CARRERA DE INGENIERA AGROPECUARIA

SANTO DOMINGO
NOMBRE: Dayana Guevara Camino MATERIA: Microbiologa
NIVEL: Tercero DOCENTE: Ing. Gustavo Nez
FECHA DE REALIZACIN: 12 de Junio del 2014 PRCTICA N 5

TEMA: Observacin e identificacin de microorganismos aislados en el ambiente
suelo, agua, aire.

I. INTRODUCCIN
La microbiologa es el rea de la ciencia que estudia a los microorganismos
(tambin llamados microbios), seres vivos invisibles a simple vista, es decir,
los que solo pueden verse con microscopio. La palabra microbiologa se
compone de tres partes de origen griego: micro o pequeo, bios o vida y
loga o estudio (estudio de la vida pequea).
Las frutas y hortalizas son productos perecederos, susceptibles al ataque de
microorganismos antes o despus de la cosecha y durante su
almacenamiento; tal es el caso de los hongos fitopatgenos, los cuales, de
acuerdo con HerreraEstrella y Carsolio (1998) pueden provocar grandes
prdidas en la produccin de frutas y hortalizas. Por otra parte, este tipo de
microorganismos son capaces de producir sustancias, como resultado de su
metabolismo secundario, como las micotoxinas, que se distribuyen con
facilidad en el substrato y pueden llegar a ser perjudiciales, an cuando se
encuentran en concentraciones muy bajas, poniendo en entredicho su
inocuidad, ya que un 25 % de las cosechas de alimentos a nivel mundial
estn contaminadas con algn tipo de micotoxinas, lo cual representa un
fuerte riesgo para la salud de la poblacin de pases importadores de
alimentos que no controlan estos contaminantes.
II. OBJETIVOS
2.1. OBJETIVO GENERAL
- Ejercitarse en las tcnicas de observacin macroscpica y microscpica de
microorganismos comunes del ambiente suelo, agua, aire.
2.2. OBJETIVOS ESPECFICOS
- Conocer la estructura de hongos comunes.
- Ejercitar el manejo del microscopio compuesto y de diseccin.

III. REVISIN DE LITERATURA
3.1. AISLAMIENTO E IDENTIFICACIN DE LOS
MICROORGANISMOS
Para el aislamiento de microorganismos especficos han sido utilizadas
tcnicas selectivas empleando medios que permiten a dichos organismos
crecer suprimiendo el crecimiento de otros microorganismos que no sean
parte del estudio. La composicin de tales medios son determinados por
los microorganismos que se pretenden estudiar. En el caso de bacterias y
levaduras, por regla general, son sensibles al crecimiento a distintos
niveles de pH y concentraciones de agua, mecanismos que limitan e
inhiben an ms la probabilidad de que otros microorganismos crezcan
en el medio selectivo. Tambin se emplean agentes fungicidas para la
supresin de desarrollo de hongos filamentosos, los cuales deben ser
utilizados con precaucin, ya que tales compuestos pueden inhibir
algunas levaduras.

Otros mecanismos ms especficos para la identificacin de los
microorganismos consideran diversas propiedades como:
- Caracterizacin fisiolgica y bioqumica, donde alcanza una
importancia significativa la utilizacin de compuestos carbonados.
- Fermentacin de carbohidratos, ya que los microorganismos pueden
utilizar diversas fuentes carbonadas, tales como, glucosa, arabinosa
rhamnosa, etctera La capacidad fermentativa permite diferenciar
algunos gneros de stas, entre los cuales se ubica el gnero
Saccharomyces y Zygosacharomyces que fermentan altamente la
glucosa. Por el contrario otras como Rhodosporidium no son tan fuertes
fermentadoras y por tanto se ubican en otro gnero.
- Asimilacin de compuestos carbonados y compuestos nitrogenados.
(Araya & Brito, 2012)

3.1.1. Criterios macroscpicos
Estos criterios tienen en cuenta el aspecto de las colonias de levaduras al
crecer en los diferentes medios de cultivo.

La mayora de los organismos levaduriformes crecen fcilmente en un
gran nmero de medios de cultivos usados rutinariamente en el
laboratorio de Microbiologa (agar sangre, agar chocolate, agar Cled,
etc.). Sin embargo, el agar glucosado de Sabourand (SDA), con o sin
antibiticos aadidos, es el medio de aislamiento por excelencia para la
identificacin de levaduras.
En el medio SDA las colonias de levaduras suelen ser completas,
ligeramente abombadas o planas de consistencia, mantecosa, lisas o
rugosas, con olor dulzn agradable, volvindose ms pastosas a medida
que envejecen.
Por lo general las colonias de levaduras no desarrollan micelio areo,
aunque en ocasiones pueden aparecer prolongaciones aracneiformes en la
periferia de las colonias. Si se observa un micelio areo definido, debe
considerarse la posibilidad de que se trate de un hongo dimrfico o de
ciertas especies de levaduras que pueden formar micelio verdadero como
Geotrichum, Galactomycetes, Trichosporon o Blastoschizomyces.

Una colonia de aspecto y consistencia mucoide sugiere la formacin de
cpsulas y puede ser el paso inicial para la identificacin de Cyptococcus
neoformans.

Las colonias de color rojo-anaranjado o naranja, de aspecto cremoso o
rugoso, son caractersticas de las especies del gnero Rhodotorula y
Sporobolomyces (anaranjado), color que manifiestan estas levaduras por
su riqueza en carotenoides.
Algunos hongos producen micotoxinas, sustancias venenosas, se
encuentran mayormente en las siembras de granos y en nueces, pero
tambin pueden ser encontradas en el apio, jugo de uvas, manzanas y en
otras frutas y vegetales.
Los hongos tienen ramas y races que parecen hilachas finas. Las races
pueden ser difciles de ver cuando el hongo est creciendo en los
alimentos y pueden encontrarse profundas, dentro delos alimentos. Los
alimentos con hongos visibles pueden tener bacterias invisibles
creciendo junto con el hongo.

El crecimiento de hongos es promovido por condiciones clidas y niveles
altos de humedad.

Cuando el alimento presenta un gran crecimiento de hongos, las hilachas
de las races ya han invadido el alimento profundamente. reas pequeas
de hongos pueden cortarse en los vegetales y frutas con bajo contenido
de humedad. Al hongo le es difcil penetrar alimentos densos.
En los hongos ms peligrosos, se puede encontrar frecuentemente
sustancias dainas en o alrededor de estas hilachas. Y en algunos casos,
estas toxinas pueden dispersarse a travs de todo el alimento. (Linares
Sicilia & Francisco, 2008)

IV. MATERIALES Y MTODOS

4.1. DE LABORATORIO
4.1.1. EQUIPOS
Microscopio estereoscopio, microscopio compuesto, estufa de
incubacin, estufa de esterilizacin, cmara de flujo laminar,
autoclave, cocina elctrica.

4.1.2. MATERIALES
Placa porta objeto, placa cubre objeto, vasos de precipitados,
Erlenmeyer, matraces, kit de diseccin, mechero de alcohol, gotero,
platos Petri conteniendo medio de cultivo.

4.1.3. REACTIVOS E INSUMOS
Alcohol antisptico y agua destilada

V. PROCEDIMIENTO

Se limpi la placa portaobjetos, ya que debe estar exenta de pelusas
Con el gotero se coloc una gota de agua destilada sobre la placa
portaobjeto.
Con la ayuda de una aguja de diseccin se rap el sitio que contena
hongos de la fruta podrida (Naranja), luego se coloc en la placa
realizando ligeros movimientos.
Seguido, se coloc el cubre objeto, haciendo coincidir una arista de la
placa con el borde del agua.
A continuacin se coloc la placa sobre la platina del microscopio,
asegurndola con las pinzas
Finalmente se procedi a observar cuidadosamente para graficar lo
observado con el lente de 60x.

VI. RESULTADOS
Observacin macroscpica: En la corteza de la naranja presenta un
crecimiento micelial de color blanco alrededor de un centro de color verde,
la consistencia del hongo es esponjosa. (Ver imagen 1.)

Observacin microscpica: Es un hongo filamentoso, color blanco. (Ver
imagen 2.)

CLASIFICACIN CIENTFICA
Reino: Fungi , Filo: Ascomycota, Clase: Eurotiomycetes, Orden:
Eurotiales, Familia: Trichocomaceae, Gnero: Penicillium, Especie:
digitatum.
VII. CONCLUSIONES

Observar a simple vista, ayuda a describir de mejor manera la parte
superficial de las esporas del hongo
Se utiliz agua destilada para una mejor observacin microscpica
VIII. RECOMENDACIONES
Tener cuidado con los lentes de observacin del microscopio, ya que
podra existir un excesivo acercamiento que daase los lentes.
Luego de tomar la muestra del hongo, cubrir la muestra para no
evitar posibles contaminaciones.
Al tomar la muestra, raspar pequeas cantidades para observar los
microorganismos de mejor manera.

IX. BIBLIOGRAFA
Ramos Zapata, J. A. (2005). MICROORGANISMOS DEL SUELO. Mxico:
Universidad Autnoma de Yucatn.











X. ANEXOS












Imagen 1. Naranja con crecimiento micelial Imagen 2. Penicillium digitatum (lente de 60x)
Conidiforo
Filide
Conidia