UNIVERSIDAD NACIONAL DE CAJAMARCA

FACULTAD CIENCIAS DE LA SALUD

DEPARTAMENTO ACADÉMICO DE CIENCIAS QUÍMICAS Y DINÁMICAS

ESCUELA ACADÉMICA PROFESIONAL DE OSBTETRICIA

“Año del Fortalecimiento de la Soberanía Nacional”

ASIGNATURA BIOQUÍMICA

TEMA : DETERMINACIÓN DE AMILASA EN ORINA

(AMILASURIA)

DOCENTE : M.CS. Q.F. MARLENY ELIZABETH VILCA GAVIDIA

ALUMNA : SALDAÑA SOLÓN, GRACE KATHERINE

Cajamarca,03 de julio del 2022

I. INTRODUCCIÓN:
El páncreas puede ser la “glándula maestra” del cuerpo si se consideran los graves
trastornos digestivos y metabólicos que aparecen cuando se pierden sus
funciones exocrinas y endocrinas. El principal trastorno al que conduce la
pérdida de la función endocrina es la diabetes mellitus, que cuenta con mayor
morbilidad y mortalidad que todas las otras enfermedades pancreáticas
juntas. Las pruebas de laboratorio importantes a este respecto, son la
determinación de glucosa en sangre, fructosa mina y hemoglobina A1c con objeto
de conocer el control glucémico a corto y largo plazo. La pérdida de la función
exocrina es común en la fibrosis quística y en algunos sujetos con ataques
repetidos de pancreatitis generalmente causados por el abuso crónico del alcohol.
El páncreas tiene una gran reserva y la pérdida de la función produce síntomas
sólo después de que 85% de las células acinares se ha perdido. Existen algunas
pruebas de función pancreática que junto con la de grasa en materia fecal son las
más importantes. Las pruebas en suero, como la tripsina inmunorreactiva, son las
menos sensibles y menos específicas a pesar de ser las más fáciles de realizar. La
pancreatitis aguda es una de las principales emergencias médicas; el alcoholismo
y las enfermedades del tracto biliar son las causas predominantes, aunque sólo
tenemos algunas evidencias conjeturales decimo se inicia una pancreatitis. Los
cambios observados en las enzimas pancreáticas como amilasa y lipasa pueden
ser de moderados a intensos, desafortunadamente sólo es posible obtener una
estimación gruesa de la gravedad del padecimiento con los estudios
de laboratorio. La pancreatitis crónica generalmente es la secuela de
múltiples brotes de la enfermedad aguda y los resultados de laboratorio
normalmente no son muy útiles para el diagnóstico. El adenocarcinoma de
páncreas, la forma común de la enfermedad maligna, es funesta para casi todos
los pacientes debido a la naturaleza invasiva del cáncer y su progresión rápida y
silenciosa. No existen pruebas adecuadas de escrutinio para el cáncer pancreático
y lamerte se presenta típicamente de seis meses a un año del diagnóstico. Las
neoplasias de los islotes de Langerhans son un reto bioquímico para su
diagnóstico. Excepto los gastrinomas que producen el síndrome de Zollinger-
Ellison, la mayoría de estos tumores no son malignos, pero pueden poner en
peligro la vida debido a la liberación no controlada de factores endocrinos y la
estimulación a sus órganos blancos. Para establecer el diagnóstico se
 requiere realizar pruebas que determinen las hormonas normalmente producidas
en las células del islote de Langerhans y otros factores. La amilasa alfa (AMS) es
un metal enzima que requiere calcio y pertenece a la clase de hidrolasas. La
reacción enzimática que cataliza la amilasa alfa es la hidrólisis aleatoria de enlaces
glicosídicos alfa-1,4 internos del almidón, glucógeno y otros polímeros de la
glucosa. Los productos de digestión de la amilasa, que es una molécula de
almidón lineal que contiene sólo enlaces alfa 1,4, son maltosa, maltotriosa y otras
dextrinas. Las principales fuentes tisulares de esta enzima son las glándulas
salivales y las células acinares del páncreas. La actividad de amilasa alfa no es
específica para estos tejidos, ya que también se encuentra en el epitelio
intestinal, trompas de Falopio, mucosa del cuello uterino, endometrio y
tejido del seno durante la lactancia. La principal función de la amilasa alfa se debe
a la fracción pancreática, que ayuda a la digestión del almidón,
glucógeno y sus productos de descomposición en el intestino delgado. La AMS
de la saliva inicia la digestión de almidón en la cavidad oral, pero su acción
termina con rapidez a consecuencia del pH ácido del jugo gástrico durante la
deglución. Durante años los niveles de α-amilasa en suero nos han evidenciado la
necesidad de su determinación para el diagnóstico de pancreatitis aguda. Las
primeras técnicas estaban basadas en los cambios de la absorción máxima del
complejo entre el almidón y el yodo, ya que la α-amilasa degrada al almidón.
Otros métodos están basados en la producción de p-nitrofenol a partir de
sustratos oligosacáridos específicos con grupos bloqueantes en el azúcar
terminal. Estos métodos utilizan una variedad de enzimas para hidrolizar
la corta cadena de oligosacáridos para producir p-nitrofenol. Estas
enzimas contienen una actividad residual de α-amilasa que reducen
significativamente la estabilidad del reactivo. El método que presentamos no
utiliza enzimas, evitando así este problema de estabilidad. Se han desarrollado
ensayos de apareamiento enzimático que permiten condiciones de hidrólisis
más controladas y congruentes, y que también pueden adaptarse a instrumentos
automatizados.

II. OBJETIVO:

− Cuantificar por el método de Caraway los niveles de amilasa

en una muestra problema de orina.
III. MATERIALES Y EQUIPOS:

Materiales

− Gradillas
− Tubos de ensayo
− Matraces Erlenmeyer de 100 mL
− Pipetas graduadas de 1 mL, 5 mL
− Probeta de 100 mL
− Probeta de 1000 mL
− Marcador de vidrio

Equipos

− Equipo de baño maría y termómetro

− Espectrofotómetro

Sustancias

− Agua destilada (H2O)

IV. MUESTRA BIOLÓGICA:

− Muestra de orina de 24 horas: Recolectar en un recipiente

limpio todos los volúmenes excretados de orina por el paciente
durante un periodo de 24 horas, controlando con precisión el
tiempo de recolección de dicha muestra. Guardar en
refrigeración. En el laboratorio medir el volumen total
excretado utilizando probeta.
− Anotar el tiempo y medir el volumen excretado antes de
proceder a la determinación de la amilasa.

V. REACTIVOS Y SUSTANCIAS:
Reactivos
− Sustrato de almidón bufferado pH 7,0 (Preparación: almidón + sodio
fosfato dibásico + agua. Se controla pH=7,0 con pH-metro).
− Solución stock de yodo (KI+KIO3+H2O+HCl)
− Solución yodada de trabajo (Preparación: 1 parte de solución stock de
yodo + 5 partes de agua destilada).
 Sustancias

− Agua destilada (H2O)

VI. PROCEDIMIENTO:
− Armar el siguiente esquema de trabajo (utilizar dos matraces Erlenmeyer
de 50 mL o 100 mL)

COMPONENTES mL/ Matraz I (PROBLEMA) II

(BLANCO)
Sustrato de almidón bufferado pH7,0 5,0 5,0
Pre- incubar a 37º C durante 5 minutos ambos matraces
Agregar muestra de ORINA. 0,1 ---------
Retirar los matraces del baño maría y llevarlos a su mesa de trabajo.
Añadir agua destilada 40,0 40,0
Solución yodada de trabajo 5,0 5,0
Mezclar por simple agitación ambos matraces
Dejar en reposo 5 minutos
Leer en espectrofotómetro a una longitud de onda de 660 nm

o CALCULOS:
VN= [35-260] U/h

Absorbancia sistema problema () = 1,274

Absorbancia sistema Blanco () = 1,448

Volumen total de la orina = 2905

1,448 − 1,274
UNIDADES DE AMILASA/100mL × 800 = 96
1,448
2905
UNIDADES DE AMILASA/HORA = 𝟗𝟔 × = 139, 44
2000
VII. DISCUSIÓN DE RESULTADOS:

SISTEMA PROBLEMA (I): Se observa un color azul ya que la amilasa de la orina

es parcialmente hidrolizada sustrato del almidón, esto se detendrá al agregar la
solución yodada, y uniéndose así el iodo y la estructura helicoidal en la amilosa,
se tiene una lectura de 1, 274

SISTEMA BLANCO (II): este presenta un color mas oscuro ya que en este caso la
orina esta ausente ya que esta es la molécula de estudio, así que el iodo solo se a
unido a las estructuras helicoidales del sustrato de la amilosa, al llevarlo al
espectrómetro se obtuvo una lectura de 1,448.

VIII. CUESTIONARIO:
1. Cuáles serían las complicaciones en una madre gestante, el desarrollo
de un cuadro depancreatitis aguda.
Las complicaciones fetales originadas por la pancreatitis son:

parto pretérmino (4.68%): Un parto prematuro es el que ocurre más de

tres semanas antes de la fecha de parto estimada. En otras palabras,
un parto prematuro es el que ocurre antes de la semana 37 de embarazo.
Los bebés prematuros, en especial, los que nacieron con mucha
anterioridad, suelen tener problemas médicos complicados.

feto pequeño para la edad gestacional (22.7%): Significa que un feto o

un bebé es más pequeño o está menos desarrollado de lo normal para su
sexo y edad gestacional. La edad gestacional es la edad de un feto o bebé
que se cuenta a partir del primer día del último periodo menstrual de la
madre.
Ictericia (29.24%): La ictericia es una coloración amarilla en la piel, las
membranas mucosas o los ojos. El color amarillo proviene de la
bilirrubina, un subproducto de los glóbulos rojos viejos. La ictericia es un
signo de otras enfermedades.

síndrome de insuficiencia respiratoria (4.39%): El síndrome de

dificultad respiratoria aguda ocurre cuando se acumula líquido en los
sacos de aire elásticos y diminutos (alvéolos) de los pulmones. El líquido
impide que los pulmones se llenen con suficiente aire, por lo tanto, llega
menos oxígeno al torrente sanguíneo.

óbito (1.75%): Muerte fetal: Muerte fetal: Definida por la OMS, como la
muerte previa a la expulsión o extracción completa del producto de la
concepción, independientemente de la edad de la duración del embarazo
Según la edad gestacional debe ser a partir 22 de gestación o un peso al
momento del nacimiento mayor de 500 gramos.
 2. Describa las complicaciones que desencadenarían a nivel local,
sistémico y metabólico al establecerse un cuadro de pancreatitis
aguda en un paciente adulto.
Complicaciones locales:

Necrosis: zonas localizadas o difusas de tejido no viable, aparece por una PA

necrotizante, puede estar comprometiendo el páncreas, en la TAC se ve heterogénea con
densidad líquidas y no líquidas y con una pared no definida.

Necrosis pancreática organizada: colección encapsulada y madura de necrosis

ocurre luego de 4 semanas de inicio de la PA. En la TAC se observa una colección
encapsulada con pared bien definida y de contenido heterogéneo con densidad líquidas y
no líquidas.

- Tratamiento: Existen dos procedimientos, el desbridamiento por lavado y la

necrosectomía

- El primero consiste en la creación de un fístula de gran tamaño (15-18 mm), a

través de la cual se colocan 3-4 prótesis plásticas.
- El drenaje se lleva a cabo a través de un catéter naso quístico conectado a una
bomba de perfusión que permite la irrigación continua de la cavidad con suero
salino a una velocidad de 20-40 ml/h (500-1.000 cm3/24 h). La necrosectomía
puede llevarse a cabo creando una comunicación amplia (hasta 20 mm) a través
de la cual se introduce un endoscopio convencional en el retroperitoneo.
- Posteriormente se realiza un desbridamiento activo retirando inicialmente el
material sólido mediante asas, cestas o balones. Una vez evacuados los detritus
sólidos se lava abundantemente.
Colecciones líquidas agudas: densidad líquida que carecen de pared se presentan
precozmente en el páncreas o cerca de él, suele darse en una PA edematosa, aparece en
las primeras 4 semanas. En la TAC su densidad es homogénea y no tiene pared evidente
que la encapsule.
- Pseudoquiste : densidad líquida que tiene una pared de tejido fibroso no granulatorio,
aparece no antes de las 4 semanas y se relaciona con la PA edematosa es la complicación
más grave en niños con PA. En la TAC se puede observar bien definida
• Tratamiento: drenaje transpapilar en pseudoquistes de pequeño tamaño
- Absceso pancreático: colección circunscrita de pus, contiene tejido necrótico en
su interior.
- Complicaciones sistémicas: Es la exacerbación de una patología preexistente
provocada por la PA, diferente a falla orgánica que sería alteraciones de novo.
- Etiología:
• Traumática: golpes considerando maltrato infantil.
• infecciosa: sobre todo virales como parotiditis, sarampión, virus hepatitis A y
B, varicela Zoster, etc.
• Fármaco: ácido valproico, acetaminofén, salicilatos, etc.
• Obstrucción de vía biliar: congénitas o adquiridas litiasis, quiste de colédoco,
etc.
• Metabólicas: déficit de antitripsina, hiperlipidemias, hipercalcemia
• Enfermedades sistémicas: como fibrosis quística, síndrome hemolítico
urémica, LES, etc.
• Hereditaria: mutaciones en el gen del tripsinógeno catiónico

- Síntomas: dolor inicialmente sobre la línea media superior del abdomen o en el

epigastrio con irradiación en banda o en cinturón hacia ambos hipocondrios o región
dorsal, el dolor presentara una intensidad máxima a los 30 minutos y permanecerá 72
horas, se acompaña de vómitos persistentes y/o náuseas, fiebre, resistencia muscular y
ruidos hidroaéreos disminuidos.

En los casos de mayor gravedad el dolor es difuso y se acompaña de distensión

abdominal, íleo y signos peritoneales. Puede generar un cuadro de shock y como sin
dolor abdominal.

En los niños la clínica puede ser muy variable, desde dolor leve hasta mostrar signos de
compromiso sistémico ya que puede generar un derrame pleural, ascitis, shock, síndrome
de distress respiratorio, coagulación intravascular diseminada, hemorragia digestiva
masiva e infección sistémica.

- Fases de la PA: Se definen dos fases

• Temprana: manifestaciones se deben a la respuesta que genera el huésped ante el daño
• pancreático, dura 1-2 semanas. Activación de la cascada inflamatoria mediada por citocina. El
determinante de gravedad en esta fase es la presencia de falla sistémica y su duración.

Colecciones líquidas agudas: densidad líquida que carecen de pared se presentan precozmente
en el páncreas o cerca de él, suele darse en una PA edematosa, aparece en las primeras 4
semanas.
En la TAC su densidad es homogénea y no tiene pared evidente que la encapsule.
- Pseudoquiste : densidad líquida que tiene una pared de tejido fibroso no granulatorio, aparece
no antes de las 4 semanas y se relaciona con la PA edematosa es la complicación más grave en
niños con PA. En la TAC se puede observar bien definida
• Tratamiento: drenaje transpapilar en pseudoquistes de pequeño tamaño

- Absceso pancreático : colección circunscrita de pus, contiene tejido necrótico en su interior.

- Complicaciones sistémicas: Es la exacerbación de una patología pre-existente provocada
por la PA, diferente a falla orgánica que sería alteraciones de novo.
- Etiología:
• Traumática: golpes considerando maltrato infantil.
• infecciosa: sobre todo virales como parotiditis, sarampión, virus hepatitis A y B,
varicela Zoster, etc.
• Fármaco: ácido valproico, acetaminofén, salicilatos, etc.

• obstrucción de vía biliar: congénitas o adquiridas litiasis, quiste de colédoco, etc.

• Metabólicas: déficit de antitripsina, hiperlipidemias, hipercalcemia
• Enfermedades sistémicas: como fibrosis quística, síndrome hemolítico urémica, LES, etc.
• Hereditaria: mutaciones en el gen del tripsinógeno catiónico
- Síntomas: dolor inicialmente sobre la línea media superior del abdomen o en el epigastrio con
irradiación en banda o en cinturón hacia ambos hipocondrios o región dorsal, el dolor presentará
una intensidad máxima a los 30 minutos y permanecerá 72 horas, se acompaña de vómitos
persistentes y/o náuseas, fiebre, resistencia muscular y ruidos hidroaéreos disminuidos. En los
casos de mayor gravedad el dolor es difuso y se acompaña de distensión abdominal, íleo y signos
peritoneales. Puede generar un cuadro de shock y como sin dolor abdominal.

• Tardía: persistencia de signos de inflamación o la presencia de complicaciones locales( hay

que observar sus características morfológicas), si la falla orgánica persiste se habla de gravedad
- Diagnóstico: Requiere dos de los siguientes tres

• Dolor abdominal consistente con un origen en el páncreas (epigastrio, muy intenso,

de inicio agudo, persistente y usualmente irradiado a la espalda).

• Elevación de lipasa o amilasa al menos 3 veces por arriba de lo normal

• Hallazgos característicos de PA en imágenes diagnósticas.

• Laboratorios: enzimas pancreáticas, la magnitud de su elevación no es directamente

proporcional a la gravedad, se espera un aumento de 3 veces lo normal.

- Lipasa: Se mantiene elevada de 8-14 días por eso es mas sensible y especifica
que la amilasa.

- Amilasa: Puede haber un porcentaje de los pacientes que no la tengan elevada

o puede elevarse en otras patologías como la parotiditis, permanece alta durante
4-6 días.

• La medición de ambas enzimas es lo ideal

• Imágenes: cuando no se elevan enzimas pancreáticas

- Ecografía abdominal: No tiene una alta sensibilidad por la mala visualización, permite
ver edema, litiasis, masas, colecciones líquidas y abscesos. Hacerse durante las primeras
48 horas y repetirse una vez

- TAC Tiene mayor valor en la clasificación de gravedad porque permite evaluar la

extensión del proceso inflamatorio y la existencia de necrosis macroscópica o
compromiso vascular. Se hace antes de las 72 horas si hay duda de diagnóstico o después
de 5 días si el paciente

no mejora con el tratamiento

- Tratamiento: Principalmente es de soporte; prevención y manejo de

complicaciones, un manejo dentro de las primeras 24 horas reduce la mortalidad y
requiere una evaluación del estado hemodinámico e inicio agresivo de restitución hídrica

• Hospitalización: ingreso a una unidad de cuidados intermedios o intensivos

según la gravedad.
• Restitución de líquidos: con soluciones isotónicas de 250-500 cc/hora para producir
un gasto urinario de 0,5. Se inicia con un bolo de lactato seguido por infusiones

• Alimentación inicio de la alimentación disminuye los días hospitalarios e infección

pancreática, en la leve el inicio se da cuando el dolor ha cedido y en la grave se da vía
nasoyeyunal. La alimentación parenteral es la última opción en pacientes prolongados

• Analgesia el dolor es un síntoma importante dentro de la patología, los AINES son

efectivos pero causan complicaciones por lo tanto, se usan opiáceos menos la morfina
que produce espasmos de oddi.

• Antibiótico no se usa en la leve, pero si en la grave ya que reduce la mortalidad al

evitar la necrosis pancreática producida por bacterias. Se usan como primera línea
cefalosporinas de tercera generación asociada a metronidazol y se segunda línea
cefoperazona más metronidazol

3. Cuál es la ventaja o desventaja que se encuentra al determinar

cuantitativamente la amilasa urinaria en el diagnóstico de la
pancreatitis.
❖ VENTAJA: La ventaja de calcular la amilasuria, es que esta se lleva a
cabo con un mínimo de tiempo, y de esta manera permita de manera más
rápida y eficaz de dichos resultados obtenidos, permitiendo así poder
darnos cuenta si existe un excedente o no a nivel normal de u de amilasa.
❖ DESVENTAJA: Una desventaja que presenta es que puede presentar un
falso positivo, debido al manejo erróneo de dicha muestra o también puede
ser debido a una acelerada contaminación, esto causado por fluidos
corporales, como por ejemplo vendría a ser la saliva, perjudicando así el
resultado, porque el paciente presenta un nivel alto de triglicéridos y e
colesterol, asimismo también presentaría un trastorno pancreático, y por
ello los resultados pueden ser más bajos de lo que esperábamos puesto que
la enzima amilasa tiene una alta sensibilidad y baja especificidad.
IX. CONCLUSIÓN:
Llegue a la conclusión de que esta medida de cálculo nos proporciona de
manera más eficiente, saber el valor de amilasuria de un paciente, y de
tener una idea concreta de lo que puede estar ocurriendo en su
organismo, para así poder ayudar en su mejoría.

X. BIBLIOGRAFIA:

− 1− de México R de G y. O. Pancreatitis aguda recurrente durante el embarazo:

. reporte de un caso [Internet]. Org.mx. [citado el 3 de julio de 2022].
Disponible en: https://ginecologiayobstetricia.org.mx/articulo/pancreatitis-
aguda-recurrente-durante-el-embarazo-reporte-de-un-caso
− −
− 2− parto pretérmino - Google Search [Internet]. Google.com. [citado el 3 de
. julio de 2022]. Disponible en:
https://www.google.com/search?q=parto+pret%C3%A9rmino&source=lnm
s&tbm=isch&sa=X&ved=2ahUKEwjqkdGP1dv4AhXQHLkGHTTtCpUQ_
AUoAXoECAIQAw&biw=1163&bih=517&dpr=1.65
− −
− 3− Studocu.com. [citado el 3 de julio de 2022]. Disponible en:
. https://www.studocu.com/es-mx/document/universidad-autonoma-del-
estado-de-mexico/gastroenterologia/pancreatitis-aguda-y-cronica/8274717