EDICIN N 131

Los insectos que afectan a las plantas Se han descripto recientemente casi un milln de especies de insectos en el planeta, de los cuales casi la mitad se alimentan de plantas. En los 400 millones de aos de co-evolucin entre plantas e insectos, los insectos han desarrollado diferentes estrategias de alimentacin herbvora. A su vez, las plantas han co-evolucionado desarrollando numerosos mecanismos de defensa contra el ataque de los insectos. En la actualidad, se estima que las prdidas en la produccin agrcola debido al ataque de insectos, se encuentran entre un 20% y un 40% de las cosechas. Si bien existen mtodos para el manejo integrado de plagas, hoy en da la biotecnologa moderna tiene un papel fundamental en el desarrollo de nuevas tecnologas para hacer frente al ataque de las plantas por los insectos. Caractersticas de los insectos Los insectos son el grupo de animales invertebrados con mayor xito en la Tierra. Se caracterizan por tener cuerpos segmentados que pueden estar fusionados a apndices especializados para caminar, nadar, morder, masticar, beber y/o aparearse. Los diferentes segmentos forman la cabeza, el trax y el abdomen. Los insectos tambin se destacan por la presencia de un caparazn externo denominado exoesqueleto que contiene quitina y protege a los insectos de sus depredadores y de la posible deshidratacin. Los insectos terrestres respiran a travs de unos conductos de aire llamados trqueas. Estos tubos ventilan continuamente todos los segmentos del cuerpo y el flujo de aire se encuentra regulado por la apertura y cierre de poros presentes en el exoesqueleto, los espirculos. El sistema circulatorio es abierto con un corazn del tipo tubular. La sangre es transportada por vasos sanguneos que irrigan a todas las clulas, y retorna al corazn por medio de aberturas especializadas con vlvulas. Los insectos poseen un sistema nervioso muy complejo que debe coordinar movimientos y actividades muy precisas como volar, aparearse en pleno vuelo o construir telaraas. A lo largo de su ciclo de vida, la mayora de los insectos atraviesan por diferentes estadios. Los distintos cambios conforman un proceso denominado metamorfosis. De acuerdo al tipo de insecto, la metamorfosis puede ser completa o incompleta (Figura 1). Por ejemplo, el saltamontes tiene transformaciones incompletas ya que pasa por varios estadios hasta transformarse en adulto, sin pasar por una etapa de inactividad o una etapa donde deja de alimentarse. En las diferentes etapas, los saltamontes se parecen al adulto con la diferencia que en los estadios tempranos no posee alas, y cambian las proporciones del cuerpo. Sin embargo, cerca del 90% de los insectos tiene una metamorfosis completa. En este caso, los adultos son radicalmente diferentes a sus formas larvarias. Adems presentan estadios de inactividad donde dejan de comer y el insecto se inmoviliza pasando por una etapa de crislida. Durante este perodo, la larva sufre una reorganizacin morfolgica y fisiolgica completa para dar
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origen al insecto adulto. Los insectos que atraviesan este tipo de metamorfosis presentan cuatro formas diferentes a lo largo de su ciclo biolgico: huevo, larva, crislida (o pupa) y adulto.

Figura 1: Esquema de la metamorfosis completa de una mariposa (izquierda) y de la metamorfosis incompleta de una langosta (derecha). Fuente: www.deza.admin.ch/ressources/resource_es_97820.pdf

Tipos de insectos Existen diversos grupos de insectos que afectan y atacan a las plantas (figura 2), entre ellos: - Los Colepteros: comprende a escarabajos y gorgojos y corresponde al orden ms grande en el reino animal (representan el 40% de los insectos). La mayora de ellos viven en el suelo y tienen hbitos nocturnos. Tienen diversas formas y tamaos y son de color marrn o negro, aunque puede haber algunos de color metlico. Una de las caractersticas ms importante y destacada de este grupo es que, si bien poseen dos pares de alas, el primer par se encuentran endurecido formando los litros. Estas estructuras protegen al primer par de alas membranosas que son responsables del vuelo. Algunos Colopteros son insectos controladores, como la mariquita (Coccinella septempunctata), mientras que otros son insectos-plaga (por ejemplo los pertenecientes al gnero Diabrotica). - Los Lepidpteros: es el segundo grupo ms importante de insectos. Incluye a las polillas que se desplazan de noche y las mariposas que vuelan de da. Se caracterizan por la presencia de dos pares de alas membranosas grandes y ojos compuestos. La mayora de los insectos de este grupo son insectos plaga. Tanto los individuos adultos como las larvas devoran hojas, flores y frutos, y producen importantes prdidas econmicas a la agricultura. Un ejemplo de insecto de este grupo es el barrenador del tallo (Diatraea saccharalis, figura 2d). En su estadio larvario o de oruga se puede alimentar de hojas y tallos de la planta de maz produciendo galeras dentro de los tallos. Estas galeras destruyen los haces vasculares de la planta provocando una prdida en el rendimiento. Adems, indirectamente, esto produce un debilitamiento de la planta que puede causar que los tallos se quiebren. - Los Dpteros: a este grupo pertenecen las moscas y los mosquitos. Se caracterizan porque sus alas posteriores, llamadas halterios, se han reducido de tal manera que slo poseen un par de alas
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membranosas verdaderas. Los halterios les sirven a estos individuos para darle direccin y estabilidad durante el vuelo. Al igual que los Lepidpteros, estos organismos poseen ojos compuestos. Si bien la mayora son controladores biolgicos o insectos benficos (mosca Archytas marmoratus, usada en la caa de azcar), existen algunos que son insectos plaga, como la mosca de la fruta o mosca del Mediterrneo (Ceratitis capitata). Esta mosca, debido a su gran adaptabilidad y a su amplio rango de plantas a las que puede atacar (ctricos, principalmente naranjas y mandarinas, frutos de carozo, frutos de pepita, y otros cultivos), es una de las plagas ms destructivas del mundo. Las moscas adultas son de color amarrillo, blanco y negro, y miden entre 4 y 5 mm de longitud. Por lo general, las hembras adultas depositan sus huevos en las frutas y una vez que nacen se alimentan de la pulpa del fruto causando su descomposicin.

- Los Sternorrhyncha: incluye a las moscas blancas (figura 2c), los pulgones y cochinillas.

Figura 2: a) Representacin esquemtica: filogenia de insectos (Hogenhout & Bos, 2011) b) Polilla de dorso de diamante (Plutella xylostella) en su estadio de oruga. c) Mosca blanca. d) Chinche verde (Piezodorus lituratus). e) Barrenador del tallo (Diatraea saccharalis) en su estado de polilla. Fuente: www.plantwise.org.

Estrategias de alimentacin de los insectos Conocer las diferentes formas en que los insectos se alimentan de las plantas permite desarrollar controles y estrategias de combate. De acuerdo con la fisiologa y la morfologa de sus piezas bucales, las estrategias de alimentacin pueden variar significativamente. Los insectos herbvoros se pueden alimentar de hojas, tallos, frutos, races, granos e, incluso, de savia y nctar. Segn los hbitos alimenticios de los insectos, se los agrupa en masticadores, chupadores, minadores y barrenadores.

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La mayora de los individuos pertenece al grupo de los masticadores y presenta aparatos bucales con mandbulas y maxilas adaptadas para cortar y triturar hojas y otras partes vegetales. En general, los daos causados por estos insectos se observan en los mrgenes de las hojas ya que se encuentran rotos o desiguales. Algunos ejemplos de este grupo son los escarabajos y sus larvas, los gusanos de seda, las larvas de algunas polillas (orugas) y los grillos. Otro grupo importante son los insectos chupadores, que insertan un tipo de trompa o pico (probscide) en los tejidos de las hojas, tallos, brotes, flores o frutos y chupan los jugos de la planta (savia o nctar). Este aparato bucal est adaptado solo a la ingestin de alimentos lquidos o alimentos que pueden disolverse con la saliva. Algunos ejemplos de insectos chupadores son los fidos (pulgones), las chinches y las moscas de la fruta. Un reducido nmero de especies se agrupan en lo que comnmente se llaman insectos minadores. Estos insectos son lo suficientemente pequeos como para alojarse y encontrar sitios confortables y con abundancia de alimentos entre ambas epidermis de las hojas. Dado que se alojan dentro de los tejidos vegetales, muchas veces los pesticidas no logran hacer su efecto y, como consecuencia, son plagas difciles de combatir. Por ltimo, se encuentra el grupo de los barrenadores. Estos organismos son insectos que durante su etapa larval o de adulto pasan gran parte del tiempo alimentndose en algn lugar debajo de la corteza de un rbol o taladrando el tallo de una planta. Pueden comer el interior de troncos, ramas, tallos o frutos haciendo grandes galeras en su interior. Algunos ejemplos de este tipo de individuos son los escarabajos, las termitas y las larvas de la polilla Diatraea saccharalis.

Mecanismos de defensa de las plantas A lo largo de los aos las plantas han desarrollado una gran variedad de barreras de defensa, constitutivas e inducibles, para reducir el dao por el ataque de los insectos. Estas estrategias incluyen tanto barreras fsicas (capas de cera, cutcula vegetal, tricomas y espinas) como barreras moleculares (metabolitos secundarios y protenas). Las barreras fsicas de mayor importancia son: Pared celular: las clulas vegetales tienen una pared celular que contiene, en muchos casos, una sustancia llamada lignina. La lignina es el compuesto mayoritario en la madera y en muchas paredes celulares. La lignina acta como una barrera de defensa dificultando el ataque de insectos masticadores. Sustancias grasas: muchas veces se observan plantas con hojas brillosas. Estas hojas poseen sustancias grasas como la cutina, la suberina y las ceras que se depositan en la pared vegetal promoviendo la inhibicin de la alimentacin y de la oviposicin de ciertos insectos. Tricomas: son clulas de la epidermis que se encuentran en la parte area de las plantas. Se especializan en la proteccin fsica y qumica contra organismos herbvoros. Por ejemplo, los tricomas de las plantas de soja (Glycine max) evitan que los huevos de insectos alcancen la epidermis de las hojas y, como consecuencia, una vez que las larvas nacen, se mueren de hambre ya que no tienen alimento disponible. Los tricomas con forma de garfio de las plantas de chauchas (Phaseolis vulgaris) atraviesan los cuerpos de las orugas a medida que se mueven en la superficie
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de la hoja. Tambin existen tricomas glandulares en las plantas de tomate y papa que secretan aceites capaces de repeler afdos y otros insectos. Espinas: son hojas modificadas que actan como barrera fsica frente al ataque de insecto herbvoro. Resinas: se producen en la corteza de los rboles y evitan el ataque de ciertos insectos barrenadores que atacan la corteza. Adems de las barreras fsicas, las plantas tienen mecanismos de defensas que como respuesta final producen compuestos txicos, repelentes o anti-digestivos para los insectos. Estos mecanismos se encuentran altamente regulados y son inducidos cuando la planta es atacada. En primer lugar, las plantas deben ser capaces de distinguir las heridas producidas por daos mecnicos de las heridas generadas por el ataque de insectos herbvoros. Se cree que las clulas vegetales han evolucionado desarrollando la habilidad de percibir patrones y molculas sintetizadas por los insectos. Hasta el da de hoy estos compuestos se clasifican en dos grupos distintos: 1) elicitores qumicos provenientes de las secreciones orales o de los fluidos de la oviposicin 2) sustancias originadas a partir de patrones de dao especfico. Una vez que las plantas detectan que estn siendo atacadas por insectos, reconfiguran rpidamente su metabolismo induciendo una cascada de seales que terminan en la sntesis de diversos compuestos de defensa. Entre los cambios celulares que se producen cabe destacar la incorporacin de iones calcio al medio intracelular, la activacin de protenas quinasas, la produccin de especias reactivas del oxgeno y del nitrgeno y el aumento en la concentracin de ciertas hormonas vegetales (etileno, cido jasmnico y cido saliclico; ver Cuaderno n 128). Una de las defensas moleculares ms importantes es la sntesis de pequeas protenas llamadas inhibidores de proteinasas (IPs). Estas protenas, al ser comidas, inhiben las proteinasas que se encuentran en el aparato digestivo del insecto. Esto produce una severa deficiencia de aminocidos que afecta de forma negativa el crecimiento y desarrollo del organismo. Sin embargo, muchas veces, esta barrera de defensa puede ser bloqueada por el insecto al producir enzimas que inhiben la funcin de las protenas IPs. Las plantas tambin producen metabolitos secundarios que juegan un rol importante en la defensa contra el ataque de insectos herbvoros. Numerosos estudios han demostrado que las plantas sintetizan una gran variedad de pequeas molculas con efectos txicos o antinutritivos para los insectos. Algunos de estos compuestos con caractersticas defensivas e insecticidas son alcaloides, terpenoides, taninos, saponinas y glucosinolatos. Todos estos cambios fisiolgicos y moleculares tambin se producen en otras partes de la planta que no fueron atacadas. En estas reas los mecanismos de defensa se desencadenan de forma preventiva por cualquier posible ataque o dao. Tambin se puede gatillar una segunda barrera de proteccin indirecta que involucra la produccin de compuestos voltiles y de nctar extrafloral para atraer a organismos predadores que se alimentan de los insectos no benficos. Consecuencias del ataque de insectos en las plantas Muchas veces los daos que producen los insectos en las plantas pueden ayudar a identificar el tipo de plaga que las est afectando. En general estos daos dependen del tipo de alimentacin del
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insecto. Como se coment previamente, estos organismos pueden atacar y daar hojas, tallos, races, flores, frutos, semillas y hasta tejidos internos. Las consecuencias del ataque de insectos en las plantas varan segn la severidad del dao y segn la estructura vegetal afectada. Tanto plantas, como rboles y arbustos pueden ser atacados en las diversas estructuras que presentan sus follajes. Muchos organismos masticadores y minadores daan a las plantas mediante la defoliacin y la alimentacin de sus hojas. Los daos que se producen pueden ser muy diversos (figura 3 a y b), pero las consecuencias son muy similares. Por ejemplo, la reduccin de la capacidad de realizar la fotosntesis (ver Cuaderno n 106), la alteracin de los procesos de transpiracin, la disminucin en el transporte de nutrientes, el retardo en el crecimiento y finalmente la posible muerte de la planta. Por ejemplo, la Diabrotica speciosa adulta se alimenta de hojas de numerosos cultivos como el maz, la soja, la alfalfa y el girasol reduciendo significativamente la produccin de estos cultivares. Tambin hay insectos masticadores que cortan pedazos de hojas y producen pequeas perforaciones en la lmina foliar de rboles y arbustos. Adems ciertos organismos pueden perforar troncos y ramas de rboles interfiriendo con el flujo de la savia y debilitando su estructura. Los insectos barrenadores y chupadores daan preferentemente estructuras internas de las plantas. Los chupadores se alimentan de la savia de las hojas, las vainas y los tallos. Estos individuos no hacen huecos en las hojas, pero en general producen su decaimiento y un color amarillamiento. Los insectos barrenadores, como las larvas de Diatraea saccharalis, penetran los tallos de ciertas plantas (como maz y sorgo) y construyen galeras que producen la disminucin del rendimiento del cultivo (figura n 3 c). Estas galeras daan negativamente los haces vasculares y producen una disminucin en la conduccin de nutrientes y en la estructura y rigidez de los tallos. El efecto indirecto es el quiebre de las plantas debido al debilitamiento de los tallos. En el caso de los barrenadores de los rboles, las consecuencias son similares. Aquellos barrenadores que slo comen la corteza externa solo producen un dao de tipo estructural. Sin embargo, los barrenadores que se alimentan de la corteza interna y del cambium, al destruir partes vitales de los rboles, los terminan matando rpidamente. Los insectos barrenadores y chupadores tambin son transmisores (vectores) de varias enfermedades que afectan a las plantas, especialmente de varias especies de virus y bacterias. Adems, los daos que producen son una va de entrada para hongos y otros patgenos. Por ltimos, estn los insectos que afectan y daan las flores, los frutos y las semillas de ciertas plantas, y las destruyen por completo para consumir su tejido interno. Frecuentemente, este tipo de daos conlleva a la descomposicin y a la cada prematura de flores y frutos, disminuyendo el potencial reproductivo. Un ejemplo de este tipo de insectos es la mosca de la fruta o del Mediterrneo (figura 3d).

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Figura 3: Consecuencias del ataque de insectos en las plantas. a) Hoja de la planta de algodn atacada por insectos masticadores y minadores (flecha) (foto de C. Mares) b) Ataque de insectos masticadores que comen tejido foliar desde afuera (Arguedas, 2006). c) Galera producida en el tallo de maz como consecuencia del ataque de la larva de Diatraea saccharalis (foto Fava et. al, 2004). d) Larvas de la mosca de la fruta atacando una naranja en descomposicin.

Controles en la agricultura Frente a la amenaza que representan los insectos para la agricultura, el ser humano ha desarrollado numerosas estrategias de control, prevencin y defensa de los cultivos. Las tcnicas ms utilizadas van desde el manejo tradicional del control de plagas hasta el desarrollo de plantas resistentes a insectos por tcnicas de ingeniera gentica (ver Cuadernos n 2, 4, 67). Algunas de las metodologas que hoy en da se ponen en prctica para combatir el ataque de insectos en las plantas son las siguientes: Manejo tradicional A lo largo de la historia de la agricultura el hombre ha desarrollado diversos mtodos para enfrentar las plagas que afectan a los cultivos. Comnmente este tipo de mtodos se denominan manejo integrado de plagas e incluyen el control preventivo, el control manual o mecnico, el control biolgico y el control qumico. El manejo preventivo, tambin llamado manejo cultural, consiste en manipular el campo para hacerlo menos favorable a la aparicin y supervivencia de plagas mediante la preparacin del terreno, el buen manejo de malezas, la planificacin de la poca de siembra y de riego, y la rotacin de cultivos. De esta manera se trata de destruir los reservorios de poblaciones de insectos antes y despus de sembrar. Adems, esta prctica interrumpe los movimientos de las
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plagas y hace ms vigorosa a la planta de forma que pueda resistir el ataque de estos organismos y evita fechas de plantacin que sean favorables para el desarrollo de los insectos. El manejo mecnico es uno de los controles ms difciles de realizar, sobre todo si el rea productiva es muy extensa. Consiste en la remocin de una plaga, con la mano o con alguna herramienta, en sus estados de huevo, de larva o de adulto. Adems se intenta retirar del campo las plantas enfermas o las partes vegetales afectadas por los insectos. Esta estrategia se implementa especialmente en cultivos de caf y pltanos, y es muy eficiente aunque es altamente intensiva en mano de obra y muy costosa. Otro control tradicional emplea otros organismos vivos para enfrentar a las plagas. Se llama control biolgico y utiliza insectos beneficiosos que se alimentan o completan su ciclo de vida a costa de otros insectos. Existen los insectos benficos depredadores y los parasitoides. Los benficos depredadores se alimentan directamente de un insecto (como las mariquitas o las baquitas de San Antonio que se alimentan de pulgones). Los parasitoides se alojan dentro de un insecto y lo comen hasta matarlo. El control biolgico incluye otras metodologas como es el uso de insecticidas biolgicos, que tienen como principal agente activo a un microorganismo o a un derivado de l. En general los plaguicidas biolgicos causan enfermedades en los insectos o los matan mediante la liberacin de compuestos txicos. El ejemplo ms conocido es el uso de la bacterias Bacillus thuringiensis (Bt). Esta bacteria es utilizada como insecticida microbiano ya que se caracteriza por la produccin de protenas cristalinas (protenas Cry) que matan de forma selectiva a un grupo especficos de insectos. Este insecticida se presenta como formulados vivos en agua, en aceite emulsionantes o en polvos. Al aplicar las bacterias al cultivo, stas quedan sobre la superficie de la planta y son ingeridas por los insectos que comen el follaje. Una vez dentro del sistema digestivo, las bacterias liberan las toxinas Cry que se activan y se adhieren al epitelio intestinal. Esto provoca la parlisis del sistema digestivo del insecto, que deja de alimentarse y muere a los pocos das. La aplicacin de las bacterias, va area o terrestre, tiene su mxima eficacia contra larvas jvenes de insectos. Esta bacteria es inofensiva para el hombre, mamferos y otros animales como pjaros. Por ltimo se encuentra el control qumico, que utiliza productos sintticos para combatir el ataque de plagas. Los plaguicidas sintticos son elaborados a travs de un proceso de sntesis qumica y usualmente son mezclas o formulaciones de varias sustancias que desempean funciones especficas. Los insecticidas qumicos son poco selectivos y afectan por igual tanto a plagas como a insectos benficos. Adems se pueden acumular en el medio ambiente por mucho tiempo y puede afectar a otras especies no blanco (otros animales, hombre, etc.). Biotecnologa y resistencia a insectos Durante los ltimos aos, el hombre ha venido desarrollando diversas estrategias biotecnolgicas que han permitido el menor uso de insecticidas, la disminucin en los costos de produccin, y mayores beneficios para el ambiente y para la salud de productores y consumidores. Si bien se han obtenido unas 100 especies vegetales genticamente modificadas resistentes a insectos, slo se han aprobado unas pocas (ver Cuadernos n 26, 99 y 111). La estrategia biotecnolgica ms ampliamente usada y comercializada para el desarrollo de cultivos resistentes a insectos es la tecnologa Bt. Esta tecnologa se basa en la expresin de genes derivados de la bacteria Bacillus thuringiensis que codifican toxinas especficas para ciertos tipos
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de insectos (lepidpteros y/o colepteros). Como se explic anteriormente, estas toxinas denominadas protenas Cry se activan en el sistema digestivo del insecto, se adhieren a su epitelio intestinal y provocan la parlisis de su sistema digestivo. Esto trae como consecuencia la indigestin del organismo, quien deja de alimentarse y muere a los pocos das. Mediante tcnicas de ingeniera gentica se ha podido desarrollar plantas que expresan estas toxinas en sus propios tejidos a partir de los cuales se alimentan los insectos. El primer cultivo transgnico resistente a insectos fue un maz Bt que expresaba una protena Cry (Cry1A (b)) que le confera resistencia a lepidpteros, en especial a las larvas de la polilla Diatraea saccharalis. Actualmente, se han aprobado otros cultivos resistentes a insectos que expresan otras toxinas Cry que permiten ampliar el espectro de control de muchas otras plagas. Adems del maz, se han aprobado plantas transgnicas Bt de algodn, papa, batata, arroz y rboles de lamo. Tambin se han identificado otras toxinas producidas por la bacteria Bacillus thuringiensis que presentan actividad insecticida. Estas protenas se denominan Cyt y VIP (protenas insecticidas vegetativas). Las primeras se producen durante la esporulacin de la bacteria y las segundas durante su crecimiento. Hasta el momento, no hay eventos comerciales de ambas toxinas. Existen otros genes identificados que se pueden utilizar como posibles fuentes para la generacin de resistencia contra insectos. Son genes que codifican para inhibidores de proteasas (IP), protenas de origen vegetal que presentan resistencia a una amplia gama de insectos (lepidpteros, colepteros y dpteros). Como se explic anteriormente, las protenas IPs son parte del sistema de defensa de las plantas y actan interfiriendo con el proceso digestivo de los insectos susceptibles afectando su crecimiento y desarrollo. El primer ejemplo desarrollado para estas protenas fue un arroz genticamente modificado que expresaba genes inhibidores de tripsina proveniente de la planta de caup. Si bien hasta el momento no se han aprobado ninguna planta con genes IP, se han transformado varias especies vegetales (arroz, tabaco, tomate y colza). El principal motivo del fracaso en el desarrollo de estas plantas es que se ha observado que estas protenas no siempre actan efectivamente como sustancias antinutritivas y muchas veces sus efectos son menores respecto de las protenas Bt. Finalmente, se han encontrado otros genes de resistencia a insectos de origen vegetal que actan en los mecanismos de defensa de las plantas frente al ataque de insectos. Entre ellos, los inhibidores de alfa amilasas y lectinas de ciertas legumbres. La toxicidad de las alfa amilasas ocurre mediante la inhibicin de la digestin de hidratos de carbono y la toxicidad de las lectinas es mediante la interaccin con glicoprotenas intestinales del insecto. Al igual que los inhibidores de proteasas, hasta el da de hoy no hay cultivares genticamente aprobados que expresen esas protenas. Refugios y cultivos Bt Los cultivos Bt desarrollados para el control de plagas han sido un xito en la agricultura. Sin embargo, su eficacia se ve reducida cuando los insectos generan resistencia (ver figura 4). Es por eso que siempre se debe considerar la aplicacin de refugios dentro de los cultivares. Los refugios son una pequea rea del campo donde se siembra un pequeo porcentaje del cultivo no Bt. Estas zonas proveen las condiciones ptimas para la supervivencia y el desarrollo de insectos susceptibles a las plantas Bt. De esta manera se evita la aparicin de insectos resistentes ya que se diluyen por cruzamiento y reproduccin con individuos susceptibles.
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Figura 4: Aparicin de individuos resistentes a insecticidas y/o cultivos Bt. Otra estrategia para evitar la aparicin de individuos resistentes es el apilamiento de genes. En este caso la planta expresa dos toxinas que tienen como blanco a un mismo tipo de insecto. Se ha demostrado que la accin combinada de varios genes que codifican protenas txicas resulta en un aumento en los niveles de resistencia comparado a lo esperado por el aporte de cada uno de ellos por separado. Esto se puede aplicar tanto a genes Bt como a genes que codifican otras protenas con actividad insecticida.

CONSIDERACIONES METODOLGICAS Este Cuaderno aborda diferentes conceptos que se puede trabajar en clase en los diferentes niveles de la educacin, adems del relativo especficamente a los mecanismos de defensa de las plantas y la intervencin de la biotecnologa. Uno de los primeros conceptos se vincula con el proceso de la evolucin y co-evolucin. En este punto es importante siempre tener en cuenta que el desarrollo de mecanismos para hacer frente a diferentes condiciones ambientales, ya sea el ataque de insectos, como la sequa o la adaptacin a las temperaturas, no implican una estrategia voluntaria de cambio como respuesta a las condiciones ambientales, sino un largo proceso de cambio basado en cambios genticos naturales y casuales, que favorecen la supervivencia del organismo portador de esa caracterstica y, por lo tanto, la continuidad y transmisin de ese rasgo a futuras generaciones. Bsicamente, se trata de analizar los diferentes procesos biolgicos bajo la mirada de la teora de la evolucin de Darwin. La biotecnologa moderna (mediante tcnicas de ingeniera gentica), se basa en el conocimiento de esos mecanismos biolgicos para lograr en menos tiempo y de manera controlada las modificaciones que hacen posible la adaptacin y la supervivencia de las especies afectadas.

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Este texto permite trabajar en clase la clasificacin de los animales. Los insectos son los animales ms predominantes en el Reino animal y es interesante analizar las caractersticas adaptativas que les permiten sobrevivir en su entorno, los mecanismos de defensa, la nutricin, la respiracin, la circulacin, su ciclo de vida y su alimentacin. Al igual que en el comentario anterior, es fundamental hacer hincapi con los alumnos en el hecho que las diferentes estrategias de alimentacin y los rganos que tienen estos organismos, no son una respuesta a los alimentos sino que se trata de un mecanismo de adaptacin y evolucin a largo plazo, basado en los cambios y en la seleccin natural (Darwin). Justamente es el tema de la alimentacin el que vincula a estos organismos con las tcnicas de ingeniera gentica aplicadas con el fin de lograr un efecto insecticida sin dao al ambiente y a otros organismos. Si bien los organismos tienen sus propios mecanismos de defensa contra agentes extraos, ya sean barreras fsicas como mecanismos fisiolgicos, en ocasiones no resultan suficientes y el dao puede ser importante, como es el caso de las cosechas atacadas por plagas y las prdidas que esto provoca a la actividad humana. Como se menciona en el texto, los mtodos para enfrentar las plagas no son nuevos y se han desarrollado a lo largo de los miles de aos que lleva la agricultura. Este punto es importante ya que, en ocasiones, se le adjudica a la biotecnologa moderna y a la ingeniera gentica procesos de cambio y efectos que, en realidad, son propios de la agricultura tradicional y llevan cientos de aos de aplicacin, mucho antes de la intervencin de la biotecnologa moderna. En este ejemplo del control de plagas que atacan a las plantas, los mecanismos de manejo preventivo, manejo mecnico y control biolgico, hacen uso de los propios recursos naturales para tratar el problema de las prdidas de la vegetacin. El control qumico, por su parte, usa productos sintticos que pueden tener un efecto nocivo si no se emplean de manera adecuada. Estos son mecanismos tradicionales, que no emplea tcnicas de ingeniera gentica. Este es un punto interesante ya que suele confundirse el uso de microorganismos o de sus productos, as como la hibridacin en plantas con tcnicas de ingeniera gentica. La agricultura tradicional, empleada hace miles de aos, tambin produce cambios genticos pero de manera ms azarosa y menos controlada. Un aspecto que es importante trabajar en el aula con los alumnos es que la biotecnologa moderna hace uso tambin de los recursos biolgicos y naturales existentes, pero el mecanismo para lograr los resultados es ms rpido y seguro. Por ejemplo, en lugar de aplicar un insecticida con bacterias Bacillus thuringiensis (Bt) rociando el campo, la biotecnologa moderna permite modificar de forma precisa, especfica y controlada a las propias plantas para que ellas mismas desarrollen la funcin insecticida, y esto evita el uso de insecticidas de forma masiva, evitando as el dao ambiental y de otras especies no especficas. La biotecnologa emplea los mismos recursos naturales, como son los propios genes de los seres vivos, para transmitir las caractersticas deseadas a los seres vivos de inters. Estos mismos mecanismos que se pueden emplear para conferir resistencia a las plantas frente a los insectos, se aplica para lograr cultivos resistentes a condiciones adversas como sequas, temperaturas muy elevadas o muy bajas, o para aportar mayor valor nutritivo o mayor rendimiento a diferentes cultivos. A diferencia de los mtodos tradicionales de manejo de los cultivos, la ventaja de la
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biotecnologa es que el producto es controlado, y evita un efecto inespecfico sobre otras especies que no son el objetivo. Por lo tanto, el tema trabajado en este Cuaderno referido a la biotecnologa aplicada al manejo de plagas mediante la modificacin gentica de los cultivos afectados, puede ser un ejemplo de las diferentes aplicaciones especficas y controladas de la biotecnologa, que benefician no slo al productor o al consumidor, sino que tienen un efecto ms amigable con el medio ambiente.

ACTIVIDADES Actividad 1. Completar la figura y repasar conceptos 1. Completar el tipo de insecto segn su alimentacin (puntos 1 y 2). 2. Enumerar 4 mecanismos de defensa de las plantas. 3. Explicar cada unos de ellos y cual elegira para una estrategia biotecnolgica.

Figura 5: Completar la figura Respuestas

Figura 5: Figura completa

"El Cuaderno de Por Qu Biotecnologa" es una herramienta didctica creada y desarrollada por el equipo pedaggico del Programa Educativo Por Qu Biotecnologa. Su reproduccin est autorizada bajo la condicin de que se aclare la autora y propiedad de este recurso pedaggico por parte del Programa Educativo Por Qu Biotecnologa.

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3. 1. Produccin de alcaloides: Estos son metabolitos secundarios que la planta produce frente al ataque de insectos. Son compuestos voltiles que tienen propiedades txicas una vez que son ingeridos. 2. Presencia de sustancias grasas: los compuestos como la cutina y las ceras son sustancias repelentes que evitan la puesta de huevos por parte de los insectos. Adems tienen propiedades antinutritivas que promueven la inhibicin de la alimentacin de estos organismos. 3. Sntesis de protenas IP: Son protenas que inhiben a las enzimas que tienen los insectos en el intestino (proteasas) y que son indispensables para la digestin de protenas. Al no poder degradar las protenas, el insecto tiene una deficiencia en aminocidos que impide su desarrollo. 4. Presencia de tricomas: son clulas especializadas en la epidermis de las hojas que tienen la funcin de proteger a las plantas del ataque de larvas de insectos. Muchas de estas estructuras tienen forma de garfio que permite que las orugas queden enganchadas en las mismas a medida que se mueven por la superficie de la hoja. Una estrategia biotecnolgica que utilizase un mecanismo de defensa de las plantas podra ser la sobre expresin de genes que codifican enzimas involucradas en la sntesis de compuestos alcaloides o de genes que codifiquen nuevas protenas IP.

Actividad 2. Anlisis de texto Leer y analizar el texto publicado el 12-08-2010 en la Seccin Novedades del sitio de ArgenBio (www.argenbio.org). Luego responder a las siguientes preguntas.

Genes de papa protegen al algodn de los insectos

Segn investigadores australianos, ciertas plantas, como la papa y el tabaco, poseen genes que pueden servir para proteger al algodn del ataque de insectos. Marilyn Anderson y sus colegas de la Universidad de La Trobe, en Melbourne, acaban de publicar un artculo en la revista Proceedings of the National Academy of Sciences, donde describen el potencial de los inhibidores de proteasas de controlar ciertos insectos. "Todas las plantas tienen estos inhibidores de proteasas. Forman parte de su mecanismo de proteccin natural contra el ataque de los insectos. Queramos ver si podamos usar los genes de inhibidores de proteasas para proteger al algodn", explic Anderson. En trabajos anteriores se haba encontrado que las flores de las plantas solanceas, como la papa y el tabaco, fabrican en altos niveles ciertos productos qumicos que son txicos a las plagas. Estos compuestos, llamados inhibidores de proteasas (IP), inhiben a las enzimas que tienen las larvas en el intestino, las proteasas, y que son indispensables para la digestin de protenas. Hace tiempo que los cientficos estn intentando introducir los genes de inhibidores de proteasas de tabaco en el algodn, con el objetivo de disminuir el ataque de las larvas, y as reducir el uso de insecticidas. Pero segn Anderson, sus estudios demostraban que si bien al principio el ataque de las plagas disminua, luego las larvas se adaptaban. Ahora, ella y su equipo dicen haber descubierto cmo evitar esta adaptacin y poder usar los genes de IP como una herramienta efectiva en el control de insectos. Segn los investigadores, al cabo de un tiempo, las larvas que atacaban al algodn empezaban a producir proteasas que no eran afectadas por las IP de tabaco. "Las larvas encendan genes para nuevas proteasas resistentes a los IP," explica Anderson. Entonces ella decidi estudiar estos genes nuevos, y analizar la estructura de las proteasas resistentes, en detalle. Luego buscaron IPs capaces de inhibir estas nuevas proteasas, y las encontraron, en las hojas de la planta de papa. Anderson y su equipo prob entonces transformar plantas de algodn con el gen de tabaco, con el de papa, o con ambos al mismo tiempo, y estudi el desempeo de las plantas transformadas. "Vimos que las plantas que tenan ambos genes de IP eran mejores, seala Anderson. Segn la investigadora, los estudios a campo realizados en Queensland mostraron que los dos genes juntos aumentan el rendimiento del algodn en un 21%, mientras que con los genes de tabaco anteriores no mostraban un efecto sobre el rendimiento. La idea adems es combinar estos genes con los Bt que se usan actualmente para controlar los lepidpteros en algodn. Segn otros investigadores australianos, aunque es necesario hacer ms estudios para demostrar el potencial de estos genes para proteger al algodn de los insectos, la posibilidad de usarlos juntos, e incluso combinados con los genes Bt, es muy interesante.

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Responder las siguientes preguntas: a) Cul fue la estrategia de los autores para generar resistencia a insectos en plantas de algodn? b) Cul fue el problema que los investigadores encontraron en su estrategia? c) Cul fue la solucin? d) Qu otra estrategia le podra aconsejar a los investigadores para evitar la aparicin de individuos resistentes? Respuestas a) La estrategia fue introducir en las plantas de algodn genes de inhibidores de proteasas de tabaco, con el objetivo de disminuir el ataque de larvas de insectos y el uso de insecticidas. b) El problema con el que se encontraron los investigadores fue la aparicin de insectos resistentes. Despus de haber transcurrido un cierto tiempo las larvas se adaptaban y no eran susceptibles a la accin de las protenas IP. Segn los investigadores, los insectos que atacaban al algodn empezaban a producir proteasas que no eran degradadas por las IP de tabaco. c) La solucin fue buscar nuevas IPs capaces de inhibir estas nuevas proteasas. La estrategia fue el apilamiento de genes. Los investigadores probaron generar plantas de algodn con el gen de tabaco, con el de papa y con ambos al mismo tiempo. Luego observaron que las plantas que tenan ambos genes de IP eran mejores y que aumentan el rendimiento del algodn en un 21%. d) Otra estrategia podra ser sembrar reas de refugios para evitar la aparicin de insectos resistentes. Adems como ellos bien lo proponen, se podra combinar y apilar con genes Bt que actualmente se usan para controlar lepidpteros en algodn. Actividad 3. Analizando como ingenieros agrnomos. 1. Observar la siguiente figura, analizar y responder.

Figura 6: Campo en el norte de la provincia de Buenos Aires sembrado con maz.

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a) Qu diferencias observa entre las plantas de maz de la izquierda y de la derecha? b) Qu zona correspondera a maces Bt y que zona correspondera a maces convencionales? c) Qu posible plaga los ha afectado de tal manera de quebrar sus tallos? Explique. d) Qu otras estrategias tradicionales se podra llegar a usar para combatir esta plaga? Respuestas a) Los maces del campo de la derecha se encuentran todos cados con sus tallos quebrantados sin mazorcas (choclos) por cosechar. Esta zona del campo seguramente fue atacada por alguna plaga de insectos. En cambio los maces de la izquierda, si bien estn tambin secos y listos para ser cosechadas, son plantas erguidas y vigorosas que han podido desarrollarse y producir granos. b) La zona de la izquierda correspondera a maces Bt y la de la derecha a maces convencionales. c) La plaga que seguramente atac a los maces del campo de la derecha corresponde a insectos barrenadores. Una de las plagas de insectos barrenadores ms importantes son las larvas la polilla Diatraea saccharalis. Estas se alimentaron de los tejidos internos de los tallos produciendo galeras en los mismos. Estas galeras destruyeron los haces vasculares de la planta provocando el quebrado de las plantas y las disminucin del rendimiento. d) Otras estrategias tradicionales para hacer frente a esta plaga podran ser aplicar controles preventivos y controles qumicos. En especial en los controles preventivos se tiene que seleccionar y preparar el terreno (sin malezas) y tener en cuenta las fechas de siembra y riego. Adems podra estar acompaado de aplicaciones de insecticidas qumicos para ampliar el espectro de accin. Igualmente la aplicacin de estos plaguicidas debe ser medida y prudencial dado que son nocivos y pueden generar resistencia en los insectos.

MATERIAL DE CONSULTA 1. Clasificacin de los animales. Actividades interactivas. http://www.juntadeandalucia.es/averroes/ceiplopezmayor/images/flash/hot%20potatoes/web_mj ose/animales.htm 2. http://www.rena.edu.ve/primeraetapa/Ciencias/invertebra.html Animales Invertebrados. Red Escolar nacional de Venezuela. 3. Resistencia a insectos y nematodos. Materia Agrobiotecnologa. FCEN-UBA. http://www.fbmc.fcen.uba.ar/fbmcespanol.html 4. http://www.botanical-online.com/plagasenfermedadesdelasplantas.htm Plagas de las Plantas. 5. Curtis H. y Barnes N. (1997) Invitacin a la Biologa. Edicin Panamericana. Quinta edicin. Argentina. 6. Fava F. D., J. M. Imwinkelried y E. V. Trumper. (2004). Proyecto Nacional de Agricultura Sustentable: Manejo del Barrenador del Tallo de Maz. Ediciones INTA, boletan 6, I.S.S.N. 16682882.
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7. Mara Antonia Muoz de Malajovich. (2006). Biotecnologa. Universidad Nacional de Quilmes Editorial. Argentina. 8. Dalia Lewi y Clara Rubinstein. (2011). Parte V Capitulo: Obtencin de plantas resistentes a insectos. Biotecnologa y Mejoramiento Vegetal II. Ediciones INTA.

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