Complejos orgnicos de metales pesados en el mar Introduccin Los metales estn de forma natural en el medio ambiente, son aportados

a los suelos y al ciclo hidrolgico durante la erosin de rocas gneas y metamrficas por la accin atmosfrica fsica y qumica. Algunos metales son naturalmente abundantes y tienen altas concentraciones de fondo (e.g. Al, Fe), otros metales son ms raros y tienen bajas concentraciones de fondo (e.g. Hg, Cd, Ag y Se). Definicin de metales pesados y su significado El trmino metales pesados es ampliamente usado por cientficos medioambientales y su definicin es complicada. Lesaca (1997) incluye en esta definicin a los metales que en la tabla peridica estn en el rectngulo que forman Ti, Hf, As y Bi en sus esquinas, y adems a dos elementos no metlicos: Se y Te. En general la expresin metales pesados se usa cuando hay una connotacin de toxicidad. Los metales pesados ms comunes por sus efectos txicos y porque son fcilmente medibles en muestras marinas son plomo, cadmio, mercurio, arsnico, bario, zinc, cobre, hierro y manganeso (Ansari, 2004). Generalmente los metales pesados se encuentran en concentraciones muy bajas, aunque la actividad humana ha aumentado sus niveles en muchas aguas fluviales, ocanos y sedimentos por: residuos mineros, extraccin de petrleo y gas, industrias (pesticidas, pinturas, cuero, tejidos, fertilizantes, medicamentos), vertidos domsticos, residuos agrcolas, etc. Algunos metales pesados son esenciales para la vida y otros son beneficiosos, pero muchos son altamente txicos. Las concentraciones en las cuales los metales pueden ser considerados txicos cambian de una especie a otra, para una especie, un elemento es esencial en niveles bajos, puede ser txico para otras. Los criterios para establecer si o no un metal pesado es esencial para el crecimiento normal de plantas y/o los animales incluyen: el organismo no puede crecer ni puede completar su ciclo biolgico sin un suministro adecuado del metal. el metal no puede ser totalmente reemplazado por otro metal. el metal tiene una influencia directa en el organismo y est involucrado en su metabolismo. Adems de C, H, O, N, P, K y S, los elementos que se ha demostrado que son esenciales para los vegetales son: Al, B, Br, Ca, Cl, Co, Cu, F, I, K, Mg, Mn, Mo, Na, Ni, Rb, Si, Ti, V, Zn. Los oligoelementos esenciales que con ms probabilidad pueden provocar problemas de deficiencia en vegetales son: B, Cu, Fe, Mn, Mo, Zn. El carbono orgnico disuelto (DOC) y coloidal (COC) en el agua del mar pueden ser los factores clave en controlar el destino, transporte y biodisponibilidad de muchos metales y contaminantes orgnicos en ambientes marinos (Bruland et al., 1991; Honeyman y Santschi, 1992; Campbell et al., 1997). Sin embargo, todava no est claro como el DOC del agua de mar aumenta la solubilidad de metales por complejacin. El conocimiento de las interacciones de metales con la materia orgnica macromolecular y coloidal (COM) son importantes para entender la biogeoqumica marina de metales esenciales. Se ha visto que una fraccin significativa de metales disueltos en agua de mar estn asociados con COM (e.g. Greenamoyer y Moran, 1996; SanudoWihelmy et al., 1996; Wen et al.) Solubilidad de los metales en agua de mar 1

La solubilidad de los metales pesados en el agua de mar es interesante para estimar la concentracin de los metales disueltos, las rutas de la toma biolgica de los metales por los organismos marinos, su bioacumulacin y su toxicidad.. La solubilidad de metales pesados en agua de mar est controlada por varios factores como pH, temperatura, salinidad, naturaleza de los aniones, etc. Compuesto metlico BaCO3 BaSO4 CdCO3 CaCO3 CaSO4 Cu2S CuS FeCO3 Fe(OH)2 FeS Fe(OH)3 PbCO3 PbSO4 PbS MnCO3 MnS Hg2CO3 Hg2SO4 HgS NiCO3 NiS Sn(OH)2 SnS ZnCO3 Zn(OH)2 ZnS Ksp a 25 C 2,58 x 109 1,07 x 1010 6,18 x 1012 4,96 x 109 7,10 x 105 2,26 x 1048 1,27 x 1036 3,07 x 1011 4,87 x 1017 1,59 x 1010 2,64 x 1039 1,46 x 1013 1,82 x 108 9,04 x 1029 2,24 x 1011 4,65 x 1014 3,67 x 1017 7,99 x 107 6,44 x 1053 1,42 x 107 1,07 x 1021 5,45 x 1027 3,25 x 1028 1,19 x 1010 6,86 x 1017 2,93 x 1025

Tabla 1: Datos de productos de solubilidad de algunos compuestos metlicos. Los metales pesados (en forma particulada o soluble) existentes en los ocanos finalmente van a parar a los fondos marinos, los cationes metlicos solubles son precipitados por aniones como sulfato, cloruro, fluoruro, bicarbonatos/carbonatos. Los precipitados formados tienen muy bajas solubilidades a los pHs de agua de superficie (8,18,3) y de las aguas profundas (7,68,1). Adems se acepta que la interaccin de los metales minoritarios disueltos con partculas suspendidas en agua de mar es el mecanismo predominante de las concentraciones observadas y de sus patrones de distribucin. Whitfield y Turner (1987) propusieron tres tipos principales de distribucin de los elementos en base a su interaccin biogeoqumica con partculas. As los elementos han sido clasificados como conservativos, reciclados y retirados.

Los metales pesados conservativos (e.g. Mo, Ti) interactan dbilmente con partculas y tienen un tiempo alto de residencia (> 105 aos). Los metales pesados reciclados (e.g. Cd, Cr, Ni y Zn) estn involucrado en los ciclos internos de materia del particulada biolgica, sus concentraciones estn agotadas en aguas superficiales y aumentan con la profundidad, sus tiempos de residencia estn del rango de 103 105 aos. Los metales pesados retirados (e.g. Co, Pb, Hg, Mn) tienen relativamente un tiempo de residencia corto (< 103 aos) debido a su interaccin fuerte con partculas. Especiacin, biodisponibilidad y acumulacin de metales pesados La especiacin se refiere a las formas fsicas y qumicas en las cuales un elemento puede existir en un sistema. En aguas ocenicas, es difcil determinar evolucin de las especies directamente. Aunque algunas especies individuales pueden ser analizadas, otras slo se pueden deducir de modelos de equilibrios termodinmicos. La especiacin determina la movilidad ambiental de un elemento, especialmente en el reparto que sufre entre el agua y los sedimentos.

Figura 2: Especiacin de los iones metlicos en agua de mar y los principales mecanismos que la controlan (Ansari, 2004). En el mar, los metales se encuentran en los sedimentos en suspensin, en los del fondo del mar, en forma disuelta y en la biota. Las rutas principales para pasar de un compartimento a otro son la adsorcin, la complejacin, la precipitacin y la toma biolgica. La adsorcin es generalmente el proceso predominante porque los metales tienen afinidades fuertes con los hidrxidos de Fe y de Mn, con la materia orgnica particulada, y en un grado inferior con los minerales de la arcilla; as, los metales tienden a acumularse en los sedimentos del fondo.

La fase disuelta representa la fuente biodisponible principal de metales para los organismos. Esta fraccin est favorecida en condiciones del pH bajo (la solubilidad de los hidrxidos metlicos aumenta cuando el pH disminuye), baja concentracin de materia orgnica particulada y las altas concentraciones de la materia orgnica disuelta. La fase de sedimentos en suspensin est favorecida por un alto pH y alta concentracin de materia orgnica particulada. Alto pH, alto Eh y elevadas concentraciones de materia orgnica particulada favorecen que los metales se trasladen a los sedimentos del fondo, o que permanezca como material particulado en suspensin si hay suficiente energa que remueva los sedimentos. Compuestos de coordinacin El conocimiento de la complejacin de metales por ligandos orgnicos en agua de mar es muy problemtico. Hay actualmente un gran vaco entre la informacin de las investigaciones de laboratorio sobre la complejacin de metales por ligandos orgnicos estructuralmente caracterizados, y las investigaciones de complejacin por compuestos orgnicos naturales cuya estructura molecular es esencialmente desconocida. En el agua de mar, puede distinguirse entre in complejo y par inico. En el complejo existe una fuerte asociacin entre los iones, con hidratacin propia distinta a la de ambos componentes. En el par inico la asociacin es slo una atraccin semidistante, conservando cada componente su grado de hidratacin casi intacto. Los complejos son ms estables que los pares inicos, se forman mediante uniones de tipo covalente entre un ion central con orbitales de valencia vacos, que acta como cido de Lewis (normalmente es un metal de transicin), y uno o varios ligandos que poseen pares de electrones libres. Estos ltimos pueden ser de tipo aninico como el Cl, F, Br, I, NO3, CO32, SO42, S2, PO43, SO32, CN, o bien molculas orgnicas cuyos grupos funcionales contienen tomos de oxgeno, nitrgeno ,azufre, etc. En este sentido, se suele considerar al protn como un metal y los grupos OH como ligando. Esta interaccin lleva a la formacin de un enlace covalente coordinado o dativo, por eso los complejos reciben tambin el nombre de compuestos de coordinacin. La diferencia entre un par inico y un ion complejo no siempre es fcil de establecer. Incluso, con frecuencia, se tratan conjuntamente a la hora de abordar el anlisis general de las interacciones entre especies en disolucin, advirtindose, que la estabilidad de cada una de estas especies est gobernada por parmetros diferentes. Aunque existen algunos aspectos diferenciadores que se puede resumir en: La formacin de un ion complejo obedece al establecimiento de interacciones fundamentalmente covalentes, mientras que un par inico tiene un carcter predominantemente electrosttico. Cuando se forma un ion complejo, las respectivas esferas de hidratacin de las especies intevinientes se modifican para dar lugar a una nica capa de molculas de agua que queda envolviendo al complejo en su conjunto. Desde un punto de vista cintico, cuando se forman iones complejos, la reaccin de asociacin es precedida por una etapa de deshidratacin. La formacin de pares inicos implica variacin de la absorcin en la zona del espectro correspondiente al ultravioleta, mientras que la formacin de un ion complejo implica cambios en la parte visible del espectro de absorcin. Los iones en disolucin son realmente acuacomplejos, ya que las molculas de agua por si mismas se comportan como ligandos hacia los iones en disolucin. Es por ello que se suele decir que una reaccin de complejacin en disolucin acuosa es realmente una reaccin de sustitucin de ligandos. Casi todos los ligandos, como el agua o el ion cloruro, ocupan un solo sitio de coordinacin, estas especies se 4

llaman ligandos monodentados. Otras molculas ocupan hasta dos sitios de enlaces, se llaman ligandos bidentados. Hay otros ligandos ms complejos que se unen a tres, cuatro, cinco y hasta seis sitios de coordinacin. Todos los ligandos que forman ms de una unin con un ion de metal se llaman ligandos quelantes (del griego, chelos, que significa garra). El tomo central debe disponer de orbitales vacos capaces de aceptar pares de electrones, los cationes de los grupos 1 y 2 al disponer de orbitales con poca tendencia a captar electrones tienen poca tendencia a formar complejos, son los metales de transicin los que presentan una mayor tendencia. Cuando los ligandos se coordinan al metal, formando la esfera de coordinacin del complejo. El conjunto puede ser neutro, catinico o aninico, los ligandos forman la primera esfera de coordinacin y los contraiones la segunda esfera de coordinacin. El conjunto de ligandos alrededor del catin central forman un "cluster". Complejacin de metales por la materia orgnica en agua de mar La especiacin afecta a la reactividad de los metales pesados y, por tanto, a su disponibilidad biolgica y al carcter beneficioso/txico para un determinado organismo. No obstante, y a pesar de la importancia de muchos de los metales pesados desde el punto de vista biolgico, sus bajos niveles de concentracin hacen que la especiacin de estos elementos no est claramente establecida. Un punto importante a considerar en la especiacin de metales pesados es su complejacin con ligandos orgnicos presentes en el agua de mar. En los ocanos, el contenido en materia orgnica disuelta vara desde 1 mg C/l en profundidad (en unidades DOC) hasta valores diez veces superiores en aguas superficiales. Aunque la naturaleza qumica de esta materia no est bien caracterizada, se puede citar como ejemplos, ligandos procedentes de la actividad humana, como EDTA, o bien sustancias hmicos y compuestos polmericos de composicin variable que contienen grupos aptos para la coordinacin del tipo de alcoholes, fenoles, cidos carboxlicos, etc. En relacin con la biodisponibilidad de un elemento, puede mencionarse le caso del hierro. El hierro es considerado un posible nutriente limitante del crecimiento de organismos planctnicos. No obstante, son muchos los autores que consideran que tan slo las especies inicas solubles de Fe pueden ser asimiladas por el fitoplancton, y no el Fe en forma de especies hidrxido u oxohidrxido, en estado coloidal (Hudson, 1990). Por lo que se refiere a la toxicidad de determinados metales, la forma en que stos estn presentes y, en concreto, la naturaleza de los ligandos a los que se encuentran coordinados, puede modificar drsticamente sus propiedades. Este es el caso, por ejemplo del cobre, que puede actuar como nutriente cuando est formando parte de especies en las que el Cu (II) est coordinado con ligandos de tipo orgnico, o como un txico, si se presenta en forma de ion Cu(II) libre (Sunda, 1979). Generalmente, para una gran variedad de metales pesados que incluye Co2+, Mn2+, Ni2+, Cu2+, Zn2+, y Fe3+, se observa que la biodisponibilidad est ntimamente relacionada a la especiacin. Para estos metales la particin de los metales entre cationes hidratados, Mn+, y las formas MLi, complejadas con ligandos en disolucin (Li) ejerce una influencia principal en los ciclos biogeoqumicos de los ocanos. Una investigacin de complejacin de metales realizada por Mantoura et al. (1978) concluye que aproximadamente el 10% del total del cobre en aguas ocenicas est complejado con materia orgnica. Actualmente, debido a los avances analticos, se dice comnmente que el 99% o ms del cobre total en agua de mar est en forma de complejos orgnicos (Campos et al., 1994; Coale y Bruland, 1990). Se han usado una gran variedad de tcnicas para analizar la complejacin de metales minoritarios por la materia orgnica en agua de mar. Las primeras valoraciones de la complejacin de metales por sustancias orgnicas se usaron para proporcionar estimaciones de los enlaces metlicos y tienen un inters limitado en la 5

qumica del medio marino. Estas medidas fueron reemplazadas por valoraciones de fraccionamiento de los metales como orgnico, inorgnico, y particulado (Hanson, 1983). Como son muy importantes las concentraciones libres de los iones metlicos por su participacin en los procesos biogeoqumicos, casi todas las valoraciones modernas de las interacciones rganometlicas tratan de definir parmetros que permitirn el clculo de la concentracin libre del ion metlico. Sistemtica de la complejacin Normalmente se entiende que la complejacin de un metal por la materia orgnica natural implica una gran variedad de tipos de sitios de coordinacin y de afinidades de los metales por los ligandos. La naturaleza y distribucin de estos sitios de coordinacin no est conocido a priori pero se puede deducir por las observaciones de los cambios de las asociaciones de los metales con los ligandos, por ejemplo cuando aumenta la concentracin de los metales. Un anlisis de los datos completamente satisfactorio es problemtico, porque cuando hay muchos tipos de sitios de coordinacin puede dar lugar a datos de titulacin muy parecidos y es difcil distinguir la eficacia de los modelos. Turner et al. (1986) han comparado cinco modelos aplicables para el anlisis de complejacin de cobre por cidos flvicos: el modelo multisitio, en el cual se asume que el metal y la materia orgnica estn asociadas en un nmero pequeo de tipos de sitios de coordinacin, cada sitio tiene una estabilidad asociada (Ki) y una concentracin constante del sitio de total (Li). el modelo multidentado (Buffle, 1977), en el cual un ligando (L) con slo un tipo de sitio de coordinacin puede complejar el metal formando dos tipos de complejo: ML o ML2. el modelo electrosttico (Cabaniss, 1984), en el cual hay un solo sitio de coordinacin, con una constante de estabilidad funcionalmente dependiente del grado de ocupacin del metal en el sitio de enlace. el modelo de distribucin normal (Perdue, 1983), que asume una variacin continua en la afinidad del sitio de coordinacin por el metal que es normalmente distribuido. el modelo del espectro de afinidad (Thakur, 1980), que asume una variacin continua en las afinidades del sitio de enlace con una distribucin desconocida. Turner et al. (1986) apreciaron que la ausencia de informacin estructural apropiada de los cidos flvicos provoca que no se puedan hacer comparaciones del significado qumico y fsico de los diversos modelos. Basados en consideraciones prcticas (simplicidad conceptual y matemtica) y estadsticas, el modelo multisitio fue el modelo ms satisfactorio para describir los datos de titulacin de Pb y Cu. Este modelo no hace ninguna distincin entre el carcter termodinmico de la complejacin inorgnica y orgnica. Cintica de la complejacin La descripcin de las caractersticas de equilibrio de interacciones de los iones metlicos con materia orgnica en agua de mar son complicados por el papel de la cintica de coordinacin en las observaciones de complejacin. Generalmente se espera que la cintica de coordinacin de los metales pesados y minoritarios con la materia orgnica disuelta en agua de mar sea lenta. Diversas investigaciones han sugerido que los tiempos de equilibrio usando adiciones de EDTA en agua de mar estn en el orden de 24 horas (Sunda y Huntsman, 1991). Las investigaciones de los equilibrios de 64Cu con la materia orgnica disuelta, seal que 70% de los sitios de intercambio en un ambiente de estuario experiment un cambio rpido relativo; mientras que el 20% de los sitios no intercambi en un lapso de tiempo de 24 horas (Mills, 1982). El equilibrio del 6

plomo con ligandos orgnicos en agua de mar se muestra significativamente ms lento que en el caso del cobre (Capodaglio, 1990). Raspor et al. (1980) vieron que la cintica lenta de coordinacin de los metales minoritarios con EDTA en agua de mar puede ser atribuible, en gran parte, al papel de Ca2+ en los fenmenos de complejacin. Los quelatos orgnicos en agua de mar estn coordinados con Ca2+, Mg2+ y metales minoritarios (incluidos los metales pesados). Consecuentemente, se espera que la complejacin de metales minoritarios en agua de mar generalmente debera estar escrita como una reaccin de sustitucin de ligandos: M1 + M2L M1L + M2 Donde M1 es un metal pesado o minoritario, M2 puede ser Ca2+, Mg2+, H+, u otro metal pesado o minoritario. Desde que se acepta que la coordinacin de los metales con materia orgnica esta fuertemente influenciada por el pH (Sunda y Huntsman, 1991), se considera especial el papel de H+ en la ecuacin anterior. Afinidad de los metales pesados por los ligandos El propsito del trabajo de Guo et al. (2000) fue caracterizar la composicin elemental de materiales orgnicos coloidales aislados para examinar la complejacin de metales con materia orgnica macromolecular en ambientes marinos. Encontraron que la concentracin de metales pesados (Cu, Pb, Zn, Cd, Co, Ni, Cr, Be, Fe, Al, Mn, V, Ba, Ti) en un asilado de materia orgnica coloidal vara desde menos de 0,1 hasta 50 g/g de coloide, excepto para el hierro que tiene concentraciones mayores que 120 g/g. El orden de IrvingWilliams se ha usado para comparar la afinidad de metales por ligandos. Por ejemplo Mantoura et al. (1978) report la siguiente secuencia de constantes de estabilidad para la complejacin de metales por sustancias hmicas: Mg<Ca<Cd,Mn<Co<Zn,Ni<Cu<Hg Bibliografa Ansari, T.M., I.L. Marr, N. Tariq, 2004. Heavy Metals in Marine Pollution PerspectiveA Mini Review. Journal of Applied Sciences 4(1): 120. Bruland, K.W., Donat, J.R., Hutchins, D.A., 1991. Interactive influences of bioactive trace metals on biological production on oceanic waters. Limnol. Oceanogr. 36, 15551577. Buffle, J., Greter F., and Haerdi, W., 1977. Measurement of complexation properties of humic and fulvic acids in natural waters with lead and copper ionselective electrodes. Anal. Chim. Acta 118, 2944. Byrne, R.H., 1996. Specific problems in the measurement and interpretation of complexation phenomena in seawater. Pure Appl. Chem. 68, 16391656. Cabaniss S.E., Shuman M.S., Collins B.J., 1984. Metalorganic binding: a comparison of models. In: Complexation of Trace Metals in Natural Waters (Kramer CJM, Duinker JC, eds). Martinus Nijhoff, 165179. Campbell, P.G.C., Twiss, M.R., Wilkinson, K.J., 1997. Accumulation of natural organic matter on the surfaces of living cells: implications for the interaction of toxic solute with aquatic biota. Can. J. Fish. Aquat. Sci. 54, 25432554.

Campos, M.L.A.L., and Van den Berg, C.M.G., 1994. Determination of copper complexation in sea water by cathodic stripping voltammetry and ligand competition with salicylaldoxime. Anal. Chim. Acta 284(3), 481496. Capodaglio, G., K.H. Coale, K.W. Bruland. Lead speciation in surface waters of the eastern North Pacific. Marine Chemistry, Vol. 29: 221233 (1990). Coale, K.H., Bruland, K.W., 1990. Spatial and temporal variability in copper complexation in the North Pacific. DeepSea Res. 37, 317336. Greenamoyer, J.M., Moran, S.B., 1996. Evaluation of an osmonics spiralwound crossflow ultrafiltration system for subm sampling of Cd, Cu, and Ni in seawater. Mar. Chem. 552, 153163. Guo, L., P.H. Santschi, K.W. Warnken, 2000. Trace metal composition of colloidal organic material in marine environments. Mar. Chem, 2000 Hanson, A.K., Jr. & Quinn, J.G. 1983. The distribution of dissolved and organically complexed copper and nickel in the Middle Atlantic Bight. Can. Jour. Fish. Ae. Sci, 40, 151161. Honeyman, B.D., Santschi, P.H., 1992. The role of particles and colloids in the transport of radionuclides and trace metals in the oceans. In: Environmental Particles. Buffle, J., vanLeeuwen, H.P. Eds. , IUPAC Environmental Analytical Chemistry Series 1 Lewis Publishers, London, pp. 379423, Chap. 10. Hudson, R.J.M., F.M.M Morel, 1990. Iron transport in marine phytoplankton: kinetics of cellular and medium coordination reactions. Limnol. Oceanogr. 35, 10021020. Lesaca, R.M., 1977. Monitoring of heavy metals in Philippine rivers, bay waters and lakes. Symp. Proc. Int. Conf. Heavy Metals Environ., Toronto, 2: 285307. Lpez, J. (coord.), 2001 Temas de Qumica Oceanogrfica. UCAUNED. Cdiz Lpez, J. 1992. Fundamentos de qumica oceanogrfica. Seminarios y cursos de qumica marina. UNED. 703 pp. Mantoura, R.F.C., Dickson, A., Riley JP, 1978, The complexation of metals with. humic materials in natural waters, Estuar. Coast. Mar. Sci., 6, 387408. Mills, G.L., Hanson, A.K., Jr., Quinn, J.G., Lammela, W.R. Chasteen, N.D., 1982. Chemical studies of copperorganic complexes isolated from estuarine waters using C18 reversephase liquid chromatography. Marine Chemistry 11: 355377. Perdue, E.M., C.R. Lytle, 1983. Distribution model for binding of protons and metal ions by humic substances. Environ. Sci. Technol. Raspor, B., H.W. Nurnberg, P. Valenta, M. Branica, 1980. Kinetics and mechanism of trace metal chelation in sea water. J. Electroanal. Chem., 115, 293. RaynerCanham, F.F., 2000. Qumica inorgnica descriptiva. Edit. Pearson Educacion. Prentice may. Riley, J.P., R. Chester, 1971. Introduction to Marine Chemistry. Academic Press, London, 465 p. SanudoWihelmy, S., RiveraDuarte, I., Flagal, A.R., 1996. Distribution of colloidal trace metals in the San 8

Francisco Bay estuary. Geochim. Cosmochim. Acta 60, 49334944. Sunda, W.G. and Huntsman, S.A., 1991. The use of chemiluminescence and ligand competition with EDTA to measure copper concentration and speciation in seawater. Mar. Chem. 36, 137163. Sunda, W.G. y P.A. Gillespie, 1979. The response of a marine bacterium to cupric ion and its use to estimate cupricion activity in seawater. J. Mar. Res., 37(4): 511529. Thakur, A.K., P.J. Munson, D.L. Hunston, D. Rodbard, 1980. Characterization of ligandbinding systems by continuous affinity distributions of arbitrary shape. Anal Biochem. 103(2):24054 Turner, D. R., Varney, M. S., Whitfield, M., Mantoura, R. F. C., and Riley, J. P. (1986) Electrochemical studies of copper and lead complexation by fulvic acid. 1. Potentiometric measurements and a critical comparison of metal binding models. Geochim. Cosmochim. Acta 50, 289297. Wen, L., Stordal, M.C., Gill, G.A., Santschi, P.H., 1996. An ultraclean crossflow ultrafiltration technique for the study of trace metal phase speciation in sea water. Mar. Chem. 45, 129152. Whitfield, M. and D.R. Turner, 1987. In. Stumm, W. (Ed.). Aquatic Surface Chemistry. WileyInterscience, New York. 4