La ingeniera gentica incluye un conjunto de tcnicas biotecnolgicas,
entre las que destacan:
La tecnologa del ADN recombinante consiste en aislar y manipular un fragmento de ADN de un organismo para "recombinarlo" con el de otro organismo. Generalmente se trata el ADN con una endonucleasa de restriccin que origina en este caso un corte escalonado en las dos hebras dobles de ADN. Los extremos escalonados de ambas hebras de ADN son complementarios, una condicin que tienen que tener si se quieren unir. Los dos ADNs as cortados se mezclan, se calientan y s enfran suavemente. Sus extremos cohesivos se aparearn dando lugar a un nuevo ADN recombinado, con uniones no covalentes. Las uniones covalentes se forman aadiendo ADN ligasa y una fuente energtica para formar los enlaces. Otra enzima clave para unir ADNs es la transferencia terminal, que puede adicionar muchos residuos de desoxirribonucletidos sucesivos al extremo 3de las hebras del ADN. De este modo pueden construirse colas de poli Guanina en los extremos 3 de una de las hebras de ADN y colas de poli Citosina en los extremos de la otra cadena. Como estas colas son complementarias, permitirn que los dos ADNs se unan por complementariedad. Posteriormente, se forman los enlaces covalentes por la ADN ligasa.El ADN recombinado se inserta en un ADN vector que acte como vehculo para introducirlo en una clula hospedadora que lo replique Los vectores o transportadores ms utilizados son los plsmidos y el ADN del fago lambda.
Secuencia de ADN: Es un conjunto de tcnicas que permiten conocer el orden en que aparecen los nucletidos en el ADN, que es la base de la informacin gentica de los organismos. Mediante esta tcnica tiene aplicaciones mdicas, como la busqueda de algn polimorfismo gentico que se asocie con una enfermedad; bsicas: comparar la historia evolutiva de un organismo; o forenses.
Reaccin en Cadena de Polimerasa: La tcnica de la PCR aprovecha la actividad enzimtica por la que se replica el ADN en las clulas para conseguir una gran cantidad de copias de ADN a partir de cantidades pequeas. Se utiliza una polimerasa o una mezcla de varias que puedan resistir temperaturas elevadas, siendo la ms comn la polimerasa taq. La tcnica consiste en realizar varios ciclos de temperaturas elevadas para conseguir la desnaturalizacin del ADN y temperaturas ms bajas para la amplificacin del ADN desnaturalizado mediante la polimerasa.
Biotecnologa
Concepto: La biotecnologa, en un sentido amplio se puede definir como la aplicacin de organismos, componentes o sistemas biolgicos para la obtencin de bienes y servicios.
Breve Historia: Tomando en cuenta la definicin anterior significa que desde hace miles de aos, la humanidad ha venido realizando biotecnologa, si bien hasta la poca moderna, de un modo emprico, sin base cientfica:
-La domesticacin de plantas y animales ya comenz en el perodo Neoltico. -Las civilizaciones Sumeria y Babilnica (6000 aos a.C.) ya conocan cmo elaborar cerveza. -Los egipcios ya saban fabricar pan a partir del trigo hacia el 4000 a.C.
-Antes de la escritura del libro del Gnesis, se disfrutaba del vino en el Cercano Oriente: recurdese que, segn la Biblia, No "sufri" (o disfrut) accidentalmente los efectos de la fermentacin espontnea del mosto de la uva (primera borrachera con vino). Otros procesos biotecnolgicos conocidos de modo emprico desde la antigedad son fabricacin de queso, cultivo de championes alimentos y bebidas fermentadas: salsa de soja, yogur, etc. tratamiento de aguas residuales. Por supuesto, hasta la llegada de la moderna biologa, y en muchos casos hasta el siglo XIX, la base de muchos de estos procesos era desconocida. De hecho, solamente en el siglo XVIII cobra cuerpo la idea de que la materia viva puede ser estudiada como la materia inanimada, es decir, usando el mtodo experimental, con lo que se inicia el lento declive de las ideas vitalistas (creencias errneas de que "la vida depende de un principio vital irreducible a otras ramas de la ciencia"), que an daran sus ltimos estertores casi al final del siglo XIX. Biotecnologa Gentica
En la dcada de 1970 se abrieron nuevas perspectivas en el campo de las biotecnologas gracias a la elaboracin de nuevas tcnicas que permiten llegar directamente al material que est en el origen de todas las caractersticas y procesos vitales, es decir, el ADN. Este conjunto de tcnicas moleculares de manipulacin gentica recibe el nombre de ingeniera gentica.
Su objetivo es la manipulacin in Vitro del ADN, la introduccin de este ADN as modificado en clulas vivas y la incorporacin del mismo como parte del material hereditario de dichas clulas. De este modo, ADN de diversas procedencias, por ejemplo, la fraccin de ADN humano regula la sntesis de insulina, puede introducirse en bacterias de manera que pasa a formar parte de su genoma y lograr as que la bacteria adquiera la capacidad de elaborar insulina.
La terapia gentica: Consiste en sustituir o aadir, segn el caso, una copia normal de la regin defectuosa del ADN para poder solucionar y restablecer la funcin alterada, evitando el desarrollo de enfermedades de origen gentico, como por ejemplo la facultad defensiva ante las enfermedades infecciosas. Las enfermedades con las que se ha empezado a trabajar son, entre otras, la deficiencia de la enzima ADA (adenosina desaminasa), conocida como la de los nios burbuja y la DMD o distrofia muscular de Duchenne.
La posibilidad de curar las enfermedades genticas con un tratamiento especfico justifica los esfuerzos que se estn realizando en este sentido. Implicaciones ticas: La ingeniera tiene aplicaciones en campos muy diversos; dos de los ms importantes son la medicina y la creacin de nuevas especies o mejora de las existentes. El progreso en estos mbitos puede aportar resultados capaces de aliviar algunos problemas de gran importancia, pero no se debe olvidar que la explotacin comercial de las tecnologas requeridas slo est al alcance de unas pocas empresas multinacionales. Como era de esperar, la tradicional dependencia econmica de los pases subdesarrollados tiene en la ingeniera gentica un nuevo elemento de desequilibrio. En otro orden de cosas, la ingeniera gentica puede plantear graves problemas ticos. Hay opiniones muy diversas sobre dnde han de situarse los lmites de manipulacin del material que est en la base de todos los procesos vitales.
Al inicio de los experimentos del ADN recombinante, varios investigadores mostraron su preocupacin por los riesgo que se pueden realizar con dichas tcnicas. En varios pases se crearon comits para discutir el uso y la aplicacin de tcnicas de ingeniera gentica.