INSTITUTO POLITCNICO NACIONAL UNIDAD PROFESIONAL INTERDISCIPLINARIA DE BIOTECNOLOGA METODOS CUANTITATIVOS. PRACTICA 17 Determinacin de cafena por espectroscopia ultravioleta.

INTEGRANTES: DELGADO RAMIREZ LUIS EDUARDO CORTES REYES ITZEL GUADALUPE MARTINEZ SANDOVAL ALAN. GRUPO: 2LV2 EQUIPO: 3 PROFESORES: ASCENCIO RASGADO VELIA PALMIRA HERNANDEZ MUOZ ALFONSO FECHA DE ENTREGA: 14-noviembre-2012 PRACTICA NO. 17 DETERMINACIN DE CAFEINA POR ESPECTROSCOPIA ULTRAVIOLETA. OBJETIVOS DE LA PRCTICA * Identificar compuestos orgnicos por medio de espectroscopia UV-VIS. * Determinar la concentracin de sustancias orgnicas en muestras problema, por medio de una curva de calibracin aplicando la ley de Beer-Bourguer. INTRODUCCIN. La determinacin de cafena ha adquirido mucha importancia, debido a su uso en la industria farmacutica y en la industria de alimentos; ya sea como ingrediente en la elaboracin de refrescos y bebidas energticas o por su presencia en productos como el t, el mate, el cacao y el caf. En todos estos casos, el control de calidad del parmetro cafena es necesario en los productos que la contienen. Por esta razn, se han desarrollado nuevos mtodos instrumentales para su determinacin en diversas matrices, especialmente en alimentos. Las tcnicas analticas ms empleadas en la actualidad pueden englobarse en dos grandes grupos: tcnicas de separacin y tcnicas espectroscpicas. Los mtodos espectroscpicos de anlisis estn basados en medidas de radiacin electromagntica absorbida o emitida por las sustancias.1

Cuando la radiacin electromagntica incide sobre la solucin de molculas puede dar lugar a tres tipos de sucesos: absorcin, dispersin y emisin de la radiacin. La teora de orbitales moleculares (OM) considera que en la formacin de un enlace entre dos tomos, dos orbitales atmicos se fusionan para dar los orbitales moleculares enlazante y antienlazante. Cada orbital molecular puede acomodar un par de electrones con espines apareados (de signo opuesto) que se denomina estado snglate. En una transicin electrnica, uno de los electrones pasar a un orbital molecular distinto conservando su nmero de espn y en este caso, la molcula en el estado excitado sigue en el estado singlete. Pero, dado que ahora los electrones se encuentran en orbitales moleculares distintos pueden tener los espines paralelos (mismo signo) y si esto ocurre, a dicho estado se le denomina triplete: En general, los orbitales moleculares se clasifican en: Orbitales enlazante y * antienlazante que se forman por la combinacin de los orbitales atmicos tipo (s) y/o (p) y constituyen los enlaces simples de las molculas. Orbitales enlazante y * antienlazante originados por la combinacin de los orbitales atmicos (p) que participan en los enlaces mltiples. Orbitales n que representan las molculas con un heteroatmo tipo N y O con pares de electrones desapareados que no participan directamente en el enlace molecular. 2 La cafena es un polvo inodoro, incoloro y amargo. Friedrich Ferdinand Runge la aisl del caf en 1819 y del t en 1827, pero su estructura qumica no se describi hasta 1875 por E. Fischer. La cafena (1, 3, 7-trimetilxantina) y otros alcaloides metilxantnicos, son derivados del grupo de las xantinas, que a su vez se derivan de las purinas. Tambin es conocida por el nombre tena, guaranna o matena. La cafena es una sustancia que se encuentra en ciertas plantas naturales y puede producirse sintticamente en laboratorio. Se localiza en cantidades variables en las semillas, las hojas y los frutos de algunas plantas, donde acta como un pesticida natural que paraliza y mata ciertos insectos que se alimentan de las plantas. Se encuentra en el caf, t, chocolate, yoco, cacao y, en bebidas de cola y energticas. Tambin se encuentran en bebidas que contienen guaran y a menudo como ingrediente en los suplementos de prdida de peso y energizantes, las bebidas deportivas, preparaciones herbales y analgsicos. La cafena es un alcaloide del grupo de las xantinas, concretamente pertenece a la familia de las metilxantinas. Las bases xnticas o pricas son alcaloides derivados de la purina. Concretamente, provienen del anillo de la purina que se forma a travs de la condensacin de una pirimidina con un imidazol. Poseen una estructura cristalina.3 Figura 1. Estructura qumica de la cafena. La frmula qumica de la cafena es C8H10N4O2 con una masa molecular de

194,19 g/mol. Es una molcula qumica aquiral, y por lo tanto, no tiene enantimeros ni tiene estereoismeros. Tiene efecto diurtico y estimulante del miocardio. Relaja los msculos lisos, favorece la vasodilatacin, contrae las arterias cerebrales, aumenta la secrecin cida del estomago y potencia la contraccin del msculo esqueltico. Pero en grandes dosis pueden elevar el humor, causar insomnio, aumentar la irritabilidad, inducir ansiedad y disminuir el cansancio. La ingesta crnica o intensa, causa intoxicacin que se manifiesta con nerviosismo, insomnio, hiperacidez gstrica, contracciones musculares, confusin, taquicardia o arritmia cardaca y agitacin psicomotriz.4 DIAGRAMAS DE BLOQUES. PREPARAR CURVA TIPO DE CAFEINA PREPARACION DE LAS SOLUCIONES PROBLEMA RESULTADOS Y ANLISIS DE RESULTADOS. *Realizar el barrido para encontrar la longitud mxima a la cul mediremos la absorbancia de las diferentes soluciones. Longitud de onda | Absorbancia | 200 | 1.520 | 205 | 1.600 | 210 | 1.357 | 215 | 0.980 | 220 | 0.614 | 225 | 0.446 | 230 | 0.394 | 235 | 0.330 | 240 | 0.252 | 245 | 0.227 | 250 | 0.243 | 255 | 0.308 | 260 | 0.403 | 265 | 0.479 | 270 | 0.548 | 275 | 0.550 | 280 | 0.482 | 285 | 0.359 | 290 | 0.214 | 295 | 0.117 | 300 | 0.084 |

*Resultados obtenidos de la medicin de absorbancias para la curva tipo y el clculo de la concentracin de cafena. Solucin No. | Concentracin de cafena (ppm) | AbsorbanciaLong. maxima = 275 nm | 1 | 5 | 0.254 | 2 | 10 | 0.473 | 3 | 15 | 0.687 | 4 | 20 | 0.910 | Problema 1 | | 0.363 | *Obtener la grfica de A=f(concentracin de cafena) (CURVA TIPO DE LA CAFEINA). Indicar si cumple con la ley de Beer Bourger. Calcular , coeficiente de absortividad molar. y = mx + b Abs = mC + b r2 > 0.98 Abs = 0.0436 C + 0.0355 r2 = 0.9999 Para poder comprobar si nuestra curva tipo cumple con la la ley de Beer, por medio de la regresin lineal es necesario calcular el valor de la r2, y si est es mayor a 0.98 quiere decir que cumple con la ley de Beer, de lo contrario, no entra en la ley de Beer y debemos repetir la experimentacin, ya que esos datos no sin confiables. En nuestro caso podemos ver que cumple con la ley de Beer, ya que el valor es mayor a 0.98, adems de cumplir con el rango de confiabilidad, el cual nos dice que para que sea 100% confiable, mnimo debemos de tener hasta 3 cifras significativas con nueve, tal como resulto en nuestro caso. Para calcular el coeficiente de absortividad molar, debemos calcular la pendiente de nuestra grfica, la cual est expresada en la ecuacin anterior, ya que la pendiente de la grfica es igual al Coeficiente de absortividad. m= = 0.0436 *Calcular la concentracin de la cafena en la muestra problema y evaluar la concentracin de cafena en las muestras problema, utilizando la curva tipo. Reportar la concentracin en ppm y en % p/p (mg. de cafena por pastilla).

*Calcular el porcentaje de error en la muestra problema, considerando la concentracin terica de cafena en la muestra problema. *Calcular la concentracin de las muestras problemas utilizando el coeficiente de extincin molar calculado anteriormente. *Mencionar algunas aplicaciones industriales de la cafena. *Mencionar algunas de las aplicaciones de la espectroscopia UV enfocada a su carrera. CONCLUSIONES. * Se cumplieron los objetivos de la prctica? Al analizarse los resultados obtenidos, y comprender que en esta prctica se aterrizan prcticamente todos el conocimiento y tcnica adquirida en el curso podemos afirmar que los objetivos de la prctica estuvieron satisfactoriamente cumplidos. * Obtener las conclusiones pertinentes. Esta prctica adquira una mayor importancia ya que en ella se aterrizaban casi todos los conocimientos adquiridos dentro del curso, por lo cual podemos afirmar que se logr identificar la concentracin de cafena contenida en una pastilla de cafiaspirina, adems que en el grupo se realiz con diversas bebidas, se estableci una metodologa en general para realizar este tipo de anlisis con distintas sustancias, adems de realizar diluciones para establecer un rango de absorbancia y de esta forma realizar otras diluciones de solucin de cafiaspirina problema, para lograr , colocar la muestra problema dentro del rango de absorbancia de las anteriores diluciones y asi calcular la concentracin de la pastilla multiplicando por el respectivo factor de dilucin. REFERENCIAS. 1. http://upcommons.upc.edu/pfc/bitstream/2099.1/11148/2/Mem%C3%B2ria.pdf 2. http://ocw.uc3m.es/ingenieria-quimica/quimica-ii/practicas-1/PR-F-Anexos.pdf 3. http://www.zonadiet.com/nutricion/cafeina.htm 4. http://www.mind-surf.net/drogas/cafeina.htm APLICACIONES INDUSTRIALES DE LA CAFEINA: La cafena es una droga consumida comnmente. Se encuentra en varias bebidas, tales como t, caf, bebidas gaseosas de "cola" y productos derivados de chocolate. Tambin se le aade cafena a otras bebidas gaseosas y es el ingrediente nmero uno de medicinas que se compran sin receta mdica, tales como pastillas contra el dolor de cabeza, resfriados, alergias, pastillas contra el dolor y para mantenerse despierto. APLICACIONES DE LA ESPECTROSCOPIA U.V EN LA INDUSTRIA ALIMENTICIA:

La espectroscopa UV-Vis est basada en el proceso de absorcin de la radiacin ultravioleta-visible (radiacin con longitud de onda comprendida entre los 160 y 780 nm) por una molcula. La absorcin de esta radiacin causa la promocin de un electrn a un estado excitado. Los electrones que se excitan al absorber radiacin de esta frecuencia son los electrones de enlace de las molculas, por lo que los picos de absorcin se pueden correlacionar con los distintos tipos de enlace presentes en el compuesto. Debido a ello, la espectroscopa UV-Vis se utiliza para la identificacin de los grupos funcionales presentes en una molcula. Las bandas que aparecen en un espectro UV-Vis son anchas debido a la superposicin de transiciones vibracionales y electrnicas. Aplicaciones * Determinacin de grupos funcionales en molculas orgnicas * Anlisis de muestras bioqumicas * Determinacin de metales en compuestos de coordinacin * Anlisis de semiconductores * Medidas de color * Determinacin cuantitativa * Seguimiento de la cintica de procesos qumicos y bioqumicos