Inmunoterapia y Otras Aplicaciones en Bioingeniera

La inmunoterapia est lejos de nuevo. Los mdicos han comprendido desde hace tiempo el papel del sistema inmunolgico en la salud general y en la lucha contra el cncer. Lo nuevo es la comprensin de cmo funciona todo el sistema, la identificacin de antgenos especficos de ciertas clulas (incluyendo no slo las clulas cancergenas sino en clulas especficas del sistema inmunolgico) y anticuerpos monoclonales. Estos acontecimientos tienen el potencial de mejorar considerablemente el cuidado de la salud.

Estimulacin inmunolgica no especifica

Terapeutas han entendido cmo la estimulacin inespecfica del sistema inmunitario durante varias dcadas. Se puede proporcionar a un paciente con una mezcla general de gammaglobulinas o coleccin de anticuerpos, los cuales pueden aislarse de la sangre donada proporcionada por otras personas. La esperanza es que algunos de estos anticuerpos sern tiles para detener un avance de la infeccin. Interfern, que impide la invasin viral no especifica en las clulas, ahora est disponible en fuentes bacterianas, obtenidas mediante tcnicas de Bioingeniera discutidas en el captulo 7. Por ltimo, se sabe que la respuesta inmune se acenta bajo ciertas condiciones. Por

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ejemplo; inyecciones de antgenos en asociacin con aceites aumentar la respuesta. Materiales que inducen a este aumento de la respuesta son conocidos como adyuvantes. Adyuvantes parece presentar el sistema inmunolgico con seales de peligro que indican que las cosas son realmente malas.

Antisueros
Los antisueros se derivan de la sangre de animales o personas que han estado expuestas a determinados antgenos. Si usted es mordido por una serpiente, se le dar un tipo de antisueros llamado antdoto. Este suero es derivado de animales, presumiblemente de algn pobre caballo, que se ha inyectado con el veneno de serpiente un nivel menos letal. El caballo genera anticuerpos contra el veneno de la serpiente. Estos anticuerpos son recogidos, concentrados e inyectados y se enlaza con el veneno y previenen su efecto biolgico. Usted, a su vez, tendra una respuesta inmune contra los anticuerpos de caballo? Te lo aseguro. Los antisueros contienen una mezcla de anticuerpos, algunos de los cuales enlazan el antgeno ms vidamente que otros. Los linfocitos producen la mezcla con policlonales o derivan ms de un clon. Esto es realmente preferible de anticuerpos derivados de un clon (monoclonal), incluso si los anticuerpos monoclonales tienen una gran afinidad por el antgeno. (Consulte la figura 6 - 1) La combinacin de antgeno y anticuerpos variantes forman grumos grandes, conocidos como inmunocomplejos (descrito en el captulo 5), que efectivamente envuelve el antgeno.

Figura 6-1 Antisueros contra anticuerpos

Estos complejos son relativamente insolubles y precipitan a veces fuera del torrente sanguneo in vivo. In vivo significa dentro del organismo vivo. La formacin de inmunocomplejos se utiliza para concentrar anticuerpos de antisueros. Despus de que la sangre se extrae del animal, como el caballo que est produciendo el antisuero, la proporcin de anticuerpos y de antgenos es alterada, generalmente aadiendo antgeno.

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Los inmunocomplejos se formarn y se precipitan de la solucin. Entonces los anticuerpos pueden ser aislados.

Anticuerpos Monoclonales
Anticuerpos monoclonales (mAbs) ganan su nombre porque son producidos por un solo clon de clulas. Este es un fenmeno fsico que se puede observar en los linfocitos-B cultivados en medios de cultivo. Como usted sabe, los linfocitos son estimulados para producir anticuerpos contra un objetivo especfico, o antgeno, cuando dicho material se une a su superficie de destino. El enlace no slo pedir los linfocitos el anticuerpo apropiado sino induce la divisin celular, resultando en clones de esta clula particular. En cultivo celular, algunas de las clulas desafiadas con antgeno dividen y forman masas que se pueden ver a simple vista. Estos son los clones que producen un solo tipo de anticuerpo por clon. La proliferacin del nico tipo de linfocitos que ves en el cultivo tambin se produce en el cuerpo. Existen numerosas aplicaciones mdicas de los anticuerpos monoclonales humanos. Tericamente, estos anticuerpos pueden obtenerse por los linfocitos-B cultivados en el laboratorio. Lamentablemente, clones de linfocitos-B humanos son muy difciles de mantener en cultivo. Es mucho ms fcil exponer las ratas o ratones al antgeno de inters y desarrollar clones de linfocitos que producen los anticuerpos correctos de estos. Histricamente, la produccin comercial de algunos anticuerpos monoclonales ha usado ambos humanos y clulas de rata o ratn en una combinacin llamada hibridomas, vistos en la figura 6-2.

Figura 6-2 Hibridoma

Hibridomas son clulas de bazo de ratas o ratones (estos animales son llamados murinos), que han sido fusionadas con las clulas del mieloma canceroso humano. La porcin de mieloma de clulas proporciona los hibridomas con la capacidad de dividirse y crecer en cultivo, tericamente indefinidamente. La porcin de linfocitos de ratn o rata proporciona la capacidad de producir anticuerpos. La fusin puede ser inducida por un virus, un campo elctrico o polietilenglicol. Esta tcnica tiene algunas

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desventajas. La produccin de anticuerpos por hibridomas es costosa y lenta. Adems, los anticuerpos de roedores producidos por los hibridomas son bien para el trabajo analtico, como en el ensayo de ELISA se describe ms adelante en el captulo, o en la tincin de las muestras de tejido, pero tienen limitado potencial teraputico en los seres humanos porque son rechazados como extraos. Afortunadamente, usted, como un bioingeniero, puede producir e ingeniar anticuerpos. Tericamente, puede determinar los genes que resultan en la produccin de los anticuerpos que puede encontrar utilizando las tcnicas descritas en el captulo 7. Como usted aprender, puede descifrar los genes produciendo anticuerpos que desee y coloque ese gen en bacterias. Las bacterias luego producir el anticuerpo. En la prctica, los anticuerpos producidos por las bacterias tienen limitaciones. Resulta que los puentes entre las cadenas de los anticuerpos son importantes, y las bacterias no pueden realizar la qumica necesaria para producir los puentes. Para muchos anticuerpos monoclonales, bioingenieros han recurrido a otra clula que produce anticuerpos en forma necesaria. Las clulas de ovario (CHO) de hmster chino han sido un gran xito. Las clulas CHO son el anfitrin de eleccin para la actual produccin de anticuerpos monoclonales de Bioingeniera. El principal inconveniente de las clulas CHO es que estos anticuerpos tienen todava antgenos que el cuerpo humano reconoce como extraos, haciendo que sea rechazado. El advenimiento de la ingeniera gentica ha proporcionado otro enfoque que ha aumentado considerablemente el potencial teraputico de anticuerpos monoclonales. Utilizando tcnicas de ADN recombinante, clulas de roedor, tal como las clulas CHO pueden ser diseados para producir anticuerpos humanos. La mayora de los antgenos que causarn que un anticuerpo no autnomo sea rechazado son en el tallo. Anticuerpos producidos de esta forma se denominan anticuerpos quimricos. Anticuerpos quimricos dominan el uso actual en inmunolgia y tratamientos oncolgicos (cncer). Recientemente, mAbs han sido ms "humanizadas" sustituyendo la mayora de las estructuras de roedores en la Fab de genticamente con los humanos. Incluso ms recientemente, mAbs plenamente humanas han sido desarrolladas, llevado a juicio y en uso teraputico en nmero limitado. De los cuatro tipos de roedores (murino), quimricos, humanizados y humanos la quimrica es el nmero ms grande en uso, pero el roedor humano es el nmero ms grande en los ensayos clnicos actuales. Hay 18 mAbs teraputicas actualmente aprobados por la FDA, la mayora de cualquier roedor (murino) o quimricos. Las convenciones de nomenclatura para estos mAbs son los siguientes. Todos los nombres de anticuerpo monoclonal finalizan con "mab". Si el anticuerpo es de un ratn, carta o se agrega a convertirse en "omab". El tipo quimrico agrega la xi cartas para convertirse en "ximab", y el tipo humanizado agrega "zumab". Por ejemplo, la droga de inmunoterapia popular Herceptin, usada para tratar el cncer de mama, es realmente trastuzumab. Por lo tanto, es un anticuerpo monoclonal totalmente humano. Rituxan, usado para tratar linfomas, es realmente rituximab, un anticuerpo monoclonal quimrico. Los principales usos son la inmunosupresin (1) para las vctimas de la enfermedad autoinmune y para rgano de trasplante destinatarios y el tratamiento de cncer (2).

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Anticuerpos monoclonales para la inmunosupresin de receptores en la superficie de los linfocitos. Anticuerpos monoclonales para tratamiento del cncer de receptores que se encuentran predominantemente en las clulas cancerosas. La ciencia es demasiado nueva para lograr grandes avances en prcticas teraputicas an, pero hay que ser conscientes, vienen cambios. Desde modestos inicios a principios de los 80, el mercado actual del anticuerpo monoclonal (mAb) est creciendo a una tasa de alrededor del 20 por ciento al ao. Ms trabajo de desarrollo se est haciendo por las pequeas empresas de biotecnologa, pero a medida que crecen los beneficios, grandes compaas farmacuticas estn demostrando mayor inters. Algunos de los principales efectos secundarios con el uso de anticuerpos monoclonales estn relacionados con la iniciacin de una respuesta inflamatoria general. Como ustedes recordarn, un receptor en la fraccin Fc del anticuerpo une a complementos y produce una inflamacin inespecfica. Una aproximacin a este problema ha sido administrar slo la fraccin Fab del anticuerpo, pero esta forma no sobrevive muy bien en el cuerpo. Cmo nunca, bioingeniero, puede hacer cosas realmente inteligentes con su capacidad para ingeniero de anticuerpos. Usted puede ser capaz de eliminar los receptores que inician la cascada del complemento y as disfrutar de la ventaja de tener el tallo, la principal ventaja es que se incrementa considerablemente la vida til del anticuerpo in vivo, sin la respuesta inflamatoria.

Nanoanticuerpos
No quiero pensar que todos los de la biotecnologa es Serendipia, pero... un grupo de investigacin de unidades Avant Besides trabajando con determinadas especies de camellos y llamas ha descubierto que estas criaturas poseen una forma muy extraa de anticuerpo llamado Nanoanticuerpos. Estas entidades parecen ser piezas pequeas de anticuerpos. Algunas formas son cadenas pesadas sin cadenas ligeras, pero con la afinidad de antgeno de cadenas ligeras. Como alternativa, otras formas son cadenas ligeras con capacidad para requisar a otras partes del sistema inmunitario, una funcin normalmente asociado a la cadena pesada. Si un sistema puede disearse para "humanizar" a los anticuerpos es decir, cambiar el funcionamiento de la protena para engaar a la informacin del sistema inmunolgico humano y lo acepte uso de nanoanticuerpos puede superar algunos de los obstculos que comprometer la terapia de anticuerpo monoclonal. Nanoanticuerpo es mucho ms pequeo que otros tipos de anticuerpos monoclonales y penetra en los tejidos mucho ms fcilmente. Seran mucho ms eficaces, por ejemplo, en la entrega de toxinas puede qumicamente vincular los organismos a tejidos de cncer.

Biblioteca de Anticuerpos
Una gran variedad de anticuerpos monoclonales han sido y estn siendo desarrollados, como los genes especficos que se descifr el cdigo para anticuerpos especficos. Una

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estrategia para mantener esta gran coleccin de informacin gentica en un solo lugar sera invaluable. Para ello, los genes de la cadena ligera de un nmero de anticuerpos monoclonales se han introducido en la vida bacterifaga. Bacterifagos son virus que infectan bacterias. Los fagos se mantienen entonces como una especie de biblioteca de esta informacin, una biblioteca viviente que contiene la informacin gentica que desea mantener, al igual que se mantendra una coleccin de libros. Estas bibliotecas de vida son conocidas como bibliotecas de combinacin. Tericamente, puede ir a la biblioteca de anticuerpos y ordenar un anticuerpo. El fago especfico que alberga la informacin gentica para el anticuerpo se proporcionar a usted. Puede introducir esta secuencia gentica en bacterias permitiendo el fago a invadir las bacterias. Si haces esto correctamente, las bacterias infectadas producir la cadena ligera de anticuerpo que desee. Esto debe ser ms tarde enganchado a una cadena pesada para producir el segmento Fab de inters. Vea la figura 6-3.

Figura 6-3 Como los bacterifagos sirven como bibliotecas vivientes

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ELISA
El desarrollo de anticuerpos monoclonales haba mejorado enormemente nuestra capacidad de diagnstico de un nmero de enfermedades humanas. Utilizando anticuerpos contra un objetivo muy especfico, podemos detectar bajos niveles de antgenos o anticuerpos que estn presentes en el cuerpo humano en condiciones de enfermedad. La presencia de los anticuerpos es un indicador muy sensible que el antgeno est presente. El antgeno puede ser asociado a un elemento del cuerpo de la persona, contra la cual el sistema inmunitario est montando indebidamente una defensa (enfermedad autoinmune), un virus o bacterias. Considere este desafo. Como un medico desea saber si su paciente tiene un cierto antgeno en su sistema. Podra sospechar una infeccin de estreptococo y desea un anlisis rpido. Usted sabe que un paciente con una infeccin por estreptococo tendra antgenos de estreptococos. Una tcnica muy usada anticuerpo monoclonal se llama ELISA (Enzyme-Linked Immunosorbent Assay). ELISA es un mtodo de deteccin de la de informacin de un inmunocomplejo, la vinculacin de anticuerpos y de antgenos. Utilizar las siguientes: Un anticuerpo al antgeno en cuestin, unido a un sustrato La sangre del paciente, que contiene el antgeno Un anticuerpo libre al antgeno en cuestin; con una enzima vinculada que reacciona con un sustrato coloreado

En ELISA, el anticuerpo se fija bien a un plstico y recoge cualquier antgeno est presente en la sangre del paciente, como se muestra en la figura 6-4. Luego el material es tratado con otra copia del anticuerpo, esta una enzima vinculada. El antgeno dependiente formar un complejo con el anticuerpo nuevo por vinculacin al anticuerpo de nuevo en un sitio distinto del sitio vinculante al anticuerpo fijado. El anticuerpo ligado a enzimas que no se ha enlazado es arrasado. Las molculas restantes forman un sndwich compuesto por capas de anticuerpos anticuerpo/antgeno/enzimavinculada. Este sndwich es tratado con un sustrato que se digiere la enzima. Los resultados de la digestin en un cambio de color en el sustrato. Listo! El antgeno est presente si el sustrato cambia de color. Esta tecnologa es la base para anlisis rpido para infecciones por estreptococos y los kits de prueba de embarazo sin receta. Existen otras condiciones en las que el antgeno no puede estar circulando o puede estar presentes en el cuerpo en cantidades muy pequeas. Un ejemplo es la infeccin por VIH (o virus) donde, durante un perodo considerable de la infeccin, el antgeno es secuestrado dentro de las clulas de la vctima. Otro ejemplo de la presencia de antgeno de bajo nivel es la necesidad de detectar antgenos para las vctimas de enfermedades autoinmunes. Que pueda tener un paciente nio en riesgo de padecer

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diabetes y necesita para determinar si el nio tiene anticuerpos que indican que est montando una respuesta inmune a sus clulas productoras de insulina.

Figura 6-4 ELISA

Recuerde, una vez activada por la exposicin a un antgeno, los linfocitos-B con continuar para producir anticuerpos, aunque a la disminucin de los niveles. La deteccin de anticuerpos circulantes es una prueba muy sensible para detectar la presencia del antgeno en alguna parte del cuerpo. En este caso, utilizara una modificacin de ELISA, mediante el cual el antgeno es conectado al sustrato, y la sangre del paciente que contiene el anticuerpo puede reaccionar con el antgeno. Para detectar la formacin de este inmunocomplejo, necesitar otro anticuerpo con una enzima vinculada. Este anticuerpo est diseado para reaccionar a cualquier anticuerpo humano Es un anticuerpo antihumano. Este anticuerpo se une a los anticuerpos que se adjuntan al antgeno simplemente porque son anticuerpos humanos. El exceso es arrasado. Cuando se ha conectado el segundo anticuerpo, la enzima digiere el sustrato para que usted pueda ver el inmunocomplejo. Es otro sandwich! Una nota de precaucin: necesitan ms ensayos para determinar el equilibrio entre la sensibilidad y precisin basado en el uso de los resultados. En el caso de VIH, puede que desee asegurarse de que usted no informa a los pacientes que son VIH negativo cuando en realidad son VIH positivo. Como resultado, usted podra, ms bien del lado conservador aunque a veces el ensayo determina que un paciente es VIH positivo, cuando en realidad l o ella no lo es. En otras palabras, el anlisis del VIH es muy sensible pero es propenso a falsos positivos. La determinacin final de la presencia del VIH por lo tanto requiere una repeticin de la prueba o la realizacin de pruebas adicionales y ms precisas.

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Otros ensayos utilizando anticuerpos monoclonales

Inmunocitoqumica se utiliza para identificar las partes de una clula en la investigacin bsica y en el diagnstico de una enfermedad. Bsicamente, si usted puede hacer un anticuerpo para algo, encontrarla en la sangre, en un tejido o en una clula. El tejido es en rodajas o en cuadritos como deseado y baado en el anticuerpo al antgeno de inters. Este podra ser un receptor de clula u otro producto de protena especfica de la clula. El anticuerpo puede vincularse a un colorante fluorescente que puede visualizar el antgeno. Cuando el anticuerpo se encuentra y forma un complejo con el antgeno, el anticuerpo libre se lava y se encuentra el colorante fluorescente slo donde se encuentra el antgeno. Utilizando un instrumento llamado Espectrofotmetro que localiza la tintura fluorescente, el investigador puede determinar si y donde el antgeno se encuentra dentro de la clula. Una aplicacin comercialmente viable de esta tcnica es en clasificadores de clulas. Considere este escenario terico. Eres un patlogo que est capacitado para reconocer los cambios sutiles en la morfologa que caracterizan a las clulas de una vctima de la artritis reumatoide. Para encontrar estas clulas, histricamente le sera recoger muestras de sangre, concentrar las clulas, preparar diapositivas manchadas de estas clulas y pasar horas escaneo de las diapositivas, buscando las clulas delatoras. Piense en el tiempo y el dinero que se ahorrara si usted podra marcar estas clulas con un signo de que un ordenador pueda reconocer y luego deje que el equipo analice ms clulas que usted, con sus limitaciones humanas. Acabamos de describir un clasificador de clulas. Clasificadores de clula que pueden ordenar clulas basadas en el nivel de detalle y tamao de clula han estado disponibles por un tiempo. Estos clasificadores utilizan detectores lser y tecnologa informtica para analizar las seales de lser. Para detectar las clulas de la artritis reumatoide, necesitar encontrar un nico antgeno asociado con estas clulas y desarrollar un anticuerpo monoclonal contra este antgeno. Una vez que el anticuerpo monoclonal, puede vincular un colorante fluorescente al anticuerpo. Mezclar la sangre sospechosa con el anticuerpo monoclonal marcado y enviar las clulas a travs de un clasificador de clulas que tiene el detector para el colorante fluorescente, como en la figura 6-5. Ests all! Un ligando es un agente de enlace que puede utilizarse para aislar molculas especficas de solucin. Anticuerpos especficos son ligandos perfectos. Puede utilizar anticuerpos en una matriz slida compatibilidad para enlazar (purificar o quitar) un antgeno. Por ejemplo, considere un investigador que desea estudiar una protena asociada con ciertos tipos de linfoma. Esta protena de la sangre de las vctimas de linfoma puede aislar mediante la preparacin de una larga columna de bolas recubiertas con anticuerpos para esta protena. Si vierte la sangre a travs de la columna, el anticuerpo se unir al antgeno. Puede utilizar tcnicas qumicas para causar que el antgeno se libere y obtenga as una muestra pura de la molcula de inters. Tcnicas de anticuerpos pueden utilizarse para desintoxicar soluciones o eliminar los

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contaminantes. Tambin puede utilizar anticuerpos anti-inmunoglobulina para purificar soluciones de anticuerpo.

Figura 6-5 Uso de los marcadores fluorescentes monoclonales para detectar clulas de artritis reumatoide

Algunos experimentan en anticuerpos monoclonales uso de tcnicas de imgenes en vivo, tales como imgenes de ciertos tipos de tumores. Puede utilizarse el etiquetado del anticuerpo con un radioistopo de alta energa pero de corta duracin. El etiquetado implica la incubacin de las clulas que producen los anticuerpos con un compuesto que es necesaria en la estructura del anticuerpo y est disponible en una forma radiactiva o istopo. El anticuerpo radiactivo se inyecta en el paciente. Se utiliza un instrumento llamado una cmara gamma al grfico de la foto el tejido radiactivo en los pacientes vivos. Para estas aplicaciones, la capacidad del anticuerpo para neutralizar rpidamente en el tejido es importante, por lo que el uso de la Fab fragmentos ms que el anticuerpo es tentador. Tambin, los fragmentos Fab no tienen el receptor de complemento, por lo que son menos propensos a iniciar una respuesta inflamatoria.

Enfermedad Autoinmune
Al mismo tiempo, se crea que todos linfocitos-B son capaces de montar una ofensiva contra el cuerpo fueron destruidos temprano en el desarrollo del sistema inmunolgico. Sin embargo, obviamente, la memoria del "mismo" a veces falla, y los soldados ataquen a la madre patria. Una teora sobre por qu esto podra suceder que gira en torno al hecho de que muchos anticuerpos tienen reactividad cruzada es decir, tienen gran afinidad por un antgeno especfico pero algo menos afinidad por un nmero de otros. Tal vez un virus u otro patgeno estimula la produccin de antgenos que tienen una afinidad moderada o muy pequea para auto-antgenos. Hemos mencionado que una vez iniciada la respuesta inmune, un proceso parece existir que resulta en la seleccin de colonias de linfocitos-B con mayor afinidad por el antgeno de inters.

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Una vez que se inicia este proceso, realmente podran evolucionar ms fuertes y ms fuertes reacciones contra s mismo. Qu hacer acerca de esto? Clsicamente, las enfermedades autoinmunes han sido tratadas por genrico supresin del sistema inmunolgico. Los corticosteroides han sido especialmente populares. Sin embargo, herramientas y conocimientos modernos han llevado al desarrollo de tratamientos ms especficos. Aunque estos tratamientos son an en ensayos clnicos, tienen esperanza para las enfermedades recalcitrantes. Un enfoque ha sido desarrollar anticuerpos a los anticuerpos. Por ejemplo, una enfermedad llamada miastenia gravis es debido a la produccin de anticuerpos contra los receptores de acetilcolina en los msculos. Vea la figura 6-6. Acetilcolina debe ser recogida por los msculos para la contraccin que se produzca. Sin ella, los msculos se encuentran fatigados y finalmente se atrofien. Si los receptores de acetilcolina estn obligados por los anticuerpos a estos receptores, la acetilcolina necesaria no puede tenerse en la clula. Se han desarrollado anticuerpos que atacan los mismo-anticuerpos. Se espera que estos anticuerpos de la bioingeniera se unan a los mismo-anticuerpos antes de que puedan atacar a los receptores de acetilcolina en las clulas musculares. Los anticuerpos contra el "mismo" estarn obligados inofensivamente en inmunocomplejos. Otros tratamientos se centran en las clulas dendrticas. Como hemos visto, visualizacin constante de mismo-antgenos por las clulas dendrticas inmaduras parece ser esencial en la prevencin de la enfermedad autoinmune. Esta observacin ha llevado a algunos ensayos clnicos donde las clulas dendrticas son estimulados a mismo-antgenos y reintroduccin al husped. El reto aqu es impedir que las clulas dendrticas de maduracin; una vez madura, realmente mejorar la respuesta inmune. Una posibilidad es la ingeniera gentica por sobreproduccin de protenas que sirven para moderar la respuesta inmune e inhibir la maduracin de clulas dendrticas (por inhibicin de la expresin de MHC clase II).

Figura 6-6 Uso de anticuerpos monoclonales en el tratamiento de miastenia gravis

Tambin, en la bioingeniera se estn desarrollando tcnicas que esperemos que pueda prevenir la expresin gnica. Los linfocitos-B que tienen los genes para producir auto-

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antgenos pueden selectivamente hacerse ineficaces por estas tcnicas. (Ver captulo 10) Uso teraputico de mAbs no ha sido una panacea libre de riesgos. Se puede ver por qu efectivamente la inmunosupresin podra aumentar la susceptibilidad a la enfermedad. De hecho, el uso de anticuerpos inmunosupresores ha permitido el desarrollo de las enfermedades infecciosas inusuales. Un caso muy conocido implica el uso del anticuerpo monoclonal llamado natalizumab en el tratamiento de la esclerosis mltiple. Un pequeo porcentaje de pacientes desarroll una rara enfermedad viral conocida como la leucoencefalopata multifocal progresiva (LMP). La teora es que el mAb, que impide la normal busqueda de linfocitos a sitios de infeccin, bloquea la migracin de las clulas inmunes al cerebro, permitiendo la expresin del virus normalmente inactivo. Otros problemas con terapia autoinmune han sido vistos con anticuerpos que bloquean el factor de necrosis tumoral u otras citocinas qumicos secretados por una clula que influyen en el comportamiento de otras clulas. Estos bloqueos tienen un impacto negativo sobre el sistema inmunolgico en general.

Cncer
La estimulacin de los sistemas inmunitarios ha sido importante en el tratamiento de cncer. Para sobrevivir y crecer, las clulas cancerosas deben superar la vigilancia natural del sistema inmunolgico. En la dcada de 1950, Dr. William Coley demostr que poda controlar el crecimiento de algunos tipos de cncer con una inyeccin de una vacuna mixta para bacterias estreptococos y estafilococos. Su vacuna es conocida como la toxina del Coley. Una mycobacterium, conocida como Bacillus Calmette-guerin (BCG), estimula la inmunidad mediada por las clulas. Se utiliza como una vacuna contra la tuberculosis, as como un tratamiento para el cncer de vejiga. Citocinas importantes para la funcin inmunolgica tambin se utilizan hibridadas. Recordar que el interfern es secretado por las clulas infectadas por el virus para impedir la invasin de las clulas adyacentes. Ahora puede producir interfern en grandes cantidades mediante tcnicas de Bioingeniera. Una forma de interfern (interfern-alfa) se utiliza comnmente para algunos mielomas, leucemia mieloide, leucemia de clulas pilosas y melanoma maligno. Recordar que las interleucinas son sustancias qumicas secretadas por un leucocito (glbulos blancos) para estimular otros leucocitos. Un tipo, interleucina-2, se utiliza para tratar el cncer de rin y melanoma. Lamentablemente, estas terapias, especialmente las interleucinas, tienen efectos secundarios, generalmente sntomas de influenza. Inducir el sistema inmune de la vctima para atacar tumores es difcil porque los antgenos tumorales son tolerados por el sistema inmune porque estos antgenos son mismo-antgenos. Una estrategia es inducir a las clulas dendrticas del paciente para representar los antgenos tumorales como extraos. Las clulas dendrticas circulantes se eliminan de la sangre del paciente y mezcladas con clulas de cncer de rin en un

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laboratorio. Las clulas luego se inyectan en el paciente como una vacuna. Estas clulas han sido por lo tanto, cebadas para presentar el antgeno a la produccin de anticuerpos clulas y aumentar una respuesta inmune. Las vacunas de clulas dendrticas han demostrado ser eficaces en el tratamiento de algunos tipos de cncer de rin. Este regimiento de tratamiento tambin ha mostrado promesa en estudios clnicos de melanoma. Los avances en la terapia de anticuerpo monoclonal han impulsado la bsqueda de la mtica "bala mgica" son armas citotxicas que buscan y matan slo las clulas de cncer. La bala mgica sigue burlndose de nosotros. Esto puede ser debido a que estamos usando slo una de las armas en un arsenal de armas, o puede deberse a que los tumores son diversos, resistentes y difciles de matar. Tambin, los tumores tienden a ser nicos. Con muchos tumores, cada vctima de cncer tendra su propio anticuerpo nico. Sin embargo, estudios de laboratorio han demostrado que la vacunacin con protenas asociadas de linfoma puede estimular el sistema inmunolgico de ratones para resistir el desarrollo de linfomas. Ha habido algunos xitos clnicos en personas que usan las vacunas de protena, especialmente con leucemias y linfomas. Otras inmunoterapias incluyen el uso de un anticuerpo monoclonal contra antgenos de superficie de la clula. Los ejemplos incluyen rituximab (Rituxan), utilizado en el tratamiento del linfoma del no-Hodkin y dirigido contra el antgeno CD20 que se encuentra en la superficie de linfocitos-B normales y malignos. Un anticuerpo monoclonal contra un receptor que se encuentra predominantemente en tumores de mama, trastuzumab (Herceptin), es til contra ciertos tipos de cncer de mamas. Una vez ms, el uso de mAbs ha experimentado algunas complicaciones debido a la naturaleza relativamente inespecfica de sus acciones. Herceptin es activo contra el receptor HER-2 que es sobre expresado en algunos pero no todos los cnceres de mama (vea la figura 6-7). HER-2 es un receptor de crecimiento y su presencia puede estar vinculada a los patrones de crecimiento anormal del tejido de cncer. Sin embargo, tambin estn presentes en algunos tejidos normales de receptores HER-2. Ha informado una frecuencia relativamente alta de complicaciones cardiovasculares en los pacientes que reciben Herceptin. Los mAbs puede estar atacando los receptores HER-2 en las clulas del corazn normal. Los ensayos clnicos estn en curso para estudiar la eficacia de vincular las toxinas y anti cuerpos que estn dirigidas a antgenos de clulas de cncer. La toxina es liberada cuando los anticuerpos para el antgeno de clulas de cncer, matando a las clulas en las proximidades. Aunque esto sin duda ayuda a localizar la toxina a la zona del tumor, otros tejidos son afectados as como cuando se suelta la toxina. La toxina puede vincularse al fragmento Fab del anticuerpo. El fragmento Fab se difunde mucho ms eficiente en los tejidos que toda la molcula. Sin embargo, mientras que el fragmento Fab puede difundir hacia los tejidos ms fcilmente que el anticuerpo intacto, el Fab fragmento sin el tallo tiene una vida media muy corta.

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Figura 6-7 Accin de Herceptin contra el tumor de mama y otras celulas

El uso de la inmunoterapia en el tratamiento del cncer, sin duda, va a crecer. Se debe apreciar ese hecho que el desarrollo de regmenes de tratamiento del cncer es realmente caro y tarda mucho tiempo para obtener incluso un tratamiento a travs del sistema immunologico. Sin embargo, el nmero de ensayos clnicos utilizando inmunoterapia presagia enormes avances en esta rea en el futuro.

Trastornos Adictivos
Para los imaginativos, la inmunoterapia tiene aplicaciones ilimitadas. Un potencial intrigante es en el tratamiento de trastornos adictivos. Puede producir un anticuerpo contra sustancias qumicamente activos, adictivos. Como el usuario de la sustancia est recibiendo los anticuerpos contra la sustancia, l o ella no pueden experimentar el efecto de la droga. Por ejemplo, un anticuerpo contra la nicotina est en desarrollo y promete ser importante para ayudar a los fumadores a luchar contra su adiccin a la nicotina.

Rechazo de Aloinjertos
Trasplante de rganos es cada vez ms comn para reemplazar rganos irremediablemente enfermos. Literalmente millones de pacientes aguardan la disponibilidad de un rgano que es compatible, es decir, uno que est lo suficientemente cerca como para el paciente en superficie estructura antignica del rgano que el sistema inmune no monte una respuesta abrumadora y ataque al rgano extranjero. Estos rganos son llamados aloinjertos. Sin embargo, incluso con tejidos estrechamente compatibles, los receptores de rganos deben tener terapias hibridas para suprimir su respuesta inmune. La investigacin est en marcha para mejorar la supervivencia de aloinjertos mediante la manipulacin de clulas dendrticas del paciente. Como se explic anteriormente en enfermedades autoinmunes, el cuerpo se puede engaar a aceptar una protena como "misma si la protena se presenta por las clulas dendrticas inmaduras. Los antgenos

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de aloinjertos se incuban con clulas dendrticas inmaduras del paciente. Cuando estas clulas son reintroducidas en el paciente, el sistema inmune es engaado pensando que el aloinjerto antgeno es "suyo o mismo". Otras terapias evitan la presentacin de antgenos de aloinjerto a las clulas-T mediante el bloqueo de los receptores en las clulas-T que son importantes en la activacin de celular.

Resumen
Los principios rectores del sistema inmunolgico son bastante simples. Existe un gran conjunto preexistente de plantillas que se adaptan a la mayora, si no todos los antgenos encontrados en el cuerpo serian extraos. Si los antgenos coinciden con una plantilla o un receptor en un linfocito-B, se arranc la produccin de anticuerpos contra ese antgeno. La poblacin de linfocito-B especfica prolifera y se mantiene relativamente alta para defenderse contra el antgeno en cuestin. Si el antgeno es protena, es un sistema que permite al cuerpo a reconocer esta protena como extraa y an dejar intactas las protenas del cuerpo. Este sistema implica una entrega entre las clulas presentadoras de antgeno, linfocitos-T y los linfocitos-B. Enfermedades autoinmunes como resultado cuando este sistema se rompe y el sistema inmune ataca sitios en el propio cuerpo. Adems de la proteccin de anticuerpos, el sistema inmune tiene tambin un grupo patrulla de clulas que reconocen el tejido anormal o tejidos infectados con patgenos. Estas clulas pueden destruir el tejido por ingerirlo o la creacin de agujeros en sus membranas. Un sistema de muerte celular inespecfico es desencadenado en reas de inflamacin cuando se activan las protenas del complemento y los neutrfilos liberan su contenido txico. La capacidad de producir anticuerpos especficos comercialmente tiene enormes potenciales mdicos. Estos incluyen anticuerpos que atacan las clulas cancerosas, anticuerpos que atan los anticuerpos en las enfermedades autoinmunes, los anticuerpos que el sistema inmune (til en enfermedades autoinmunes y para los pacientes de trasplante de rgano) y anticuerpos que pueden aumentar el sistema inmunolgico. Si bien ninguno de estos tratamientos son libres de efectos secundarios, el enorme nmero de ensayos clnicos en esta rea da un presagio de un cambio importante en la medicina.