Universidad Nacional Jos Faustino Snchez Carrin

Facultad de Medicina Humana

MEMBRANA CELULAR

I.

DEFINICIN: La membrana es crucial para el desarrollo de la vida celular ya que no solamente define los lmites de la clula, sino que adems permite que la clula exista como una entidad diferente de su entorno, tambin permite que las clulas se comuniquen entre si y se relacionen con las matrices extracelulares. Las membranas regulan el trfico molecular en el entorno celular, organizan secuencias complejas de reacciones y son de importancia principal para la conservacin de la energa biolgica. Las actividades biolgicas son

consecuencia de sus notables propiedades fsicas, son flexibles, auto sellantes, y selectivamente permeables a los solutos polares, su flexibilidad les permite los cambios de forma que acompaan al crecimiento celular y el movimiento. Es muy importante tambin mencionar que las respuestas que la clula emite ante la presencia de una serie de seales qumicas como por ejemplo; hormonas, neurotransmisores, molculas de las matrices, entre otras; incluye la recepcin inicial de dichas seales por medio de protenas receptoras pertenecientes a la membrana. Los mecanismos para la amplificacin y transformacin de tales seales, con la generacin de molculas de segundos mensajeros que activan las respuestas fisiolgicas de la clula, tambin residen en la membrana celular.

II.

MORFOLOGIA Para poder entender el funcionamiento de la membrana plasmtica previamente debemos de conocer su morfologa y estructura, para determinar que componentes estn normalmente presentes en todas las membranas.

III.

MODELOS DE MEBRANA En un principio las teoras sobre la estructura de la membrana celular estuvieron basadas en evidencias indirectas, es as que fueron surgiendo algunos modelos que trataban de identificar su estructura. NAEGELI. (1855) Denomin membrana plasmtica a una pelcula invisible, que envuelve a la clula y sera la responsable de los fenmenos osmticos que se presentan en ellas.

BIOLOGA GENERAL, CELULAR Y MOLECULAR

Universidad Nacional Jos Faustino Snchez Carrin

Facultad de Medicina Humana

E. OVERTON (1902) Al observar que las molculas liposolubles penetran con facilidad a travs de la membrana plasmtica. Sostuvo que la membrana plasmtica estaba compuesta por probablemente por una delgada capa de lpidos, cuyo espesor sera muy inferior al lmite de resolucin del microscopio ptico.

E. GORTER Y F. GRENDELL (1925) Propusieron la existencia de una bicapa fosfolipdica al observar que la cantidad de fosfolpidos de la membrana de los eritrocitos era suficiente para formar una doble capa de molculas sobre toda la superficie celular. Luego del estudio sobre este modelo una serie de tcnicas llevaron a plantear que la estructura de la membrana adems de lpidos tambin posee protenas, este conclusin de obtuvo luego de estudiar la tensin superficial de las clulas.

HUGH DAVSON Y JAMES DANIELLI. (1935) Sugirieron que la membrana plasmtica contena una bicapa lipdica con protenas formando capas continuas sobre ambas superficies. Este

modelo aunque incorrecto, pareci confirmarse mediante el estudio de sistemas lipdicos artificiales y aos mas tarde con la observacin del microscopio electrnico, que mostr por primera vez que todas las clulas estn rodeadas por una membrana plasmtica de 6 a 10 nm. de espesor. DAVID ROBERTSON. (1959) Propuso sobre las bases de las teoras anteriores un modelo de membrana que denomin unidad de membrana, interpretando la imagen segn el modelo de Davson y Danielli. Robertson deca que la bicapa de fosfolpidos estaba cubierta en ambas caras por protenas extendidas. En 1950s Robertson estudi las micrografas mostradas anteriormente y no encontr evidencia de espacios o poros. El postul entonces, que la apariencia como de rieles del tren era debida a la unin del tetroxido de osmio (sustancia que se utiliza Modelo de Robertson en la preparacin de microscopio electrnico) con las protenas y los grupos polares de los lpidos.

BIOLOGA GENERAL, CELULAR Y MOLECULAR

Universidad Nacional Jos Faustino Snchez Carrin

Facultad de Medicina Humana

ALEE O. BANGHAM Y COL. (1965)

Demostraron que la bicapa lipdica forma en el agua vesculas esfricas denominadas liposomas dotadas de 2 compartimientos separados. Luego las pruebas combinadas de microscopia electrnica y estudios de composicin qumica, as como los estudios fsicos de permeabilidad y movimiento de molculas individuales de protenas y lpidos dentro de las membranas condujeron al MODELO DE MOSAICO FLUIDO, propuesto por Jonathan Singer y Garth L. Nicolson.

Fig. 1 MODELO MOSAICO FLUIDO

IV.

MOSAICO FLUIDO En el modelo del mosaico fluido, que ha servido como dogma central de la biologa de membrana durante ms de 30 aos, la bicapa lipdica se mantiene como el centro de la membrana, pero la atencin se enfoca en el estado fsico del lpido. A diferencia de los modelos previos, la bicapa de una membrana de mosaico fluido se encuentra en un estado lquido y las molculas individuales de lpido pueden moverse a los lados dentro del plano de la membrana. La estructura y la disposicin de las protenas de membrana en el modelo de mosaico fluido difieren de las de los modelos previos en que se encuentran como mosaico de partculas discontinuas que penetran la hoja de lpidos. Lo ms importante, el modelo del mosaico fluido presenta las membranas celulares como estructuras dinmicas en las que los componentes son mviles y capaces de reunirse para mantener varios tipos de interacciones transitorias o semipermanentes.

BIOLOGA GENERAL, CELULAR Y MOLECULAR

Universidad Nacional Jos Faustino Snchez Carrin

Facultad de Medicina Humana

En este modelo los lpidos se disponen en una delgada lmina bimolecular, mientras que las protenas integrales estn insertadas en la capa fluida, de la que emergen hacia ambas superficies. Una propiedad clave de la bicapa es que, aunque constituye una estructura aplanada estable, su fluidez les permite tanto a los lpidos como a las protenas, considerables desplazamientos en dicho plano estructural. Esta fluidez se debe a que la mayora de interacciones entre los componentes son no covalentes, dejando libertad a las molculas de lpidos y protenas para trasladarse lateralmente en el plano de la membrana, pero el movimiento de una cara de la bicapa a la otra est restringido. Las protenas especializadas cumplen con la mayor parte de las funciones especficas de la membrana, pero la unidad fundamental de toda la membrana biolgica es la bicapa lipdica, a la que se debe su integridad.Una de las caractersticas importantes de la organizacin de las membranas es la asimetra de sus componentes, la cual es an ms evidente ya que las cadenas de oligosacridos sobresalen hacia la superficie extracelular de la membrana.

I.

COMPOSICIN DE LA MEMBRANA Es una estructura elstica, fina y flexible que envuelve al citoplasma, tiene un grosor de tan solo 7,5 a 10 nanmetros. Est formada casi totalmente por protenas y lpidos, por ello se dice que es de naturaleza lipoprotena, con una composicin aproximada de un 55% de protenas, un 25% de fosfolpidos, un13% de colesterol, un 4% de otros lpidos y un 3% de hidratos de carbono. Lpidos (40%) Protenas (52%) Glcidos (8%) 1.1. LIPIDOS DE MEMBRANA La variedad de lpidos presentes en las membranas es muy amplia; sin embargo, todos poseen una caracterstica en comn: son molculas anfipticas. Esto significa que sus molculas contienen una zona hidroflica o polar y una hidrofbica o no polar. A. Fosfolpidos

Los fosfolpidos son los lpidos ms abundantes en las membranas. Debido a su carcter antiptico, los fosfolpidos, en un medio acuoso se organizan espontneamente conformando la denominada bicapa lipdica. Las cabezas polares estn orientadas hacia el medio acuoso (intra y extracelular) y las colas

BIOLOGA GENERAL, CELULAR Y MOLECULAR

Universidad Nacional Jos Faustino Snchez Carrin

Facultad de Medicina Humana

hidrofbicas hacia el medio lipdico, es decir, al interior de la bicapa, constituyendo la matriz de la membrana. A su vez, estas bicapas tienden a cerrarse espontneamente sobre s mismas formando vesculas, es decir, compartimientos cerrados en toda su extensin tridimensional, similares a una esfera. Una importante propiedad de las bicapas lipdicas es que se comportan como fluidos bidimensionales en los que molculas individuales (tanto lpidos protenas) son libre para rotar y moverse en direcciones laterales. Esta fluidez es una propiedad crucial de las membranas y temperatura como la composicin lipdica. La bicapa de fosfolpidos funciona principalmente como armazn estructural de la membrana y como barrera que impide el pasaje de sustancias hidrosolubles a travs de la misma; esto ltimo es debido al carcter fuertemente hidrofbico de la matriz de la membrana. est determinada tanto por la

Hay cuatro tipos de fosfolpidos en la membrana celular: Fosfatidilcolina: es uno de los principales constituyentes de las bicapas lipdicas de las membranas celulares Esfingomielina (en este fosfolpido la glicerina ha sido sustituida por un aminoalcohol llamado D-4-esfingenina) Fosfatidilserina: fosfolpido en cuya cabeza presenta el aminocido serina unido al cido fosfrico. En la cola el glicerol est unido a dos cidos grasos. El mantenerla fuera de la hoja extracelular es importante ya que su exposicin sobre la

BIOLOGA GENERAL, CELULAR Y MOLECULAR

Universidad Nacional Jos Faustino Snchez Carrin

Facultad de Medicina Humana

superficie exterior desencadena la apoptosis (muerte celular programada). Fosfatidiletanolamina: tiende a ubicarse en la hoja de las membranas en contacto con el citosol, con un intercambio de lpidos prcticamente nulo a travs de ambas hojas. La presencia de estos lpidos cargados en el lado citoslico es de fundamental importancia para comprender los fenmenos de fusin de membrana. La estabilidad de las bicapas lipdicas est dada por: Interacciones hidrofbicas entre las colas hidrocarbonadas. Fuerzas de van der Waals entre las colas hidrofbicas. Fuerzas electrostticas y puentes hidrogeno entre las cabezas polares de los lpidos, ya sea entre ellos mismos y con las molculas de agua de los medios extra e intracelular. Como se notar todas estas son uniones dbiles (no covalentes) y le confieren simultneamente estabilidad y fluidez a la membrana.

B.

Colesterol

El colesterol es un esteroide que se encuentra en un alto porcentaje en la membrana plasmtica de las clulas animales. Su concentracin vara mucho de un tipo de membrana a otro; en animales hay membranas donde el colesterol constituye hasta el 50% del total de los lpidos. Contrariamente, la mayora de las clulas vegetales y bacterianas carecen de colesterol. Sus funciones son: Inmoviliza los primeros carbonos de las cadenas hidrocarbonadas. Esto hace a la membrana menos deformable y menos fluida, es decir, la estabiliza. Sin colesterol, la membrana necesitara de una pared celular que le otorgue contencin mecnica. Fluidez de membrana: Las membranas son estructuras dinmicas donde los componentes pueden desplazarse en todas las direcciones sobre el plano de la bicapa. De ah que el modelo reciba el nombre de mosaico fluido.

MOVILIDAD DE LOS COMPONENTES DE LAS MEMBRANAS Existen tres tipos de movimientos posibles en las membranas: Rotacin (sobre su propio eje) Traslacin (o difusin lateral) sobre el plano de la membrana.

BIOLOGA GENERAL, CELULAR Y MOLECULAR

Universidad Nacional Jos Faustino Snchez Carrin

Facultad de Medicina Humana

Flip-flop El movimiento de flip-flop es el intercambio de fosfolpidos de una monocapa (o hemimembrana) a la otra; est sumamente restringido, debido a la dificultad que posee la cabeza polar para atravesar el medio hidrofbico de la matriz de la membrana. De all que no sea un movimiento que ocurra de manera espontnea sino que est mediado por enzimas denominadas flipasas.

1.2. PROTENAS DE MEMBRANA Las protenas de membrana pueden ser extrnsecas o intrnsecas. Las extrnsecas se encuentran enteramente fuera de la membrana pero unidas a ella por uniones tipo puente hidrogeno, van der Waals o inicas. Las intrnsecas se encuentran unidas en la membrana. Muchas se extienden desde una cara a la otra de la membrana y se conocen como protenas de transmembrana. Segn su ubicacin se clasifican en: Protenas intrnsecas, integrales o transmembrana: Pueden atravesar total o parcialmente la bicapa, asomando a una o ambas superficies de la misma.Tienen un sector hidrofbico, que es el que esta insertado en la membrana y una o dos regiones hidroflicas, expuestas a los medios intra y extracelulares (ambos acuosos).La porcin que atraviesa la membrana suele presentar una estructura de alfa hlice con una elevada proporcin de aminocidos hidrofbicos que interaccionan con las colas hidrocarbonadas de la matriz de la membrana. El sector proteico (tambin llamado dominio) expuesto a los medios acuosos suele tener estructura globular e interacciona con las cabezas polares de los fosfolpidos y con otras molculas a travs de uniones inicas y puente de hidrgeno. Dentro de las protenas integrales encontramos:

BIOLOGA GENERAL, CELULAR Y MOLECULAR

Universidad Nacional Jos Faustino Snchez Carrin

Facultad de Medicina Humana

Protenas monopaso: La protena atraviesa una sola vez la membrana. Protenas multipaso: La cadena polipeptdica atraviesa dos o ms veces la bicapa lipdica. Por lo tanto, esta posee varias regiones hidrofbicas insertadas en la matriz de la membrana, alternadas con sectores hidroflicos que se exponen hacia los medios acuosos.

Un grupo de protenas denominadas Molculas de Adhesin Celular (MAC o CAM por sus siglas en ingls) es el responsable de las

interacciones entre clulas. Entre las ms importantes tenemos: INTEGRINAS: Intervienen en la interaccin de una clula con la matriz extracelular y con otras clulas, tambin son

transportadores de seales en ambas direcciones a travs de la membrana plasmtica, integrando informacin acerca del entorno tanto extra como intracelular. Son cruciales en procesos como el desarrollo embrionario, la coagulacin de la sangre, la funcin inmune celular y el crecimiento de tumores y metstasis. CADHERINAS: son responsables de las interacciones entre clulas similares y requieren de Ca ++ para dicha interaccin, y entre otras caractersticas, se encuentra las de relacionarse al citoesqueleto Un ejemplos de uniones que contiene cadherina lo constituyen los desmosomas y las uniones adhesivas celulares y que confieren rigidez y fortaleza al conjunto de clulas que se unen para formar tejidos. SELECTINAS: Tienen dominios extracelulares que en presencia de Ca++ unen polisacridos especficos en la superficie de una

BIOLOGA GENERAL, CELULAR Y MOLECULAR

Universidad Nacional Jos Faustino Snchez Carrin

Facultad de Medicina Humana

clula adyacente. Son una parte esencial del proceso de coagulacin de la sangre. CAVEOLINAS: Protenas integrales que se asocian con la hoja interna de la membrana celular obligndola a curvarse hacia adentro para formar caveolas.

Protenas extrnsecas o perifricas: Se encuentran sobre la cara externa o tambin interna de la membrana y pueden estar ligadas tanto a las protenas integrales como a los fosfolpidos por uniones dbiles. Se pueden extraer fcilmente con tratamientos no drsticos. Cuando estas se ubican del lado citoplasmtico de la membrana suelen interactuar con el citoesqueleto.

Protenas ancladas al lpido: Que se localiza fuera de la bicapa lipdica, en la superficie extracelular o en la citoplsmica, pero que tienen enlaces covalentes con una molcula de lpido que se encuentra dentro de la bicapa.

1.3. GLUCIDOS DE MEMBRANA Los glcidos de la membrana se presentan en forma de

oligosacridos o con menor frecuencia, como monosacridos. En todos los casos se encuentran unidos en forma covalente a lpidos,

constituyendo glucolpidos, o a protenas, constituyendo las famosas glucoprotenas. La ubicacin de los glcidos en las membranas

BIOLOGA GENERAL, CELULAR Y MOLECULAR

Universidad Nacional Jos Faustino Snchez Carrin

Facultad de Medicina Humana

plasmticas se realiza, en forma casi exclusiva, en la capa superficial o externa de la bicapa fosfolipdica. Las clulas proyectan hacia su superficie externa el componente oligosacrido de sus glucolpidos y glucoprotenas. El conjunto de todas estas molculas forma una cubierta extracelular denominada Glucocliz. A esta verdadera capa extracelular se le atribuyen las siguientes funciones: Micro ambiente: El Glucocliz es capaz de atrapar ciertos iones que son importantes para la clula, haciendo que estos

puedan ingresar rpidamente a la clula. Proteccin celular: La cubierta celular puede proteger a la membrana contra daos de origen qumico o mecnico. Reconocimiento celular: Las clulas pueden ser reconocidas, mediante otras clulas o molculas, a partir de la composicin diferencial Glucocliz. que presentan los distintos tipos celulares en su

V.

FUNCIONES DE LA MEMBRANA CELULAR 1. Compartimentalizacion Rodeando el contenido de toda la clula, permite la presencia de actividades especializadas sin interferencia externa y permite la regulacin independiente de distintas actividades celulares. 4.1 PERMEABILIDAD DE LA MEMBRANA La membrana plasmtica es una barrera con permeabilidad selectiva que regula el intercambio de sustancias entre el citoplasma y el medio extracelular. Sus propiedades aseguran que las sustancias esenciales, como la glucosa, los aminocidos y los lpidos entren a la clula fcilmente, que los intermediarios metablicos permanezcan en la clula y que los productos de desecho, como la urea, abandonen la misma. Todo esto permite a la clula mantener el medio interno relativamente constante. La membrana, debido a sus caractersticas hidrofbicas, es impermeable a la mayor parte de las molculas hidrosolubles, como la glucosa, los aminocidos y los iones en general, por eso, estas molculas se transfieren de un lado a otro de la membrana gracias a protenas integrales que actan como transportadores; sin estos transportadores dichas molculas no se podran difundir a travs de las membrana. En

BIOLOGA GENERAL, CELULAR Y MOLECULAR

10

Universidad Nacional Jos Faustino Snchez Carrin

Facultad de Medicina Humana

cambio, las molculas hidrofbicas, siempre y cuando su tamao no sea demasiado grande, pueden atravesar fcilmente la membrana. El incesante intercambio de solutos entre el medio que rodea a la clula y el citosol y entre este y el interior de los organoides se realiza a travs de la membrana plasmtica y de la membrana de dichos organoides, respectivamente. Segn los casos, el pasaje se produce sin gasto de energa o por mecanismos que requieren de ella. Cuando no consume energa, el proceso se denomina transporte pasivo; el dependiente de energa, transporte activo.

4.1.1

Transporte pasivo Si colocamos un soluto en un solvente, las molculas del soluto debido a la energa cintica de las molculas presentes en la solucin, se dispersan en forma progresiva por todo el solvente desde la zona donde se encuentra en mayor concentracin hacia la zona donde se hallan en menor concentracin, con una velocidad proporcional a la diferencia entre las concentraciones, hasta quedar uniformemente distribuidas. Este movimiento de soluto es llamado difusin.

Fig. 11 Difusin de una sustancia disuelta en un solvente

Podemos definir entonces a la difusin como el movimiento de molculas desde una zona de mayor concentracin hacia una de menor concentracin. A la diferencia de concentracin que existe entre una zona y otra se la denomina gradiente. Tenemos dos formas de transporte pasivo: Difusin simple, facilitada. a) Difusin Simple Cuando la difusin se realiza entre compartimientos separados por una membrana permeable a ese soluto, se denomina difusin simple, no requiere de otra energa adicional que no sea el movimiento de las molculas, desplazndose stas a favor de su gradiente de concentracin. En otras palabras, la difusin simple no

BIOLOGA GENERAL, CELULAR Y MOLECULAR

11

Universidad Nacional Jos Faustino Snchez Carrin

Facultad de Medicina Humana

requiere gasto de ATP, ya que es un fenmeno espontneo. Es el transporte que se da a travs de la bicapa lipdica, en la cual nicamente atravesarn la bicapa las molculas no polares (hidrofbicas) y pequeas como el O2, CO2, N2, benceno e incluso el CO (txico), tambin lo harn compuestos liposolubles como los cidos grasos y esteroides, adems, a pesar de ser molculas polares, el glicerol, la urea y el agua.

Fig.12 Permeabilidad de la membrana de fosfolipidos

En el caso particular del H2O, la difusin simple se denomina smosis. El pasaje de agua a travs de la membrana u smosis se lleva a cabo siempre en forma espontnea y muy rpidamente. El H2O se difundir desde el compartimiento de menor concentracin de solutos o medio hipotnico, al de mayor concentracin de solutos o medio hipertnico, con el propsito de igualar las concentraciones en ambos compartimientos. Al cabo de un tiempo, el resultado sern dos medios isotnicos, o sea, la concentracin a ambos lados de la membrana ser la misma.

Fig. 13 Efecto del proceso osmtico sobre la clula

Efecto de los cambios de concentracin Osmosis Si colocamos una clula, por ejemplo un glbulo rojo, en una solucin hipertnica (agua salada, por

BIOLOGA GENERAL, CELULAR Y MOLECULAR

12

Universidad Nacional Jos Faustino Snchez Carrin

Facultad de Medicina Humana

ejemplo) el H2O tender a salir por smosis hacia el medio extracelular, encogiendo o crenando al glbulo rojo, en la clula vegeta se denomina plasmlisis. En cambio, si el medio extracelular es hipotnico (agua destilada, por ejemplo) el H 2O penetrar en la clula, hinchndola y, finalmente, ocasionando su ruptura o lisis, en la clula vegetal se denomina turgencia. Cabe hacer aqu una breve aclaracin: un medio no es por s mismo ni hipertnico ni hipotnico; siempre que se use esta terminologa lo que se est haciendo es comparar un medio con respecto a otro. Por ejemplo, A puede ser hipertnico con respecto a B y, al mismo tiempo, A tambin puede ser hipotnico con respecto a C. Es decir, A tiene una concentracin de solutos intermedia. Por otra parte, se dice que dos medios son isotnicos cuando su concentracin de solutos es la misma.

Fig.14 Osmosis. Efecto de los cambios de concentracin de soluto en Cel. Animal -Vegetal

b) Difusin Facilitada La mayora de las sustancias que atraviesan las membranas a favor de la gradiente, es decir sin gasto de energa, lo hacen a una velocidad mayor a la esperable si su pasaje fuera por difusin simple. El sentido de difusin se realiza siempre a favor de la gradiente de concentracin y voltaje, la fuerza que impulsa la movilizacin de las partculas del soluto es el gradiente, y por lo tanto no se consume energa. Desde este punto de vista la difusin facilitada es similar a la difusin simple; la diferencia reside en que la primera participan estructuras proteicas reguladoras y en la segunda no. Aquellas molculas que no pueden atravesar fcilmente las membranas por difusin simple debido a su polaridad

BIOLOGA GENERAL, CELULAR Y MOLECULAR

13

Universidad Nacional Jos Faustino Snchez Carrin

Facultad de Medicina Humana

y/o a su tamao (glucosa, aminocidos, iones, etc.), podrn hacerlo si estn presentes sus respectivos transportadores que muestran caractersticas de especificidad y saturabilidad similares a las del complejo enzima producto. Dichos transportadores son protenas integrales de membrana y se los puede agrupar del siguiente modo: Canales inicos Los canales inicos son poros o tneles formados por una o varias protenas transmembranosas. En general, son de tipo multipaso, con un interior hidrofilico. Existen canales inicos en todas las clulas, tanto en la membrana plasmtica como en las membranas de los organoides. Son altamente selectivos, porque cada canal slo puede transportar un tipo de ion (K+, Na+, etc.). Los iones se mueven a travs del canal a una velocidad muy elevada (108 iones por segundo). El transporte de un ion es impulsado por el gradiente electroqumico quiere decir que un ion puede difundir de un lado a otro de la membrana, gracias a la diferencia de concentracin como a la diferencia de carga elctrica a ambos lados de la membrana. La mayora de los canales no permanecen abiertos permanentemente, sino que se abren en respuesta a estmulos. Estos estmulos pueden ser tanto la presencia de una sustancia inductora como una modificacin de la carga elctrica de la membrana (modificacin del potencial elctrico). Los canales que se abren o cierran en presencia de sustancias inductoras (ligandos) son llamados dependientes de ligando y los otros, dependientes de voltaje.

BIOLOGA GENERAL, CELULAR Y MOLECULAR

14

Universidad Nacional Jos Faustino Snchez Carrin

Facultad de Medicina Humana

Fig.15 Canales Proteicos

Fig.16 Mecanismo del pasaje de iones a travs de canales ionicos dependientes de voltaje y de ligando

Protenas Carriers o permiasas Al igual que los canales inicos, las permeasas estn formadas por protenas transmembrana multipaso. Suelen transportar una gran variedad de iones como el HCO3- y otras molculas polares sin carga como la glucosa. Este tipo de protenas fijan una nica molcula de sustrato (o unas pocas) a la vez, y a continuacin sufren un cambio conformacional reversible que les permite transportar el soluto de un lado al otro de la membrana (translocacin). Aqu vale hacer otra aclaracin: para entender la difusin facilitada no hay que pensar si una sustancia entra o sale de la clula, lo importante es considerar que se est movilizando algo a favor del gradiente (qumico o elctrico) gracias a la accin de protenas transportadoras. Por esta razn es que no se requiere de energa adicional, no se requiere gasto de ATP, ya que es el propio gradiente el que impulsa el pasaje a travs de los transportadores. Este tipo de transporte es siempre sin gasto de energa y a favor del gradiente electroqumico. La velocidad de transporte es muy inferior al de los canales inicos.

Fig.17 Protenas de transporte

BIOLOGA GENERAL, CELULAR Y MOLECULAR

15

Universidad Nacional Jos Faustino Snchez Carrin

Facultad de Medicina Humana

Este tipo de transporte es siempre sin gasto de energa y a favor del gradiente electroqumico. La velocidad de transporte es muy inferior al de los canales inicos. Existen tres tipos de permeasas: MONOTRANSPORTADORA O UNIPORTE: Transfieren un solo tipo de soluto de un lado al otro de la membrana (transporte de glucosa en la mayora de las clulas animales, desde el medio extracelular, la sangre, donde la concentracin es mayor, hacia el interior de las mismas donde es menor). Los uniportes transportan las molculas a favor de su gradiente de concentracin. Como ejemplo podemos citar la glucosa y distintos aminocidos. COTRANSPORTADORA O SIMPORTE: Transfieren dos tipos de solutos, ambos en el mismo sentido. CONTRATRANSPORTADORA O ANTIPORTE: Transfiere DOS tipos distintos de solutos en sentidos contrarios. Es decir, uno ingresa al citoplasma si, y solo si, simultneamente el otro sale.

Estos dos tipos de transporte acoplan el movimiento de un tipo de ion o molcula a favor de su gradiente de concentracin con el de otro tipo de molcula o ion

Fig. 18 Tipos de transporte mediados por protenas transportadoras

BIOLOGA GENERAL, CELULAR Y MOLECULAR

16

Universidad Nacional Jos Faustino Snchez Carrin

Facultad de Medicina Humana

en contra de su gradiente de concentracin sea lo que hacen es acoplar un transporte energticamente favorable con otro que no lo es. Un ejemplo de cotransporte sera el transporte de Na+ y glucosa en la membrana plasmtica de las clulas intestinales (ver ms adelante) y uno de contratransporte, el transporte de Cl y HCO3 en la membrana de los glbulos rojos. Tanto el cotransporte como el contratransporte, son tambin llamados transportes acoplados, ya que no se pueden llevar a cabo si no estn presentes ambos tipos de solutos. Casos particulares de transporte pasivo: Ionforos y Aquaporinas Ionforos Estas sustancias tienen la propiedad de poder incorporarse a las membranas y aumentar la permeabilidad a ciertos iones. En general son fabricados por bacterias como mecanismos defensivos. Existen dos tipos distintos: Transportadores mviles: Se unen reversiblemente a un ion que se encuentra en el medio con mayor concentracin, giran en la bicapa y lo liberan en el otro lado de la membrana. Ejemplo: Valinomicina (Fig.19). Formadores de canales: Son protenas con estructura helicoidal, en cuyo interior de la hlice hay una regin hidroflica que permite el paso de iones monovalentes (con una sola carga elctrica). Ejemplo: Gramidicina (Fig. 20).

Fig. 19 Transportador ionico mvil y un ionoforo formador de canal

Fig. 20 Estructura de un canal de Gramicidina

Aquaporinas Son canales especiales con estructura helicoidal que permiten el paso selectivo de H2O. No son canales inicos. En ciertas clases

BIOLOGA GENERAL, CELULAR Y MOLECULAR

17

Universidad Nacional Jos Faustino Snchez Carrin

Facultad de Medicina Humana

de clulas, por ejemplo en algunas clulas renales, se requiere un mayor transporte de H2O que es logrado exclusivamente con la difusin simple (osmosis). La estructura de las aquaporinas es semejante a la de los ionoforos formadores de canales. Las acuaporinas estn constituidas por cuatro protenas de 28KDa iguales en tres si (menos una que esta glicoslada), denominadas CHIP, cada una de las cuales se compone de seis alfa hlices transmembranosas.

Fig.21 Acuaporina. Corte transversal por el plano de la membrana, los puntos representan una hlice alfa transmembranosa

4.1.2

Transporte activo Cuando el transporte de un soluto se realiza en direccin contraria a su gradiente de concentracin o de voltaje, solo es posible con gasto de energa, de ah que este tipo de pasaje se lo llame transporte activo. El transporte activo tiene lugar a travs de permeasas llamadas bombas, en esta forma tambin existen formas de monotrasporte, cotransporte y contratransporte. Las clulas no pueden depender nicamente del transporte pasivo dado que deben importar, por un lado, molculas que estn en menor concentracin en medio extracelular que en el citoplasma y, por otro, necesitan mantener constante la composicin inica intracelular. Ambas funciones se llevan a cabo por medio del transporte activo. Es un transporte que se realiza en contra del gradiente, ya sea este de concentracin o elctrico y, en consecuencia, se requerir gasto de energa en forma de ATP.

BIOLOGA GENERAL, CELULAR Y MOLECULAR

18

Universidad Nacional Jos Faustino Snchez Carrin

Facultad de Medicina Humana

El transporte activo se realiza por medio de bombas y tambin presenta como en el transporte pasivo formas de monotransporte, cotransporte y contratransporte. Posee las mismas caractersticas de especificidad y saturabilidad que la difusin facilitada, aunque difiere de sta por realizarse contra el gradiente electroqumico. El transporte activo esta desfavorecido termodinmicamente (es endergnico) y se da solamente cuando est acoplado (directa o indirectamente) a un proceso exergnico como, por ej., la conversin de ATP a ADP + Pi. Debido a esto, las bombas se suelen denominar ATPasas de transporte. Existen muchos tipos de ATPasas distintas. Aqu vamos a hablar de las ms importantes, que son la Bomba de Na+-K+ (bomba sodio potasio)y la de K+/H+.

TRANSPORTE ACTIVO PRIMARIO Usa energa (generalmente obtenida de la hidrlisis de ATP), a nivel de la misma protena de membrana produciendo un cambio conformacional que resulta en el transporte de una molcula a travs de la protena. El ejemplo ms conocido es la bomba de Na+/K+. La bomba de Na+/K+ realiza un contratransporte (usando un "antyport"). Transporta K+ al interior de la clula y Na+ al exterior de la misma, al mismo tiempo, gastando en el proceso ATP. En el caso del transporte activo, las protenas transportadoras deben mover molculas contra un gradiente de concentracin. Por ejemplo en la bomba de sodio-potasio de las clulas nerviosas el Na+ es mantenido a bajas concentraciones en el interior de las clulas y el K+ a altas concentraciones. Las concentraciones estn invertidas en el exterior de las clulas. El valor del potencial elctrico generado por la diferencia de permeabilidad de los iones y su distribucin a ambos lados de la membrana es de -70 mV, resultando el interior de la clula negativo con respecto al exterior. A) ATP- ASAS TIPO P:

BIOLOGA GENERAL, CELULAR Y MOLECULAR

19

Universidad Nacional Jos Faustino Snchez Carrin

Facultad de Medicina Humana

Las bombas de clase P (compuestas por dos polipptidos diferentes: alfa y beta) intervienen en el transporte de H+, Na+, K+ y Ca++, se las encuentra en las membranas plasmticas de vegetales, hongos y bacterias , donde en las membranas plasmticas de eucariotas actan como bombas de Na+/ K+ y H+/K+ (clulas gstricas) y este tipo se lo encuentra adems como bombas de Ca++ en dichas clulas (y en el retculo sarcoplsmico de clulas musculares). BOMBA DE NA+ / K+

Es de fundamental importancia para el metabolismo celular, est constituida por un tetrmero de dos subunidades transmembranosas alfa y dos beta. En el dominio citosolico, de la subunidad beta reside el sitio catalico para la hidrolisis de ATP y el sitio para la unin de tres iones sodio. En el domino extracelular existe el siti de unin de dos iones potasio, este sitio puede ser ocupado por la oubaina, que es un glcido digitalico que inhibe el funcionamiento de la bomba. Concentracin de K+ en el interior celulares tpicamente 10 a 20 veces mas alta que en el exterior, La bomba acta como un transportador de intercambio (antiportador), bombeando de forma activa Na + hacia el exterior del a clula y K+ hacia el interior. Dado que este transportador hidroliza ATP para bombear el Na+ hacia fuera y el K+ hacia adentro, tambin se llama Na+ / K+ - ATPasa. Una caracterstica esencial de la bomba de Na+/K+ es que el ciclo de transporte depende de la autofosforilacin de la protena. El grupo fosfato Terminal del ATP es transferido a un residuo de acido aspartico de la bomba, de donde es posteriormente eliminado. Las bombas inicas que se fosforilan a si mismas reciben el nombre de ATP asas de transporte de tipo P. La bomba de Na+/ K+ puede llegar a hacerse reversible, produciendo ATP Modelo de funcionamiento de la bomba de Na+ / K+ A) La unin del Na+ a la protena transportadora. B) Ocurre la fosforilacin de la cara citoplasmtica de la bomba por ATP lo que induce un cambio conformacional en la protena transportadora. C) Se transfiere sodio a travs del a membrana y lo libera en el exterior. D) En esta situacin se da la unin de K+ a la cara extracelular de la protena que media el transporte.

BIOLOGA GENERAL, CELULAR Y MOLECULAR

20

Universidad Nacional Jos Faustino Snchez Carrin

Facultad de Medicina Humana

E) La desfosforilacin de la protena transportadora devuelve a la protena a su configuracin original. F) Se transfiere el K+ a travs de la membrana liberndolo en el citosol. La fosforilacion de la bomba es dependiente de Na+ y la desfosforilacion es dependiente de K+, esto hace que las transciones conformacioanles se den de una forma ordenada.

Fig.22 Transporte Activo mediante bombas de Na y K

BOMBA DE CA++:

La familia de ATPasas de tipo P incluye las bombas de Ca++, que eliminan el calcio del citosol despus de que haya participado en algn proceso de sealizacin intracelular. Las clulas eucariotas mantienen unas concentraciones de calcio libre en su citosol muy bajas, frente a unas concentraciones de calcio extracelular muy superiores. La entrada de Ca++ a favor de su elevado gradiente de concentracin, en respuesta a seales extracelulares, es uno de los mecanismos de transmisin de estas seales de manera rpida a travs de la membrana plasmtica. La salida de calcio esta determinada por esta bomba ATPasa tipo P y un antopiportador (llamado intercambiador de Na+ / Ca+) impulsado por el gradiente electroquimico de Na+. La bomba ms conocida de este tipo es la bomba de Ca++ ATPasa de la membrana del retculo sarcoplasmico, Cuando un potencial de accin despolariza la membrana de la clula muscular, el Ca+ se libera desde el retculo sarcoplasmico la citosol mediante unos canales de Ca+, lo que estimula la contraccin muscular. La bomba de Ca+ es la responsable de devolver de nuevo este Ca+ al retculo sarcoplasmico. La posterior fosforilacin del dominio de la bomba de

BIOLOGA GENERAL, CELULAR Y MOLECULAR

21

Universidad Nacional Jos Faustino Snchez Carrin

Facultad de Medicina Humana

Ca+ , hacen que las hlices transmembrana se reordenen drsticamente, lo cual colapsa l centro de unin del Ca+, de forma que los iones Ca++ son liberados al otro lado de la membrana, hacia la luz del retculo sarcoplasmico. B) ATP- asas tipo V Son estructuras semejantes a turbinas, formadas por muchas subunidades proteicas diferentes. Muchas ATPasas de tipo V actan en sentido opuesto: es el gradiente de H+ a travs de estas membranas el que impulsa la sntesis de ATP a partir de ADP y fosfato. Los gradientes de H+ se generan en las etapas de transferencia de electrones de la fosforilacin oxidativa o de la fotosntesis, o mediante la bomba de H+ activada por la luz. Algunos orgnulos, como los lisosomas, contienen ATPasas de transporte tipo V, que bombean H+, por lo que son responsables de la acidificacin de estos orgnulos. C) ATP-ASAS TIPO F: Proceso dentro de la membrana interna mitocondrial TRANSPORTE ACTIVO SECUNDARIO Cotransporte Na+/Glucosa: Esta situacin se da en las membranas apicales de las clulas del intestino delgado o en membranas de clulas renales, donde deber absorberse glucosa desde la luz del intestino o de los tbulos renales, aunque las concentraciones extracelulares sean bajas. Gracias a la accin de la bomba Na+-K+ se expulsan iones Na+ a travs de la membrana basal de la clula. De este modo, la concentracin de Na+ intracelular se mantenida baja. En la regin apical de la membrana se encuentra una permeasa pasiva cotransportadora de Na+ y glucosa. El Na+ ingresa de este modo a favor de su gradiente electroqumico al interior de la clula y arrastra a la glucosa con l, que ingresa de este modo en contra de su gradiente de concentracin, gracias al sistema de cotransporte.

VI.

PATOLOGIAS Las patologas de membranas se deben principalmente a alteraciones en las protenas que forman parte de la membrana. Alteraciones en:

BIOLOGA GENERAL, CELULAR Y MOLECULAR

22

Universidad Nacional Jos Faustino Snchez Carrin

Facultad de Medicina Humana

1. Alteraciones en las protenas de transporte: Sndrome de Fanconi, raquitismo, osteomalacia. SNDROME DE FANCONI:Es una alteracin en la absorcin y transporte de aminocidos, glucosa, cido rico y fosfato, a nivel renal. Hoy da est establecido que se debe a mutaciones de un gen que codifica un

transportador especfico de glucosa.Este gen se expresa en hepatocitos, clulas pancreticas y membranas de clulas epiteliales de intestino y rin. 2. Alteraciones en protenas receptoras: Defecto del nmero y/o afinidad de los receptores ACONDROPLASIA: La acondroplasia es la causa ms comn de enanismo. Es un trastorno gentico del esqueleto seo. Se debe a mutaciones del gen que codifica el receptor 3 del factor de crecimiento de fibroblastos. El receptor 3 es una protena que se encuentra en la membrana celular y que contiene a la tirosincinasa que es una enzima que acta en la tiroides. 3. Alteraciones en protenas de contacto:La disminucin del nmero de nexos de membrana, la formacin de prolongaciones irregulares en masa o evaginaciones citoplasmticas vesiculiformes, adems de la ausencia de inhibicin de contacto, son caractersticas de tumores malignos. CANCER Y METSTASIS: La metstasis es la diseminacin de las clulas cancerosas desde un sitio de origen primario hacia otros tejidos donde crecen como tumores secundarios; este es el principal problema de cncer. La metstasis refleja una falla en la interaccin clula clula. A continuacin, algunos cambios detectados en la superficie de clulas malignas: Alteraciones en la permeabilidad Alteraciones en las propiedades de transporte Adhesin disminuida Incremento de la capacidad de aglutinacin de muchas lecitinas Alteraciones en las actividades de una gran nmero de enzimas Alteraciones de la carga elctrica de la superficie Aparicin de antgenos nuevos Prdida de ciertos antgenos Alteraciones de las cadenas de oligosacridos constituyentes de glucoprotenas

BIOLOGA GENERAL, CELULAR Y MOLECULAR

23

Universidad Nacional Jos Faustino Snchez Carrin

Facultad de Medicina Humana

Cambios en los componentes de glucolpidos

4. Alteraciones en protenas que son canales inicos: La mayora de las enfermedades relacionadas con las membranas se van encontrar en las protenas y de estas en un tipo de protenas muy especial las que funcionan como canales a diferentes iones; el conjunto de estas enfermedades relacionadas con los canales inicos se denominan canalopatas o canalopatologas. Las alteraciones en las funciones de los canales inicos pueden conducir a graves enfermedades del sistema nervioso o del sistema muscular, incluyendo al corazn.

BIBLIOGRAFIA Alberts,

et

al.

(2002).

Molecular

Biology

of

the

Cell.

4th

edition.GarlandPublishing. De Robertis, E.; Hib, J.; (2001). Fundamentos de Biologa Celular y Molecular. 3 Edicin. El Ateneo. Bs.As. Harper,H. (1995). Manual de Bioqumica. Ediciones El Manual Moderno. Karp, G. (1998). Biologa Celular y Molecular. Ed. Mc Graw Hill- Interamericana. Mxico. Lodish, H.; (2001). Biologa Molecular de la Clula. 4 Edicin. Ed. Panamericana. Bs.As.

BIOLOGA GENERAL, CELULAR Y MOLECULAR

24