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Trabajo de investigación en campo
Título original
CUANTIFICACIÓN DE LOS ÁCIDOS ORGÁNICOS DE ACUERDO A SU ORIENTACIÓN EN Escontria chiotilla DEL MUNICIPIO DE SANTO DOMINGO HUEHUETLAN EL GRANDE, PUEBLA..docx
SU ORIENTACIN EN Escontria chiotilla DEL MUNICIPIO DE SANTO
DOMINGO HUEHUETLAN EL GRANDE, PUEBLA. Berlanga-Barbosa, Bruno Javier.*; Chino-Palomo Luis Javier.*; Crisanto-Tllez Lilian G.*; Jara-Vzquez Amrica *; Melndez-Snchez Daniela.* *Benemrita Universidad Autnoma de Puebla, Escuela de Biologa. Resumen. Los cidos orgnicos son esenciales en distintas funciones fisiolgicas de las plantas CAM, la cantidad de estos vara respecto a la posicin del sol y la luz que reciben en cada punto del cactus (Escontria chiotilla), mientras que la ubicacin responde de una manera indirecta a la curva de asimilacin de Co2 clsica de Osmond (1978) donde la asimilacin de Co2 est estrechamente relacionada con la produccin de cidos y por lo tanto la posicin de la luz solar, por lo que el objetivo de este proyecto es cuantificar los cidos orgnicos en Escontria chiotilla en distintos puntos cardinales a diferentes horas del da en el municipio de Santo Domingo Huehuetln El Grande, en el estado de Puebla. Se extrajeron muestras de 1cm 3 de la cactcea Escontria chiotilla, en el municipio de Santo Domingo Huehuetln El Grande, a las cuales se les evalu la cantidad de cidos orgnicos a diferentes horas del da y en las diferentes coordenadas (norte, sur, este y oeste), se titul con hidrxido de sodio al 0.01N, los resultados fueron obtenidos en mililitros; puesto que 1ml de hidrxido de sodio corresponde a un miliequivalente de cidos orgnicos por cada 1gr de la planta (Osmond et al., 1994). Los datos se analizaron con una prueba estadstica de anlisis de varianza y una prueba de comparaciones mltiples de Tukey (P0.05) (Olivares, 1994), no encontrando diferencias significativas entre las coordenadas a diferentes horas del da, adems, el cambio en la produccin de cidos orgnicos conforme la cantidad de luz irradiada a la planta a lo largo del da tampoco presento diferencias. Palabras clave: cidos orgnicos, CAM, cactceas, luz solar, hidrxido de sodio, Escontria chiotilla.
Introduccin La familia Cactaceae agrupa una gran diversidad de plantas, en ellas destacan los cactus columnares (viejitos y tetechos); los cactus Candelabriformes (rganos y pitayas); las biznagas, algunas trepadoras como los nopalillos (Heliocereus spp.); las pitahayas (Hyolocereus spp.) y una gran variedad de nopales entre otras (Jimnez, 2011). Este grupo constituido por cerca de 2,000 especies, las cules estn distribuidas en el Continente Americano, desde el norte de Canad hasta la Patagonia, Argentina. Las cactceas columnares incluyen alrededor de 170 especies, de las cuales 80 de ellas se encuentran en Mxico (Bravo-Hollis, 1978; Valiente-Banuet et al, 1991). La mayora de las cactceas se desarrollan en ambientes ridos y semiridos; en Mxico las zonas secas abarcan cerca el 60% de la superficie del pas, estas zonas se caracterizan por presentar de 250 a 450 mm de precipitacin anual y, por lo tanto, la disponibilidad de agua es el parmetro fsico ms importante que determina la composicin de la flora en estos ecosistemas (Nobel 1996). En las zonas centrales de Mxico encontramos sitios que sobresalen por su gran diversidad; el ms llamativo en cuanto al nmero de especies por rea, es el valle de Tehuacan-Cuicatlan (Puebla- Oaxaca) en donde existen al menos 81 especies de cactceas, 25% son endmicas de la zona (Arias et al, 1997). Las cactceas han evolucionado caractersticas anatmicas y fisiolgicas particulares, que les han permitido colonizar los ambientes ridos. Entre ellas se mencionan la estructura suculenta o crasa de sus troncos, la cual les permite acumular gran cantidad de agua en sus tejidos. Sus hojas se han reducido, prcticamente ausentes, lo cual reduce la evotranspiracin y la fotosntesis se lleva a cabo entonces en la superficie de sus tallos. Fisiolgicamente, las cactceas se distinguen de la mayora de las plantas verdes porque, al igual que otras plantas suculentas (agaves y siempre vivas), su fotosntesis sigue una ruta metablica conocida como metabolismo cido crasulceo o MAC, con ella logran economizar el agua, ya que realizan un intercambio gaseoso durante la noche cuando la temperatura del ambiente es ms baja (Jimnez. 2011). Los tallos presentan tejido fotosinttico (Clornquima) y parnquima muy desarrollados que les permiten conservar agua y nutrientes para sobrevivir durante prolongados perodos de sequa (Bravo-Hollis 1978; Nobel 1988). La suculencia de los tejidos y del metabolismo MAC ha permitido que las cactceas sobrevivan en ambientes ridos extremos. Conaza (1992) informo, que en estados del centro como San Luis Potos, Puebla, etc. la temperatura mxima para la permaneca del nopal es de 35 C y adaptndose a un amplio rango de precipitacin; prospera con precipitaciones medias anuales de 150 mm hasta 800 mm, bien distribuidos durante el ao. Para medir la actividad CAM se requiere hacer una titulacin del tejido, con una solucin alcalina de NaOH en concentraciones de 0.01 N (Osmond et al., 1994), la acidificacin se expresa como el incremento nocturno del cido mlico en unidades de equivalentes de acides o concentraciones de iones H+ por peso fresco, por volumen de agua de los tejidos (Medina et al., 1989). Flores (2006) trabaj con la fluctuacin fotosinttica de Escontria chiotilla en San Juan de los Ros, Chiautla de Tapia, Puebla, quin hizo una evaluacin de los cidos orgnicos durante un ao y concluy que la acidez titulable se puede ver disminuida por la temperatura y precipitacin pluvial, adems de que la orientacin norte registro la mayor produccin de frutos. Aguilar y Trujillo (2009) realizaron un estudio sobre la nutricin mineral de Escontria chiotilla describiendo la asimilacin de sodio, potasio, fsforo y nitrgeno, en el tejido de esa, durante el ciclo de produccin en la Localidad de Venta Salada, Coxcatln, Puebla, Mxico, concluyendo que la asimilacin de sodio en E. chiotilla fue relativamente baja en comparacin con los dems nutrimentos analizados (K, P y N), lo cual, es adecuado para el desarrollo de las plantas ya que el Na como el NaCl en altas concentraciones inhibe el crecimiento; As como los factores como el pH favorece la disponibilidad de nutrimentos aportados por la materia orgnica hacia la planta. Winter y Smith (1996) describen los productos y el proceso de la fotosntesis MAC donde remarcan la presencia de los productos de la descomposicin de carbohidratos para la formacin de cidos orgnicos, que se da por medio de la descarboxilacin durante la liberacin del CO 2 en el da. Nobel (1988) Menciona que las condiciones ambientales determina en gran medida la contribucin de la enzima carboxilante en la asimilacin del CO 2 varan en funcin de la disponibilidad del agua, cambios en la irradiacin y la temperatura, entre otros factores. Lo que nos hace considerar que los cidos orgnicos tambin varan respecto a los factores ya mencionados. El objetivo de este proyecto es la cuantificacin de cidos orgnicos en Escontria chiotilla en distintos puntos cardinales a diferentes horas del da en el municipio de Santo Domingo Huehuetln El Grande, en el estado de Puebla.
Materiales y mtodos La toma de muestras se realiz en el municipio de Santo Domingo Huehuetln El Grande, en el estado de Puebla, la zona de muestreo se encuentra ubicada a los 18 41 06 y 18 53 12 de latitud norte y los meridianos 98 03 18 y 98 15 06 de longitud occidental (Figura 1). Figura 1. Localizacin del rea de estudio en el municipio de Huehuetln el Grande, Puebla, Mxico (Enciclopedia de los municipios de Mxico, 1999).
Se seleccionaron 3 plantas al azar de Escontria chiotilla a las cuales se les tom muestras de 1gr. de peso fresco del tallo con ayuda de un horadador, cada muestra fue colocada en frascos de 50ml previamente etiquetados a los cuales se les agreg alcohol etlico al 100% evitando as el deterioro de los cidos orgnicos. (Osmond et al., 1994). El procesamiento de las muestras se realiz en la Benemrita Universidad Autnoma de Puebla, en la Escuela de Biologa. Cada muestra se coloc en un vaso de precipitado agregando 100 ml de agua destilada, este se calent hasta el punto de ebullicin con ayuda de mecheros bunsen, asegurando la evaporacin del alcohol y dejando nicamente los cidos orgnicos y el agua destilada dentro del vaso (Osmond et al.,1994), tras enfriar a temperatura ambiente se macer con ayuda de un mortero hasta obtener una consistencia homognea la cual se filtr con ayuda de una gasa en otro vaso de precipitados de 250 ml e inmediatamente se midi el pH inicial por medio de un potencimetro de campo. (Osmond et al., 1994). Tras la toma del pH inicial, con ayuda de una bureta de 50 ml conteniendo hidrxido de sodio al 0.01N se procedi a la titulacin del filtrado hasta alcanzar un pH de 6.4, registrando as la cantidad de hidrxido de sodio en mililitros (Nobel, 1998; Osmond et al., 1990).
Resultados. Se realiz un anlisis estadstico ANOVA, no obteniendo diferencias significativas entre las coordenadas de las 8 a.m. Con una prueba de comparaciones mltiples (Tukey) a un 0.05 se corrobor estos resultados (Grafica1).
Grfica 1. Se muestra con letra A, los valores que no representan diferencia significativa.
Tras medir la cantidad de NaOH en ml, se analizaron los datos con una prueba ANOVA, registrando datos menos homogneos para cada punto cardinal (Grafica 2) sin embargo, al corroborar con la prueba Tukey, sta arroj que no haba diferencias significativas entre grupos.
Grfica 2.Valores de las coordenadas norte, sur, este y oeste, se puede observar que la letra A representa la homogeneidad de los valores obtenidos.
En el caso de las doce de la maana, al hacer el anlisis estadstico se obtienen los mismos resultados, como se puede observar la prueba Tukey con un de 0.05 no se encontraron diferencias significativas (Grfica 3).
Grfica 3.Valores de las coordenadas norte, sur, este y oeste a las 12 de la maana donde se aprecian los resultados realizados con la prueba Tukey, marcados con letra A no mostrando una diferencia significativa. Los resultados arrojados de los datos de las 2 de la tarde, muestran que no hay ninguna diferencia significativa entre las coordenadas (Grfica 4), comprobando los datos con una prueba Tukey con 0.05, se corroboran los resultados obtenidos por ANOVA.
Grfica 4.Valores de las coordenadas norte, sur, este y oeste a las 2 de la tarde, donde se aprecian los resultados no significativos, una prueba Tukey confirma la homogeneidad con A. Mientras que los datos obtenidos a las 4 de la tarde indicaron que no se presentaba diferencias significativas obteniendo entre las distintas coordenadas. (Grafica 5). Corroborando estos datos con una prueba de Tukey ( 0.05).
Grfica 5. Los puntos cardinales que se muestrearon a las 4 pm, son representados con la letra A ya que no hay diferencias significativas entre estos datos. Las muestras de las 6pm tras ser analizadas con ANOVA, seala que no hay diferencias significativas, incluso al utilizar la prueba de comparaciones mltiples ( 0.05), se obtiene el mismo resultado (Grfica 6).
Grfica 6. La prueba de comparaciones mltiple (Tukey) seala que los datos obtenidos y marcados con la letra A son estadsticamente iguales.
Al comparar los datos en relacin a la hora de la recoleccin de las muestras, se obtiene por ANOVA que no hay diferencias significativas a lo largo del da, comprobando estos resultados con una prueba Tukey a un de 0.50 (Grfica 7)
Grfica 7. Se muestra que durante las horas del da, la cantidad de NaOH, es igual entre las coordenadas sealadas con la letra A.
Discusin Los resultados analizados no tuvieron cambios significativos debido a condiciones de baja irradiacin lumnica adems de factores como la humedad relativa y baja concentracin de Co2 y O2 (Coca Soriano et. al., 2007), siendo factores que pudieron estar implicados en la variacin de cidos orgnicos cuantificados, igualmente descritos como factores ambientales por Nobel (1988) donde la temperatura juega un papel importante tambin. Los factores y condiciones descritos anteriormente adems de la orientacin de las cactceas y la precipitacin pluvial fueron evaluados por Flores (2006) quien determino que la acidez titulable era disminuida por estos. A diferencia de Martnez (1987) quien encontr diferencias significativas en la cantidad de los cidos orgnicos en relacin a la temperatura, en las diferentes coordenadas registrados a lo largo de un ao, en el presente proyecto que se registr durante un da, si bien en un da existen diversas constantes de temperatura no hubo suficiente control de muestreo, no se obtuvieron diferencias significativas entre las coordenadas, esto puede deberse a factores que pueden afectar la tasa fotosinttica inclusive entre la presencia de competencia entre las especies muestreadas por la luz solar. Mandujano (2002) realiz un trabajo donde evalu el metabolismo cido crasulceo en ramas jvenes y maduras de E. chiotilla encontrando que la orientacin sur y las ramas jvenes presentaron fluctuaciones de acidez ms pronunciada, inclusive la cantidad de cidos orgnicos que se generan responde a la etapa en la que el cactus se encuentre como lo demuestra Loza-Cornejo (2003), sin embargo en este proyecto no se verific la edad de las especmenes estudiados pudiendo haber diferencias de edad entre las ramas seleccionadas para el muestreo y descartando una homogeneidad en los datos. Conclusin No se encontraron diferencias significativas tomando en cuenta el tiempo de muestreo por lo tanto se recomienda realizar este trabajo por un tiempo ms prolongado. La localizacin de cactceas fue una mala estrategia puesto que haba competencia con otras especies por la luz y el agua, e incluso entre los mismos especmenes muestreados se sometan a la sombra en las coordenadas norte-sur. Un factor importante es que se muestreen un mayor nmero de individuos con caractersticas similares, tales como edad, localizacin y tamao, ya que la produccin de biomasa y la cantidad de agua almacenada afecta la produccin de cidos orgnicos puesto que si existen factores de variacin entre individuos no se podr realizar un anlisis estadstico confiable. Agradecimientos Se le agradece a la comunidad de Huehuetlan El Grande por permitirnos tomar muestras en la zona, a los profesores David Martnez y Tobas Rodrguez por asesorarnos en la elaboracin del escrito y en la recoleccin de muestras y a los Cactus muestreados por su valiosa colaboracin con la ciencia. Literatura citada. 1. Aguilar Barajas Beatriz & Trujillo Hernndez Antonia. 2009. Asimilacin de Na, K, P y N, en Escontria chiotilla. UNAM. FES Iztacala. 2. (Weber ex Schum.) Rose (Cactaceae), durante sus estados fenolgicos, en Venta Salada, Coxcatln, Puebla 3. Andrade et.al.,2007, El metabolismo cido de las crasulceas: diversidad, fisiologa ambiental y productividad. Bol.Soc.Bot.Mx. 81: 37-50. 4. Arias M., S., S. Gama Lpez y L.U. Guzmn C. 1997. Cactaceae. Flora del valle de Tehuacn-Cuicatln, Fascculo 14. Instituto de Biolga, Universidad Nacional Autnoma de Mxico. Mxico. 5. Bravo-Hollis, H. 1978. Las cactceas de Mxico. Vol 1, 2. ed. Universidad Nacional Autnoma de Mxico, Mxico D.F. 6. Coca Soriano, Edith; Ortiz Montiel, Juan Gerardo; Snchez Correa, Socorro & Prez Crisanto Joel. Efecto de la irradiacin luminosa en la aclimatacin de Mammillaria carmenae Castaeda (Cactaceae) proveniente de cultivo in vitro. Facultad de Estudios Superiores Iztacala, UNAM. 7. CONAZA. 1992. Aspectos tcnicos y socioeconmicos del nopal Opuntia ssp. Serie: Fichas tcnicas de especies forestales. ( Mimeografiado ) Saltillo, Coah., Mxico. 8. Flores. S.J. 2006. Fluctuacin fotosinttica en Escontria chiotilla (Weber) Rose, en la localidad de San Juan de los Ros en el municipio de Chiautla de Tapia, Puebla. Tesis de Licenciatura. Escuela de Biologa. BUAP.77p. 9. Jimnez Sierra L. Cecilia. 2011. Las cactceas mexicanas y los riesgos que enfrentan. Revista Digital Universitaria, UNAM. 10. Mandujano, P.M. 2002. Fluctuacin del metabolismo cido de las crasulceas en ramas jvenes y maduras de Escontria chiotilla (Weber) Rose con orientacin norte-sur en el municipio de Coxcatln, Puebla. Tesis de maestro en Biologa de Recursos Vegetales. Facultad de Estudios Superiores Iztacala, UNAM. Mxico. 81P. 11. Martnez, M. D. 1987. Fluctuacin fotosinttica de Escontria Chiotilla (Weber) Rose en la localidad de Venta Salada, Municipio de Coxcatln, Puebla. Tesis de Lic. E.N.E.P. Iztacala, UNAM. Mxico 97P. 12. Medina E., Olivares E., Daz M. y Van der Merve N. 1989. Metabolismo cido de crasulceas en bosques hmedos tropicales. 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