Multi-capa de materiales compuestos reforzados con fibras

porosas para implantes:

En la formacin de fosfato de calcio in vitro en presencia de
vidrio bioactivo
DEL ARTCULO
Historia del artculo:
Recibido el 31 de mayo 2012
Aceptado 09 de agosto 2012
Xxx Disponible en lnea
Palabras clave:
Poroso compuesto reforzado con fibras
Vidrio bioactivo
Fluido corporal simulado
Ensayo in vitro
Condiciones de prueba esttica y dinmica

Objetivos. Materiales compuestos con fibra de vidrio reforzada (FRC), sobre la

metacrilato bifuncional resina, han demostrado recientemente su potencial par
como craneoplastia duradera, ortopdica y implantes orales. En este estudio s
una estructura de implante sndwich de varios componentes con (i) las capas
fuera de FRC porosa, que interconectan el hueso cortical, y (ii) que abarca l
internas de grnulos de vidrio bioactivo, las cuales interactan con el hueso espo

Mtodos. La capacidad de Bioglass 45S5 grnulos ( 100-250 uM ) para

formacin fosfato de calcio en la superficie de la FRC, se explor mediante la
de laminados de porosa FRC- Bioglass en fluido corporal simulado ( SBF ) d
mximo de 28 d.
Resultados. En ambas condiciones estticas (agitado) y dinmicas, grnulos
bioactivo indujeron la precipitacin de fosfato de calcio en las superficies de
como se confirma mediante el escaneo de electrones microscopco.

Importancia. El sistema de flujo dinmico propuesto es til para la simulaci

similar a huesos, como la formacin de apatita en varios nuevos diseos de
porosos que contienen vidrio bioactivo y la degradacin del material del implante

1.Introduccin
Compuestos reforzados con fibra duraderos, bioestables (CRF), que se iniciaron
originalmente para ser desarrollados para aplicaciones en odontologa en la
dcada de 1960, hubo que esperar hasta mediados de la dcada de 1990, hasta
que hicieron su camino en el uso clnico de rutina en diversos tipos de
restauraciones dentales. Entre las aplicaciones de la odontologa protsica y de
restauracin, FRC ha sido probado como material de implante en implantologa
craneofacial, ortopdicos y oral.
El material de implante se basa en las matrices de co-polmero externas de
metacrilato de polimetil (PMMA), bisphenol-A-dimethacrylate (BisGMA) y
triethyleneglycoldimethacrylate (TEGDMA) reforzado con fibras de vidrio E.

El potencial de la FRC como material de implante par

seas craneofaciales tambin se ha demostrado, en c
vivo estudios, el sistema de resina BisGMA-TEGDMA
tiene buena biocompatibilidad y se muestra la capacida
hueso [5].
Adems, la mejora de la biocompatibilidad FRC pu
mediante la imitacin de la estructura fibrosa del hue
implante-hueso.
Para lograr este objetivo, se sugiere una estructura de i
basada en mltiples componentes. Las capas exteriores
interconectan la cortical hueso, son de FRC porosa, mie
internas, y la interfaz de hueso esponjoso, comprende
biolgicamente activo.

Esta estructura de implante podra permitir la fijacin, la

proliferacin y migracin de las clulas que conducen a la
vascularizacin y rpida crecimiento de masa sea para la
estabilizacin del implante en el mediano y largo
plazo. 45S5 Bioglass (BG), un material Biocom sustituto
de injerto seo compatible y osteoconductivo,est
aprobadoporlaAdministracindeDrogasyAlimentosde
EE.UU. para ciertas aplicaciones clnicas en ortopedia y
crneo-maxilofacial. Por esta razn, este vidrio bioactivo
fue elegido para ser utilizado como componente
Biolgicamente activo en las estructuras de implantes FRC.
La formacin de una capa de apatita similar al hueso sobre
el implante de la superficie es esencial para la consecucin
de unin del hueso y la osteoconductividad. En contacto
con los fluidos corporales BG es capaz de la formacin de
una capa de apatita. La formacin de la capa tambin puede
ser simulada in vitro. Adems, se demostr que la presencia
de BG puede conducir a la formacin de apatita sobre la
superficie de los materiales de polmero bioinertes
adyacentes. Lainduccindeestellamadoefecto"halo"da
expectativa a que las estructuras de emparedado de
implantes sirva para mejorar la fijacin del implante FRC y
tambin para mejorar el crecimiento interno del hueso en
las capas porosas de FRC.
El objetivo de este trabajo fue estudiar la formacin de
fosfato de calcio (CaP) inducida en las superficies del
implante FRC por grnulos de BG. Por lo tanto,
experimentos establecidos in vitro eran desarrollados para
describir las reacciones que tienen lugar en la inmersin de
estructuras compuestas en fluido corporal simulado (SBF)
tanto en condiciones estticas y dinmicas con diversos
arreglos del componente bioactivo. El conocimiento
detallado de la in vitro e in vivo en las reacciones es
esencial para el desarrollo de diferentes estructuras de
implantes para aplicaciones craneofaciales.
2. Materiales y mtodos
2.1. Arreglos experimentales
La capacidad de los grnulos de vidrio bioactivo para
inducir la formacin de CaP sobre las superficies de
material compuesto durante la inmersin en SBF, seestudi
medianteelusoexperimentaldedosdiferentes
condiciones, estticas y dinmicas. En las pruebas estticas,
las muestras FRC fueron incubados en SBF en la presencia
y en la ausencia de grnulos BG separadas. Muestras
incubadas incluidos (1) FRC1: las muestras de control de
resina de pulido sin refuerzo, (2) FRC2: FRC porosa, y
(3) FRC3: laminado de estructuras FRC.
Se incluyeron muestras FRC1 y FRC2 para estudiar la
influencia de la distancia entre las superficies compuestas y
Grnulos de BG en el comportamiento in vitro. FRC3 era
un sustituto de un implante craneal. En la prueba dinmica,
se aprob un flujo de SBF a travs de las muestras de
FRC3. Los detalles de los montajes experimentales se
muestran en lafigura. 1.

2.2. Preparacin de las muestras

Las muestras FRC1 se prepararon mediante el vertido de mezcla
de resina que consiste en BisGMA (50% en peso), TEGDMA
(50% en peso), leva-phorquinone (0,7% en peso) y DMAEMA
(0,7% en peso) en moldes de masilla y luego polimerizados por
fotopolimerizacin. Posteriormente, las muestras se molieron
(LaboPol-21 de la mquina de pulir, 300 rpm, Struers A / S,
Rdovre, Dinamarca) a la dimensin final de 9 mm 59 mm
2,9 mm ( 0,2 mm cada uno) y las superficies fueron pulidas con
papel de SiC de grano 4000. La foto-polimerizacin iniciada de
las muestras se llev a cabo en tres etapas para asegurar que el
contenido residual de monmeros fuera mnimo. En primer lugar,
las muestras fueron pre-curados por un dispositivo dental de cura
a mano (Elipar S10 LED lmpara de polimerizacin,
3M/ESPE, Seefeld, Alemania) con un tiempo de exposicin de
120 s (intensidad: 1200 mW / cm 2 , Longitud de onda: 430-480
nm). En segundo lugar, la muestra fue post-curada en un horno
de vaco de la luz (Visio Beta vario, 3M/ESPE, Seefeld,
Alemania) durante 15 min en la temperatura y, finalmente, en un
horno de luz (Targis energa, Ivoclar Vivadent AG, Schaan,
Liechtenstein) durante 25 min a una temperatura de 95C.
Las muestras FRC2 se prepararon a partir de 1 mm de espesor Elminas de fibra de vidrio (Ahlstrom Fibra vidrio Oy, Kotka,
Finlandia). Las fibras orientadas al azar en las hojas tenan un
dimetro de 10 m y una longitud de 8 mm, y estaban ligadas por
un acrlico ligante con un agente de acoplamiento de silano
metacrilato. Piezas de 9 mm 60 mm fueron cortadas de estas
hojas y escaladas. Las piezas cortadas se impregnaron con 1-1,5
ml de la BisGMA / TEGDMA mezcla de resina, y se dejaron
durante 48 h en lo oscuro. Despus de la impregnacin, se
elimin el exceso de resina mediante la compresin y las
muestras fueron entonces curadas con luz como se ha descrito
anteriormente. Estos procedimientos se aseguraron de que entre
75-81% en peso de la resina se mantuvo en la estructura de
muestra de FRC2, lo que se esperaba que resultara en una
porosidad total de 39-49% en volumen con ms del 90% de
porosidad funcional (abierta). El tamao medio del poro era
mayor que 100 m. Las fibras de vidrio E de refuerzo en las
muestras fueron cubiertas por la resina de polmero.
Las muestras FRC3 se prepararon mediante el ensamblaje de dos
piezas de FRC2 con un envoltorio de fibras (everStick Ortho,
0.75 mm, StickTech Ltd., Turku, Finlandia) que sirven como
separadores (Figura 2) entre las capas para permitir la
incorporacin de la BG-Granulos. Cada una de las dos capas BG
contena 45S5 Bioglass grnulos de la fraccin de 100-250 m
(composicin en% en peso: SiO2: 45, Na 2 O: 24.5, CaO: 24,5, P
2 O5: 6). Las dos partes de las piezas de FRC2 a lo largo de los
espaciadores se sellaron con resina adicional antes de la
Fotopolimerizacin final ( Figura 2) . Muestras prequeas (10
mm 10 mm 4 mm), que contenian 60 5 mg de BG por capa
se utilizaron en el ensayo esttico. Muestras ms grandes (9,3
mm 30 mm 4 mm), que comprendan de 200 10 mg de BG
por capa se aplicaron en la prueba dinmica. El contenido de BG
tanto FRC3 ms pequeas y ms grandes fue de alrededor de
38% de la muestra total de peso. En las pruebas anteriores, la

FRC2 se hizo de picadas silanizadas orientadas al azar

cubierto de vidrio E impregnado en el BisGMA /
TEGDMA matriz de polmeros. Este compuesto se utiliz
para crear mltiples componentes laminados (FRC3) que
tenan dos capas de BG grnulos atrapados entre tres capas
de FRC porosa.
Los Grnulos BG fueron retenidos por el polmero, pero no
incrustados en ella.

disposicin por paquetes de granulos de FRC2 entre las capas

permiti humectar toda la estructura de material compuesto.
Despus de la preparacin de las muestras se lavaron en agua
ultrapura (calidad MilliQ), despus se lav con etanol, se sec a
temperatura ambiente y se almacen en un desecador. Muestras
para la prueba de inmersin esttica fueron limpiadas
adicionalmente por sonicacin durante 5 min.

Figura 1 - Esquema prueba de configuracin de inmersin de esttica (a) y dinmica (b) left:
sistema de bombeo, a la derecha: Seccin transversal del espcimen FRC3

Figura 2 - (a) Esquema de diseo del implante craneal: A - hueso intacto, B - tejido cerebral, C - duramadre, D - tornillos para
implantes fijacin, E - denso y F - FRC capas porosas con Everstick titulares espaciales (gris) y BG (sin marca) entre las
capas. (B) Esquema de FRC3 muestra.
2.3. In vitro inmersin en SBF
Grnulos BG (Bioglass 45S5, 100 mg / ml, 300-500 m fraccin) fueron
aadidos a la parte inferior del frasco donde era apropiado, consulte la
La bioactividad in vitro de las muestras se estudi utilizando
Tabla1 por detalles. El contacto entre los grnulos BG y las muestras
SBF preparada de acuerdo con la formulacin de Kokubo (cFRC1 o FRC2 estaba asegurado.
SBF). El SBF se prepar disolviendo productos qumicos
Despus de eso fueron aadidos 7 ml de SBF. Sin embargo, las Pequeas
reactivos de NaCl, NaHCO3, KCl, K2HPO4 3H2O, MgCl2
muestras de FRC3 fueron incubadas con 5 ml de SBF en orientacin
6H2O, CaCl2 2H2O, y Na2SO4 en agua desionizada. El
horizontal. Las muestras se mantuvieron a 37 C, ya sea para 3 y / o 7 d
fluido fue tamponado a pH fisiolgico 7,40 a 37 C con
en una incubadora de movimiento (Stuart S1500) utilizando la velocidad
(CH2OH)3 CNH2 y 2-MHCl.
de 120 rpm. El flujo de la solucin fue dentro del rango laminar pero
En las condiciones de ensayo esttico, las muestras (dos por
indujo algn movimiento de partculas de vidrio en la solucin. El pH de
grupo) se colocaron verticalmente en 10 ml frascos de
la mezcla de soluciones de SBF se determin a 37 C (pH metro:
polipropileno como se muestra en lafigura.1
MP225, Met-tler Toledo) en varios momentos durante la inmersin.
En el establecimiento de la dinmica, 22 ml de SBF circularon a travs
de numerosos FRC3 dentro de un reactor. Este sistema cerrado, que se
muestra en . Figura 1 b

Tabla 1 - grupos de las muestras usadas en cada prueba de inmersin esttica y dinmica. Tiempos de inmersin fueron de 3 y 7
das de la esttica prueba y 7, 14 y 28 d en la prueba dinmica N: Nmero de pruebas de cada tiempo de inmersin. En la prueba
dinmica, dos muestras se sumergieron en paralelo.
Prueba
Nombre del
N
Muestra
SBF
grupo
Tipo
Tamao
Volumen
Inmersin
Velocidad de flujo
(mm3)
(ml)
con
(ml / min)
Grnulos BG
Esttico
Control de
2/2
Ninguno
n/a
7
No
n/a
Esttico
SBF
0/2
FRC1
9 59
7
No
n/a
Esttico
FRC1 de
0/2
FRC2
2,9
7
No
n/a
Esttico
control
1/1
Ninguno
9 60 1
7
S
n/a
Esttico
Control
2/2
FRC1
n/a
7
S
n/a
Esttico
FRC2
2/5
FRC2
9 59
7
S
n/a
Esttico
BG
1/1
FRC3
2,9
5
S *a
n/a
Dinmic
FRC1 + BG
2/2/1
FRC3
9 60 1
22
S *a
13
a
FRC2 + BG
10 10 4
(distribuido)

FRC3
FRC3

9,3 30
4

*a Grnulos BG fueron parte de las muestras de FRC3.

Figura 3 - SEM de FRC1 muestra despus de 3 d inmersin en condiciones estticas con BG (FRC1 + BG): superficie de la muestra en posicin
mm (b) en 250 magnificacin; superficie de la muestra (c) y la seccin transversal (d) en la posicin x = 3 mm en mayor aumento, flechas blan
resina.

Figura 4 Muestra de SEM de FRC2 despus de 7 das de inmersin en condiciones estticas con BG (FRC2 + BG): superficie de la muestra en
(a), y 60 mm (b) en 250 magnificacin; superficie de la muestra para x = 0 en un aumento mayor (c) y cruz seccin (d) en la posicin x = 3 m
indican CaP en resina.

Consistaenunabombaperistltica(tipoIsomatecReglo
Rpido, IDEX Health & Science GmbH, Wertheim,
Alemania), un bao de agua para mantener
circulando la solucin a 37 C y dos cmaras de
muestras paralelas hechas de PE reforzada con
un dimetro interior (dI) De 9,4 mm. Se determin
la velocidad de flujo como 13 ml / min en el tubo
conector principal (Tygon ST3603, Saint-Gobain
Performance Plastics, EE.UU.) con dI = 3,2 mm y
se estim en 3 ml / min en cada uno de las
cmaras de la muestra. Ambos extremos de
la FRC3 se cubrieron con papel de filtro fijado por
los soportes de PE para homogeneizar las
condiciones de circulacin. Anterior a la prueba,
el FRC3 fue pre-sumergido en SBF durante 10 min
en vaco para llenar la estructura porosa de
lquido. Despus de eso, las cmaras de muestras
se conectan a la bomba y al reactor (incluyendo
las muestras) se limpiaron mediante el bombeo
en etanol, H2O (dos veces) y finalmente SBF. El
tiempo de pre-inmersin total fue de 20 min. Las
muestras FRC3 fueron mantenidas en el flujo de
SBF durante 7 d, 14 d o 28 d con el intercambio
de la solucin despus de cada 7 d. Se detect el
pH de la SBF antes y despus de la inmersin.
Despus de la eliminacin de las muestras

Figura 5 - Grosor mximo de capas de precipitacin

en FRC1 FRC2 y despus de la prueba de inmersin
esttica para 3 y 7 d depende del rea de la
muestra basada en seccin transversal Imgenes
de SEM: Como los datos no siguen normales
distribucin, el diagrama representa medianas
calculadas junto con los valores mnimo y mximo
de al menos cuatro mediciones. Las lneas se
dibujan para guiar el ojo.

incubadas, en las pruebas estticas y dinmicas,

se tomaron muestras de 0.5 ml SBF para el
anlisis de las concentraciones inicas. Las
concentraciones inicas de Ca, P, K, Mg, Na, P y Si
se determinaron con un espectrmetro de
emisin de plasma acoplado inductivamenteptico (ICP-OES, Optima 5300 DV, Perkin
Elmer). La muestras de FRC eliminadas se lavaron
en H2O (dos veces), seguido de etanol (Una vez)
y despus se sec durante la noche a 60C en un
horno. El peso de las muestras en estado seco se
midi antes y despus de la inmersin. Las
muestras secas fueron almacenadas en un
desecador antes de la caracterizacin por
microscopa electrnica de barrido (SEM).
2.4. Caracterizacin de las capas de precipitacin
Caracterizacin de las superficies externas y de las secciones
transversales de las muestras se realizaron por SEM (Gminis
1530, LEO Oberkochen / Carl Zeiss, Alemania) acoplados con
energa- dispersiva de rayos X espectroscopia (EDX, UltraDry
de Silicon Drift Detector, Thermo Scientific, Madison, WI,
EE.UU.). Para el examen en la seccin transversal, las
muestras fueron incorporados en resina epoxi (EpoFix,
Struers A / S) llena de carbn activo PA (Merck, Darmstadt,
Alemania) para mejorar el contraste contra la resina BisGMA /
TEGDMA. Despus de la polimerizacin y ajuste de la resina
de la incrustacin, las muestras fueron seccionadas a lo largo el
eje principal y luego pulidas con papel de SiC hasta 4000
grit. El anlisis SEM de las muestras de la esttica se llev a
cabo en varias posiciones a lo largo de los muestras (en 0, 3, 8,
11, 22, 33, 44, 58 mm de distancia desde el extremo inferior).
Adems, la formacin de la capa de reaccin sobre los
grnulos de BG se examin en sus superficies y en seccin
transversal. Cross-secciones de la FRC3 de la prueba dinmica
se analizaron a 0, 15 y 30 mm de distancia de la superficie de
entrada de la solucin de la muestra.
2.5. El anlisis estadstico
El anlisis estadstico se realiz mediante el SPSS (StatisPaquete tica de las Ciencias Sociales, SPSS Inc., Chicago,
EE.UU.) Software. La igualdad de las varianzas se analiz por
prueba de Levene y donde corresponda, la igualdad de medios
de prueba con muestras independientes t-test.

Los datos que no seguan distribucin normal fueron

analizados a travs de Kruskal-Wallis y Mann-Whitney Utest. El nivel de significacin estadstica considerado fue
de 0,05.
3. Resultados
3.1. Niveles de precipitacin en el ensayo esttico
En la presencia de grnulos de BG en SBF, los productos
de la disolucin inica de BG indujeron la formacin de un
Ca y P en las capas ricas en superficies
de FRC1 y FRC2. En la caracterizacin mediante SEM-EDX,
una estructura tpica de coliflor se observ la
precipitacin de CaP en todas las superficies de las
muestras probadas en condiciones estticas (lasFigs.3
5) . El espesor de la capa de CaP disminuy al aumentar la
distancia de los grnulos de BG. Sin embargo, en el
extremo superior de las muestras el espesor aument de
nuevo. El espesor de la capa de CaP aument con el
tiempo de inmersin. Despus 7 d, la capa era
considerablemente ms gruesa (hasta 0,8 m) en FRC1 en
comparacin con las muestras (FRC2 .Figura 5) . Adems,
la cobertura de la superficie por CaP fue casi completa
para FRC1, mientras que slo fue parcial para FRC2. El
porcentaje de la superficie cubierta por la CaP no hizo
estadsticamente cambiar significativamente entre el
tercero y sptimo da de incubacin. Sin embargo,
para FRC2, hubo un aumento significativo en la cobertura
de la superficie en la proximidad de los grnulos BG (X =
0-30 mm). Como era de esperar, no se encontr
formacin de CaP en las superficies de las muestras
cuando los grnulos BG estuvieron ausentes.
Curiosamente, las capas de reaccin sobre la superficies
separada por los BG grnulos eran diferentes,
dependiendo de si el FRC1 o FRC2 estaban presentes o
ausentes en el SBF. Cuando BG grnulos se incubaron sin
las muestras, la tpica capa de reaccin consistan en
CAP, slice y mezcla de CaP / slice de 5 um de espesor,
tambin se observaron en las superficies de BG grnulos
(300-500 um) ya despus de 1 semana de inmersin en
SBF.

Figura 6 - SEM de la superficie de grnulos BG despus de 7 das de inmersin en condiciones estticas y sin (a) y
con FRC2 espcimen (B).
Cuando las muestras se incubaron junto con BG
En condiciones de verificacin esttica sin signos de
grnulos, las capas de reaccin en las superficies de
reacciones en vidrio, se observaron superficies
los grnulos fueron ms delgada y consisti
granulares en la parte central de la laminas. Sin
principalmente de Si con manchas ocasionales de
precipitacin de CAP sobre las fibras de vidrio E
reforzadas se observ en imgenes de SEM.
formaciones de CAP ( .Fig.6) . La composicin tpica
de BG grnulos y capas de precipitacin detectados
3.2. Niveles de precipitacin en la prueba
por anlisis EDX se presentan en lafigura. 7.
dinmica
En el caso de FRC3, Si-rich, mezcla de CAP / Si y
En la condicin dinmica experimental, precipitaciones
ocasionalmente finas capas de CAP fueron
de CaP en la superficie de FRC2 las capas de
detectadas sobre los grnulos de BG (fraccin 100FRC3 fueron vistas en algunos sitios con flujo de SBF a
250 m) incorporados dentro de la estructura
lo largo de toda la estructura de la muestra (Ver fig.
laminada. En examen mediante SEM-EDX, capas
9, centro). Las capas de reaccin observadas en la BG
delgadas precipitadas de CaP, se observaron en la
grnulos incorporados dentro de la estructura
superficie de la resina junto a los grnulos BG. ( .
laminada eran similares a los observados en la
Figura 8) .
condicin esttica.
Se observ mejoras en la formacin de capas de CaP
para tiempos de incubacin ms largos, especialmente
en los bordes de la muestra.

Figura 7 - EDX espectros mostrando composicin tpica de los grnulos de BG y capas de precipitacin despus de 7 das de
inmersin: (a) originales BG, (b) capa rica en Si, (c) Si / CaP capa de mezcla, (d) la capa de cabeza (en resina de
polmero). Calculado CaO / P2O5 ratios (media DE desviacin) se indican.

Figura 8 - micrografa SEM de FRC3 despus de 7 das de inmersin esttica: seccin transversal en el margen (A y B) y la parte
central (C y d) de la muestra. Flechas blancas indican capa rica en Si, puntas de flecha negras Si / CaP capa de mezcla y flechas
White Cap en resina. Los crculos marcan el rea de detalle las figuras de la derecha.
Despus de la inmersin, los cambios en el peso de las
muestras de FRC3 fueron observados (Tabla 2). Esto
podra en parte depender de la desintegracin de los
grnulos de BG desde las periferias de la FRC3. Como
se sugiere por las imgenes SEM, en las entradas de
las muestras (x = 0 mm), la eliminacin parcial de los
grnulos de BG se llev a cabo (Fig. 9). Sin embargo,
tanto en las condiciones estticas y en las dinmicas,
no se encontraron grnulos BG unifamiliares en el SBF
despus la eliminacin de las muestras. Con la
inmersin prolongada en condiciones dinmicas, el
peso se redujo en 3,51,2% (media desviacin

3.3. Anlisis de SBF flotante

Para las pruebas de inmersin tanto estticas como
dinmicas, los resultados del anlisis de la
concentracin de iones (ICP- OES) del SBF flotante
estaban en consonancia con los resultados de la
caracterizacin por SEMEDX; ver Tabla 3 para ms
detalles. Iones de silicio y sodio fueron liberados de
los grnulos de BG, mientras que los iones de fosfato
fueron consumidos durante las reacciones de
precipitacin. Una pequea cantidad de iones de
magnesio en el SBF fue incorporada en la estructura
de CAP.

estndar) del peso inicial de la muestra. Sin embargo,

estos cambios no fueron estadsticamente
significativos, ya que la formacin de capas de
precipitacin tambin puede tener una influencia en el
peso de la muestra.

La figura. 9 - SEM de FRC3 despus de 28 d de inmersin en condiciones dinmicas: seccin transversal en las posiciones x = 0, 15
y 30 mm, para las ampliaciones 30 (izquierda) y 250 (derecha). Puntas de flechas blancas indican rica capa de Si, puntas de
flecha negras Si / CaP mezclado capa y flechas blancas CAP en resina. Zona de marca de Crculos de detalle figuras de la derecha.
Mediciones de pH en la solucin SBF siguieron la esperaba tendencia. En el ensayo esttico, despus de 1
semana de incubacin de FRC1 y FRC2 con los grnulos BG, un aumento de 10.2unidades (media
desviacin estndar) del valor original en el pH de la solucin se detect, mientras que el pH del Grupo de
control de SBF (solucin pura) no cambi. Una ligera disminucin de 0,1 unidades relacionadas con el tiempo,
fueron observadas en el pH de la FRC1 y FRC2 incubada sin grnulos BG. En la configuracin dinmica, el
aumento de pH en la solucin disminuy con el aumento del tiempo de incubacin. Los detalles de las
mediciones de pH se dan en la figura 10 y en la Tabla 2.

Tabla 2 - cambios de pH de SBF y adelgazamiento de FRC3 durante la inmersin en condiciones estticas y dinmicas (promedio y
desviacin estndar (entre parntesis)). N.A. = no analizado. Para grupos de dos muestras (*) indica el rango del distancia entre los
dos valores. En los ensayos dinmicos, ambos FRC3 muestras sumergidas en paralelo se ponderaron por separado, mientras que
slo una muestra SBF fue retirado del reactor de prueba dinmica a la vez.

Tabla 3 - Concentracin de iones (mg / l) en mixta SBF despus de varios tiempos de inmersin en esttica y en condiciones
dinmicas. Tambin figuran las lneas de emisin (nm) para cada ion en los anlisis ICP-OES. Los valores representan las
desviaciones medias y estndar (en parntesis) del nmero indicado de muestras. Para grupos de dos muestras (*) indica el rango
la distancia entre los dos valores. <LDC indica valores por debajo del lmite de deteccin (para iones de P y Si en cada caso
4 mg / L).

4. Discusin
Este estudio se realiz en el marco del desarrollo de una novela de capas mltiples de FRC poroso biocompatible para implantes para
la ciruga craneofacial, incluyendo reconstrucciones de huesos de la mandbula. Con la incorporacin de este tipo de implante de hueso se
espera que tenga lugar a travs de un efecto combinado de la fijacin biolgica y bioactiva. Grnulos BG incorporados dentro de la
estructura del implante debe proporcionar una fijacin bioactiva y mejorar la incorporacin biolgica de los componentes del implante de
la FRC porosa por la mineralizacin de la superficie de la FRC. Los resultados de este estudio confirman la mineralizacin (formacin de
CaP) inducida en la superficie de las estructuras porosas por FRC Grnulos BG en condiciones in vitro en estticas y dinmicas.
La precipitacin de CaP de la solucin sobresaturada, tales como SBF, se llevo a cabo en la superficie de diversos materiales
polimricos, por lo tanto, se espera que ocurra tambin en Superficies FRC dentro de los implantes compuestos que contienen BG.
Un requisito previo para la nucleacin de apatita de polmeros es el aumento de la sobresaturacin de SBF por slice y liberacin de iones
de calcio a partir de BG. Nucleacin heterognea, un paso inicial de la precipitacin en la superficie slida, se produce tan pronto como el
pH local del medio es mayor que el punto isoelctrico de la superficie. Iones con carga positiva de Ca2 + estn fuertemente adsorbidos en
la superficie de carga opuesta seguido por la atraccin de HPO42 - iones. Despus de eso, las concentraciones de iones en SBF son
suficientes, para iniciar el crecimiento espontneo de cristales de CaP. La cintica de precipitacin, conduce a cambios en el pH local y de
concentraciones de iones de SBF, en parte, pueden ser correlacionados con la composicin del cristal, la relacin de rea superficial a
volumen (AS / V) y la agitacin o flujo de la solucin. Las condiciones de umbral para la nucleacin se alcanzan ms rpidamente en
esttica que en condiciones dinmicas, de modo que la precipitacin se pospone en este ltimo caso.
El proceso de precipitacin sobre la superficie BG incluye la formacin de una capa amorfa de CaP en la parte superior de una capa
rica en Si y la posterior cristalizacin de CaP para hidroxiapatita. La presencia de las superficies de FRC disminuye la precipitacin de
CaP sobre la superficie de los grnulos de BG (Fig. 6). Resultados similares se informaron para compuestos de polmeros degradables. Sin

embargo, como las muestras utilizadas en este estudio fueron bioestables, creemos que el rea de superficie combinada ms grande de BG
y FRC1/FRC2, en que se produjo la precipitacin de CaP, hicieron que se redujera el espesor de la capa de CaP formado en grnulos BG
en comparacin con la capa de precipitacin formado en grnulos BG incubada sola.
Adems, en el ensayo esttico, la agitacin de abrasin de BG grnulos en contacto con superficies FRC1/FRC2. La agitacin de la
solucin durante la incubacin esttica igualo gradientes de concentracin locales a lo largo de las superficies de las muestras y, en
contraste con la configuracin proporcionada por Abe et al, dio lugar a un precipitado de estructuras similares en la parte de atrs y los
lados frontales de la muestra. Sin embargo, hubo desviaciones notables en la superficie cubierta por CaP, especialmente para las muestras
FRC2. Una capa de CaP pronunciada en la superficie FRC2 se formo principalmente en la proximidad de los grnulos BG de disolucin
(Fig. 5). Esto sugiere que una capa de BG integrada a lo largo de la toda estructura laminada es esencial para asegurar la formacin de una
capa de CaP continua. Si esta capa de CaP es suficiente para promover la unin osea inicial a travs de crecimiento interno celular, va a ser
verificada en experimentos posteriores.
Debido a las diferencias en las proporciones eficaces de rea de superficie de los grnulos de BG al volumen de SBF, una comparacin
directa no es plausible entre las muestras FRC2 incubadas con grnulos de BG y FRC3 que tenan grnulos BG atrapadas dentro de la
estructura. De hecho, las diferencias en el pH y la concentracin de iones gradientes locales explican en parte diferentes patrones
observados para la precipitacin de la CaP. Para superficies FRC2 en posiciones libres se logr la formacin de una capa uniforme, sin
embargo, un ms localizado y pronunciado efecto de "halo" se observ en superficies FRC2 dentro de capas de laminado FRC3 con
limitada de circulacin SBF. La interconectividad de los poros es un requisito previo para la formacin de CaP en el interior de estructuras
de materiales compuestos porosos no degradables, que se cumplan en el caso de las actuales estructuras de FRC. En principio, la capa de
precipitado podra cubrir incluso los poros de pequeo tamao en la superficie de la FRC3. Sin embargo, esta cobertura de los poro no
pudo ser confirmado en el presente estudio.
Varios autores han abordado la reactividad de los vidrios bioactivos y cermicas en sistemas de inmersin esttica y dinmica. En
general, el enfoque posterior se considera superior, a pesar de que no existe un consenso sobre que caudal simula mejor la situacin real en
el sitio de implante seo. Se ha demostrado que los sistemas dinmicos (flujo continuo o sistemas de flujo circulatorio con grandes
depsitos de SBF) son capaces de mantener el nivel de pH fisiolgico y las concentraciones de iones durante un largo perodo de tiempo.
Por lo tanto, el transporte inico debido a los gradientes de concentracin y de estrs (dispersin convectiva) evita que los iones se
concentren en la superficie de la muestra y se precipiten rpidamente. En contraste con las pruebas de inmersin dinmica de Aza et al o
Rmila y Vallet- Regi, el sistema construido de este estudio para garantizar el flujo de SBF a travs de la estructura porosa de FRC3.
Enfoques dinmicos similares se han utilizado tambin por Deng et al y Yue et al. En el presente diseo experimental, el permanente
intercambio de SBF asegura que los niveles de pH constantes no eran factibles, como las concentraciones de iones umbral locales para la
reacciones de precipitacin no habran sido necesariamente alcanzado en el plazo de investigacin. Con el tiempo, prcticamente no hay
observaciones de que la precipitacin en el compuesto hubiera sido posible. Por lo tanto, no habra habido ninguna prueba de SBF en
realidad fluye a travs de la estructura porosa del implante. Por estas razones el reactor construido en este estudio se utiliz para la
circulacin de SBF.
Para el CaP formado sobre las superficies de la FRC1 y FRC2 la CaO/P2O5 ratios que se calculan a partir de los espectros EDX. Estos
relaciones estaban en el rango de 1,49 0.19 que son valores tpicos sugeridos por EDX acercandose a la composicin estequiomtrica en
relacin a CaP de 1,67. Sin embargo, se espera que el uso del anlisis EDX con las superficies rugosas para ser semi-cuantitativa y podra
implicar un error sistemtico. Otros autores asumieron la presencia de una estructura defectuosa de pequeos cristalitos basado en
desviaciones similares de la relacin terica. El uso de los anlisis de pelculas finas de difraccin de rayos X de la estructura de CaP
podra haber revelado ms detalles estructurales.
Otras opciones para mejorar los montajes experimentales para simular condiciones fisiolgicas fueron propuestos por Bohner y
Lemaitre. Entre ellos se incluyen el uso de soluciones simplificadas simulado de fluidos corporales en lugar de SBF de Kokubo y las
estrategias para establecer una presin parcial constante de dixido de carbono (CO2) cerca de 0,05 atm (5%) que es una parte esencial del
sistema tampn del pH de la sangre.
La tasa de la formacin de la capa de apatita in vivo es probable que sea ms lenta que la simulada in vitro, ya que las protenas de suero
adherentes no presentes en SBF inhiben la nucleacin de la reaccin de apatita. Adems, los cambios considerables de los niveles locales
de pH fisiolgico son poco probables. Esto podra explicar por qu la formacin de apatita no se ha observado en las superficies de
polmeros junto a la capa de grnulos BG de recubrimientos craneales despus de un perodo de estudio de 12 semanas. Sin embargo,
Grnulos BG se han mostrado para mejorar la osteointegracin de los Implantes FRC en tanto in vitro como en condiciones in vivo. Con
lo que el nuevo diseo de implante laminado FRC- Bioglass permite el aumento del transporte de los lquidos corporales por la
penetracin capilar en la estructura del implante, los autores apuntan a promover an ms el crecimiento del hueso y de introducir efectos
antimicrobianos locales observados en estudios experimentales.
La figura. 10 - Diagrama que muestra los cambios de pH durante la prueba de inmersin en condiciones estticas (promedio de
dos mediciones). Bars indica los valores mximos de dos mediciones y mnimo.

5. Conclusiones
En este trabajo, se estudi la capacidad de 45S5 Bioglass de grnulos atrapados dentro la porosa bioestable de FRC para inducir la capa
de hidroxiapatita in vitro en las superficies de material compuesto y para mejorar la osteointegracin.
Para resina independiente y muestras de FRC inmersos en SBF agitado (condicin esttica) la presencia de grnulos de vidrio bioactivo
separadas por la precipitacin de la capa de CaP sobre toda la longitud de la muestra (60 mm) inducidas. El espesor de la capa disminuye
al aumentar la distancia a partir de los grnulos de vidrio. La capa de la precipitacin fue ms gruesa para las muestras de resina llanas que
para las muestras de FRC porosos.
Tanto en las condiciones estticas y dinmicas, los grnulos de vidrio bioactivo atrapados dentro de la estructura laminada de FRC que
fueron capaces de llevar a cabo reacciones bioactivas conocidas, as como para inducir la formacin de CaP en la superficie de la FRC.
Por ltimo, los resultados indican que la disposicin de sistema de flujo continuo es una herramienta til en la simulacin in vitro de la
formacin de apatita similar al hueso en las superficies de implantes y la degradacin del material de implante.