UNIVERSIDAD NACIONAL DEL CALLAO

FACULTAD DE INGENIERIA QUIMICA PRIMERA PRCTICA

DETERMINACION DE LA LONGITUD DE ONDA MAXIMA

I.

OBJETIVOS Determinacin del aspecto que presenta el espectro de colorante. Familiarizarse con la utilizacin y manejo de un espectrofotometro absorcin de un

II. FUNDAMENTO TEORICO Espectroscopia Es el estudio de la interaccin entre la radiacin electromagntica y la materia, con absorcin o emisin de energa radiante.

El anlisis espectral en el cual se basa permite detectar la absorcin o emisin de radiacin electromagntica a ciertas longitudes de onda y relacionar stas con los niveles de energa implicados en una transicin cuntica. Existen tres casos de interaccin con la materia: 1. Choque elstico: Existe slo un cambio en el impulso de los fotones. Ejemplos son los rayos X, la difraccin de electrones y la difraccin de neutrones. 2. Choque inelstico: Por ejemplo la espectroscopia Raman. 3. Absorcin o emisin resonante de fotones. La espectroscopa se relaciona en la mayora de los casos a la tercera interaccin. Estudia en qu frecuencia o longitud de onda una substancia puede absorber o emitir energa en forma de un cuanto de luz. La energa de un fotn (un cuanto de luz) de una onda electromagntica o su correspondiente frecuencia, equivale a la diferencia de energa de dos estados cunticos de la substancia estudiada:

h es la constante de Planck, es la frecuencia del haz de luz u onda electromagntica asociada a ese cuanto de luz y E es la diferencia de energa. Esta ecuacin es conocida tambin como la ecuacin bsica de la espectroscopia. Las diferencias de energa entre estados cunticos dependen de la composicin qumica de la prueba o de la estructura
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de la molcula, y es por eso por lo que este mtodo proporciona informacin importante para qumicos, fsicos y bilogos. Por medio de un espectrofotmetro se mide el espectro de la luz (intensidad de la luz absorbida, reflejada o emitida en funcin de la frecuencia o de la longitud de onda). Los espectros se diferencian considerablemente de elemento a elemento. En general, se denota como espectro a la distribucin de la intensidad en funcin de la frecuencia o de la longitud de onda. Adems de la luz visible, la espectroscopia cubre hoy en da una gran parte del espectro electromagntico, que va de los infrarrojos hasta los rayos gamma. El objetivo de la espectroscopia es obtener informacin acerca de una prueba o de un cuerpo radiante, por ejemplo:

La estructura interna o la temperatura (por ejemplo de estrellas) La composicin o la dinmica un una reaccin qumica La espectroscopia analtica identifica tomos o molculas por medio de sus espectros

Campos de estudio

Espectroscopia astronmica Espectroscopia de absorcin atmica Espectroscopia de fluorescencia Espectroscopia de rayos X Espectroscopia de resonancia magntica nuclear Espectroscopia de microondas Espectroscopia infrarroja Espectroscopia ultravioleta-visible

Espectro de absorcin

La espectroscopia de absorcin es la medida de la cantidad de luz absorbida por un compuesto en funcin de la longitud de onda de la luz. En general, e irradia una muestra con una fuente de luz y se mide la cantidad de luz transmitida a varias longitudes de onda, utilizando un detector y registrando el fenmeno en un grfico. Al contrario que en los ensayos qumicos, la mayora de las tcnicas espectroscpicas no son destructivas, es decir, no destruyen las muestras durante
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el anlisis; se pueden realizar diferentes tipos de espectros sin prdida o perdiendo muy poco de muestra. Cuando un slido incandescente se halla rodeado por un gas ms fro, el espectro resultante presenta un fondo continuo interrumpido por espacios oscuros denominados lneas de absorcin que ocurren porque el gas ha absorbido de la luz aquellos colores que ste irradia por s mismo. Pero tambin se da el caso que en la naturaleza cohabitan cuerpos que absorben radiacin emitida por otros, eliminando del espectro de radiacin que reciben aquellas bandas absorbidas, las cuales quedan de color negro. A esas bandas, se les suele llamar rayas negras o simplemente rayas espectrales. Por otra parte, suele ocurrir que unos cuerpo absorben slo la radiacin de unas determinadas longitudes de onda y no aceptan absorber otras de otras longitudes, por lo que cada cuerpo, cada elemento qumico en la prctica, tiene su propio espectro de absorcin, el cual se corresponde con su espectro de emisin, al igual como si fuera el negativo con el positivo de una pelcula.

En el caso de una estrella, cuando la luz del caliente y energtico interior de ella atraviesa la ms fra y menos energtica atmsfera exterior, alguno de los fotones es absorbido por electrones, que saltan a niveles concretos de energa. Muchas de tales interacciones crean bandas oscuras en el espectro continuo con longitudes de onda que corresponden con los intervalos entre pares de niveles energticos. Espectro electromagntico Es el intervalo de todas las frecuencias posibles, desde cero hasta el infinito. En la prctica, en el espectro se representan desde loas bajas frecuencias de radio utilizadas en las comunicaciones con submarinos hasta las altas frecuencias de los rayos gamma. El espectro electromagntico es continuo. Todas las radiaciones electromagnticas viajan a la velocidad de la luz (aproximadamente 3 x 1010cm/s, en el vaco), pero difieren en la frecuencia y en la longitud de onda.
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Onda electromagntica Una onda electromagntica es la forma de propagacin de la radiacin electromagntica a travs del espacio. En la naturaleza, las fuerzas elctricas se originan de dos formas: Primero est la atraccin o la repulsin elctricas entre las cargas elctricas (+) y (-). Las ondas electromagnticas siguen una trayectoria rectilnea y su velocidad es constante en cada medio especfico. Al pasar de un medio a otro la nica caracterstica que permanece constante es la frecuencia. La velocidad vara para cada longitud de onda. La frecuencia y la longitud de onda se relacionan segn la siguiente expresin matemtica: Longitud de onda: CxT=C/f Donde es la longitud de onda, C es la velocidad de la luz en el vaco, T el periodo y "f" la frecuencia. La frecuencia de una onda es el nmero de ondas que pasan por un punto fijo cada segundo o el nmero de vibraciones por unidad de tiempo; se representa por la letra griega (>un<), y generalmente se mide en hertz (Hz) o ciclos por segundo. La longitud de onda, representada por la letra griega (>lambda<), es la distancia entre dos picos (o dos valles) de una onda. La longitud de onda es una distancia y por lo tanto su unidad de medida es el metro. Como la luz es una radiacin electromagntica que tiene unas longitudes de onda muy pequeas se usan submltiplos del metro, como son el Angstrom () que es la diez mil millonsima de metro (1x10-8m ) y el Nanmetro (nm) que es la mil millonsima de metro ( 1x10-9m). La longitud de onda y la frecuencia, las cuales son inversamente proporcionales, estn relacionadas por la ecuacin: =c Donde: c = velocidad de la luz (3x1010 cm/s) = frecuencia de hertzios = longitud de onda en cm. Las ondas electromagnticas viajan como los fotones, corpsculos de energa carentes de masa. La energa de un fotn es proporcional a su frecuencia e inversamente proporcional a su longitud de onda. En ciertas condiciones, una molcula puede absorber la energa de un fotn que ha chocado sobre ella. En este caso, la energa de la molcula aumenta una cantidad
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o = c/

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igual a la energa del fotn hv. Por esta razn, la irradiacin de una mezcla de reaccin se suele representar por el smbolo hv. Los rayos X son tan energticos que excitan a los electrones hacia todos los niveles de energa, produciendo ionizacin. El ultravioleta-visible excita a los electrones a niveles de energa ms altos dentro de las molculas. Las energas de infrarrojo producen vibraciones moleculares y las energas de microondas producen rotaciones. Las frecuencias de onda de radio (energa muy baja) producen transiciones de espn nuclear que se observan en la espectroscopia RMN. Otras ondas electromagnticas La naturaleza de onda de la luz origina que los diferentes colores se reflejen de forma diferente por una superficie, generando finas rayas paralelas [a esto se debe el que un disco compacto lser (para uso musical o para ordenador) brille en todos los colores del arco iris]. Las filas ordenadas de los tomos en un cristal tambin forman lneas paralelas pero mucho menos espaciadas y resultan tener el mismo efecto sobre los rayos X, mostrando que los rayos X, al igual que la luz, tambin son ondas electromagnticas, pero con una longitud de onda mucho ms corta. Se encontr posteriormente que los haces de electrones en un campo magntico, dentro de un tubo de vaco, podan hacerse inestables y emitir ondas ms largas que la luz: el tubo magnetrn donde ocurra esto fue un dispositivo de radar de alto secreto durante la II Guerra Mundial e hizo posible posteriormente la fabricacin del horno microondas. Las ondas electromagnticas lideran la radio y la televisin y la enorme industria electrnica. Pero tambin se generan en el espacio (por rayos de electrones inestables en la magnetosfera, as como en el Sol y en el universo remoto, informndonos sobre las partculas magnticas del distante espacio). Las ondas, o 'disturbios', se dan en un medio invisible llamado el campo de fuerza elctrico (que utiliza partculas cargadas, como los electrones (-) y los protones (+) que se afectan y hacen mover entre s); sin estas partculas cargadas no puede haber campos de fuerza elctrica y por tanto no hay ondas electromagnticas. Por lo tanto, los campos magnticos podran producir corrientes elctricas y las corrientes elctricas producen campos magnticos. Espectrofotmetro Un espectrofotmetro es un instrumento usado en la fsica ptica que sirve para medir, en funcin de la longitud de onda, la relacin entre valores de una misma magnitud fotomtrica relativos a dos haces de radiaciones. Tambin es utilizado en los laboratorios de qumica para la cuantificacin de sustancias y microorganismos.
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Hay varios tipos de espectrofotmetros, puede ser de absorcin atmica o espectrofotmetro de masa. Regin UV-visible: La espectroscopia visible es una de las tcnicas ms ampliamente y ms frecuentemente empleadas en el anlisis qumico; Para que una sustancia sea activa en el visible debe ser colorida: el que una sustancia tenga color, es debido a que absorbe ciertas frecuencias o longitudes de onda del espectro visible y transmite otras ms. Por ejemplo: una solucin es amarilla debido a que dentro de la regin visible absorbe radiacin en el rango de 435 a 480 nm. En este rango de longitud de onda se encuentra el color azul del visible, por lo que este compuesto absorbe el color azul y transmite los colores complementarios que dan origen al color amarillo de la solucin mencionada. La absorcin y transmisin de las longitudes de onda de la regin visible de esta parte del espectro no es la misma en substancias que den diferentes tonalidades de amarillo, por lo que podemos tener una gama diferente de tonalidades como: amarillo canario, amarillo limn, amarillo plido, etc. La siguiente tabla nos da una relacin entre rango de longitudes de onda en que absorbe el compuesto, color absorbido y color observado o transmitido.

El Ultravioleta del vaco se considera aquella regin comprendida de los 100 a los 190nm. Se le llama as debido a que el nitrgeno atmosfrico absorbe este tipo de radiacin, por lo que se debe efectuar el vaco para poder excluir las absorbancias de este gas de las absorbancias del compuesto en estudio. Las complicaciones tcnicas asociadas al vaco necesario, adems de la poca utilidad que se tiene en el Ultravioleta del vaco, han hecho que esta tcnica prcticamente no tenga uso y de hecho no hay equipos disponibles comercialmente para aplicaciones de este tipo de espectroscopia. El espectro
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Visible y Ultravioleta, por el contrario, tienen amplia aplicacin y son tcnicas que se emplean continuamente. El rango visible se considera de los 380 a los 750 nm. El rango del Ultravioleta cercano o del Cuarzo es de 190 a 380 nm. La base de la espectroscopia Visible y Ultravioleta consiste en medir la intensidad del color (o de la radiacin absorbida en UV) a una longitud de onda especfica comparndola con otras soluciones de concentracin conocida (soluciones estndar) que contengan la misma especie absorbente. Para tener esta relacin se emplea la Ley de Beer, que establece que para una misma especie absorbente en una celda de espesor constante, la absorbancia es directamente proporcional a la concentracin. La coloracin de la solucin se debe a la especie absorbente y esta coloracin puede ser natural o inducida. La coloracin natural puede ser la base de la cuantificacin de una especie, como por ejemplo: la clorofila en ciertas plantas, los complejos metlicos que se encuentran presentes en solucin acuosa, como son los iones de Cobre (II), Manganeso (VII), Cobalto (III), etc. Ms frecuentemente, se induce a la formacin de un complejo colorido que absorba en el visible, y que sea especfico para el elemento o compuesto que se desea cuantificar colorimtricamente. Ejemplo: la formacin de un complejo colorido cuando el cloro libre reacciona con la ortotoluidina, o la cuantificacin de glucosa en la sangre y orina por la accin del molibdato en determinadas condiciones, o la intensificacin del color del ion cobre, al formar un complejo amoniaco-cobre, el cual se forma cuando a una solucin acuosa que contiene iones cobre se le agrega hidrxido de amonio. Para esto se requiere de un control de ciertas condiciones, que inhiben o favorecen la formacin de compuestos coloridos: pH: El pH es un factor determinante en la formacin de ciertos complejos o compuestos coloridos. Cuando el pH influye en la tcnica analtica, se requiere de un control adecuado de este valor para lo cual se agrega alguna solucin buffer, o estabilizador de pH. Temperatura: La temperatura es factor importante, sobre todo en reacciones en las cuales el factor cintico es la base del anlisis. Tiempo: En ciertas reacciones, se requiere de un tiempo determinado para que se tenga una lectura estable de absorbancia de la solucin producida. Es tambin factible que los complejos o compuestos formados sean lbiles, estos es que despus de un cierto tiempo se descompongan a otros productos diferentes, por lo que el tiempo indicado al que debe hacerse la lectura debe establecerse con base a la experiencia y los resultados que se tengan.
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Las tcnicas analticas UV-Visible han recibido gran aceptacin debido, entre otras a las siguientes razones: 1. Amplio campo de aplicacin: Como ya se ha mencionado, las tcnicas espectroscpicas UV-Vis., son ampliamente empleadas ya que son muchas las especies que son activas en el Visible, y muchas ms las que con un tratamiento adecuado son capaces de formar especies coloridas. Lo mismo puede decirse de la espectroscopia UV. 2. Selectividad adecuada: Aunque no es muy comn si es posible tener interferencias en UV-Visible. Cuando esto ocurre, es posible emplear los mtodos para anlisis de multicomponentes. Otra alternativa es aislar el analito de la interferencia, o separa la interferencia misma. 3. Buena Exactitud y Precisin: En estas tcnicas espectroscpicas es normal tener errores relativos del 1 al 3 %, por lo cual se puede considerar que se tendrn resultados analticos con un mnimo de incertidumbre si se procede en la forma correcta. 4. Facilidad y Conveniencia: Aunque existen instrumentos altamente sofisticados acoplados a computadoras y con sistemas pticos y electrnicos de alta precisin, es posible obtener resultados muy aceptables para anlisis de rutina, con instrumentos o espectrofotmetros de los ms sencillos en el mercado, a un costo muy accesible. APLICACIN Las aplicaciones principales son:

Determinar la cantidad de concentracin en una solucin de algn compuesto utilizando las frmulas ya mencionadas. Para la determinacin de estructuras moleculares. La identificacin de unidades estructurales especificas ya que estas tienen distintos tipos de absorbancia (grupos funcionales o isomeras). Aplicacin a nivel industrial:

El primer uso industrial de la espectrofotometra y colorimetra estuvo en la industria de la pintura. El objetivo principal era intentar mantener las partidas de pintura lo ms similares posible entre ellas y as reducir al mnimo las diferencias cuando se deba retocar de nuevo la pintura.

Aplicacin de la espectrofotometra uv- visible y calibracion multivariable al analisis de control de preparados farmacuticos
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FACULTAD DE INGENIERIA QUIMICA En los alimentos se pueden encontrar un gran nmero de sustancias txicas, tales como plaguicidas, antibiticos y toxinas, presentando distintos orgenes (naturales o sintticos) y niveles de toxicidad para la salud humana. Este tipo de compuestos se encuentran generalmente a muy bajas concentraciones en matrices muy complejas, por lo que es necesario la utilizacin de metodologas lo ms fiables posibles. En este sentido, el empleo de las tcnicas cromatogrficas (de gases y de lquidos) acopladas a detectores de espectrometra de masas ha permitido la deteccin adecuada de este tipo de sustancias en los alimentos a concentraciones extremadamente bajas. Por ello, y en funcin de las caractersticas del contaminante, se debe elegir la tcnica cromatogrfica que posibilite una mejor separacin del contaminante de los interferentes presentes en la matriz, as como de los contaminantes entre s. Esta metodologa proporciona datos de gran valor que mejoran nuestro conocimiento de la Salud Pblica a travs de la Seguridad Alimentaria. III. MATERIALES Y REACTIVOS

Espectrofotometro. Cobalto(0.15M) Agua destilada

IV. PROCEDIMIENTO EXPERIMENTAL

Primero la se realiza la calibracin utilizando como sustancia el agua destilada (auto cero). Colocamos las celdas dentro del espectrofotmetro y encendemos el haz de luz; la lectura debe ser: A = 0.000 T (%) = 100.0

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Luego de calibrar el espectrofotmetro. Procederemos a analizar las soluciones coloreadas. Retiramos una de las celdas y la lavamos muy bien. Luego agregamos unos mililitros de la solucin Co en ella y lo llevamos al espectrofotmetro.

Medimos la A y T en un intervalo de longitud de onda tomando como referencia la TABLA N 2 TABLA N 2

COLORES DE LA LUZ

VISIBLE

Longitud de onda (nm)

Color adsorbido

Color Observado

380-420 420-440 440-470 470-500 500-520

Violeta Azul violeta Azul Verde azulado Verde

Verde amarillo Amarillo Anaranjado Rojo Prpura 10

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Azul violeta
Azul Verde azuloso Verde

V. CALCULOS Y RESULTADOS

4.1 Tabla para Co (0.15M) 400 410 420 430 440 450 460 470 480 490 A 0.065 0.094 0.143 0.215 0.316 0.414 0.478 0.531 0.584 0.654 T 86.0 80.3 71.9 60.8 48.3 38.5 33.3 29.4 26.0 22.2

500
510 520 530 540 550 560 570

0.687
0.653 0.558 0.422 0.292 0.189 0.117 0.079

20.6
22.2 27.6 37.8 51.0 64.8 76.3 83.5 11

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4.2 Grafica de la curva de absorbancia.

CURVA ABSORBANCIA
0.8 0.7 0.6 0.5 0.4 0.3 0.2 0.1 0 0 100 200 300 400 500 600 700 CURVA ABSORBANCIA

4.3 Grafica de la curva de tramitancia.

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CURVA TRAMITANCIA
100 90 80 70 60 50 40 30 20 10 0 0 200 400 600 800 CURVA TRAMITANCIA

VI. CONCLUSIONES

Por medio de esta prctica se logr familiarizarse y aprender el uso correcto y manejo del espectrofotmetro de absorcin UV-visible por medio de sustancias que presentan color y que por medio de la espectrofotometra se puede observar su regin de absorbancia en determinada longitud de onda que nosotros podemos manejar de acuerdo a nuestras necesidades, as como lograr determinar en que regin se encuentra determinado compuesto si es que este es desconocido, ayudndonos tambin al graficarlo para facilitar la determinacin del mismo.
Se observo que para el cobalto el valor ms alto de la longitud de onda es 500nm; de acuerdo a la Tabla N 2 es correcto pues est en el rango: Rojo: 470 - 500 , Purpura : 500 520 La sustancia de cobalto obtuvo una absorbancia de 0.653 y tramitancia 20.6

VII. RECOMENDACIONES.

Las cubetas de vidrio deben estar limpios antes de ser usados. 13

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FACULTAD DE INGENIERIA QUIMICA Las sustancias en las cubetas de vidrio no deben presentar burbujas para una mejor una lectura.

VIII.REFERENCIA BIBLIOGRAFICA.

http://es.scribd.com/doc/8553130/Espectrofotometria

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