Contaminantes biolgicos: evaluacin en ambientes laborales
Biological contamination: evaluation in working environments
Contaminants biologiques:valuation dans l'envorennement du travail Redactor: Ana Hernndez Calleja Lda en Ciencias Biol!gicas "# del Carmen "art$ %ol Lda en &armacia Objetivo Conocer los mtodos de actuaci!n 'iginica (rente a los )roblemas derivados de la )resencia de contaminantes biol!gicos en ambientes laborales susce)tibles de )rovocar e(ectos nocivos en la salud del trabajador Introduccin La 'igiene industrial clasi(ica los contaminantes que se )ueden )resentar en el ambiente de los )uestos de trabajo en qu$micos* ($sicos + biol!gicos ,ntendiendo )or contaminantes biol!gicos los microorganismos* inclu+endo los que 'an su(rido mani)ulaciones genticas* los cultivos de clulas + los endo)arsitos 'umanos multicelulares ,s evidente el alto grado de conocimientos que sobre los contaminantes qu$micos + ($sicos se 'an ido acumulando a lo largo del tiem)o* no )udindose a(irmar lo mismo al 'ablar de los contaminantes biol!gicos +a que* aunque muc'os no estn de(inidos como ,n(ermedades -ro(esionales* la gran variabilidad de (actores que condicionan su )resencia* su)ervivencia + actuaci!n sobre el 'ombre* 'ace di($cil abordar los )osibles )roblemas )lanteados )or su )resencia en un ambiente laboral ,l 'ec'o de que los contaminantes biol!gicos sean seres vivos + )or tanto ca)aces de re)roducirse* que en una misma es)ecie bacteriana e.istan ce)as con distinto )oder )atognico o que (actores tales como la tem)eratura + la 'umedad ambientales )uedan condicionar su )resencia* no )ermite establecer unos /valores m.imo )ermitidos/ generalizados + vlidos )ara cualquiera que sea la situaci!n )roblema )lanteada -or todo ello )arece interesante )ro(undizar en su estudio a (in de intentar avanzar en el conocimiento de estos contaminantes ,n esta l$nea + de acuerdo con el Art 01 de la Constituci!n -ol$tica de C2 los )atronos deben )rotecci!n de los trabajadores contra los riesgos relacionados con la e.)osici!n a agentes qu$micos* ($sicos + biol!gicos durante el trabajo* en la que se )reveen directivas sobre agentes determinados Clasificacin de los contaminantes biolgicos A continuaci!n se describen las caracter$sticas de los di(erentes agentes biol!gicos as$ como algunos de los ejem)los ms re)resentativos de cada gru)o Virus %on las (ormas de vida ms sim)les* estn constituidas 3nicamente )or material gentico: A45 6Acido deso.irribonucleico7 o A25 6Acido ribonucleico7 + una c)side o cubierta )roteica %on )arsitos obligados* es decir* )recisan de un 'us)ed )ara )oder re)roducirse La in(ecci!n la llevan a cabo in+ectando su material gentico en las clulas del 'us)ed 8na vez en su interior se sirven de la maquinaria biol!gica del 'us)ed )ara )roducir co)ias de s$ mismos 'asta lograr su total recom)osici!n + en un n3mero tal que rom)e las membranas celulares )asando as$ a in(ectar nuevas clulas Bacterias %on organismos ms com)lejos que los virus + a di(erencia de ellos son ca)aces de vivir* en un medio adecuado* sin la necesidad de un 'us)ed )ara com)letar su desarrollo 4e todos modos un buen n3mero de ellos son )at!genos )ara el 'ombre ,s de destacar la ca)acidad de elaborar es)oras que )resentan algunas bacterias Las es)oras no son ms que (ormas de vida resistentes a condiciones adversas -ueden resistir* durante a9os incluso* altas tem)eraturas* sequedad* (alta de nutrientes* etc * recu)erando su estado normal + ca)acidad in(ectiva al entrar en contacto con un medio adecuado )ara su desarrollo Protozoos %on organismos unicelulares siendo algunos de ellos )arsitos de los vertebrados %u ciclo vital es com)lejo* necesitando* en algunos casos* de varios 'us)edes )ara com)letar su desarrollo La transmisi!n de un 'us)ed a otro la realizan 'abitualmente insectos Hongos %on (ormas com)lejas de vida que )resentan una estructura vegetativa denominada micelio que est (ormada )or 'i(as 6estructuras (ili(ormes )or las que circula el cito)lasma )lurinucleado7 ,sta estructura vegetativa surge de la germinaci!n de sus clulas re)roductoras o es)oras %u 'bitat natural es el suelo* )ero algunos com)onentes de este gru)o son )arsitos tanto de 'ombres + animales como de vegetales Helmintos %on organismos )luricelulares con ciclos vitales com)lejos + con diversas (ases en su desarrollo As$* es (recuente que com)leten cada una de sus (ases de desarrollo 6'uevo:larva:adulto7 en di(erentes 'us)edes 6animales;'ombre7* + que la transmisi!n de un 'us)ed a otro sea realizada )or di(erentes vectores 6agua;alimentos;insectos;roedores7 Artrodos %on organismos )luricelulares con ciclos vitales com)lejos + con diversas (ases en su desarrollo* 6'uevo:larva:adulto7 (ases que )ueden ser com)letadas en diversos 'us)edes siendo transmitidas de unos a otros )or varios vectores Algunas es)ecies de artr!)odos son endo)arsitos* es decir* atraviesan la su)er(icie del cuer)o <tras es)ecies no )enetran en el organismo sino que viven tem)oralmente sobre l* )udiendo causar el e(ecto adverso )ara la salud al inocular en el 'us)ed to.inas que )roducen diversas modi(icaciones )atol!gicas ,n el Cuadro = se describen algunos de los ejem)los ms re)resentativos de cada gru)o* as$ como sus v$as de entrada en el organismo* sectores de actividad ms (recuentemente im)licados + las medidas de )revenci!n + control ms im)ortantes + adecuadas a cada caso V!as de entrada "uc'os de los )rocesos )ro)ios de los sectores de actividad en que los contaminantes biol!gicos estn )resentes son susce)tibles de )roducir )olvo + aerosoles a los que* 'abitualmente* irn asociados los microorganismos La e.)osici!n + subsiguiente in(ecci!n de un individuo )or un agente biol!gico )uede tener lugar )or var$as v$as: <ral 6ingesti!n7 2es)iratoria 6in'alaci!n7 <cular 6a travs de la conjuntiva7 -arenteral 6)inc'azos7 4rmica 6a travs de lesiones +;o roturas de la )iel7 %iendo de todas ellas la v$a res)iratoria la de ma+or )robabilidad Las dosis in(ectivas )ara el 'ombre var$an con: ,l agente biol!gico La v$a de entrada La resistencia del 'us)ed* es decir* el grado de integridad de sus sistemas de(ensivos "#todos de muestreo $edimentacin ,ste mtodo consiste en ubicar )lacas de -etri* conteniendo medio de cultivo adecuado* en aquellas zonas escogidas )ara el muestreo >ras el )eriodo de muestreo se recogern las )lacas + se )rocesarn seg3n las tcnicas anal$ticas microbiol!gicas ms a)ro)iadas Recogida en medio acuoso %imingement& Consiste en 'acer borbotear un volumen de aire a travs de una soluci!n isot!nica contenida en un (rasco lavador + la )osterior determinaci!n cuantitativa )or los mtodos microbiol!gicos 'abituales 6&ig =7 'ig( ): Recogida en medio acuoso( "uestreador "a* 'iltracin Consiste en (iltrar un volumen de airea travs de (iltros de gelatina* incubndolos )osteriormente sobre medios de cultivo a)ro)iados Imactacin ,ste mtodo se basa en la retenci!n de microorganismos libres o de microorganismos aerotrans)ortados* ad'eridos a )art$culas de )olvo* en )lacas conteniendo medios de cultivo Recolector de Andersen 8n volumen de aire es (orzado a )asar a travs de 1 niveles en los que se encuentran )lacas con medio de cultivo La velocidad del aire aumenta de nivel en nivel consiguindose una se)araci!n )or tama9o de )art$cula Recolector RC$ %Reuter centrifugal s*stem& 8n volumen de aire es im)ulsado )or una 'lice sobre una cinta de )lstico )ortadora de alveolos +u.ta)uestos que contienen el medio de cultivo adecuado -art$culas + microorganismos aerotrans)ortados son )ro+ectados )or acci!n de la (uerza centr$(uga sobre el medio de cultivo 8n volumen de aire es as)irado + conducido a travs de una su)er(icie )er(orada sobre una )laca conteniendo un medio de cultivo adecuado ,n el Cuadro ? se resumen las )rinci)ales ventajas + desventajas de los di(erentes muestreadores ambientales de contaminantes biol!gicos Cuadro +: Ventajas * desventajas de los diferentes muestreadores de contaminantes biolgicos "uestreo de suerficie Placa de contacto ,sta )laca que contiene un medio de cultivo adecuado* en ligero e.ceso* se coloca sobre la su)er(icie a muestrear* )resionando sobre la misma + mantenindola inm!vil durante el contacto La base de la )laca se 'alla reticulada + )resenta una su)er(icie de dimensiones conocidas 'rotis %$,ab-rinse& ,ste mtodo se basa en la utilizaci!n de torundas estriles de algod!n* que nos )ermiten muestrear zonas de di($cil acceso )ara las )lacas de contacto Las torundas de algod!n se colocan )osteriormente sobre un medio de cultivo adecuado "aniulacin. transorte. almacenamiento * eliminacin de las muestras ,n la ma+or$a de los mtodos de muestreo comentados el so)orte en que se recogen los contaminantes biol!gicos consiste en una )laca que contiene un medio de cultivo que )ermitir el crecimiento de los contaminantes biol!gicos ca)tados ,s evidente que en el medio ambiente + en las manos de la )ersona que 'a de tomar las muestras estn )resentes microorganismos inocuos )ara el 'ombre )ero que )ueden ser una im)ortante (uente de error en la medici!n si* debido a que la mani)ulaci!n de dic'os so)ortes es incorrecta* estos microorganismos )ueden crecer en el medio de cultivo (alseando los resultados obtenidos -or ello mencionaremos los )untos a tener en cuenta )ara evitar esos errores: ,sterilizaci!n de so)ortes + medios de cultivo utilizados 4esin(ecci!n del equi)o de muestreo 4esin(ecci!n de las manos o utilizaci!n de guantes estriles )ara la mani)ulaci!n de las muestras %ellado de los so)ortes 'asta su utilizaci!n %ellado )osterior a la ca)taci!n de la muestra >rans)orte inmediato al laboratorio )ara su )rocesamiento -rocesamiento de las muestras mediante tcnicas anal$ticas adecuadas Almacenamiento limitado 6en nevera7* de las muestras 4estrucci!n de los cultivos )or esterilizaci!n en autoclave + )osterior eliminaci!n de las muestras )or incineraci!n u otros mtodos llevados a cabo )or ,ntidades debidamente autorizadas /#cnicas anal!ticas 4e las muestras tomadas en los di(erentes ambientes laborales se )uede obtener in(ormaci!n de dos ti)os 8na* cuantitativa* el n3mero de microorganismos )resentes )or unidad de volumen Habitualmente la unidad utilizada es: unidades (ormadoras de colonias )or metro c3bico 6u(c;m @ 7 6=7 ,l anlisis se realiza de (orma visual* manualmente o con la a+uda de un contador de colonias <tro ti)o de in(ormaci!n es la cualitativa* es decir* las di(erentes es)ecies de microorganismos que se 'an ca)tado en la muestra ,ste anlisis se realiza tratando las di(erentes colonias que se 'an desarrollado en el medio de cultivo mediante tcnicas bioqu$micas + tcnicas que )ongan de mani(iesto la mor(olog$a de las diversas es)ecies 6>inciones + "icrosco)$a7 4ada la gran variedad de microorganismos + de tcnicas anal$ticas e.istentes* se obviar su descri)ci!n )uesto que ello esca)a de la intenci!n de esta 5ota >cnica + )or otra )arte son >cnicas )er(ectamente establecidas + am)liamente di(undidas )or la literatura Algo similar ocurre con los medios de cultivo a utilizar Auizs aqu$ 'acer una distinci!n entre los medios de cultivo llamados 8niversales* en los que crecern un am)lio n3mero de di(erentes microorganismos + los medios de cultivo denominados es)ec$(icos o restrictivos que 3nicamente )ermiten el desarrollo de un n3mero limitado de microorganismos di(erentes ,ntre los )rimeros tenemos : Agar : 5utritivo* en el que crecer todo ti)o de microorganismos* + que ser el adecuado )ara el contaje total de microorganismos viables Agar : %abouraud* al que se a9ade cloran(enicol* + se utiliza )ara ca)tar 'ongos + levaduras 6el cloran(enicol evita el desarrollo de microorganismos que enmascarar$an el crecimiento de los 'ongos + levadura7 ,ntre los es)ec$(icos encontramos una gran variedad* tantos casi como ti)os de microorganismos di(erentes )ueden )resentarse* como )or ejem)lo: "edio "c Conke+ : )ara enterobanterias Agar : %angre : )ara estre)tococos "edio : C'a)man :)ara esta(ilococos >ri)ticase : %o+ : Agar : )ara brucelas etc La elecci!n de uno u otro ir en (unci!n del grado de conocimiento sobre los contaminantes que se es)era encontrar en un ambiente -ero no es de descartar la utilizaci!n simultnea de ambos sistemas )ara asegurar una com)leta ca)taci!n de todos los )osibles contaminantes )resentes* dado que en la ma+or$a de los casos no es )osible una identi(icaci!n )revia de los mismos 0ota: u(f(c1m 2 : unidades formadoras de colonias or metro c3bico de aire( Valoracin 4el mismo modo que ocurre cuando se trata de valorar la e.)osici!n a contaminantes qu$micos* una vez identi(icados los contaminantes biol!gicos + estimadas sus concentraciones en el medio ambiente de trabajo* se )roceder a la valoraci!n /com)arando )ara cada contaminante objeto de estudio el valor de su concentraci!n ambiental* con el valor de re(erencia m.imo admisible )ara dic'o contaminante/ ,ste valor de re(erencia m.imo admisible o criterio de valoraci!n* )ara el caso de los contaminantes biol!gicos* no est establecido a nivel normativo en nuestro )a$s ni en los de nuestro entorno socio: econ!mico >am)oco e.isten criterios de valoraci!n de ti)o tcnico /no vinculantes/ a estilo de los >LB'% de la ACClH )ara contaminantes qu$micos* siendo ello debido quizs a la e.istencia de una gran variabilidad de (actores )ro)ios de la naturaleza de los contaminantes biol!gicos 6su ca)acidad de re)roducci!n* el 'ec'o de que en una misma es)ecie microbiana e.istan ce)as con distinto )oder )atognico o que alteraciones de (actores ambientales tales como la tem)eratura* 'umedad* etc )uedan condicionar su )resencia en un determinado ambiente7 que inciden en la di(icultad de establecer unos criterios de valoraci!n generalizados + vlidos )ara cualquiera que sea la situaci!n )roblema )lanteada 5o obstante* a )esar de las di(icultades e.istentes* el Comit sobre Bioaerosoles de la ACCDH 'a dado a conocer un documento sobre: /"icroorganismos viables en ambientes de o(icina: -rotocolo de muestreo + )rocedimientos anal$ticos/* 'aciendo es)ecial 'inca)i en que se trata de un borrador + que no se )uede 'acer uso inmediato del mismo en estudios de cam)o Asimismo* anuncia que est desarrollando )rotocolos similares en E ambientes di(erentes adems del anteriormente mencionado 6o(icinas7 ,n dic'o )rotocolo* en el que se establecen sistemas de muestreo* estrategia de muestreo* )rocedimientos anal$ticos* inter)retaci!n de datos + recomendaciones sobre medidas correctoras* se a(irma que la utilizaci!n del mismo deber$a estar basada en in(ormaci!n mdica o cl$nica que indicara la )resencia de en(ermedades relacionadas con el )uesto de trabajo* tales como: (iebre del 'umidi(icador* )neumonitis 'i)ersensitiva + alergias debidas* )robablemente* a bioaerosoles 8n )unto interesante a destacar de este )rotocolo es el que 'ace re(erencia a la inter)retaci!n de los datos obtenidos + del que se in(ieren dos acciones a realizar ,n )rimer lugar* + si el n3mero total de u(c;m @ e.cede de =FFFF* recomienda a)licar de inmediato las medidas correctoras descritas en el mismo ,n segundo lugar* si el n3mero total de u(c;m @ es in(erior a =FFFF* recomienda la identi(icaci!n de los )osibles agentes etiol!gicos* de los cuales )ro)orciona una lista dividida en tres gru)os: Hongos* como )or ejem)lo: As)ergillus s)* Clados)orium s)* "ucor s)* Bacterias* como )or ejem)lo: &ormas gram negativas o %ta)'+lococcus aureus* %tre)tococcus salivarius* Cor+nebacterium s)* Actinomicetos termo($licos* como )or ejem)lo: "icro)ol+s)ora (aeni* >'ermomonos)ora s)* ,n estos casos si la )resencia de alguno de los agentes identi(icados e.cede de las 0FF u(c;m @ + si no 'a+ indicios de res)uesta alrgica a )art$culas )rocedentes del e.terior* se deben a)licar las medidas correctoras descritas en el )rotocolo 8n cuarto gru)o de )osibles agentes causantes de la en(ermedad* en el que se inclu+en: -rotozoos* micoto.inas* endoto.inas* es mencionado + su estudio recomendado en el caso en que una vez a)licadas las medidas correctoras + 'abiendo disminuido el n3mero de los dems agentes etiol!gicos mencionados* )ersistirn los e(ectos adversos ,ste )rotocolo* que como se 'a mencionado est en (ase de discusi!n* es o ser vlido )ara un ambiente determinado* )ersistiendo el )roblema de c!mo evaluar* aquellas situaciones de las que no se )osee dato alguno que sirva como criterio de valoraci!n La em)resa -ool Bioanal+sis ltalina 6)bi7 desarrolladora del mtodo de muestreo %ur(ace Air %+stem 6%A%7* en su )ublicaci!n /"icrobiological control o( t'e air and sur(ace environment/* sugiere los )rocedimientos )ara realizar muestreo ambientales en los que se establece un )rograma de muestreo inicial en di(erentes ambientes* tales como : Hos)itales* industrias de alimentaci!n* laboratorios bacteriol!gicos* )lantas de tratamiento de e(luentes* control de desin(ecci!n* etc indicando )ara cada uno de ellos el n3mero de muestras a tomar 4e este muestreo inicial se obtendrn los datos con los que elaborar los niveles de ace)tabilidad que en trmicos generales 6)bi7 sugiere entre @FF:0FF u(c;m @ 8na vez (ijados estos niveles de ace)tabilidad recomienda realizar muestreos rutinarios que )ro)orcionarn in(ormaci!n acerca de la situaci!n 'iginica del rea estudiada + sobre si medidas 'iginicas )reventivas 6o correctoras7 debern ser tomadas )ara mejorar las condiciones ambientales de un determinado )uesto de trabajo Bibliograf!a 6=7 LD<G* -H I LD<G* "H Air $amling Instrument for 4valuation of Atmos5eric Contaminants CincinnatD ACCDH =JK@ 6?7 %>A5D,2* 2G et al "icrobiolog!a "adrid ,d Aguilar =JEE J=F ) 6@7 ADHA Bio5azards Reference "anual Akron AlHA =JK1 =1F ) 6L7 <"% 6oonosis Parasitarias Cinebra <"% =JEE =@0 ) %erie de in(ormes tcnicos nM 1@E 607 <"% 6oonosis Bacterianas * V!ricas Cinebra <"% =JK? =11 ) %erie de in(ormes tcnicos nM 1K? 617 DL< 4nc*cloaedia of Occuational Healt5 and $afet* Cinebra DL< =JK@ 6E7 CA%><5 4, D2DA2>,* , /#cnicas. An7lisis * Controles en "icrobiolog!a Barcelona ,d Augusta =JE= 0E0 ) 6K7 BAL,5* H et al "edicina Preventiva * $ocial( Higiene "adrid ,d Amaro =JE= ==LE ) 6J7 H,25A54,N* A I "A2>D* C 4valuacin * Control de Contaminantes Biolgicos en Ambientes 8aborales Barcelona D5%H> =JKJ %erie 4ocumentos >cnicos nM 00KJ 6=F7 C2ALL,G* LB et al Patt*9s Industrial H*glene and /o:icolog*( Vol( III 5ew Gork ,d Ho'n Oile+ and sons 6==7 %AP* 5D ;angerous Proierties of Industrial "aterials 5ew Gork ,d Ban 5ostrand 2ein'old Co =JKL %ection ? Dndustrial Air Contaminant Control )) J:@? 6=?7 48&&8%* HH I B2<O5* C" Healt5 Asects Biotec5nolog* Annals o( <ccu)ational H+giene =JK0*?J:=Q: =:? 6=@7 "ACH,2* HH I &D2%>* "O Personal Air $amlers for "easuring Occuational 4:osures to Biological Hazards American Dndustrial H+gienists Association Hournal =JKL* L0:?: E1:K@ 6=L7 ACCDHC<""D>>,, <5 BD<A,2<%<L% Airborne Viable "icroorganisms in Office 4nvironments: $amling Protocol and Anal*tical Procedures A))lied Dndustrial H+giene =JK1* : =: =J:?@ 6=07 -<<L BD<A5ALD%D% D>ALDA5A 6)bi7 "icrobiological Control of /5e Air and $urface 4nvironment %bi& "ilan