EPIDEMIOLOGA Y MANEJO INTEGRADO

DE PROBLEMAS FITOSANITARIOS EN

AGAVE TEQUILANA WEBER VAR. AZUL

ENFERMEDADES
DEL AGAVE TEQUILERO
Dr. Gil Virgen Calleros

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TEQUILA EPIDEMIOLOGA Y MANEJO INTEGRADO

DE PROBLEMAS FITOSANITARIOS EN

AGAVE TEQUILANA WEBER VAR. AZUL

Resumen Se determinaron los principales fitopatgenos y maleza que se asocian al cultivo de agave (A. tequilana W. var. azul) en la zona de Altos y Centro del Estado de Jalisco. Se realizaron muestreos continuos de septiembre de 1998 a abril de 1999. Tambin se determin el estado fitosanitario en la zona de los Altos, tomando una muestra de 100 plantas en un sitio determinado por cada 100 hectreas. Por otra parte se estudi bajo condiciones de laboratorio el efecto de la temperatura y el pH sobre el crecimiento radial del micelio de Fusarium oxysporum. Asimismo se evaluaron diferentes agroqumicos con accin tanto fungicida como bactericida para el control de la pudricin del cogollo causada por Erwinia carotovora. Los fitopatgenos encontrados fueron: Erwinia carotovora , Fusarium oxysporum, Phytophthora sp, Didymosphaeria sp (Asterina mexicana), Botryodiplodia sp, Pleospora sp, un virus no identificado y nemtodos de los gneros Pratylenchus sp, Dorylaimus sp, y Helicotylenchus sp. El estudio del estado fitosanitario en la zona de los Altos mostr un 56.1% de plantas enfermas por Erwinia sp (pudricin del cogollo) desde un grado 2 a grado 5 (1 = planta sana; 5 = planta muerta) y un 43.9% de plantas sanas. Del total de plantas enfermas cerca del 88% se encuentran en grado 2. Tambin se determin que el mayor nmero de plantas con grado 5 se encontr en predios con una alta infestacin de maleza. Datos similares se encontraron en la zona de tequila, aunque en este caso se determin un porcentaje mayor (cerca de 20%) de plantas enfermas con Fusarium, especialmente en la zona del municipio de Tequila. La maleza asociada a agave incluye 20 especies de gramneas y las ms abundantes fueron: Digitaria spp, Chloris gayana y Rhynchelytrum repens. Tambin se encontraron 12 especies de maleza de hoja ancha. El rango ptimo de pH para el desarrollo del micelio de F. oxysporum fue de 5.0 a 6.5 a 20oC y de 5.0 a 7.0 a 10 oC. Con respecto a la evaluacin de agroqumicos se encontr que el sulfato de cobre pentahidratado fue el ms consistente en el control de la pudricin del cogollo.

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TEQUILA INTRODUCCIN

Algunos de los principales patgenos que se han reportado en agave Agave tequilana L. Weber var azul, son: la mancha negra Asterina mexicana y la antracnosis Colletotrichum agaves ( Prez, 1980 y Villalvazo, 1986), el tizn de las pencas causado por Alternaria sp y Stangonospora gigantea , la pudricin roja de las pencas causada por Chalariopsis sp, la pudricin de la raz causada por los hongos Armillaria mellosa y Fusarium sp. (Granados 1993). Por otra parte, tambin se han asociado al agave la bacteria del gnero Erwinia sp, as como los hongos Fusarium sp y Phytium sp , (Valenzuela, 1994). La pudricin del tallo causada por Fusarium oxysporum, (Luna, 1996). Entre los fitopatgenos ms importantes de este cultivo sin duda alguna destacan aquellos asociados a la pudricin del cogollo y a la marchitez del agave. Estos sntomas se han atribudos a fitopatgenos tales como Erwinia sp y Fusarium sp, o bien por la accin de ambos fitopatgenos (Martnez, 1994 y Velez et al, 1996). Los sntomas tpicos de la pudricin del cogollo son lesiones necrticas y acuosas en las hojas, que en la mayora de los casos, inician en la

espina apical o en las espinas laterales. Estas lesiones avanzan hacia el centro de la hoja y en el centro del cogollo causan una pudricin descendente que llega hasta la pia y puede provocar la muerte de la planta. Por otra parte el hongo Fusarium sp produce sntomas iniciales tales como: encarrujamiento o enrollamiento de las hojas y decoloracin de las hojas que contrasta con el azul tpico de las plantas sanas. Tambin causa una pudricin seca del sistema radicular, dejando el tejido con una apariencia polvosa, la cual avanza hacia la pia (muerte ascendente). A diferencia de la pudricin bacteriana, no existen lesiones acuosas en las hojas (Martnez et al. 1998). Estas 2 enfermedades se han diseminado considerablemente en las reas cultivadas de agave, ocasionando un grave problema. Ante tal situacin, existe la necesidad de generar conocimientos bsicos acerca de los factores que favorecen el desarrollo y diseminacin de las enfermedades, lo cual permitir generar estrategias de manejo integrado. Por otra parte, sobre el problema que implica la presencia de maleza en

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el cultivo de agave, se ha producido poca documentacin para el Estado de Jalisco. Actualmente poco o nada se sabe sobre su biologa, taxonoma, distribucin, grado de infestacin, as como los posibles efectos directos que por competencia pudieran ocasionar al cultivo o sobre el efecto indirecto, como lo es, su posible papel como hospederos naturales de fitopatgenos. Los conocimientos generados a la fecha han sido relacionados con el control qumico y en su mayora se han limitado a la realizacin de pruebas de efectividad de los herbicidas, y los resultados a la fecha muestran inconsistencia, por tanto no aportan beneficios evidentes al cultivo. En la actualidad es indiscutible que existe la necesidad de generar informacin sobre la distribucin espacial de especies de maleza asociadas al cultivo del agave. Estos conocimientos son bsicos para entender las interacciones entre las especies de maleza y los cultivos (Pimienta, 1984). Los conocimientos generados sobre un fuerte sustento ecolgico y biolgico de las especies de maleza, permitirn establecer un manejo adecuado de la maleza asociada al agave. El presente trabajo pretende recabar y producir informacin referente a los aspectos bsicos de las principales enfermedades y de la maleza asociada a agave para fundamentar futuras estrategias de manejo y control integral de los organismos que atacan este cultivo en las zonas productoras del Estado de Jalisco.

Los objetivos del presente proyecto son: Identificacin de las principales enfermedades, as como la entomofauna y maleza asociada al cultivo de agave, incluyendo algunos de los principales enemigos naturales. Evaluacin del estado fitosanitario actual de agave. Estudio epidemiolgico de las enfermedades con nfasis en la marchitez, considerando la interrelacin patgeno-insecto-maleza, as como la informacin meteorolgica relevante en el desarrollo de las mismas. Determinacin de las estrategias de manejo integrado, considerando control qumico, biolgico, modificacin de las caractersticas del suelo y prcticas culturales para el manejo y control de enfermedades.

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TEQUILA MATERIALES
Y MTODOS

Aislamiento e identificacin de las enfermedades Para la identificacin de las principales enfermedades, se colectaron muestras de plantas enfermas, separndolas por grupo de sntomas (pudricin de cogollo, marchitez, manchas foliares, etc.) para facilitar su identificacin. Dichas muestras se procesaron en medio de cultivos papa-dextrosa-agar (PDA) y agar nutritivo (AN). Para ello, se cortaron trozos de 0.5 cm de dimetro de las reas daadas. Posteriormente, se desinfectaron con una solucin de hipoclorito de sodio al 3% durante 2 minutos, enjuagndose despus tres veces con agua destilada estril. Los trozos de tejido desinfectado fueron colocados en placas de petri con medio PDA o bien con AN; este ltimo, para observar los agentes asociado a la pudricin de cogollo. Las placas sembradas se incubaron a 20+2 oC durante 48 horas, para el caso de bacterias y 5 a 7 das para hongos. Para el caso de los fitopatgenos asociados a manchas foliares, se realizaron observaciones en un estereoscopio para determinar la presencia de estructuras reproductivas.

Cuando estas no se encontraron, las muestras se incubaron en cmaras hmedas por un perodo de 2 a 3 das, hasta que aparecieran las estructuras, realizando cortes para su observacin. La identificacin de los fitopatgenos asociados a agave se realiz con claves taxonmicas especializadas para hongos, propuestas por Barnett y Hunter, (1987). Las bacterias se resembraron en medio Cristal Violeta Pectato (CVP) el cual es selectivo para el desarrollo de Erwinia, dado que solo se encontr la presencia de esta bacteria.

Pruebas de Patogenicidad para E. carotovora Se realizaron inoculaciones sobre plantas sanas de agave de 1 ao de edad, mediante la inyeccin de una suspensin bacteriana a una concentracin de 107 clulas/ml. La inoculacin se llev a cabo en tres plantas, tomando cada una como una unidad experimental Asimismo, se realiz tambin la inoculacin de agua destilada estril en 3 plantas sanas, las cuales sirvieron como testigo. Todo ello se llev a cabo en 3 niveles de la planta en el pice del

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cogollo, parte media de la planta y en la base del cogollo. Despus de inoculadas las plantas se cubrieron con bolsas de plstico para favorecer el desarrollo de la pudricin. La evaluacin se tomo como el nmero de das en que apareci la lesiones iniciales y otra ms tomando el tiempo transcurrido hasta que la planta completa muri. En todos los casos la inoculacin fue subepidrmica, es decir por infiltracin de la suspensin bacteriana. varon a 4oC hasta su posterior utilizacin en pruebas de inhibicin .

Aislamiento de bacterias antagnicas Se tomaron muestras de suelo de la rizsfera de plantas que presentaban una apariencia sana, en el rancho El Llano, localizado en el municipio de Santa Cruz del Astillero. El suelo fu tamizado en una malla No. 60. Con el suelo se inocularon placas de Petri que contenan medio PDA, usando una esponja estril de 2 cm de dimetro impregnada con el suelo y presionndola tres veces sobre la placa de Petri, de tal manera que se fuera diluyendo la muestra. Las placas de petri con PDA inoculadas se incubaron a 29+oC durante 24 horas. Las colonias bacterianas se transfirieron por picadura con la punta de un palillo estril, a otra caja con medio PDA. Despus de crecidas y purificadas, se transfiri de nuevo a un tubo con PDA inclinado. Los cultivos puros se conser-

Inhibicin in vitro Se realiz de acuerdo a la metodologa propuesta por Virgen-Calleros et al (1996), la que consisti en colocar en el centro de una placa de Petri, con medio PDA, un disco de 0.5cm de dimetro de micelio de F.oxysporum, y alrededor del hongo a una distancia de 2 cm, una siembra por picadura de 10 aislados bacterianos. Las placas se incubaron a 20oC + 3oC, por 72 horas. Las bacterias que inhibieron el crecimiento micelial del hongo fueron seleccionadas para su posterior identificacin mediante el uso de pruebas bioqumicas propuestas por MacFaddin (1990).

Evaluacin del estado fitosanitario Para determinar la importancia de los problemas fitopatolgicos en agave se realiz un muestreo aleatorio, en la zona de los altos para estimar la distribucin, incidencia y severidad de las 2 principales enfermedades (pudricin de cogollo y marchitez). Se midieron empleando la escala arbitraria de 1 a 5, propuesta por Martnez et al (1998), donde 1 es planta sana y 5 planta muerta (cuadros 1 y 2). El muestreo se realiz en los municipios de la zona altos, utilizando 1 sitio de muestreo

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para cada 100 has de cultivo. El muestreo dentro de los predios se realiz de manera sistematizada. En cada uno de los predios muestreados se dejaron 4 hileras de planta como borde y se inici en la quinta hilera. As mismo, se dejaron las primeras 20 plantas para evitar el efecto de orilla y se tomaron los datos en las siguientes 20 plantas. Lo anterior se repiti cada 5 surcos, para completar un total de 100 plantas por predio muestreado. Los datos obtenidos fueron usados para determinar el porcentaje de plantas enfermas y grado de severidad. identificacin taxonmica, fueron revisadas para detectar sntomas de la enfermedad conocida como marchitez, para seleccionarlas y someterlas posteriormente a un estudio sobre su funcin como posible hospedero natural. Con los datos obtenidos del registro de especies por cuadrante, se obtuvo la frecuencia, densidad absoluta y relativa de cada especie.

Identificacin, frecuencia y densidad de maleza Se llev a cabo un muestreo de maleza en 34 sitios en los municipios Arenal, Amatitan, Tequila, Zapotlanejo, Tototln, Arandas y Jess Mara en el Estado de Jalisco, durante el verano y otoo de 1998. En cada sitio se realizaron conteos de especies en cuatro cuadrantes de 0.5 m x 0.5 m (0.25m2) por sitio, registrndose el nmero de especies por cuadrante. Adems, se registr el porcentaje de cobertura por especie en cada sitio y se realiz un reconocimiento visual de aquellas especies que aparecen como rodales en las reas aledaas al cultivo. Al momento de realizar la cuantificacin y colecta de especies en campo para su

Efecto de la temperatura y pH sobre el crecimiento micelial de F. oxysporum Se determin el crecimiento del micelio de F. oxysporum a diferentes niveles de pH y temperatura (cuadro 3). Se tom un disco de 9 mm de dimetro, colocndolo al centro de la placa de petri con medio PDA. Para ajustar los valores de pH se utiliz cido actico al 30% para acidificar y NaOH 1N para alcalinizar. Para los valores de rangos de pH de 3.0 y 3.5 se utiliz carragaenina como medio gelificante en lugar de agar. La carragaenina no causa efecto directo sobre el crecimiento del micelio del hongo, esta se us en lugar de agar, dada que la condicin de acidez no permite que este ltimo solidifique. Las placas se incubaron a 10 C y 20 C hasta que en algn valor se alcanzara el mximo desarrollo del micelio del dimetro total de la caja de petri. El

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experimento se analiz con un diseo completamente al azar en arreglo factorial a (pH) x b (temperatura) con la finalidad de conocer si existe interaccin entre estos factores. La separacin de medias se realiz mediante la prueba de Scheffe. Las variables medidas fueron crecimiento radial del micelio hasta que se alcanz el mximo desarrollo (9 cm), momento en que se tom la ltima lectura. Ensayo de control qumico de la pudricin del cogollo Se realiz un ensayo de control qumico de la pudricin del cogollo (E. carotovora), usando 2 formulaciones de Sulfato de cobre pentahidratado (uno sistmico y otro no sistmico) (cuadro 4). El experimento se estableci en el municipio de Zacoalco de Torres. El ensayo se estableci bajo un diseo de bloques al azar, con 4 repeticiones. La unidad experimental fue de 5 plantas de agave. Las plantas fueron seleccionadas con la presencia de grado 2 de la enfermedad, de acuerdo a la escala de dao propuesta por Martnez et al (1998) (Cuadro 1). El ensayo inici con la primera aplicacin el 30 de abril de 1999, se realizaron 2 aplicaciones posteriores los das 7 y 14 de mayo. Despus de cada una de las aplicaciones se realiz la evaluacin. Asimismo se realiz una evaluacin final 2 meses despus del inicio del ensayo (30 de junio de 1999). La evaluacin consisti en realizar una nueva calificacin usando la escala citada. Para confirmar que E. carotovora era el causante de la enfermedad evaluada, se hicieron aislamientos de muestras de hoja enferma en medio de cultivo CVP. La aplicacin de los productos, fue aspersin dirigida al follaje procurando un buen cubrimiento se us un vo-

Efecto de las condiciones climatolgicas en la distribucin de las enfermedades Para determinar el efecto de las condiciones climatolgicas, sobre la presencia y distribucin de las principales enfermedades, se tomaron en cuenta temperatura ambiente (promedio de la temperatura mxima y mnima), temperatura del suelo y precipitacin, los datos de estas condiciones climatolgicas se obtuvieron de las estaciones meteorolgicas (propiedad de Agave Azul) establecidas en 3 municipios de la regin productora de agave del estado de Jalisco (Tequila en la zona Centro y Acatic y Tepatitln en la zona Altos), estos datos correspondieron al ao 1998. Los datos promedio de las condiciones sealadas anteriormente fueron analizados en funcin de la distribucin y presencia de las principales enfermedades.

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lumen de 200 litros de agua por hectrea. Con los datos de las evaluaciones se realiz el anlisis de varianza y prueba de Tuckey al 0.05 de significancia con el paquete estadstico SAS. los ndices de la enfermedad se transformaron en porcentajes de infeccin con la frmula de Towsend-Heuberger para posteriormente realizar el ANVA, asimismo se calcul la eficacia de control con la frmula de Abbott.

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TEQUILA RESULTADOS
Y DISCUSIN

Identificacin de enfermedades Los principales fitopatgenos que se han identificado en diferentes partes de la planta se muestran en Cuadro 5. De acuerdo a las observaciones de incidencia y severidad los fitopatgenos ms importantes por sus efectos sobre el desarrollo de la planta as como por su distribucin son Erwinia carotovora. (pudricin del cogollo) y Fusarium oxysporum. (marchitamiento). Se ha encontrado que el dao de E. carotovora se asocia en la mayora de las ocasiones con una pudricin que inicia a nivel de la base de las espinas, ya sean laterales o apicales, predominando en estas ltimas, sobre todo en las hojas centrales de la planta, de donde posteriormente avanza la pudricin hacia la pia. As mismo se observ que el avance de la pudricin por E. carotovora depende de la humedad que se forma en las hojas internas del cogollo, esto aparentemente se debe a que la pelcula de agua que se forma sobre las hojas reduce el nivel de oxgeno, favoreciendo con ello el desarrollo de la bacteria. Lo anterior se ha demostrado en la degradacin natural e inducida de te-

jido de tubrculos de papa infectados con E. carotovora, encontrndose que esta degradacin es menor en condiciones de alto nivel de oxgeno (Maher y Kelman 1983) y es ms severa cuando existen niveles bajo de oxgeno (Lund y Wyatt, 1972). Precisamente la humedad que se forma en el tejido puede causar una reduccin en el nivel oxgeno a cero en 2.5 hr a 21oC, tal como lo han demostrado Burton y Wigginton (1970). Se conoce adems, que en la degradacin del tejido por Erwinias que causan pudriciones blandas, intervienen enzimas pectolticas como pectato-liasas, poligalacturonasas y pectin-liasas (Kotoujansky, 1987), mismas que pueden verse involucradas en pudricin del cogollo de agave. Se encontraron tambin dos enfermedades que previamente no se haban reportado en este cultivo. La primera, es una mancha foliar causada por el hongo Botryodiplodia sp , que inicia como una mancha amarillenta (figura 1), la cual posteriormente se torna necrtica, momento en el cual se forman los picnidios sobre las manchas. Este patgeno presenta conidios bicelulares en picnidios en estroma y

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se encontr en los municipios de Magdalena y Acatln de Jurez. Por otro lado en la zona de los altos se encontr ampliamente distribuida la otra enfermedad denominada mancha anular, que se presenta como una serie de pequeos puntos en crculos que a medida que maduran estas estructuras se tornan de un color rojo-negrusco. Este hongo presenta ascas bitunicadas con ascosporas bicelulares y peritecios en estromas formndose principalmente en las hojas externas de la planta. La presencia de este patgeno se puede encontrar en cualquier poca del ao en la zona de los altos. rri la pudricin completa. Esto ocurri en las 3 plantas inoculadas, no as en donde solo se inocul agua estril. Determinando con ello que la bacteria Erwinia carotovora es responsable de la pudricin del cogollo. Trabajos simultneos en CINVESTAV han mostrado que la utilizacin de primers especficos para la amplificacin por PCR de esta bacteria han sido positivos en muestras enviadas por nuestro laboratorio (Olalde, 1999). En el caso de F. oxysporum las pruebas de patogenicidad estn actualmente en desarrollo por lo cual no se muestran resultados.

Pruebas de patogenicidad La inoculacin de E. carotovora result en el desarrollo de una lesin necrtica, semejante a aquella que ocurre en campo. Esta lesin apareci en promedio a los 20 das despus de inoculada la planta, con un tamao de lesin de casi 1 centmetro y fue mayor su avance cuando se inocul en la parte central del cogollo, la pudricin completa del cogollo ocurri en promedio de 5 meses despus de inoculada (figura 5), inicialmente la pudricin del cogollo avanz del sitio de inoculacin hacia la pia, pero una vez que lleg a la base del cogollo la pudricin avanz del sitio de la inoculacin hacia el pice del cogollo hasta que ocu-

Inhibicin in vitro de F. oxysporum con bacterias antagnicas De casi un promedio de 500 cepas aisladas de rizobacterias en el laboratorio, solo 2 mostraron antagonismo al crecimiento micelial de F. oxysporum in vitro, mostrando halos de inhibicin promedio de 0.5 a 1 cm de dimetro. Ambas cepas se probaron de nuevo in vitro colocndose una estra de la bacteria en un extremo y en el otro un disco de micelio del hongo (figura 6). Las bacterias antagnicas fueron identificadas como Bacillus sp. basados en pruebas bioqumicas propuestas por MacFaddin (1990). Actualmente se realizan tambin ensayos para demostrar su importancia en el control biolgico.

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Evaluacin del estado fitosanitario Con respecto al estado fitosanitario, los datos hasta ahora obtenidos muestran en la zona de los altos un 56.1% de plantas de enfermas por Erwinia (desde grado 2 a grado 5 de la escala) y un 43.9% de plantas sanas, a este respecto el cuadro 6 muestra un ejemplo de la severidad de dao causado por Erwinia sp. Se observ que tanto en el predio San Ramn como en el predio ingreso al Zamorano existi el mayor numero de plantas con grado 5 (muertas), en ambos casos los predios se encontraban con una alta incidencia de maleza. Esta condicin puede favorecer la severidad de la pudricin del cogollo debido a que la circulacin del viento se ve disminuida, favoreciendo con ello la formacin de humedad sobre las hojas del cogollo y por ende el desarrollo de la bacteria. Asimismo la distribucin de enfermedades por municipio es distinta, por citar en Jess Mara se encontr que de las plantas enfermas el 53% correspondi a Erwinia, el 34% a Fusarium y el 23% a una combinacin de Fusarium y Erwinia. Con todas las reas muestreadas se realizar lo mismo para establecer el porcentaje por enfermedad, considerando las anteriores solamente debido a su importancia, con todo ello se establecer al final del estudio las regiones de mayor incidencia. Identificacin y frecuencia de maleza En los Cuadros 7 y 8 aparecen las principales especies de maleza tanto de hoja ancha como hoja angosta. Se encontraron un total de 25 diferentes especies de maleza de hoja angosta y 58 de hoja ancha. Las especies de hoja angosta (gramneas) presentaron un dominio en la densidad sobre las especies de hoja ancha, es decir se presentaron con densidades de poblacin superiores y de esta forma mantienen un dominio espacial en los predios de agave. Entre las especies de hoja angosta (gramneas) (Cuadro 7), destacan por su presencia y densidad Eragrostis mexicana , Rynchelitium repens , Cynodon dactylon , Digitaria ciliaris , Chloris gayana y Eleusine indica ya que estas especies presentan el mayor grado de distribucin e infestacin. El resto de las especies de hoja angosta, tienden a presentar un patrn de distribucin de mayor agregacin a nivel de localidad y menor grado de infestacin ya que incluso en algunos casos nicamente se reporta su presencia debido a que presentaron una baja densidad por unidad de rea. La especie Rhynchelitium repens tiende a presentar una fuerte infestacin en aquellas plantaciones con pobre manejo del suelo.

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La comunidad vegetal de especies de hoja ancha (dicotiledneas) presenta una mayor diversidad de especies (58 diferentes especies) en comparacin a las especies de hoja angosta (Cuadro 8). Entre estas destacan por su distribucin y grado de infestacin, Amaranthus hibridus, Spermacoce verticilata , Phytolacca icosandra , Melampodium perfoliatum, Crotalaria pumila, adems de las especies no identificadas de los generos; Sida , Ipomoea, Bidens y Anoda, los gneros Secchiopsis , Sicyos, Cyclanthera, Microsechium que corresponden a las especies conocidas como chayotillos y los gneros Solanum, Physalis y Euporbia spp, Todas ellas presentan una mayor distribucin y mayor grado de infestacin en las reas cultivadas con agave. El resto de las especies reportadas son especies que al igual que muchas especies gramneas su grado de infestacin y distribucin es baja y solo se reporta su presencia. Cabe resaltar que las especies de los gneros Ipomoea y las que corresponden a especies conocidas como chayotillos ; Secchiopsis, Sicyos, Cyclanthera y Microsechium, por lo general, son especies que se desarrollan entre plantas de agave, se presume que estas especies no son favorecidas por las practicas de manejo de suelo (disturbio del suelo). Su desarrollo se favorece bajo el dosel de la planta de agave y en consecuencia su control puede presentar mayor grado de dificultad y por ello un probable efecto competitivo ms directo. La especie Phytolacca icosandra (perenne), su presencia en la mayora de las plantaciones se encuentra fuera del cultivo o en las orillas y presenta mayor infestacin en aquellos huertos con bajo nivel de manejo agronmico y descuidados. Durante el proceso de colecta de especies de maleza, fueron analizadas con la finalidad de detectar sntomas de la enfermedad conocida como marchitez del agave, sin embargo, no se detectaron visualmente los sntomas caractersticos de esta enfermedad en ninguna de las especies encontradas tanto en las de hoja ancha (dicotiledneas) como en gramneas.

Efecto de la temperatura y pH sobre el crecimiento micelial de F. oxysporum En el cuadro 9. se observa que a 10 C el desarrollo del micelio es ms lento, requiriendo de 13 das para alcanzar el dimetro total de la caja de petri, as mismo el rango de pH en el que ocurri el mayor desarrollo fue de 5.0 a 8.0. Por otra parte el crecimiento a 20 C fue mayor a 5.5, y de 6.5 a 7.5 de pH. Por otro lado, en este ensayo, el ANVA no

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mostr significancia para la interaccin entre pH y temperatura. As mismo la presencia de Fusarium sp, parece estar ligada a factores relacionados con caractersticas del suelo, tales como pH, entre otros, dado que hemos encontrado que el desarrollo del micelio en condiciones in vitro, se favorece en pH ligeramente cido que va de 5.0 a 7.0 a 10oC y 20 oC . Lo anterior se ha demostrado en F. solani f sp. phaseoli, en donde se ha determinado que existe reduccin en la germinacin de las clamidosporas en temperaturas altas (de 25 a 30oC), y pH de 8.0 (hyakumachi, 1989). hasta el mes de mayo, y en junio comienza a disminuir. Se ha demostrado que la germinacin de las clamidosporas (estructuras de sobrevivencia o resistencia del patgeno) de la mayora de las especies de Fusarium germinan a temperaturas promedio de 15 a 25 oC tal como se demostr en F. oxysporum f sp. phaseoli en donde la germinacin ocurri mayormente en temperaturas menores en promedio de 25 a 30 oC (Hyakumachi, 1989), mientras que en F. oxysporum f sp dianthi los sntomas de marchitez fueron ms severos a temperaturas de 23 a 26oC (Ben-Yephet y Shteinberg, 1997), si estas condiciones favorecieran a F. oxysporum en el caso de agave, es probable que la germinacin de las clamidosporas se diera de en los meses de enero, febrero, marzo y quiz abril para el caso de la zona Tequila, mientras que adicionalmente en el mes de mayo pudiera ocurrir germinacin de clamidosporas para la zona de Tepatitln, esto es de suma importancia para el manejo de este hongo, ya que nos indicara que las medidas preventivas de control deben realizarse previo a la germinacin de las clamidosporas para reducir la probabilidad de la infeccin de agave, especialmente en plantaciones establecidas. Por otro lado, el crecimiento del micelio in vitro es mayor a temperaturas de 20 a 25 oC y se ve favorecido a

Efecto de las condiciones climatolgicas en la distribucin de las enfermedades La evaluacin de las condiciones climatolgicas (tomando en cuenta solo el ao 1998) se llev solo a cabo relacionando la presencia de las principales enfermedades. Con respecto a la temperatura del suelo, se observa que en la regin de Tequila es ms alta durante todo el ao en un promedio de 2 a 3 oC con respecto a Acatic y de 4 a 5 oC con relacin a Tepatitln, as mismo la temperatura ms alta es en el mes de mayo en la zona de Tequila donde se registr 30.77 o C aqu, tambin se observa que la temperatura del suelo fue incrementando

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rangos de pH de 5.5 a 7.0 (fig. 8), mientras que a 30 oC, parece no ser tan favorable. Tanto la temperatura del suelo as como la temperatura ambiente no llegan a superar los treinta oC lo cual puede favorecer el desarrollo del patgeno. La humedad es otro factor que influye en la severidad de Fusarium y se reporta que las condiciones de baja humedad favorecen a este patgeno, especialmente cuando el suelo tiene una humedad de menos del 25%, de acuerdo con la precipitacin de tres diferentes zonas (Tequila, Acatic y Tepatitln), esta ocurre de junio a septiembre siendo mayor en julio y agosto, indicando que la severidad de Fusarium puede verse afectada en el periodo de lluvias, el cual comprende de mayo a octubre. La conjuncin del crecimiento del micelio, la temperatura del suelo, temperatura ambiente y la precipitacin nos hacen suponer que el perodo critico para que ocurra la infeccin en agave va del mes de enero a abril, siendo mayor el perodo de marzo y abril. Es en estos meses entonces, que se deben realizar algunas prcticas factibles para evitar la germinacin y desarrollo del hongo. Esto puede hacerse al final del ciclo de lluvias en el mes de octubre a diciembre, para evitar el incremento de propagulos en la poca seca y por ende reducir la posibilidad de infeccin. De acuerdo a los datos climatolgicos registrados en 1998, mostraron una relacin en la distribucin de enfermedades, indicando en el caso de Fusarium se encontr en un 15% en la zona de los Altos, mientras que en la zona de Tequila se encontr con cerca de un 20% de incidencia, lo cual indica la importancia que tiene la temperatura y la humedad en la distribucin de este patgeno. Esto puede tambin indicar que aquellas reas con temperatura del suelo entre 15 y 25 oC y baja humedad del suelo, puede ser muy favorable para el hongo. Por otro lado, a diferencia de las condiciones favorables para el hongo, en el caso de la pudricin del cogollo, causado por E. carotovora esta enfermedad se ve favorecida por condiciones de alta humedad, que en el caso de las tres reas de estudio, no existe diferencia entre la precipitacin, lo cual indica que esta igualmente distribuida (cerca de 51% en los Altos y cerca del 50% en la zona de Tequila) y la poca en la que ocurre probablemente la mayor infeccin es la poca de lluvias, puesto que el nivel de oxgeno disminuye por el desplazamiento de la humedad, condiciones favorables para el desarrollo de la bacteria (Burton y Wigginton, 1970), estas condiciones ocurren en los meses de junio y julio.

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Ensayo de control qumico de la pudricin del cogollo en condiciones de campo Los resultados mostrados corresponden a la ltima evaluacin para el control de pudricin bacteriana del cogollo, obtenidos en el municipio de Zacoalco de Torres. Como se observa en el cuadro 10 la diferencia para tratamientos result altamente significativa, no as para las repeticiones. El coeficiente de variacin en este ensayo fue aceptable. Este cuadro tambin muestra claramente que los tratamientos de sulfato de cobre pentahidratado sistmico se mantuvieron con un menor grado de enfermedad y que las dosis baja, intermedia y alta resultaron estadsticamente iguales, mientras que el sulfato de cobre no sistmico result tan daado como el testigo sin aplicacin. Cabe sealar que el ensayo se inicio con un grado de dao dos de acuerdo a la escala utilizada y 2 meses despus en los tratamientos 1, 2 y 3 (cuadro 4) se mantiene estadsticamente el mismo nivel de dao no as en los tratamientos 4 y 5 (anexo 1). Por otra parte, los resultados del calculo de eficacia, muestran que el sulfato de cobre pentahidratado sistmico fue de 9 a 11 veces ms eficaz que el sulfato de cobre no sistmico, esto dado que se toma el grado de dao al inicio del ensayo y al termino de dos meses el numero de plantas que pasaron al siguiente grado de dao de la enfermedad (anexo 2). Por otra parte se trabaja con el anlisis de los datos climatolgicos, de las estaciones establecidas por la empresa Cuervo, para establecer si existe una probable correlacin con la presencia de algunas enfermedades.

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TEQUILA CONCLUSIONES

Se determin la presencia de 11 fitopatgenos asociados al cultivo de agave. La pudricin del cogollo es causada por la bacteria Erwinia carotovora y la marchitez fue atribuida a Fusarium oxysporum, adems estn ampliamente distribuidos y y fueron considerados como las enfermedades ms importantes del cultivo. Se reportan 2 nuevas enfermedades foliares plenamente identificadas como Botryodiplodia sp y Didymosphaeria sp , la primera se encontr en el municipio de Magdalena y Acatln de Jurez y la segunda en la zona de los Altos. Se encontr que una cepa de Bacillus sp. es altamente inhibitoria in vitro sobre el desarrollo de Fusarium oxysporum. La comunidad de especies de maleza gramneas asociadas al cultivo de agave mantienen un dominio en su densidad sobre las especies de hoja ancha (dicotiledoneas), no obstante que estas ltimas presentan una mayor diversidad florstica, predominando en su mayora las especies anuales en ambos tipos de especies.

La comunidad de especies de maleza asociadas al agave esta compuesta por dos grupos ; a) aquellas especies que se desarrollan en el rea abierta (entre hileras de plantas) y que representan la mayora y b) aquellas especies que se desarrollan bajo el dosel de la planta de agave y que se benefician de la asociacin directa mediante una asociacin de tipo mutualista negativa entre las cuales predominan los gneros (Secchiopsis, Sicyos, Cyclanthera, Microsechium) del grupo de especies conocidas comnmente como chayotillos y los pertenecientes al genero Ipomoea. La frecuencia y densidad del tipo de especies de maleza encontradas en asociacin al agave sugiere que la comunidad y composicin de la misma est fuertemente relacionada a las practicas de manejo del cultivo, como lo pudiera ser el tipo y frecuencia de uso de herbicidas, practicas de manejo del suelo (cultivos, fertilizacin, etc.) y la variacin ambiental en las diferentes zonas productoras. En campo ninguna especie de maleza aqu reportada mostr sntomas de

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la enfermedad conocida como marchitez. El pH favorable para el desarrollo de Fusarium a 10oC est en un rango de 5.0 a 6.5. Sulfato de cobre pentahidratado sistmico en sus tres dosis mantuvo la planta con menor dao por la bacteria Erwinia sp.

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TEQUILA LITERATURA
CITADA

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Cuadro 1. Escala para evaluar el dao de marchitez del agave por E. carotovora Indice 1 2 3 4 5 Descripcin Planta Sana. De 1 a 5 lesiones acuosas con una longitud de 1 a 30 cm. Iniciando en las espinas apicales o laterales. Una o ms lesiones acuosas de ms de 30 cm. O bien, ms de 6 lesiones de 5 a 30 cm. Lesiones necrticas en el cogollo que avanzan hasta cas llegar a la pia. Cogollo completamente daado, llegando hasta la pia, planta evidentemente muerta. Cuadro 2. Escala para evaluar el dao de marchitez del agave por Fusarium sp. Indice 1 2 3 4 5 Descripcin Planta Sana De 1 a 5 hojas externas con encarrujamiento ligero De 6 a 10 hojas externas con encarrujamiento Planta con ms de hojas10 con encarrujamiento acentuado. Planta muerta fcil de desprender del suelo. Cuadro 3. Crecimiento radial del micelio de F . oxysporum a diferentes niveles de temperatura y pH. Temperatura oC 10 20 3.0 3.0 3.5 3.5 4.0 4.0 4.5 4.5 Valores pH 5.0 5.0 5.5 5.5 6.0 6.0 6.5 6.5 7.0 7.0 7.5 7.5 8.0 8.0 8.5 8.5

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Cuadro 4. Tratamientos para el control de marchitez bacteriana del agave causado por Erwinia sp. Zacoalco de Torres, Jal. 1999. Tratamiento 1 2 3 4 5 Producto Cu2SO4.5H20 sistmico Cu2SO4.5H20 sistmico Cu2SO4.5H20 sistmico Cu2SO4.5H20 Testigo 1750 3 2100 3 1750 3 Dosis de Producto G i.a/ha 1400 3 Cada 7-das No. De Aplicaciones Intervalo de Aplicaciones

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Cuadro 5. Fitopatgenos asociados al cultivo de Agave tequilana Weber var. azul Fitopatgeno Nombre comn Anillo rojo Pudricin del cogollo Marchitez Pudricin de raz Mancha Anular (Asterina mexicana) Mancha foliar Viruela Virus Nemtodos Nemtodos Nemtodos Erwinia sp Erwinia sp Fusarium oxysporum Phytophthora sp Didymosphaeria sp Hojas Botryodiplodia sp Pleospora sp Virus no identificado Pratylenchus sp Dorylaimus sp Helicotylenchus sp Hojas Hojas Hojas Races Races Races Parte afectada Nombre cientfico Hojas Hojas y pia Races y pia Races

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Cuadro 6. Severidad de la pudricin del cogollo en Agave tequilana var azul en predios de la zona de los Altos. Predio El Viborero Zacamecate Rancho Santa Mara El Chivo San Ramn Bajo seco Centinela La Ceja de la Capilla Ingreso al Zamorano TOTAL Severidad (escala de 1 a 5) 1 2 78 92 96 25 0 0 58 351 2 86 20 7 4 46 85 96 28 372 3 10 1 1 0 3 12 3 5 35 4 1 0 0 0 0 1 1 1 4 5 1 1 0 0 26 2 0 8 38

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Cuadro 7. Especies de maleza de hoja angosta (gramneas) presentes en zonas productoras de agave (Agave tequilana weber en el estado de Jalisco. Frecuencia No. sitios Especie Eragrostis mexicana Rynchelitium repens Cynodon dactylon Digitaria ciliaris Chloris gayana Eleusine indica Cenchrus echinatus Setaria glauca Echinochloa colona Eragrostis pectinacea Leotochloa filiformis Brachiaria plantaginea Chloris submutica Chloris radiata Eragrostis glomerata Hackelochloa granularis Heteropogon melanocarpus Sorghym halepense Paspalum plicatulum Panicum ciliaris Hilaris cenchroides Digitaria distans Ixophorus unisetus Digitaria filiformis Andropogon hirtifolious P = Solo se reporta su presencia N.C. = No contabilizada en los muestreos presente (%) 19 19 17 15 15 13 8 7 7 4 4 4 3 3 1 P P P P P P P P P P 56 56 50 44 44 38 24 21 21 12 12 12 9 9 3 absoluta relativa (m ) 14 14 12 11 11 9 6 5 5 3 3 3 2 2 1 11.3 29.0 N.C 12.3 35.4 11.2 2.2 4.5 1.5 2.0 N.C 1 3.3 2.0 71.0 6 16 7 19 6 1 2 1 1 1 2 1 38
2

Densidad Absoluta Relativa

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Cuadro 8. Especies de maleza de hoja ancha (dicotiledneas) presentes en zonas productoras de agave (Agave tequilana weber en el estado de Jalisco. Frecuencia No. sitios Especie Amaranthus hybridus Spermacoce verticilata Phytolacca icosandra Crotalaria pumila Melampodium perfoliatum Tithonia tubaeformis Sida angustifolia Sida rhombifolia Sida spinosa Bidens pilosa Bidens ostruthioides Bidens lemmonii Ipomoea purpurea Ipomoea longepedunculata Ipomoea coccinea Ipomoea hederofilia Ipomoea decasperma Anoda cristata Anoda hostata Anoda acerifolia Secchiopsis triquetra Sicyous angulata Sicyous laciniata Cyclanthera sp. Microsechium sp. Solanum rostratum Solanum americanum Physalis aequata Physalis sp. Commelina diffusa presente (%) 15 11 11 7 7 7 6 1 1 5 1 P 10 3 4 1 1 8 3 4 3 4 2 3 1 3 1 3 1 3 44 32 32 21 21 21 18 3 3 15 3 N.C. 29 9 12 3 3 24 9 12 9 12 6 9 3 9 3 9 3 9 6.8 2.1 2.7 0.7 0.7 5.5 2.1 2.7 2.1 2.7 1.4 2.1 0.7 2.1 0.7 2.1 0.7 2.1 2.2 1.5 2.3 N.C. 1.0 1.7 1.0 3.0 N.C. 1.5 N.C. N.C. N.C. 5.0 N.C. N.C. N,C. 1.3 3 2 3 1 2 1 3 2 6 2 absoluta relativa (m ) 10.3 7.5 7.5 4.8 4.8 4.8 4.1 0.7 0.7 3.4 0.7 10.0 9.0 N.C. 3.5 16.0 N,C. 9.5 3.0 N.C. 2.0 3.0 12 10 4 18 11 3 2 3
2

Densidad Absoluta Relativa

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continuacin cuadro 8 Frecuencia No. sitios Especie Commelina coelestris Euphorbia adenoptera Euporbia spp. Euphorbia prostrata Mimosa sp. Zornia diphylla Meleria quinqueflora Prosopis juliflora Paraphyllium sp. Verbesina pedunculosa Anelima sp. Sonchus oleraceous Pennisetum purpureum Oxalis painteri Oxalis decaphyla Verbena ciliata Xanthium canadensis Solidago velitinium Cosmos bipinatus Graphalium salicifolium Lepidium virginicum Salidago velatinum Tradescantia crassifolia Eupatorium sp. Portulaca oleraceae Galinsoga parviflora Brassica campestris Salvia sp. P = Solo se reporta su presencia N.C. = No contabilizada en los muestreos presente (%) 2 8 3 1 2 P P P P P P P P P P P P P P P P P P P P P P P 6 24 9 3 6 absoluta relativa (m ) 1.4 5.5 2.1 0.7 1.4 N.C. 3.0 6.0 1.0 N.C. N.C. N.C. N.C. N.C. N.C. N.C. N.C. N.C. N.C. N.C. N.C. N.C. N.C. N.C. N.C. N.C. N.C. N.C. N.C. N.C. N.C. N.C. N.C. 3 7 1
2

Densidad Absoluta Relativa

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Cuadro 9. Crecimiento radial del micelio de F. oxysporum a diferentes rangos de pH y temperatura. Temperatura PH 3.0 3.5 4.0 4.5 5.0 5.5 6.0 6.5 7.0 7.5 8.0 8.5 10 C* 0.80e*** 0.80 e 5.93 d 6.83 c 8.26 a 7.81 ab 8.26 a 8.40 a 8.36 a 7.65 abc 7.91 ab 7.11 bc Rango 0.8 0.8 0.8 0.8 5.8 6.1 6.8 6.9 8.1 8.4 7.0 8.2 7.9 8.9 8.2 8.7 8.1 8.9 7.5 7.8 7.4 8.4 7.1 7.2 20 C** 0.80 g 0.80 g 3.65 f 6.73 e 7.51 cd 8.06 abc 7.67 bc 8.15 abc 8.2 ab 7.78 abc 7.00 de 8.43 ab Rango 0.8 0.8 0.8 0.8 3.6 3.6 6.7 7.0 7.4 7.6 7.9 8.1 7.6 7.7 8.1 8.2 7.8 8.5 7.6 8.0 6.6 7.6 8.3 8.5

*incubacin por 13 das. **incubacin por 9 das. *** Tukey (p = 0.05)/promedio de tres repeticiones

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Cuadro 10. Resultados de control qumico con diferentes dosis de Cu2SO4.5H20 sistmico y no sistmico. Tratamiento 1 2 3 4 5 N de plantas 20 20 20 20 20 Media 2.45 b 2.50 b 2.40 b 2.90 a 2.95 a % de infeccin datos transformados 49 b 50 b 48 b 58 a 59 a % de eficacia 52.63 47.36 57.89 5.26 0

Tukey 0.05 DMS= 0.3829 Tratamientos con la misma letra son estadsticamente iguales.

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Anexo 1. Calificacin de dao por marchitez bacteriana del agave, Zacoalco de Torres Jal. 30 de junio de 1999. U de G 2000. Tratamiento 1-1 1-2 1-3 1-4 1-5 2-1 2-2 2-3 2-4 2-5 3-1 3-2 3-3 3-4 3-5 4-1 4-2 4-3 4-4 4-5 5-1 5-2 5-3 5-4 5-5 ANALISIS DE VARIANZA Fuente de variacin Tratamientos Repeticiones CV= 16.48262 GL 4 3 SC 5.54000000 0.08000000 CM 1.38500000 0.02666667 F 7.31 0.14 P-F 0.0001** 0.9353 ns Cal. Rep. 1 2 3 2 3 3 3 3 3 2 2 2 2 3 2 2 2 3 3 3 3 3 3 3 2 3 Cal. Rep. 2 2 3 3 3 3 3 3 2 2 2 2 2 2 2 3 3 3 3 2 3 3 3 3 3 3 Cal. Rep. 3 2 2 3 2 2 3 2 3 2 2 3 3 3 3 2 3 3 3 3 3 3 3 3 3 3 Cal. Rep. 4 2 2 2 2 3 3 3 3 2 2 3 3 2 2 2 3 3 3 3 3 3 3 3 3 3

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Anexo 2. Eficacia Abbott para la calificacin final (30 de junio de 1999). U de G 2000. Ca - Ta x 100 Ca Ca = infeccin en el testigo (individuos con dao que cambiaron de categora). Ta = infeccin en el tratamiento (individuos con dao que cambiaron de categora). Tratamiento 1 2 3 4 5 Ca - Ta x 100 Ca 19- 9 x 100 19 19-10 x 100 19 19 - 8 x 100 19 19-18 x 100 19 19-19 x 100 19 0 5.26 57.89 47.36 52.63 % de eficacia

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TEQUILA

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CONSEJO REGULADOR DEL

TEQUILA ENFERMEDADES
DEL AGAVE TEQUILERO

Introduccin El cultivo de agave (Agave tequilana Weber var. azul) ocupa una superficie de ms de 50,000 has en el estado de Jalisco, distribuidas principalmente en 3 zonas: altos, sur y centro (Valenzuela, 1994), as mismo en los ltimos aos se ha incrementado la superficie plantada, especialmente en otros Estados del pas tal como Nayarit, Guanajuato y Michoacn. Sin embargo en los ltimos aos, el cultivo de agave se ha visto afectado por una serie de problemas fitosanitarios, destacando entre estos, aquellos causados por fitopatgenos, mismas que tienen una fcil diseminacin a estas reas. Por otra parte es poca la informacin existente con respecto a esta problemtica en agave (Valenzuela, 1994). En la actualidad se han generado algunas investigaciones en torno a ello, pero an en forma espordica, (Luna, 1998). Varios autores mencionan ciertos antecedentes del gnero Agave, en torno a las enfermedades entre ellos Lezama (1952), seala algunas de las plagas que afectan al cultivo de agave. Prez (1980) y Villalvazo (1986), reportan que

dos de las enfermedades fungosas ms importantes que atacan tanto al agave pulquero en la mesa central de Mxico as como el Agave tequilana L. Weber, en la regin de Tequila, Jalisco, son la mancha negra (Asterina mexicana) y la antracnosis (Colletotrichum agaves). Otras enfermedades en Agave tequilana lo son; el tizn de las pencas causado por Alternaria sp y Stangonospora gigantea, la pudricin roja de las pencas es causada por Chalariopsis sp, pudricin de raz es causada por los hongos Armillaria mellosa y Fusarium sp. (Granados 1993). Algunos de los principales patgenos asociados a agave que se han identificado son: la bacteria del gnero Erwinia sp, as como los hongos; Fusarium sp. (Valenzuela, 1994). La pudricin del tallo en Agave tequilana Weber es causada por Fusarium oxysporum, (Luna, 1996). Entre los fitopatgenos ms importantes de este cultivo sin duda alguna destacan aquellos asociados a la marchitez del agave, este sntoma se ha asociado a fitopatgenos tales como Erwinia sp y Fusarium sp, o bien por la accin de ambos fitopatgenos (Martnez, 1994 y Velez et al, 1996).

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CONSEJO REGULADOR DEL

TEQUILA

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CONSEJO REGULADOR DEL

TEQUILA ENFERMEDADES
ASOCIADAS AL CULTIVO DE AGAVE

Los principales fitopatgenos que se han identificado en diferentes partes de la planta incluyen: Marchitez o encarrujamiento del agave (Fusarium oxysporum), pudricin del cogollo (Erwinia sp), anillo rojo (Erwinia sp), mancha foliar ( Botryodiplodia sp ), mancha anular ( Didymosphaeria sp ), mancha foliar

negra (Rhizoctonia solani), adicionalmente otras enfermedades tales como nematodos de los gneros Helicotylenchus, tambien se han encontrado virus asociados al cultivo de agave (Cuadro 1). A continuacin se describen algunas de las principales enfermedades en este cultivo.

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TEQUILA
Cuadro 1. Fitopatgenos asociados al cultivo de Agave tequilana Weber var. azul Fitopatgeno Nombre comn Anillo rojo Marchitez bacteriana Pudricin de raz Pudricin de raz Mancha Anular (Asterina mexicana) Mancha foliar Mancha negra foliar Viruela Virus Nemtodos Nemtodos Nemtodos Erwinia sp Erwinia sp Fusarium oxysporum Phytophthora sp Didymosphaeria sp Hojas Botryodiplodia sp Rhizoctonia solani Pleospora sp Virus no identificado Pratylenchus sp Dorylaimus sp Helicotylenchus sp Hojas Hojas Hojas Hojas Races Races Races Parte afectada Nombre cientfico Hojas Hojas y pia Races y pia Races

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CONSEJO REGULADOR DEL

TEQUILA MARCHITEZ
O ENCARRUJAMIENTO DEL AGAVE

Hasta hace algunos aos esta enfermedad se observaba frecuentemente en plantas de ms de 3 aos de edad, en la actualidad es comn encontrarlas al siguiente ao de plantadas e incluso en el mismo ciclo de plantadas casi al final del periodo de lluvias, mostrando con ello que la presencia de dicho patgeno se ha favorecido con el uso de plantas provenientes de plantas enfermas. Sntomas: Los sntomas producidos por esta enfermedad incluyen una decoloracin de las hojas que contrasta con el azul tpico de las plantas sanas, tambin provoca que las hojas se marchiten enrollndose hacia el centro de las mismas (encarrujamiento o acigarramiento), a medida que la enfermedad avanza se intensifica el encarrujamiento de las hojas, el patgeno causa una destruccin de las races y provoca una lesin rojiza en la pia, tanto el dao a races como a la pia causa una apariencia polvosa del los tejidos, y esta avanza hacia la pia (muerte ascendente), provocando un desprendimiento fcil de la planta. El patgeno: El hongo responsable de esta enfermedad es Fusarium oxysporum. Este patgeno produce tres tipos de esporas asexuales; macroconidios,

microconidios y clamidosporas. El hongo forma una masa algodonosa de micelio que puede ser de color blanco al inicio de su crecimiento y posteriormente adquiere ciertas tonalidades violceas. Las macroconidias generalmente tienen 5 septos, tienen la clula basal atenuada y la clula basal en forma de pie, las clamidosporas se pueden formar solas o en cadena y generalmente intercaladas son de forma esfricas y con pared celular gruesa esto le permite sobrevivir por un perodo largo en el suelo (ms de 15 aos) en ausencia de plantas hospederas, estas son las estructuras de sobrevivencia . Epifitiologa: Algunos de los factores que favorecen el desarrollo de este patgeno en una gran nmero de cultivos son pH temperatura y nivel de humedad en el suelo, presencia de otros organismos que daen las races (ej. Nemtodos, insectos, etc), la fertilizacin (especialmente la nitrogenada), entre otros. En condiciones de laboratorio el crecimiento del micelio del hongo se favorece en un pH cido (promedio de 5.5) y aunque puede crecer en diversas temperaturas, se desarrolla mejor en cerca de 20 a 25oC.

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CONSEJO REGULADOR DEL

TEQUILA
5
c r e c i m i e n t o r a d i a l (cm)

4.5 4 3.5 3 2.5 2 1.5 1 0.5 0 3 3.5 4 4.5 5 5.5 6 6.5 7 7.5 8 8.5

Figura 4. Crecimiento radial del micelio in vitro de Fusarium oxysporum aislado de agave a diferentes temparaturas y pH, 72 horas despus de la siembra:
10C 15 oC 20 oC 25oC 30o C

pH

Control.- Las estrategias de manejo incluyen el uso de desinfeccin de hijuelos con una solucin de TCMTB, Benomil, o tiabendazole. Estos fungicidas deben aplicarse como tratamiento a los mismos por inmersin al menos por 2 a 3 minutos. As mismo el uso de cepas antagonistas y promotoras de crecimiento como Bacillus subtilis son esencialmente tiles para retrasar el proceso infectivo, entre las practicas

de manejo de suelo es recomendable no fertilizar con fuentes que acidifiquen el suelo (ej. Sulfato de amonio). Por otra parte el uso de fungicidas al suelo puede ser una practica til si estos son aplicados al inicio del periodo de lluvias y repetidas las aplicaciones al menos en un promedio de 2 ocasiones en este periodo (agosto y octubre), esto puede prevenir las infecciones del ao siguiente.

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TEQUILA PUDRICIN DEL COGOLLO (ERWINIA CAROTOVORA)

Esta enfermedad es sin duda alguna junto con la marchitez del agave, los factores fitopatolgicos ms importante en la produccin del cultivo. Sntomas: Los sntomas tpicos de la pudricin del cogollo son lesiones necrticas y acuosas en las hojas que en la mayora de los casos inician en la espina apical o en las espinas laterales, estas lesiones avanzan hacia el centro de la hoja y en el centro del cogollo causan una pudricin descendente que llega hasta la pia y puede provocar la muerte de la planta. En campo, se ha encontrado que la presencia de Erwinia sp. (pudricin de cogollo) se asocia en la mayora de las ocasiones con un inicio a nivel de la base de las espinas, ya sean laterales o apicales, predominando en estas ltimas, sobre todo en las hojas centrales de la planta, de donde posteriormente avanza la enfermedad hacia la pia. El Patgeno: A la fecha se han aislado diferentes especies de bacterias asociadas a la pudricin del cogollo, entre ellas la ms comn es Erwinia carotovora misma que se ha diagnosticado en dicho sndrome (Velez, et al,

1996). E. carotovora pertenece a la.. familia de las enterobactericeas. La bacteria es un bacilo corto de 1 a 3 micras y tiene flagelos peritricos, son anaerobios facultativos y causan una gran nmero de pudriciones acuosas. Generalmente las colonias son pequeas y hundidas en el medio de cultivo CVP (Cristal violeta pectato). Epifitiologa. El avance de Erwinia depende de la humedad que se forme en las hojas internas del cogollo, esto aparentemente se debe a la pelcula de humedad que se forma sobre las hojas, la cual desplaza los niveles de oxgeno favoreciendo el desarrollo de la bacteria. Lo anterior se ha demostrado para la maceracin de tejido de tubrculos de papa provocado por E. carotovora, encontrndose que esta es menor en condiciones de oxgeno adecuado (Maher y Kelman 1983), considerndose que es ms severa cuando existen condiciones bajas de oxgeno (Lund y Wyatt, 1972). As mismo, se ha determinado que la severidad de esta enfermedad se incrementa en predios infestados de maleza. Ya que, la ventilacin se ve disminuida, lo cual provoca un incremento de la humedad

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en las hojas del agave. La pelcula de humedad en el tejido puede causar una reduccin en el nivel oxgeno a cero en 2.5 hr a 21oC (Burton y Wigginton, 1970). Se conoce adems que para la maceracin del tejido por Erwinia que causan pudriciones blandas, intervienen enzimas pectolticas entre estas se encuentran las pectato liasas, poligalacturonasas y pectin liasas (Kotoujansky, 1987), mismas que pueden verse involucradas en la maceracin del tejido de agave. Control: Para el manejo de esta enfermedad se puede realizar una poda sanitaria dirigida, cortando 5 cm por debajo de la lesin seguida de una aplicacin de algn bactericida, entre ellos Sulfato de cobre pentahidratado antibiticos del tipo gentamicina o estreptomicina, por otro lado el antibitico experimental ac. Oxolinico mostr resultados prometedores sobre el control de esta enfermedad, las aplicaciones debern realizarse cercano a la poca de lluvias (junio y julio) y despus de las mismas (noviembre).

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TEQUILA MANCHA
FOLIAR SP)

(BOTRYODIPLODIA

Esta enfermedad es incipiente y sus daos y distribucin no son muy frecuentes, aunque indudablemente el incremento de esta enfermedad puede propiciarse si no se maneja adecuadamente. Sntomas: Esta enfermedad inicia como una mancha amarillenta generalmente circular a ovoide, la cual posteriormente se torna necrtica manteniendo un halo amarillento alrededor de la lesin si las condiciones son favorables estas manchas se unen formando entonces una necrosis de la hoja, las cuales generalmente se presentan en las hojas ms viejas, sin embargo se puede presentar en hojas jvenes. El patgeno: El patgeno responsable de esta enfermedad es Botryodiplodia sp el hongo produce picnidios, mismos que se forman sobre las manchas necrticas, generalmente en el centro de la misma, estos picnidios se pueden apreciar a simple vista como una serie de puntitos de color de ne-

gro sobre dichas manchas, este patgeno presenta conidios bicelulares de color caf claro a caf oscuro en picnidios en estromticos. Epifitiologia: Esta enfermedad bsicamente se ha encontrado en los municipios de Magdalena y Acatln de Jurez, coincidiendo con reas un poco ms clidas, con respecto a la zona de Los Altos. Por otro lado este patgeno puede ser un serio problema ya que las manchas llegan a unirse necrosando gran parte del tejido (bsicamente hojas). La mancha foliar se ve favorecida por temperaturas entre 20 a 25 C. Control: Respecto al control de esta enfermedad, puede sugerirse el uso de fungicidas de contacto como mancozeb ( manzate) durante el perodo de lluvias, ya que parece que la humedad esta ligada a la presencia de dicho patgeno, se deber iniciar tambin con podas sanitarias, eliminando aquellas hojas que presenten los sntomas de la misma.

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TEQUILA MANCHA
ANULAR SP)

(DIDYMOSPHARERIA

El impacto de esta enfermedad no esta bien determnada, sin embargo, la presencia de ste sobre el cultivo reduce el rea fotosinttica al daar las hojas. Sntomas: Esta enfermedad se presenta como una serie de pequeos puntos crculos de color claro al inicio de los sntomas, los cuales a medida que maduran las estructuras se tornan de un color rojo-negrusco hasta que prcticamente pueden quedar estructuras duras de color negro, en estas reas se reduce la capacidad fotosinttica de la planta y puede llegar a retrasar el crecimiento normal de la planta. En la regin de Los Altos se encuentra ampliamente distribuida la enfermedad en plantas de ms de cuatro aos de edad, y es comnmente conocida como mancha anular, y la presencia de este patgeno se puede encontrar en cualquier poca del ao, principalmente en las hojas externas de la planta, as mismo, tambin se ha observado en hojas jvenes de las plantas en la regin de Acatln de Jurez.

El patgeno: Este hongo presenta ascas bitunicadas con ascosporas bicelulares y peritecios en estromas, pertenecen al grupo de los ascomycetos. Epifitiologa: Aunque no se han determinado las condiciones a las cuales se favorece su presencia, parece estar ligado a temperaturas no muy altas osciladas entre 20 22 C promedio, motivo por lo que su distribucin es ms frecuente en la zona de los Altos, an cuando ha sido observada en otras zonas. Control: El control de sta enfermedad radica principalmente en eliminar las fuentes de inculo, que bsicamente consisten en plantas mostrencas y residuos de las hojas jimadas o bien agaves de otras especies afectadas. Puede tambien aplicarse algn fungicida de contacto entre los que destacan, Mancozeb y clorotalonil o bien fungicidas sistmicos del grupo de los triazoles, que muestran eficacia contra los ascomycetos.

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TEQUILA MANCHA FOLIAR NEGRA (RHIZOCTONIA SOLANI)

El hongo R. solani K. es quiz uno de los hongos ms importantes en la agricultura debido al gran nmero de hospederos que ste ataca. Sin embargo esta enfermedad es poco comn en las plantaciones de agave y su dao es apenas incipiente. Sntomas: Esta enfermedad se caracteriza por la presencia de una mancha foliar de color negro que avanza a lo largo de toda la hoja, generalmente a medida que avanza el patgeno es factible observar una especie de anulaciones sobre las hojas y en las reas ms daadas pueden observarse unos pequeos puntos de color negrusco por ambos lados de las hojas, aunque son ms frecuentes sobre el haz de la hoja. Esta enfermedad se presenta inicialmente en las hojas externas de planta y la base de las mismas y de ah avanza hacia las hojas internas del cogollo y generalmente la mancha es ms pequea en las hojas internas. El patgeno: Las caractersticas tpicas de este patgeno son: a) ramificacin en ngulo recto cerca del septo distal de las clulas jvenes en las hifas vegetativas, b) formacin de un septo cerca del punto de origen de la ramifi-

cacin, c) constriccin de la ramificacin de la hifa en el punto de origen, d) presencia de un septo doliporo, e) ausencia de conexiones en forma de grapa, f) ausencia de conidias, presenta clulas monilioides, g) tejido escleroidial no diferenciado en corteza y mdula, y h) ausencia de rizomorfos (Ogoshi, 1987). El patgeno forma pequeos microesclerocios de clulas moniliodes las cuales corresponden al hongo Rhizoctonia solani. Variabilidad gentica de R. solani K: Se ha demostrado que R. solani posee una amplia variabilidad gentica, lo cual motiv a Schultz en 1937 (citado por Ogoshi, 1987) a desarrollar un esquema de agrupacin basado en la fusin de las hifas de los aislamientos, reportando 5 grupos: I (hortensis), II ( brassicae), III ( typica ), IV ( cichorii endiviae) y V (fuchsiae). Ms recientemente Parmeter et al (1969) desarrollaron un esquema de agrupacin de R. solani en grupos de anastomosis, determinando la presencia de 4 grupos los cuales nombr; AG1, AG-2, AG-3, y AG-4, esto dio inicio al desarrollo del concepto de grupos de anastomosis , en los siguientes 15 aos

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(Anderson, 1982). La anastomosis de las hifas es una manifestacin de incompatibilidad somtica o vegetativa entre los aislamientos (Anderson, 1982) y la reaccin de anastomosis puede ir desde la fusin de las paredes y membranas hasta no llevarse a cabo dicha fusin (Carling y Sumner, 1992). En el caso de agave parece que el grupo de anastomosis asociado es el AG-1. Epifitiologa: Este patgeno se ha observado con cierta frecuencia en las reas del sur de Jalisco en plantas de distintas edades, y los microesclerocios se pueden localizar sobre las venas de las hojas. Las condiciones para esta enfermedad son ms bien de condiciones con cierto nivel de humedad relativa, lo cual puede indicar la presencia del mismo en la poca de lluvias. R. solani K se disemina con la lluvia, riego, agua inundada, herramientas y cualquier medio que lleve suelo contaminado (Agrios, 1988). La temperatura favorable para el hongo oscila entre 15 a 25oC en la mayora de los grupos de anastomosis. Control: El control de la enfermedad radica en el saneamiento de las plantas enfermas, as como en la vigilancia de los niveles de inculo, puede emplearse fungicidas altamente especficos para este hongo tal como; thifluzamide o flutolanil, los cuales se debern aplicar cerca de la poca de lluvias.

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TEQUILA LITERATURA
CITADA

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Universidad de Guadalajara Centro Universitario de Ciencias Biolgicas y Agropecuarias Divisin de Ciencias Agronmicas

Departamento de Produccin Agrcola Reporte final: Proyecto: Epidemiologa y manejo integrado de problemas fitosanitarios en Agave tequilana Weber var. azul

Participantes: Gil Virgen Calleros Jose Luis Martnez Ramrez Ramn Rodrguez Ruvalcaba Fco. Javier Bernal Marcelino Vzquez Garca Enrique Pimienta Barrios

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