COD 12580 5 x 40 mL + 5 x 10 mL CONSERVAR A 2-8C Reactivos para medir la concentracin de LDH Slo para uso in vitro en el laboratorio clnico

LACTATE DEHYDROGENASE (LDH) LACTATO DESHIDROGENASA (LDH)

PIRUVATO CONTROL DE CALIDAD
Se recomienda el uso de los Sueros Control Bioqumica niveles I (cod. 18005, 18009 y 18042) y II (cod. 18007, 18010 y 18043), para verificar la funcionalidad del procedimiento de medida. Cada laboratorio debe establecer su propio programa de Control de Calidad interno, as como procedimientos de correccin en el caso de que los controles no cumplan con las tolerancias aceptables.

FUNDAMENTO DEL MTODO

La lactato deshidrogenasa (LD o LDH) cataliza la reduccin del piruvato por NADH, obtenindose lactato y NAD+. La concentracin cataltica se determina a partir de la velocidad de desaparicin del NADH, medido a 340 nm1,2. Piruvato + NADH + H+
LDH

Lactato + NAD+

COMPOSICIN
A. Reactivo: 5 x 40 mL. Tris 100 mmol/L, piruvato 2,75 mmol/L, cloruro de sodio 222 mmol/L, pH 7,2 B. Reactivo: 5 x 10 mL. NADH 1,55 mmol/L, sodio azida 9,5 g/L Nocivo (Xn): R22: Nocivo por ingestin. R31: En contacto con cidos libera gases txicos. S28.1: En caso de contacto con la piel lavar inmediata y abundantemente con agua.

CARACTERSTICAS METROLGICAS
Los datos siguientes se obtuvieron usando un analizador A25. Los resultados son similares a los del A15. Los detalles sobre los datos de evaluacin estn disponibles bajo solicitud. Lmite de deteccin: 40,5 U/L = 0,67 kat/L. Lmite de linealidad: 1250 U/L = 20,92 kat/L. Repetibilidad (intraserie):
Concentracin media 420 U/L = 7,00 kat/L 852 U/L = 14,20 kat/L CV 1,3 % 1,2 % n 20 20

CONSERVACIN
Conservar a 2-8C. Los Reactivos son estables hasta la fecha de caducidad indicada en la etiqueta, siempre que se conserven bien cerrados y se evite la contaminacin durante su uso. Indicaciones de deterioro: Reactivos: Presencia de partculas, turbidez, absorbancia del blanco inferior a 1,200 a 340 nm (cubeta de 1 cm).

Reproducibilidad (interserie):
Concentracin media 420 U/L = 7,00 kat/L 852 U/L = 14,20 kat/L CV 2,0 % 2,7 % n 25 25

PREPARACIN DE LOS REACTIVOS

Reactivo de Trabajo: Vaciar el contenido del frasco B en el frasco A. Agitar suavemente. Si se desea preparar otros volmenes, mezclar en la proporcin: 4 mL de Reactivo A + 1 mL de Reactivo B. Estable 2 meses a 2-8C.

MUESTRAS
Suero o plasma recogidos mediante procedimientos estndar. El suero o plasma debe separarse de los elementos celulares lo antes posible. No utilizar muestras hemolizadas. La lactato deshidrogenasa en suero o plasma es estable 2 dias a temperatura ambiente y 24 horas a 2-8C. Utilizar heparina como anticoagulante.

Veracidad: Los resultados obtenidos con este procedimiento no mostraron diferencias sistemticas cuando se compararon con un procedimiento de referencia. Los detalles de los experimentos de comparacin estn disponibles bajo solicitud. Interferencias: La hemlisis o la tarda separacin del suero ocasionan resultados elevados debido a la elevada concentracin de LD en los eritrocitos. La lipemia (triglicridos < 10 g/L) y la bilirrubina ( < 20 mg/dL) no interfieren. Otros medicamentos y sustancias pueden interferir3.

CARACTERSTICAS DIAGNSTICAS
La lactato deshidrogenasa se encuentra presente en todas las clulas del organismo aunque sus mayores concentraciones se hallan en el hgado, corazn, rin, msculo esqueltico y eritrocitos.

VALORES DE REFERENCIA
Temperatura de reaccin 25C 30C2 37C1 Adultos U/L 105-210 140-280 207-414 Kat/L 1,70-3,50 2,30-4,70 3,40-6,80

La concentracin de LDH en suero o plasma est aumentada en pacientes con enfermedad heptica, alteraciones renales, infarto de miocardio, muchas enfermedades malignas, distrofia muscular progresiva y en casi cualquier causa de hemlisis4,5. El diagnstico clnico no debe realizarse teniendo en cuenta el resultado de un nico ensayo, sino que debe integrar los datos clnicos y de laboratorio.

Los valores a 25C se han obtenido a partir de los de 30C mediante un factor de conversin. Estos valores se dan nicamente a ttulo orientativo; es recomendable que cada laboratorio establezca sus propios intervalos de referencia.

BIBLIOGRAFA
1. Sociedad Espaola de Qumica Clnica, Comit Cientfico, Comisin de Enzimas. Mtodo recomendado para la determinacin en rutina de la concentracin cataltica de lactato deshidrogenasa en suero sanguneo humano. Quim Clin 1989; 8: 57-61. 2. Scientific Commitee. Recommandations pour la mesure de la concentration catalytique de la lactate deshidrogenase dans le serum humain a 30C. Ann Biol Clin 1982; 40: 87-164. 3. Young DS. Effects of drugs on clinical laboratory tests, 4th ed. AACC Press, 1995. 4. Tietz Textbook of Clinical Chemistry, 2nd edition. Burtis CA, Ashwood ER. WB Saunders Co., 1994. 5. Friedman and Young. Effects of disease on clinical laboratory tests, 3th ed. AACC Press, 1997.

CALIBRACIN
Se recomienda el uso de un calibrador con base de suero (Calibrador de Bioqumica, cod. 18011).

PARMETROS DEL ENSAYO A25

GENERAL Test name Analysis mode Sample type Units Reaction type Decimals Replicates Name of assoc. constituent Type of reading Sample Reagent 1 Reagent 2 Washing Predilution factor Main Reference Reading 1 Reading 2 Reagent 2 Postdilution factor Type of calibration Calibrator replicates Blank replicates Calibration curve Blank absorbance limit Kinetic blank limit Linearity limit LDH kinetic mon. serum U/L decreasing 0 1 monoch. 6 300 1.2 340 60 s 195 s 2 multiple 3 3 1.200 1250

A15
LDH kinetic mon. serum U/L decreasing 0 1 monoch. 6 300 1.2 340 72 s 216 s 2 multiple 3 3 1.200 1250

PROCEDURE Volumes

Filters Times

CALIBRATION

OPTIONS

M12580c-0606

BioSystems S.A. Costa Brava 30, Barcelona (Spain)

ISO 13485 - TV Rheinland - Reg.: SX 60010383 0001 ISO 9001 - TV CERT - Reg.: 01 100 6696

07/2006