Ivonne Bernier P CEO IBLAB

Industria de cosmticos y de tocador. Mtodos de ensayo microbiolgicos para productos cosmticos . NTC 4833

 ISO 21148, Cosmetics Microbiology General instructions for microbiological examination. ISO 21149, Cosmetics Microbiology Enumeration and detection of aerobic mesophilic bacteria. ISO 16212, Cosmetics Microbiology Enumeration of yeast and mould ISO 18415, Cosmetics Microbiology Detection of specified and non-specified microorganisms. ISO 22716, Cosmetics Good Manufacturing Practices (GMP) Guidelines on Good Manufacturing Practices. ISO 29621, Cosmetics Microbiology Guidelines for risk assessment of microbiologically low risk products1)

 ISO 24444 Test de proteccin solar in vivo ISO 22717 P. aeruginosa ISO 22718 S. aureus

 Bacterias mesfilas, mohos y levaduras (crecimiento en un rango de temperatura entre 15 y 40C),capaces de crecer en aerobiosis. Cosmticos en general < 1000 UFC/g mL Cosmticos para beb y rea de los ojos (1) < 100 UFC/g mL
(1) nios menores de 3 aos, y aquellos a ser usados en el rea de los ojos

 Formas cosmticas lquidas solubles en agua Formas cosmticas slidas y polvos Formas cosmticas lquidas semislidas, slidas de base oleosa no miscibles en agua

 Caldo de dilucin Agua peptonada tamponada Agar TSA Bacterias Mesfilas Agar Sabouraud al 4% _ Mohos Agar Extracto de levaduras Levaduras Agar Manitol sal rojo de fenol _ S. aureus Agar Baird Parker S. aureus Agar Vogel Johnsosn S. aureus

 Agar TBX E. coli Agar Macconkey Agar EMB Agar VRBA Agar Cetrimide Pseudomonas sp y P. aeruginosa Caldo TSB Medio de SIM Caldo Lethen modificado

Peso de muestra 10 g o 10 mL

Diluyente 90 mL Caldo Casoy

Medio de cultivo Agar Cetrimide + suplementos

Microorganismo P. aeruginosa

10 g 0 10 mL

Caldo Lauril sulfato + MUG 90 ml Caldo Casoy Agar MacConkey Agar EMB 90 mL Caldo Casoy Agar sabourud al 4% glucosa

E. coli

10 g o 10 mL

Mohos Coliformes

Microorganismo Bacterias Mesfilas S. aureus P. aeruginosa Mohos y Levaduras Coliformes Clostridium SR

Presencia/ Ausencia P/A P/ A

Recuento No. Colonias* FD

No. Colonias* FD No. Colonias*FD No. Colonias * FD en tubo (esporas) Placa

 La norma nombra el TBX pero no lo utiliza en los recuento de E. coli No se nombra el caldo lauril sulfato con MUG No se nombra los medios para Clostridium sulfito reductor

 Trminos y definiciones Manejo de las muestras Instalaciones Equipos Personal Preparacin y manejo de muestras Muestreo de los cosmticos
Diluyentes Neutralizantes Medios de cultivo

 Tcnicas de recuento en placa Tcnicas por FM Preparacin y calibracin de los inculos

Microorganismo Mohos y Levaduras

Medio de cultivo Agar Sabouraud SDCA Agar Patata dextrosa Agar GP glucosa peptona Agar Extracto de malta

Tcnica R placa FM

Neutralizante Caldo caseina+lecitina polisorbato 20

Recuento en placa
Peso de muestra 1g o 1mL Diluyente 9mL Dilucin de muestra 10-1 Siembras en profundidad : 1mL Siembra en superficie : 0,1mL

 Recuento por FM Membrana de 0,45m Peso muestra 1g o 1mL Filtrar y lavar membrana

 Validacin de la tcnica por recuento en placa Validacin de la tcnica por FM Validacin del inculo Validacin del neutralizante

 Principio
Enriquecimiento usando un caldo no selectivo Aislamiento e identificacin Hacer neutralizacin para inhibicin microbial

Medio de cultivo Agar casena (SCDA) Agar casena (SCDA) Agar Casena (SCDA)

Peso de Muestra 1g 1mL/ 9 mL diluyente 1g 1mL/ 9 mL diluyente 1g 1mL/ 9 mL diluyente

Microorganismo P. aeuriginosa E. coli S. aureus

 Siembra en placa a 32,52,5C por 726 h Siembra por FM Deteccin de bacterias por enriquecimiento
Incubacin en caldo no selectivo Aislamiento a un agar selectivo

 Medios de enriquecimiento
Caldo Eugon LT 100 Medio de siembra:
Agar (SCDA) Agar TSA

 Enriquecimiento en medios no selectivos Siembra en medios selectivos

 Inoculacin a 32,52,5C por 20-72 h Siembra : Agar Cetrimide 32,52,5C por 48 h Identificacin bioqumica
Pruebas convencionales Pruebas miniaturizadas

 Enriquecimiento en medios no selectivos Siembra en medios selectivos

 Inoculacin a 32,52,5C por 20-72 h Siembra: Agar Baird Parker 32,52,5C por 24h Identificacin bioqumica
Pruebas convencionales Pruebas miniaturizadas

 Parte del concepto de crecimiento en Agar Plate Count para realizar las siembras para patgenos No incluye enriquecimiento para microorganismos patgenos

Hay que trabajar cada grupo de microorganismos independientemente Incluye enriquecimiento para microorganismos patgenos

 Medios de convencionales

cultivo

Medios de cultivo de difcil consecucin Incluye PB miniaturizadas Valida diluyente Valida neutralizante

Realiza PB convencionales Diluyentes Neutralizantes

PBX: (57 1) 416 63 01 Web Page: www.iblaboratorio.com Mail: contactenos@iblaboratorio.com