UNIVERSIDAD NACIONAL DE UCAYALI

FACULTAD DE CIENCIAS AGROPECUARIAS Y AGROINDUSTRIA

ESCUELA PROFESIONAL DE INGENIERIA AGROINDUSTRIAL

CURSO

: MICROBIOLOGA GENERAL

TEMA

: MEDIOS DE CULTIVO

DOCENTE

: BLGO. IDELFONSO AYALA ASCENCIO

CICLO

: IV

ALUMNO

: CONTRERAS WAISS HANS

Pucallpa-Per
2014

I.

INTRODUCCIN

Un mtodo fundamental para estudiar las bacterias es cultivarlas en un medio

lquido o en la superficie de un medio slido de agar. Los medios de cultivo
contienen distintos nutrientes que van, desde azcares simples hasta
sustancias complejas como la sangre o el extracto de caldo de carne. Para
aislar o purificar una especie bacteriana a partir de una muestra formada por
muchos tipos de bacterias, se siembra en un medio de cultivo slido donde las
clulas que se multiplican no cambian de localizacin; tras muchos ciclos
reproductivos, cada bacteria individual genera por escisin binaria una colonia
macroscpica compuesta por decenas de millones de clulas similares a la
original. Si esta colonia individual se siembra a su vez en un nuevo medio
crecer como cultivo puro de un solo tipo de bacteria. Muchas especies
bacterianas son tan parecidas morfolgicamente que es imposible
diferenciarlas slo con el uso del microscopio; en este caso, para identificar
cada tipo de bacteria, se estudian sus caractersticas bioqumicas
sembrndolas en medios de cultivo especiales. As, algunos medios contienen
un producto que inhibe el crecimiento de la mayora de las especies
bacterianas, pero no la de un tipo que deseamos averiguar si est presente.
Otras veces el medio de cultivo contiene determinados azcares especiales
que slo pueden utilizar algunas bacterias. En algunos medios se aaden
indicadores de pH que cambian de color cuando uno de los nutrientes del
medio es fermentado y se generan catabolitos cidos. Si las bacterias son
capaces de producir fermentacin, generan gases que pueden ser apreciados
cuando el cultivo se realiza en un tubo cerrado. Con otros medios de cultivo se
identifica si las bacterias producen determinadas enzimas que digieren los
nutrientes: as, algunas bacterias con enzimas hemolticas (capaces de romper
los glbulos rojos) producen hemlisis y cambios apreciables
macroscpicamente en las placas de agar-sangre. Los diferentes medios y
tcnicas de cultivo son esenciales en el laboratorio de microbiologa de un
hospital, pues sirven para identificar las bacterias causantes de las
enfermedades infecciosas y los antibiticos a los que son sensibles esas
bacterias.

II.

OBJETIVO

Conocer los principios generales de medios de cultivo de uso comn en

microbiologa.

Observar el efecto de las condiciones de asepsia en el control de la contaminacin

microbiana en el laboratorio.

III.

MATERIALES

MATERIALES DE LABORATORIO:

Medios de cultivo o ingredientes deshidratados

Agua destilada o desionizada
Algodn, gasa
Tubos de ensayo de 200x15 esterilizados
Vasos precipitados de 500ml
Vasos precipitados de 250ml
Balanza
Matraz de Erlenmeyer de 250 y 500ml debidamente esterilizados
Probeta de 100ml
Mechero bunsen
Esptulas
Lpiz marcador de vidrio
Pipetas graduadas
Probeta de 100ml
Tubos de ensayo
Cocina elctrica
10 placas Petri empaquetada en papel kraff esterilizadas
Bagueta

MATERIALES DEL ALUMNO

Algodn, gasa
500 gr de papa blanca
Papel aluminio y papel corriente no absorbente
Papel Kraff
Pabilo
Alcohol

IV.

PROCEDIMIENTO

Caldo nutritivo: Es un medio lquido complejo de uso general para el cultivo de

bacterias.
Ingredientes (g/l)
Peptona de casena
NaCl
Extracto de carne
pH

Pesar 10 gr de agar nutritivo

5.0
8.0
3.0
7.0

Mesclar al Agar nutritivo con 500 ml

de agua en un vaso de precipitado

Poner el vaso de precipitado en una cocina y

calentar a ebullicin durante un min.

Ajustar el pH

Distribuir el caldo en los 3

matraces

Esterilizar en la autoclave a 121 C durante 15

minutos

2. Agar nutritivo: Es un medio solido complejo de uso general para el cultivo de bacterias
exigentes.
Ingredientes (g/l)
Peptona de casena
NaCl
Extracto de carne
Agar agar
pH

5.0
8.0
3.0
15.0
6.5 7.0

Por intermedio de una balanza

analtica Pesar 27.5g de muestra de
MaCconkey Agar.

Disolver la solucin en litro de agua libre

de co2

Calentar la solucin en una cocina elctrica,

introduciendo en esta una pastilla de metal
(utilizada para la atraccin del calor), hasta
alcanzar el punto de ebullicin.

Vaciar la solucin en tres de los

matraces previamente esterilizados.

Esterilizar en autoclave

3.- Papa-dextrosa Agar (PDA). Es un medio solido complejo comercial de uso general para
el cultivo de hongos.
Ingredientes (g/l)
Glucosa
Extracto de papa
Agar
pH

20.0
4.0
15.0
5.6

Pesar 10gr. De dextrosa y 7.5 gr.

De agar agar

Papel 0.9 gr + Dextrosa 10.0 gr = 10.9 gr

Papel 0.8 gr + Agar agar 7.5 gr = 8.3 gr

Medir 500 ml de agua destilada, 250 ml para el Agar

agar ms dextrosa y 250 ml para la papa.

Pelar, cortar en trozos y pesar 125gr. De papa

blanca.

Hervir 250 ml de agua con los trozos

de papas

Colocar los siguientes 250 ml de agua a hervir,

primero colocar el agitador durante unos 2
minutos y soltar el Agar agar poco a poco cuando
este ya disuelto agregar la dextrosa.

Retirarlo de la cocina e inmediato sacar el gitador,

soltar el agua de papa y completar los 500 ml con
un poco de agua

Agitar constantemente la
solucin y medir el ph
obteniendo 6.5

Pasar a repartir equitativamente

al matraz.

Pasar a rotular para llevarlos a esterilizar a la autoclave.

Se esterilizara a 121C, cuando llegue a 15 libras recin controlar a 15 o 20 min.

V.

VI.

RESULTADOS

Pudimos observar los distintos tipos de cultivos como el caldo nutritivo, el

agar nutritivo y el PDA, sus distintos colores y olores.

Los cultivos que hicimos son para 2 distintos tipos de microorganismos los
cuales con hongos y bacterias.

CONCLUSIN

En esta prctica se aprendi la importancia de preparar medios de cultivo,

de que materiales pueden ser hechos, los distintos tipos de cultivos que
pueden desarrollarse en el laboratorio, as como su clasificacin, sus
caractersticas principales, los distintos tipos que pueden servir para
identificar diferentes bacterias, as como las condiciones que estos deben
de reunir.

VII.BIBLIOGRAFA

http://www.microinmuno.qb.fcen.uba.ar/guia.pdf

http://es.wikipedia.org/wiki/Cultivo_ax%C3%A9nico

http://www.iqb.es/diccio/c/cultivo.htm

https://espanol.answers.yahoo.com/question/index?qid=20080919094308A
Au7WT3

CUESTIONARIO
Qu medios de cultivo son usados para aislar hongos?
Para el aislamiento primario de los
hongos, se utilizan diversos medios
de cultivo. Estos medios hay que
seleccionarlos en funcin del hongo
que se sospeche y del tipo de
muestra.
Medios ms utilizados
Agar Dextrosado de Saboureaud
con
Cicloheximida
y
Cloranfenicol: se utiliza para el
aislamiento e identificacin de
dermatfitos y Cndidas.
Agar Dextrosado con Cloranfenicol sin Cicloheximida: se utiliza para el
aislamiento e identificacin de patgenos ambientales y oportunistas.
Agar de harina de maz (Corn Meal Agar):
o Suplementado con Tween 80: para diferenciar distintas especies de
Cndida y para realizar subcultivos ya que estimula la esporulacin de
hongos miceliales.
o Suplementado con 10 gramos de Glucosa: para diferenciar
Trichophyton.
Agar de Urea: se utiliza para diferenciar entre levaduras e identificar diferentes
especies de Trichophyton
En qu consiste el medio de cultivo TSI, LIA e indique que especies identifica?
TSI
El Agar-hierro-triple azcar es un medio de cultivo. Gracias a su composicin es uno
de los medios de cultivo ms empleados para la diferenciacin de entero
bacterias segn:
1. Fermenten o no glucosa.
2. Fermenten o no lactosa o sacarosa.
3. Produzcan o no cido sulfhdrico.
4. Produzcan o no gas.

LIA
(Lisina Hierro Agar): Medio de cultivo utilizado para diferenciar microorganismos,
especialmente Salmonella spp., basado en la decarboxilacin / desaminacin de la
lisina y en la produccin de cido sulfhdrico.
Cul es el propsito de utilizar tapones de algodn en los recipientes donde se
elaboran los medios de cultivo?
Para as evitar que los medios de cultivo de deshidraten o evitar que los cultivos
deshidratados absorban humedad.
Cul es la diferencia entre un cultivo puro y un cultivo mixto? Da ejemplos.
Cultivos puros (anexicos) son los cultivos que continen un solo tipo de
microorganismo. Los cultivos puros se inician a partir de colonias aisladas. De manera
que todos los individuos del mismo tengasn la misma composicin gentica.
Cultivos mixtos es aqul en el que se contienen dos o ms cepas de organismos.
Generalmente a que temperatura debe incubarse los tubos y cajas y porque?
A temperaturas entre 20 y 25C se pueden incubar en la gaveta o cajn del laboratorio
porque? Pues se debe a que funcionan con are seco, lo que determina la
deshidratacin de los medios de cultivo (el crecimiento de cualquier cultivo).