para actuar como sonda
gnica.

3.3. Marcadores moleculares

Estas tcnicas utilizan los fundamentos de la tcnica de PCR y las ms usadas

incluyen polimorfismos en el largo de fragmentos de restriccin (RFLP), nmero
variable de secuencias nucleotdicas repetidas en tandem (VNTR), polimorfismos
conformacionales de hebra simple (SSCP), electroforesis en gel denaturante en
gradiente (DGGE), amplificacin al azar de ADN polimrfico (RAPD) y por ltimo,
los mtodos que usan el polimorfismo de secuencias nucleotdicas cortas
repetidas en tandem como son los microsatlites

Esta identificacin permite:

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Seleccionar los progenitores en un programa de mejoramiento gentico

Identificar el gen (o grupos de ellos) que codifican para la caracterstica a

seleccionar, pero cuyo genotipo es difcil de visualizar a simple vista.

Determinar a qu variedad gentica pertenece un individuo, estimar su pool

gentico y determinar su origen.

4. HIBRIDACIN IN SITU FLUORESCENTE (FISH)

FISH (del ingles fluorescent in situ hybridization) es una herramienta tecnolgica
relativamente nueva que combina la citogentica convencional con la gentica molecular
que se basa en la capacidad nica de una hebra sencilla de ADN, por ejemplo, una sonda
para unirse o hibridar con su secuencia complementaria donde quiera que sta est
localizada en la extensin metafasica aunque con menos frecuencia que otros mtodos
usados para el anlisis cromosmico, FISH puede tambin usarse para estudiar
cromosomas durante la interfase, periodo de descanso entre las divisiones celulares de
aqu que este rea de estudio se denomine interface citogentica.
En esta tcnica la sonda de ADN se conjuga con nucletidos modificados, los cuales,
despus de hibridar con la muestra problema, permiten que la regin en la cual ha
ocurrido la hibridacin se pueda visualizar con luz ultravioleta. Esta tcnica FISH tiene
ahora una amplia difusin para diagnsticos clnicos, ya que sus resultados se obtienen
rpidamente.

4.1. Diferentes tipos de sondas FISH

4.1.1. Sondas centromricas
Consisten en secuencias repetitivas de ADN a nivel centromrico en un cromosoma
especfico. Se utilizan en diagnostico prenatal para una deteccin rpida de aneuploidas
(trisomia 13, 18, 21) usando clulas en interfase obtenidas de las vellosidades corinicas.
4.1.2. Sondas unilocus
Son especficas para un locus particular. Se utilizan con xito en la identificacin de
minsculas deleciones y duplicaciones submicroscpicas. En grupo de trastornos
conocidos como sndromes por microdeleciones
4.1.3. Pintar cromosomas

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Consiste en la mezcla de sondas de diferentes partes de un cromosoma en particular.

Cuando esta mezcla de sondas se usa en una hibridacin, el cromosoma entero florece,
por lo que decimos que esta pintado. Pintar cromosomas es muy til para caracterizar
reordenamientos complejos, tales como translocaciones sutiles y para identificar el origen
de material adicional de un cromosoma, como pequeos marcadores de supernumerarios
o anillos.
4.1.4. Pintar a la inversa
En este procedimiento una porcin de material cromosmico no identificado, pequeos
marcadores supernumerarios o anillos, se usa para pintar por hibridacin una metafase
normal. El cromosoma no identificado se obtiene por separacin de clulas activadas por
fluorescencia, el cual es amplificado utilizando la reaccin en cadena de la polimerasa
(PCR) para preparar dicha pintura. El origen del segmento no identificado se obtiene
mediante la identificacin del cromosoma sobre el cual se hibrida.
Deteccin a nivel de reacciones inmunolgicas
Hay numerosos marcadores en los antgenos de los eritrocitos

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5. SONDEOS GNICOS EN MBITOS CLNICOS

5.1. Caractersticas:

El PGH nos acerca a un nuevo tipo de prctica clnica, la que se ha dado en llamar
Medicina Genmica y Predictiva.

Determinacin de anomalas genticas.

Revolucin Del diagnstico y el pronstico

5.2. Posibilidades de diagnstico gentico

Sondeo prenatal

Amniocentsis

Extraccin de vellosidades corinicas (transcervical o transabdominal ).

Extraccin y purificacin de sangre perifrica materna muestras de clulas fetales.

Sondeo neonatal: Fenilcetonuria, Hipotiroidismo congnito, Galactosemia, Anemia

falciforme, Tay-Sachs.

5.3. Estudios en el laboratorio

Antes: pruebas se reducan al cariotipo.

Herramientas de la Ingeniera Gentica y con la informacin del PGH.

Objetivo: informacin a las parejas sobre la situacin del feto, actual o futura.
Obviamente, el horizonte es el del recurso al aborto en el caso de "malformacin"
o posibilidad de enfermedad grave futura.

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CONCLUSIONES

Las sondas son molculas de ADN o ARN homologas a una secuencia de ARN

o ADN diana yson de cuatro tipos.

Para la establecer el diseo y la preparacin de una sonda se debe tener en cuenta

en tamao y la hibridacin.

El largo de la sonda decrementa su estabilidad.

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BIBLIOGRAFA

Lynn B. Jorde, John C. Carey, Michael J. Bamshad. Gentica mdica. Cuarta

Edicin.Barcelona:Elsevier; 2011.

Blanca Ramos Cerrillo. Hibridacin in situUniversidad Nacional Autnoma de

Mxico.

[Acceso

12

de

Abril

del

2014].

Disponible

en:

http://www.ibt.unam.mx/computo/pdfs/met/hibridacion_in_situ.pdf

Pedro Fernndez Ruiz. Hibridacin de los cidos nucleicos. Hospital Clnico/

IDIBAPS/Universidad de Barcelona. [Acceso 12 de Abril del 2014]. Disponible en:
http://www.seap.es/c/document_library/get_file?uuid=dd48aeb8-9e38-4541-bcfbd75fd6b2ee9f&groupId=10157

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