Informe de Laboratorio Anlisis Instrumental

Informe N 2: Determinacin de Cobre (II) con la formacin de un complejo amoniacal: cuantificacin por adicin patrn
Allan Cortes, Gabriela Gallardo, Mara Anglica Saavedra 1
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Anlisis Instrumental, Ingeniera Ambiental Universidad de Valparaso. Avenida Gran Bretaa 1111, Playa Ancha, Valparaso.

Fecha de sesin de laboratorio: 20 de Agosto 2013, Fecha de entrega de informe: 27 de Agosto2013. Palabras clave: Espectro de absorcin, Cuantificacin por adicin patrn, Absorbancia, Complejo Amoniacal, Analito, Concentracin

RESUMEN En la prctica realizada se obtuvo un espectro de absorcin del complejo de cobre amoniacal, con el fin de determinar el mximo de absorcin del complejo de Cu (II) para luego cuantificar una muestra problema por mtodo de adicin patrn para saber la cantidad de cobre que posee. El mtodo, adicin patrn, consiste agregar concentraciones crecientes del anlito que se est midiendo (muestra problema), con lo que se obtiene una recta entre las concentraciones agregadas y sus respuestas. La concentracin es estimada en el punto de corte de la prolongacin de la recta en el eje de la abscisa [1]. Con la informacin obtenida se puede determinar el lmite de deteccin y cuantificacin.

1. Introduccin

La espectrofotometra es uno de los mtodos de anlisis ms usados, y se basa en la relacin que existe entre la absorcin de luz por parte de un compuesto y su concentracin. Cuando se hace incidir luz monocromtica (de una sola longitud de onda) sobre un medio homogneo, una parte de la luz incidente es absorbida por el medio y otra transmitida, como consecuencia de la intensidad del rayo de luz sea atenuada desde Po a P, siendo Po la intensidad de la luz incidente y P la intensidad del rayo de luz transmitido. Cada sustancia tiene su propio espectro de absorcin, el cual es una curva que muestra la cantidad de energa radiante absorbida, Absorbancia, por la sustancia en cada longitud de onda del espectro electromagntico, es decir, a una determinada longitud de onda de la energa radiante, cada sustancia absorbe una cantidad de radiacin que es distinta a la que absorbe otro compuesto. La absorbancia est relacionada con la concentracin de la sustancia, c, por la ley de Lambert-Beer, que se resume con la ecuacin: A = b c , donde c se expresa en mol/L, b es la longitud del camino ptico (anchura de la clula que contiene la disolucin de la sustancia) y se expresa en cm, y es la absortividad molar, propiedad caracterstica de cada sustancia correspondiente a la cantidad de radiacin

que absorbe a una longitud de onda determinada por unidad de concentracin, siendo sus unidades L mol-1cm-1 Para poder aplicar la ley de Lambert-Beer es necesario seleccionar previamente una longitud de onda puesto que tanto A como varan con ella. Para ello se obtiene previamente el espectro de absorcin de la sustancia, que consiste en una representacin de los valores de absorbancia frente a la longitud de onda expresada en nanmetros (nm). Del espectro de absorcin puede seleccionarse el valor de longitud de onda para el cual la absorbancia es mxima. Uno de los mtodos ms utilizados para determinar la concentracin de una muestra problema, es el mtodo de la curva de calibracin. Esta curva de calibracin es una grfica que relaciona la concentracin de al menos cinco soluciones de estndar de concentraciones conocidas, con la absorbancia de cada uno de ellos a la longitud de onda mxima ( max). Una vez obtenida la grfica se determina la funcin matemtica que presenta dicha recta a travs del tratamiento estadstico de regresin de los mnimos cuadrados, la cual relaciona la absorbancia y la concentracin de un analito. La siguiente ecuacin matemtica corresponde a dicha funcin: A = mc + n (ecuacin 1) Donde, A: Absorbancia. N: Intercepto de la recta

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m : Pendiente de la recta y que corresponde al producto entre absortividad a de la muestra y el espesor b de la cubeta. Luego se mide la absorbancia de la solucin problema y se interpola su valor en la grfica o se reemplaza en la ecuacin (1), para obtener el valor de concentracin del analito. La concentracin de la solucin problema debe estar comprendida en el rango de concentracin que comprende la curva de calibracin. Si la concentracin de la solucin problema es menor que la concentracin del estndar ms diluido, debe usarse el mtodo de adicin estndar, que consiste en adicionar un volumen determinado de un estndar concentrado a la solucin problema, antes de realizar la lectura y que permite que esta lectura este dentro de las obtenidas para la curva de calibracin. En el caso contrario, si la concentracin del analito es mayor que la concentracin del estndar ms concentrado la solucin problema deber ser diluida. El mtodo adicin patrn consiste en tomar alcuotas iguales de muestra, se le aade a cada una por separado cantidades diferentes de analito, excepto a una de ellas y se realiza la medida (blanco). La escala de concentracin (x) se define con las concentraciones de analito agregadas a las alcuotas de muestra, por tanto, la concentracin desconocida est dada por el punto en el cual la lnea extrapolada corta al efe de concentracin. La recta de regresin se establece mediante mnimos cuadrados. En la prctica que realizaremos a continuacin se determinar la concentracin de cobre presente en una determinada muestra por espectrofotometra. Para ello se formar previamente el complejo con amoniaco, es decir, Cu(NH3)4+2. Por otro lado, se medir la absorbancia de una serie de disoluciones cuya concentracin de Cu(NH3)4+2. es perfectamente conocida, representndose el valor de absorbancia obtenida frente a la concentracin (recta de calibrado). Por ltimo, a partir del valor de absorbancia medido para la muestra problema y utilizando la recta de calibrado se determinar la cantidad de cobre presente en la muestra problema. El complejo formado Cu(NH3)4+2 presenta color azul. Para que una sustancia sea coloreada debe absorber luz visible, provocndose como consecuencia trnsitos electrnicos. En el caso del complejo amoniacal de cobre, la presencia de los ligandos (NH 3) alrededor del ion Cu+2 provoca que los orbitales 3d del Cu2+ se diferencien energticamente, posibilitando la absorcin de un fotn de energa adecuada que provoca un trnsito electrnico.

R2

Se agregan 3 ml de solucin de cobre a 16 M, 6 ml de NH 3 (c) y agua destilada hasta aforar un matraz de 25 ml; para luego trazar el espectro de esta solucin, configurando el espectrofotmetro en un rango de 200- 700 nm, y de esta forma obtener la longitud de onda de mxima absorcin. Por otro lado preparan un blanco que constar con agua destilada y amoniaco. 2.2 Determinacin de los volmenes de trabajo, para la adicin patrn. En un matraz de aforo de 25 mL se agregan 5 mL de muestra problema, 6 ml de NH 3 (c) y se afora. Se determina la absorbancia, la cual deber ser entre los valores de 0,3 a 0,5, si no se logra se deber ajustar la dilucin y repetir el proceso. Luego, en base a lo determinado, agregue un volumen de la solucin de cobre que permita el incremento en 0,2 UA (unidades de absorbancia) en un volumen final de 25 mL. Preparar cuatro puntos con la informacin que permita construir una recta para la cuantificacin de adicin patrn. 2.3 Determinacin cuantificacin. del lmite de deteccin y

Determinar el lmite de deteccin y cuantificacin instrumental de esta metodologa a travs de la siguiente formula:

Tabla n1 Materiales y reactivos qumicos utilizados junto a su clasificacin de seguridad.

Materiales Piseta Nombre, Frmula Pipetas granuladas Propipeta Matraz de aforo 25 ml Vaso Precipitado Gotario Celdas Espectrofotomtricas Espectrofotmetro Agua Destilada H2O Manipulacin: Sin indicaciones particulares Es corrosivo para la piel, los ojos y los pulmones [2]. Manipulacin bajo campana Cobre 16 M Cu Reactivos Tipo de sustancia. Manipulacin Manipulacin: Sin indicaciones particulares

Amoniaco Concentrado NH3

2. Parte experimental
2.1 Espectro
amoniacal de absorcin del complejo de cobre

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R3

Para obtener la concentracin de Cu+ (II) que se debe agregar a las muestras para obtener un aumento de 0,2 UA se realiza la siguiente relacin:

3. Resultados 3.1 Espectro de absorcin complejo de Cobre Amoniacal

Donde [X] representa la concentracin a agregar, y resulta ser un valor de 3,2x10-3 M.

del Finalmente para saber cuanto volumen en mL se debe

agregar a la muestras para que la recta de adicin patrn tenga un incremento de 0,2 UA se realiza la siguiente analoga

= 0,5 mL Es decir se debe agregar un volumen de 0,5 mL de patrn para que el incremento sea de 0,2 UA. Finalmente obtengo los siguientes datos: Tabla 2: Informacin de contenido que cada muestra para construir recta de adicin patrn Aforo Muestra problema (mL) Cu (II) 0,16 M (mL) H2O destilada (mL) NH3 1 8,0 0 11,0 6,0 2 8,0 0,5 10,5 6,0 3 8,0 1,0 10,0 6,0 4 8,0 1,5 9,5 6,0

Imagen 1: Espectro de absorcin complejo. El espectro de absorcin del complejo seala que: Longitud de onda mxima: 624,00 nm Absorcin mxima: 1,186 UA.

3.2 Determinacin de los volmenes de trabajo, para la adicin patrn.

Para obtener el valor de absorbancia entre 0,3 a 0,5 UA se diluye la muestra considerando aforar los matraces de 25 mL con 8 ml de muestra problema. Para conseguir el aumento de 0,2 UA en cada muestra para generar la recta de adicin patrn se realiza la siguiente relacin para conocer que concentracin de cobre (II) posee la muestra

De los cuales podemos calcular la concentracin ( utilizando la relacin: ) de cada muestra y su unidad de absorcion arrojada por el espectofotometro

= 0,0193 M

Obtenemos:
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Tabla 3: Datos de concentracin y unidad de absorcin Concentracin de Cu+ (II) M 0 3,2x10-3 6,4 x10-3 9,6 x10-3 Graficamente: Grafico1 : Concentracion versus unidad de absorcin
1.2 1 0.8 0.6 0.4 0.2 0 0 0.0032 0.0064 0.0096

R4

Unidad de Absorcin (UA) 0,370 0,520 0,755 1,038 Como el lmite de deteccin es tres veces la seal-ruido

Lmite de deteccin= 6,217 x10-3 Y como el lmite de cuantificacin es 10 veces la seal ruido:

Lmite de cuantificacin = 0,0200073

Donde el eje Y corresponde a la unidad de absorvancia (UA) y el eje X corresponde a concentracin de cobre en cada muestra. R2= 0,982 indica que corresponde a una recta de forma lineal, por lo tanto se asume una ecuacin de la siguiente forma:

4. Discusin
La onda de longitud mxima, y el mximo de absorcin resultaron valiosos datos entregados por el espectrofotmetro para el estudio de la relacin entre la absorcin (unidades de absorcin) y la concentracin (Molar); lo cual result una correlacin lineal Con una onda de longitud mxima de 624,00 nm y un mximo de absorcin de 1,186 UA se pudo lograr el estudio de la muestra problema de cobre. Una vez obtenida la recta de adicin patrn, realizada previo anlisis y relaciones matemticas, se logr asumir el tipo de correlacin que est entre la absorbancia y la concentracin, obtenido una ecuacin de recta como la siguiente: Absorbancia =69,97X + 0,3349 Donde 69,97 es la pendiente y 0,0349 el intercepto, con una correlacin ajustada de valor 0,982.

A = mc + n
Absorbancia = m*concentracin + n Absorbancia =68,97X + 0,3349 Para calcular la concentracin en Molar de la muestra problema se asume que la absorbancia es igual a cero. Por lo tanto la concentracin es:

[Muestra problema] = 4,78x10 M

-3

Entregndonos la concentracin de cobre de la muestra problema de un valor de 4,78x10-3 M. Por lo tanto se aprende que la concentracin desconocida de alguna muestra puede ser calculada mediante la el mtodo del adicin patrn. Tambin podemos deducir que el lmite de deteccin de la muestra, es decir la concentracin mnima obtenida a partir de la medida de una muestra (que contiene el analito) que fuimos capaces de discriminar de la concentracin obtenida a partir de la medida de un blanco, sea de una
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3.3 Determinacin del lmite de deteccin y cuantificacin.

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muestra sin analito presente es de 6,217 x10-3; y que el lmite de cuantificacin de la muestra, que debe ser mayor al de deteccin un valor de0,0200073, indicando que el lmite de deteccin debe ser menor a la especificacin de la prueba de impurezas lmite y que el lmite de cuantificacin debe ser menor a la especificacin del contenido / valoracin de la prueba de impurezas. Adems es necesario mencionar que la adicin de volumen para obtener el aumento necesario en la recta fue calculado por una regla de tres simple que fue iterado gracias a la primera prueba no mencionada en los resultados donde al aadir solo 5ml de muestra problema la unidad de absorbancia no se encontraba en el rango requerido, por lo tanto se adhiere ms concentracin de la que se aconsejaba en la gua de trabajo, as tambin se aument el rango de longitud de onda del espectrofotmetro para un resultado ms claro de la longitud de onda mxima de la muestra.
[1]

R5

Quiroz R. 2013.Guia de laboratorio de anlisis, Determinacin del Cobre (II) con la Formacin de un Complejo Amoniacal: Cuantificacin por Adicin Patrn: 1-2 [2] State Compensation Insure Fund. 2000-2010. Seguridad en el uso del amoniaco. Consultado a 24 agosto. 2013. Disponible en: http://www.statefundca.com/safety/safetymeeting/SafetyMe etingArticle.aspx?ArticleID=440 [3] Daniel C. Harris, Anlisis qumico cuantitativo, 3 Edicin, Editorial Revert, SA, Barcelona, Espaa, 2007.

5. Conclusiones
La onda de longitud mxima, y el mximo de absorcin resultaron valiosos datos entregados por el espectrofotmetro para el estudio de la relacin entre la absorcin (unidades de absorcin) y la concentracin (Molar); lo cual result una correlacin lineal. Datos anteriores fueron calculados gracias al procedimiento experimental de adicin patrn, tcnica consistente en medir primero la seal analtica debida a la muestra problema, y despus el aumento de seal debida una cantidad conocida de analito aadida. Suponiendo respuesta lineal, es posible calcular cunto analito haba en la muestra problema y que por esto se diferencia de la curva de calibrado, grfico que representa el valor de alguna propiedad frente a la concentracin del analito. Cuando se mide esa propiedad en una muestra problema, se puede determinar su concentracin a partir del grfico. [3] La mayor dificultad de este mtodo es encontrar un patrn adecuado, con seal reproducible y que genere una seal similar a la del analito. Existen muchos mtodos analticos que requieren de adicionar un patrn para poder ser cuantificados ya que los errores pueden llegar a ser grandes, agregando el patrn la exactitud y precisin del mtodo se hacen muy buenos, esto se aprecia en los valores resultantes de los lmites de deteccin y cuantificacin Finalmente se asimila que para el mtodo de adicin patrn la calibracin supone representar la razn entre la seal del analito y la del estndar interno como una funcin de la concentracin del analito, por lo tanto puede compensar distintos tipos de errores indeterminados y sistemticos

6. Referencias
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