UNIVERSIDAD CENTRAL DE VENEZUELA

FACULTAD DE AGRONOMA
DEPARTAMENTO E INSTITUTO DE BOTNICA AGRCOLA
POSTGRADO EN AGRONOMA
INSTITUTO NACIONAL DE INVESTIGACIONES AGRCOLAS
ESCUELA SOCIALISTA DE AGRICULTURA TROPICAL

GENERALIDADES SOBRE PATOLOGA DE SEMILLAS

(CASO HONGOS) E IMPORTANCIA DE ALGUNOS
PATGENOS FNGICOS CON NFASIS EN CEREALES
Y OLEAGINOSAS

Prof.a HELEN YNGEBORG PREZ PIVAT

NOVIEMBRE, 2015

CONTENIDO
Definiciones bsicas: Semilla, Epidemiologa, Epidemia, Enfermedad,
Patologa de Semillas, Inculo, Fuente de Inculo, Infeccin, Infestacin,
Transporte y Trasmisin.
Importancia agronmica de la semilla.
Breve resea de aspectos histricos de enfermedades fngicas
asociadas a las semillas.
Tipos de asociacin de las semillas con los patgenos fngicos.
Ejemplos.
Trasmisin de patgenos fngicos a partir de la semilla. Ejemplos.

Algunas implicaciones epidemiolgicas

patgenos fngicos con las semillas.

de

la

asociacin

de

Mtodos de anlisis fitopatolgico para la deteccin de patgenos

fngicos en semillas.
Algunos ejemplos importantes de patgenos fngicos asociados a
las semillas en cereales y oleaginosas.
Medidas generales de control. Certificacin de semillas.

DEFINICIONES BSICAS
SEMILLA
Unidad reproductiva de las espermatofitas,
normalmente de origen sexual.
Endosperma o albumen

Endosperma o
albumen

Episperma (testa+tegmen)
Embrin

Embrin

Pericarpo y
episperma
fusionados

Dicotilednea

Monocotilednea
Fruto-semilla
(Gramineae)

Epidemiologa (Epifitiologa o epifitologa)

Ciencia que se ocupa del estudio
de las enfermedades en
poblaciones.
(Van Der Plank, 1963)

Estudio de poblaciones de patgenos

en poblaciones de plantas, bajo la
influencia de factores ambientales y la
interferencia del hombre.
(Kranz, 1974)

Epidemia
Fenmeno mediante el cual un patgeno
Cualquier incremento o
se disemina y afecta extensas reas de disminucin temporal o espacial de
poblaciones individuales de plantas en un
una enfermedad.
corto tiempo.
(Ulacio, 2013)
(Agrios, 2005)

Enfermedad
Alteracin fisiolgica o morfolgica negativa de la planta causada por
accin de un patgeno o algn factor ambiental, lo que puede ocasionarle
deterioro e incluso la muerte. (Arauz, 1998; Agrios, 2005)

PATOLOGA DE SEMILLAS
Ciencia que estudia las implicaciones relativas a la asociacin
de patgenos con las semillas, considerando todas las etapas
del sistema de produccin y uso de las mismas.
Tiene como objetivo principal el control de los patgenos de
los vegetales transmisibles por la semilla.
(Pacheco, 1988)

Caractersticas de la Patologa de Semillas

2
1
Diagnstico y
estudio de los
patgenos
asociados a
la semilla

Caracterizacin
y evaluacin de
prdidas causadas
por patgenos a
partir de la
semilla

3
Estudio sobre
la dinmica y
los mecanismos
de trasmisin
de
patgenos

Estudio de
causas y
control de
deterioro en
semillas
almacenadas

Desarrollo de
mtodos de
deteccin y
control de
patgenos en
semilla

CARACTERSTICAS

Desarrollo de
mtodos de
control de
enfermedades en
campos de
produccin
de semillas

Establecimiento
de lmites
de tolerancia

(Pacheco, 1988)

C
A
L
I
D
A
D
S
A
N
I
T
A
R
I
A

Inculo
Patgeno(s) que llegan a la planta. Cualquier parte del
patgeno que puede producir infeccin.

Fuente de Inculo
Reservorio del patgeno
Suelo, semillas, restos de cosecha, malezas, rganos de
propagacin, material de trasplante, cultivos de campos vecinos
infectados, hospedantes alternos.

Infeccin
Establecimiento del patgeno en forma activa (dentro del
hospedante).
A

Secciones transversales de semillas de soja

(Glycine max L. Merr.)
A. Embrin sano.

B. Embrin infectado por Colletotrichum truncatum.

Co: conidios; St: Setas
(Begum et al., 2007)

Infestacin
Contaminacin externa por un patgeno, en forma pasiva.

Semillas de soja (Glycine max

L. Merr.) infestadas por
Peronospora manshurica

Transporte y Trasmisin
El transporte de un patgeno por la semilla no asegura,
necesariamente, su trasmisin a la progenie. La trasmisin tiene
altas probabilidades de ser efectiva a partir del momento en que
el patgeno se localice en el embrin.

IMPORTANCIA AGRONMICA DE LA SEMILLA

Semilla
Importancia para el ser humano
Principal medio de reproduccin
de las plantas.
Importante fuente de alimento.
Fuente de materia prima para la
agroindustria e industrias
farmacutica y textil.
Elaboracin de combustibles
eclogicos.
Alto potencial gentico, esencial
para la supervivencia de la
humanidad.
Elemento vital en la agricultura.
(Periss, 2002)

SEMILLAS APOMCTICAS
- Partognesis
- Apogamia
- Embriona adventicia

SEMILLAS
ARTIFICIALES
- Cultivo de Tejidos

SEMILLA CON
SENTIDO
AGRONMICO

PROPGULOS
- Tubrculos
- Estolones
- Rizomas
- Bulbos
- Cormos

SEMILLA
BOTNICA
- vulo desarrollado
luego de la
- fecundacin

FRUTO SEMILLA
- Caripsis
- Cipsela
- Aquenios
- Smaras

Conceptos que convergen para definir una semilla con

sentido agronmico.
(Periss, 2002)

Aproximadamente
70% de los alimentos
consumidos
mundialmente

Provistos
directamente
por semillas

Granos

Grano
Semilla cuyo uso abarca tanto el consumo humano y animal
como la generacin de nuevas plantas mediante la siembra.
Trigo
(Triticum aestivum L.)

Soja
(Glycine max L. Merril)

Maz
(Zea mays L.)

Arveja
(Pisum sativum L.)

Arroz
(Oryza sativa L.)

Caraotas
(Phaseolus spp.)

Fuente esencial de
hidratos de carbono

Fuentes de protenas
(Periss, 2002)

BREVE RESEA DE ASPECTOS HISTRICOS DE

ENFERMEDADES FNGICAS ASOCIADAS A LAS SEMILLAS
RENNANT (1637)
Sospechaba que el carbn del
trigo era llevado con la semilla
de alguna forma. La semilla se
tornaba negra y no permita
realizar el proceso de trilla
normalmente.

HELLWIG (1699)
Realiz el reporte del primer
caso de transporte de un hongo
patgeno con la semilla
(esclerocios de Claviceps
purpurea junto a semillas de
centeno), recomendando la
flotacin en agua para su
separacin.
(Pacheco, 1988)

TULL (1733)

TILLET (1755)

Estableci dos
formas de
resolver el
problema del
carbn:
tratamiento con
salmuera para
inhibir las
esporas o el
cambio de
semillas para la
nuevas siembras.

Control del carbn

mediante siembra
de semillas nuevas
y no las
cosechadas en
cultivos anteriores.
Demostr por
primera vez el
transporte externo
de un patgeno
(Tilletia sp.) por la
semilla.

FRANK (1883)
Demostr que Colletotrichum
lindemuthianum fue transmitido a travs
de la semilla. El micelio a menudo
penetra dentro de los cotiledones
infectndolos. Este reporte constituye el
primer caso de transmisin orgnica
conocida de un patgeno desde la
planta a su progenie a travs del
embrin.

(Pacheco, 1988)

TIPOS DE ASOCIACIN DE LAS SEMILLAS CON LOS

PATGENOS FNGICOS
El transporte de patgenos en cualquiera de estas asociaciones no
implica una eventual transmisin de los patgenos a la progenie.

Como acompaante o mezclado con las semillas

El patgeno acompaa de manera independiente a la semilla del
hospedante, pero no est adherida a ella. Van mezcladas. Se
pueden presentar micelio o esclerocios.

Ejemplos:

Esclerocios de Claviceps purpurea

con semillas de trigo

Esclerocios de Sclerotinia
sclerotiorum junto a semillas
de soja

Externo o adherido a la semilla

El patgeno es llevado pasivamente en la superficie de la
semilla. El patgeno no penetra en las partes internas de
frutos o semillas.

Ejemplos:

Pyricularia oryzae en arroz

Peronospora manshurica en soja

Ubicado internamente
El patgeno es llevado internamente en la semilla del
hospedante, en el tejido (embrin, endosperma, cotiledones o
entre ste y la testa). Una semilla en esta condicin se
considera infectada.

Ejemplo:

Colletotrichum lindemuthianum en caraota

Patgeno Virulento

El proceso ser
exitoso en la
medida en que
estos factores
sean
coincidentes

Condiciones Ambientales
Favorables

Hospedante
Susceptible

Factores que inciden en el proceso de infeccin de las

semillas

INFECCIN DE LAS SEMILLAS

Infestacin
Sistmica
El patgeno puede establecerse
en cualquier sector de la semilla
penetrando a travs de:
Flores, frutos, pednculo, estigma.
Pared del ovario.
Aberturas naturales (hilo y
micrpilo).

Patgenos adheridos a la
superficie de la semilla
(cosecha,
extraccin,
seleccin o embalaje).

trilla,

Concomitantes
Constituye la mezcla fsica de
semillas con propgulos de
patgenos como los esclerocios
en el caso de algunos hongos.

TRASMISIN DE PATGENOS FNGICOS A

PARTIR DE LA SEMILLA
El transporte es parte preponderante de la transmisin.
1. Puede transportar patgenos a grandes distancias.

La semilla
es el
sistema
ms
eficiente de
transporte
por las
siguientes
razones:

2. Es un sustrato nutritivo ptimo para el patgeno (contenido

de protenas, lpidos, carbohidratos, sales minerales).
3. El inculo mantiene su patogenicidad constante por ms
tiempo.

4. La posibilidad de que ocurra infeccin son mayores, por ntima

asociacin con el hospedante, favoreciendo la penetracin y
colonizacin del patgeno.
5. Permite una distribucin homognea del inculo en las reas
sembradas.

En Patologa de Semillas, el trmino transmisin significa adems de la transferencia y

establecimiento del patgeno en la semilla, la transferencia de la planta-madre a la semilla.
(Menten y Bueno, 1987)

Transmisin planta a semilla

Ustilago nuda en cebada
Infeccin intra-embrionaria
seguida por infeccin
sistmica.

Acceso a
los ovarios

Colletotrichum lindemuthianum en frijol

Infeccin intra-embrionaria
seguida por infecciones
locales.
Fusarium verticillioides en maz
Semilla infectada con micelio del
hongo.

* No siempre el ingreso de patgenos al ovario implica la infeccin del embrin

(Pacheco,1988)

Transmisin semilla a semilla

Transferencia
de inculo
superficial

Gneros
Colletotrichum
Fusarium
Septoria

Fusarium oxysporum
Contaminacin seguida
por saprofitismo y
posterior infeccin
sistmica

* Las operaciones de tratamiento y manejo de semillas durante la cosecha es

una forma de transferir inculo de semilla a semilla.
(Pacheco,1988)

Transmisin semilla a planta

Puede ocurrir de diferentes maneras en funcin de la posicin
de los patgenos en las semillas y de la naturaleza de accin
de los mismos en los hospedantes.

1. A partir de patgenos presentes en la mezcla

con las semillas

Infeccin inmediata
de la plntula por actuacin
activa y directa del patgeno
Sclerotinia sclerotiorum
(forma micelial)

Infeccin por propgulos

infectivos
derivados de estructuras del
patgeno transportadas
inicialmente junto a las semillas.

Claviceps purpurea
(esclerocios, ascas con
ascosporas)
(Pacheco,1988)

2. Patgeno ubicado o localizado pasivamente en

la superficie de las semillas.
Puede ocurrir al inicio del proceso, existiendo ms
probabilidad de infeccin inmediata.
Gnero Ustilago

3. Patgeno ubicado o localizado en el interior de

las semillas.

Colletotrichum truncatum

(Pacheco,1988)

Tipo de asociacin
del patgeno con
la semilla.

Tipo de suelo y sus

caractersticas: humedad,
temperatura, acidez, nutrientes
minerales y orgnicos, potencial
de inculo, microflora.

Tipo de germinacin
de la semilla
(hipgea, epgea).

Edad de la semilla
Microflora antagnica

Factores
que afectan la
transmisin

Profundidad de
siembra

Vitalidad de la semilla

Densidad de inculo
en la semilla

Susceptibilidad del
hospedante
Daos causados por
hongos, insectos o
daos mecnicos
(Pacheco,1988)

ALGUNAS IMPLICACIONES EPIDEMIOLGICAS DE

LA ASOCIACIN DE PATGENOS FNGICOS CON
LAS SEMILLAS
MEDIO DE
INTRODUCCIN Y
FUENTE DE
INCULO EN
REAS CULTIVADAS

MEDIO DE
SOBREVIVENCIA DE
PATGENOS

LA SEMILLA
PAPEL EN LA
SELECCIN Y
DISEMINACIN
DE RAZAS
PATOGNICAS

MEDIO DE
DISEMINACIN
DE PATGENOS A
LARGA DISTANCIA
(Machado, 1987)

MEDIO DE
SOBREVIVENCIA DE
PATGENOS

Mayor potencial de viabilidad en el tiempo.

Mayor proteccin y concentracin de
reservas nutritivas.

MEDIO DE
INTRODUCCIN Y
FUENTE DE
INCULO EN
REAS CULTIVADAS

Semillas contaminadas o infestadas.

Existencia de plantas jvenes enfermas
distribuidas en nuevas reas sembradas.

MEDIO DE
DISEMINACIN
DE PATGENOS A
LARGA DISTANCIA

Patgenos en el interior de la semilla.

Medio ideal de sobrevivencia y
diseminacin.

PAPEL EN LA
SELECCIN Y
DISEMINACIN
DE RAZAS
PATOGNICAS

Seleccin preferencial de razas patognicas de

un fitopatgeno en relacin a un hospedante o
variedad (campos de produccin de semillas,
mayor homogeneidad de genotipos).

MTODOS DE ANLISIS FITOPATOLGICO PARA LA

DETECCIN DE PATGENOS FNGICOS EN SEMILLAS
Para todos los mtodos se suelen emplear 400 semillas de un lote
tomadas al azar (4 repeticiones de 100 semillas).

MTODOS CONVENCIONALES
1. Anlisis en Seco
Colocacin de semillas en hileras en placas Petri con papel filtro
en el fondo.
2
1
Se puede calcular el porcentaje de semilla
infestada en el lote.
Ej. N Placa
N Semillas con hongo en sup.
1
5
2
15
3
10
4
12
42/ 400 (N total semillas)
= 0,105 x 100
= 10,50%

1. Anlisis en Seco

Ventajas: Econmico y sencillo.

Desventajas: Slo detecta hongos superficiales, no detecta hongos en
endosperma ni en el embrin.
Phoma (picnidios) Macrophomina phaseolina
Sorgo
(microesclerocios)
Ajonjol

Pseudocercospora
sesami

2. Lavado de las Semillas

Alcohol absoluto 95%

Centrifugacin. Se decanta
sobrenadante.Se resuspende
pellet con agua.

Agua destilada estril

(ADE)

Estructuras quedan suspendidas

en el agua. El agua de lavado se
vierte en un nuevo tubo.

Agitacin vigorosa para desprender estructuras

fngicas (micelio y conidios principalmente)
Menos preciso. Permite indicar
gneros o especies presentes
en la superficie de la semilla.

Se coloca gota en
portaobjeto, se coloca
cubreobjeto y se
observa en
microscopio.

3. Mtodo del papel secante estndar (mtodo hmedo)

Proporcionar a las semillas condiciones muy favorables (humedad y
temperatura) para la manifestacin de microorganismos presentes en las
mismas (internos y externos).
Papel absorbente humedecido en el fondo de cada
placa. Es necesario mantener la humedad.
Se colocan las semillas en hileras y distanciadas
para facilitar la observacin y evitar problemas de
contaminacin de una semilla a otra.
Incubacin por mximo 7 das (observaciones y evaluaciones seriadas
para evitar encubrimiento por hongos de rpido crecimiento),
temperatura 26C, luz fluorescente 12 h y oscuridad 12 h.
Ventajas: Econmico y sencillo.
Desventajas: Slo detecta hongos. No detecta hongos de difcil
esporulacin. Detecta ms hongos superficiales que internos
(endosperma y embrin), los cuales tardan ms en proyectarse al exterior.

3. Mtodo del papel secante estndar (mtodo hmedo)

Para deteccin de hongos internos, se sigue el mismo

mtodo pero modificado:

Desinfeccin con hipoclorito de sodio 3% por

1 minuto.
Lavado con agua destilada estril.
Se dejan secar a temperatura ambiente.
Como en caso anterior, se incuban por mximo 7 das (observaciones y
evaluaciones seriadas para evitar encubrimiento por hongos de rpido
crecimiento), temperatura 26C, luz fluorescente 12 h y oscuridad 12 h.

4. Mtodo del papel secante con congelacin

Al congelarse el embrin la semilla no germina y no se desordenan en las placas.

Papel absorbente humedecido en el fondo de cada

placa. Es necesario mantener la humedad.
Se colocan las semillas en hileras y distanciadas
para facilitar la observacin y evitar problemas de
contaminacin de una semilla a otra.
Incubacin por 24 horas en condiciones de luz fluorescente y 26C.
Luego de 24 horas, las cpsulas se llevan a freezer (-15 o -20C) por 24
horas ms.
Luego se colocan en condiciones iniciales por 7 das ms.

5. Otros mtodos

Extraccin de ADN. Secuenciacin de ADN y anlisis de

secuencias.
Reaccin en cadena de la polimerasa (PCR).
Anticuerpos monoclonales.

(Rodrguez, 2013; Husted, 1994; Burns et al., 1994 )

ALGUNOS EJEMPLOS IMPORTANTES DE PATGENOS

FNGICOS ASOCIADOS A LAS SEMILLAS EN CEREALES Y
OLEAGINOSAS

Complejo fngico
Manchado del grano en arroz
Asociado a un complejo de gneros
fngicos (Bipolaris, Sarocladium,
Alternaria, Epicoccum, Fusarium,
Rhynchosporium) y especies
bacterianas del gnero Pseudomonas,
(P. glumae, P. fuscovaginae, P. syringae
pv. oryzae).

Actividad de tales
microorganismos reducen la
viabilidad y rendimiento de la
semilla certificada.
Sntomas en las glumas
varan dependiendo de la
clase de microorganismos
asociados y el avance de
la infeccin.
En condiciones tropicales,
Bipolaris oryzae se
encuentra con mayor
frecuencia, observndose
grandes lesiones causadas
por el hongo.
(Rodrguez y Nass, 1991)

Aspergillus sp., Fusarium verticillioides

MICOTOXINAS
Toxinas producidas por hongos
AFLATOXINAS Y FUMONISINAS
Caractersticas comunes:

Bajo peso molecular.

Poco solubles en agua.
Solubles en compuestos orgnicos.
Altamente termoresistentes.

(Mazzani, 2005)

AFLATOXINAS
Descubiertas en tortas de man (1960), algodn (1963).
Cultivos susceptibles: man, maz, algodn, arroz y sorgo.
Presentes en las especies fngicas: Aspergillus flavus (algunos
aislamientos, siendo la cepa tipo NRRL 2999), A. parasiticus, A.
nomius y A. tamarii.
Aflatoxinas conocidas: AFB1, AFB2, AFG1, AFG2, AFM1
AFB1: Cancergena. AFM1: Recuperada de leche.

Efectos negativos: intoxicaciones, carcinognesis, inmunosupresin.

Niveles mximos permitidos:
Consumo humano: 20 ppb
Alimentos concentrados diversos: 20 ppb
Alimentos concentrados para pollos de engorde: 10 ppb
Leche (M1): 0,5 ppb (nios).
(Mazzani, 2005)

FUMONISINAS
Presente en maz, sorgo y arroz. Descubiertas a finales de la dcada
de los aos 80 e inicios de los aos 90.
En el trpico se encuentran asociadas al hongo Fusarium
verticillioides y en clima templado al hongo Fusarium proliferatum.
Fumonisinas conocidas: B1, B2, B3. B1: Ms importante.
Efectos negativos: mutagnesis, carcinognesis.
Niveles mximos permitidos:
Consumo humano: < 1 ppm (maz), 10 ppb (man).
Equinos: < 3 ppm
Cerdos: 10 ppm
Bovinos: 50 ppm

(Mazzani, 2005)

MEDIDAS GENERALES DE CONTROL

Principio de Control

EXCLUSIN

Medidas
Cuarentena.

ERRADICACIN

Eliminacin de plantas enfermas,

destruccin de restos de cosecha.

PROTECCIN

Desinfeccin de suelos, aplicacin de

fungicidas, pocas de siembra.

BIOLGICO

Aplicacin de controladores biolgicos,

uso de extractos vegetales,
mejoramiento de plantas.
(Pacheco, 1988; adaptado por Prez-Pivat, 2015)

CERTIFICACIN DE SEMILLAS

Es el proceso de verificacin de la identidad, la produccin,

el acondicionamiento y la calidad de las semillas, con el
propsito de asegurar semillas con:

Pureza e identidad gentica

Calidad fisiolgica
Calidad sanitaria
Calidad fsica

Objetivo Central:
Actuar como medida de control
de calidad para mantener las
enfermedades de los cultivos a
niveles tan bajos como sea
posible.
(Pacheco, 1988; INIA Per, 2015)

 Semilla Gentica: Obtenida de la primera generacin resultante del proceso de

mejoramiento gentico capaz de reproducir la identidad de un cultivar, manejada y
conducida por un fitomejorador.

Semilla Fundacin: Obtenida de la semilla gentica, producida bajo la supervisin

de un fitomejorador o entidad creadora del cultivar, sometida al proceso de certificacin
y que cumpla con los requisitos establecidos.

Semilla Certificada: Obtenida a partir de la semilla de fundacin sometida al

proceso de identificacin y que cumple con los requisitos establecidos para esta
categora de semilla.

Semilla Registrada: Proveniente de cultivares genticamente mejorados, cuyo

producto final es debidamente aprobado y que cumple con todos los requisitos
establecidos en el reglamento de la categora de semilla certificada, excepto con el
registro de la genealoga.

Semilla Fiscalizada: Proveniente de semilla de fundacin, o semilla registrada,

sometida al proceso de certificacin y que cumple con los requisitos establecidos para
esta categora de semilla.
(Mrquez, 2003)

Tarjeta de
identificacin
de la muestra
Planilla de anlisis de calidad

Color blanco: clase Gentica o Fundacin.

Color rojo prpura: clase Registrada.
Color azul claro: clase Certificada.
Color verde claro: clase Fiscalizada.

Flujograma de procedimientos de laboratorio para la certificacin y/o anlisis de

semillas (INIA-CENIAP)

(Mrquez, 2003)

GRACIAS