EXPRESIN GNICA: SINTESIS Y CLASIFICACION DE PROTEINAS El ARN es la ltima expresin del gen.

TRADUCCIN: LOS COMPONENTES La maquinaria celular para la traduccin del ARNm a polipeptidos consta de cinco componentes principales: los ribosomas; que llevan a cabo el proceso de sntesis de polipeptidos. Las molculas de ARNt; que alinean los aminocidos en el orden correcto a lo largo del molde de ARNm. Las aminoacil-ARNt sintetasas; unen los aminocidos a sus molculas de ARNt correspondientes. Las molculas de ARNm; llevan codificada la informacin de la secuencia de aminocidos para que se sinteticen los polipeptidos. Los factores proteicos; facilitan varios pasos del proceso de traduccin. LOS RIBOSOMAS LLEVAN A CABO LA SINTESIS DE POLIPEPTIDOS Los ribosomas desempean un papel fundamental en la sntesis de protenas, orientado adecuadamente el ARNm, con respecto a los ARNts que portan a los aminocidos, de tal manera que el cdigo gentico se lea adecuadamente y catalizando la formacin de los enlaces peptidicos que unen los aminocidos de la cadena polipeptidica. Los ribosomas, son partculas hechas de ARN y protenas que se encuentran en el citoplasma, tanto de clulas eucariotas como de procariotas, asi como en la matriz mitocondrial y en el estroma de los cloroplastos. Todos los ribosomas, consta de dos unidades disociadas denominadas subunidad mayor y subunidad menor. En el ribosoma existen cuatro lugares particularmente importante para la sntesis de protenas. Son un sitio de unin a ARNm y tres sitios a los que puede unirse ARNt: un sitio A (aminoacil), donde se une cada nuevo ARNt, que llega portando un aminocido, un sitio P (peptidil), donde reside el ARNt que lleva la cadena polipeptidica en formacin y un sitio E (exit), desde el cual los ARNt abandonan el ribosoma, despus de haber descargado sus aminocidos. LAS MOLECULAS DE ARN DE TRANSFERENCIA LLEVAN LOS AMINOACIDOS AL RIBOSOMA Anticodon: secuencia especial de tres nucletidos localizada dentro de uno de los bucles de la molcula del ARNt, los anticodones permiten a las molculas de ARNt reconocer codones en el ARNm, por complementariedad de bases. De acuerdo con la hiptesis del balanceo, la flexibilidad en la unin codn-anticodon permite que se formen algunos apareamientos inesperados, la inusual base inosina (I), que es extremadamente rara en otras molculas de ARN, se presenta a menudo en la posicin de balanceo de los anticodones del ARNt. LAS AMINOACIL-ARNt SINTETASAS UNEN LOS AMINOACIDOS A LOS ARNs DE TRANSFERENCIA ADECUADOS Las enzimas responsables de la unin de los aminocidos de sus respectivas molculas de ARNt se denominan aminoacil-ARNt sintetasas. La aminoacil-ARNt sintetasas catalizan la unin de un aminocido a su correspondiente ARNt, mediante un enlace ester, en una reaccin acoplada a la hidrlisis de ATP en AMP y pirofosfato. Se dice que el enlace ster que une el aminocido al ARNt es un enlace de alta energa. EL ARN MENSAJERO LLEVA LA INFORMACION CODIFICADA AL RIBOSOMA El codn de iniciacin, es el primer codn en ser transcrito, suele ser AUG, la secuencia no traducida del extremo 3 es la que sigue al codn stop, que es el ltimo codn que se traduce y que puede ser UAG, UAA o UGA. SE REQUIEREN FACTORES PROTEICOS PARA LA INICIACION, ELONGACION Y TERMINACION DE LAS CADENAS POLIPETIDICAS Factores proteicos: son necesarios para la iniciacin de la traduccin, otros para la elongacin de la cadena polipeptidica en formacin, y otros para la terminacin de la sntesis de polipeptidicos. EL MECANISMO DE TRADUCCIN La traduccin de los ARNm a polipeptidos es un proceso secuencial y ordenado que comienza con la sntesis de una cadena polipeptidica por el extremo amino terminal, o N-terminal y continua con la adicin de aminocidos a la cadena en crecimiento, hasta que se llega al extremo carboxilo terminal, o C-terminal. El proceso de traduccin se subdivide en tres fases: 1. La fase de iniciacin: en la que el ARNm se une al ribosoma y se posiciona para la traduccin

2. La fase de elongacin: en la que los aminocidos se van uniendo secuencialmente por medio de enlaces peptidicos en el orden determinado por la ordenacin de codones del ARNm. 3. La fase de terminacin: en la que el ARNm y la nueva cadena polipeptidica se desligan del ribosoma. LA INICIACION DE LA TRADUCCION REQUIERE FACTORES DE INICIACION, SUBUNIDADES RIBOSOMICAS, ARNm y ARNt INICIADOR Iniciacin en procariotas: la iniciacin se puede subdividir en tres pasos distintos: 1. Factores de iniciacin: denominados IF1, IF2 e IF3, se unen a la subunidad ribosmica menor con el GTP unido a IF2. 2. El ARNm y el ARNt que lleva el primer aminocido se unen a la subunidad ribosmica 30s. 3. El complejo de iniciacin 30s se une a una subunidad ribosmica 50s libre, generando el complejo de iniciacin 70s. Iniciacin en eucariotas: el proceso de iniciacin en eucariotas requiere un conjunto diferente de factores de iniciacin, una ruta algo distinta de ensamblaje del complejo de iniciacin y un iniciador especial ARNt que lleva una metionina que no ha sido previamente formilada. LA ELONGACION DE LA CADENA IMPLICA CICLOS SECUENCIALES DE UNION DEL AMINOACIL ARNt, FORMACION DEL ENLACE PEPTIDICO Y TRASLOCACION La etapa de elongacin de la sntesis del polipeptido implica un ciclo repetitivo de tres pasos: 1. La unin de un aminoacil ARNt 2. La formacin del enlace peptidico 3. La traslocacin Unin del aminocil ARNt: la elongacin empieza cuando un aminoacil ARNt cuyo codn es complementario del segundo codn se une al sitio A del ribosoma. La unin de este nuevo aminoacil ARNt al codn del sitio A requiere dos factores de elongacin proteicos, EF-Tu y EF-Ts, y esta mediada por la hidrlisis de GTP. Los factores de elongacin no reconocen anticodones concretos, lo que significa que cualquier tipo de aminoacil ARNt puede ser transportado hacia el ribosoma. Formacin del enlace peptidico: durante muchos aos se pens que la formacin del enlace peptdico estaba catalizada por una hipottica protena ribosmica a la que se daba el nombre de peptidil transferasa, en 1992 Harry Soller y sus colegas mostraron que la subunidad mayor de los ribosomas bacterianos retena la actividad peptidil transferasa despus de haber eliminado todas las protenas ribosmicas. Traslocacin: durante este proceso el peptidil ARNt se deplaza del sitio P al sitio E, donde se libera del ribosoma. Este proceso requiere un factor de elongacin, denominado ER-G y una molcula de GTP. La nica diferencia entre los sucesivos ciclos de elongacin y el primer ciclo es que un ARNt de iniciacin ocupa el sitio P al principio del primer de elongacin y es un peptidil ARNt el que ocupa al principio de los siguientes ciclos. LA TERMINACION DE LA SINTESIS POLIPEPTIDICA ESTA MEDIADA POR FACTORES DE LIBERACION QUE RECONOCEN CODONES STOP Los codones stop son reconocidos por protenas denominadas factores de liberacin, que mimetizan la estructura molecular de las molculas de ARNt, que llevando GTP, se unen al sitio A del ribosoma y finalizan la traduccin, puesto que separan a la cadena polipeptidica completa del peptidil ARNt. EL PLEGAMIENTO DEL POLIPEPTIDO ESTA FACILITADO POR CHAPERONAS MOLECULARES Una de las caractersticas principales de las chaperonas moleculares es unirse a las cadenas polipeptidicas durante las primeras etapas del plegamiento, evitando asi que interaccionen con otros polipeptidos antes de haber adquirido su conformacin adecuada. Dos familias de chaperonas mas frecuentes son Hsp70 y Hsp60. LA SNTESIS DE PROTENAS SUELE UTILIZAR UNA FRACCIN IMPORTANTE DE LAS RESERVAS ENERGTICAS CELULARES Cada enlace fosfoanhidrido tiene una energa libre estndar de 7.3 kcal/mol, los cuatro enlaces representan un requerimiento de energa libre de 29.2 kcal/mol por cada aminocido insertado.

MUTACION Y TRADUCCION La mayora de las mutaciones de un codn afectan simplemente a un aminocido y las mutaciones en la tercera base de un codn no suelen producir un cambio de aminocido. LOS ARNts SUPRESORES ELIMINAN LOS EFECTOS DE ALGUNAS MUTACIONES Las mutaciones que convierten los codones que codifican aminocidos en codones stop se conocen como mutaciones sin sentido. Una molecula de ARNt que elimina de este modo el efecto de una mutacin se denomina ARNt supresor. LA DEGRADACION MEDIADA POR CODONES SIN SENTIDO Y LA DEGRADACION POR AUSENCIA DE TERMINACION SON MECANISMOS QUE FACILITAN LA DESTRUCCION DE ARMms DEFECTUOSOS En ausencia de un ARNt supresor adecuado, un codn sin sentido puede hacer que la traduccin termine prematuramente, generando por lo tanto un polipeptido incompleto, para evitar este problema las clulas de los mamferos destruyen los ARNm que contienen codones stop prematuros, mediante un mecanismo denominado degradacin mediada por codones sin sentido, la pieza clave de este mecanismo es el complejo de unin a exones (EJC), un complejo multiproteico que se deposita, durante el ayuste del ARNm, en cada punto donde se elimina un intrn del pre-ARNm. En las clulas eucariotas, la traduccin se paraliza cuando un ribosoma encuentra el final de un ARNm sin haber encontrado un codn stop, un complejo enzimtico de degradacin de ARN se une en ese momento al sitio A del ribosoma, desocupado y degrada el ARNm defectuoso mediante un proceso conocido como degradacin por ausencia de terminacin, este mismo problema se resuelve de manera ligeramente distinta en bacterias. PROCESAMIENTO POSTRADUCCION Algunas protenas experimentan un tipo de procesamiento relativamente inusual denominado ayuste de protenas, que es anlogo al ayuste de ARN, durante le ayuste de protenas, unas secuencias de aminocidos especficos denominadas inteinas son eliminadas de la cadena polipeptidica y los segmentos restantes denominados exteinas, se empalman para dar lugar a la protena madura. CLASIFICACION Y REGULACION DE LA LOCALIZACION DE LAS PROTEINAS La traduccin es un proceso mayoritariamente citoplsmico, algunas evidencias recientes sugieren que un 10% de los ribosomas de las clulas se encuentran en el nucleo, donde pueden traducir ARNs sintetizados de novo. La transferencia de polipeptidos hacia el RE se denomina exportacin contraslacional, porque el movimiento del polipeptido a travs o hacia la membrana del RE esta directamente acoplado con el proceso de traduccin. La llegada de polipeptidos a los orgnulos requiere la presencia de sealizacin de localizacin especial y se denomina exportacin postulacin. LA EXPORTACION DURANTE LA TRADUCCION PERMITE QUE ALGUNOS POLIPEPTIDOS ENTEN EN EL RE A MEDIDA QUE SE VAN SINTETIZANDO Evidencia de las secuencias seal del RE: la idea de que el RE estaba implicado en el transporte de protenas sintetizadas de novo hacia varias localizaciones dentro de la celula, surgi por primera vez a partir de unos estudios de Colvin Redman y David Sabatini sobre la sntesis de protenas en vesculas del RE rugoso. Las funciones de la SRP y del translocn: la secuencia seal no inicia por si misma el contacto con el RE, el contacto esta mediado por una partcula de reconocimiento de la seal (SRP), reconoce y se une a la secuencia seal del RE del nuevo polipetido y despus a la membrana del retculo. Los componentes proteicos tiene tres sitios activos fundamentales: 1. El que reconoce y se une a la secuencia seal del RE 2. El que interacciona con el ribosoma para bloquear la traduccin 3. y por ltimo el que se une a la membrana del RE. Translocn: es el que lleva a cavo la traslocacin de polipeptidos a treves de la membrana del RE. Adems es un complejo proteico compuesto por varios componentes implicados en la exportacin cotraslacional, que incluye un receptor SRP al que se une SRP, un receptor de ribosoma. Bip y la protena disulfuro isomerasa: una de las chaperonas mas abundantes en el lumen del RE es una protena denominada Bip, que es miembro de la familia de las chaperonas Hsp70, se une a regiones hidrfobas de las cadenas

polipeptidicas, especialmente a regiones enriquecidas en los aminocidos triptfano, fenilalanina y leucina. El lumen del RE contiene la enzima protena disulfuro isomerasa, que cataliza la formacin y ruptura de puentes disulfuro entre los residuos de cistena. Secuencia de transito: es la secuencia de direccionamiento de los polipeptidos, est localizada en el extremo N-terminal del polipeptido.