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PRACTICA_3_COPROCULTIVO

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UNIVERSIDAD NACIONAL AUTÓNOMA DE MÉXICO FACULTAD DE ESTUDIOS SUPERIORES “ZARAGOZA” CARRERA DE MEDICO CIRUJANO

LABORATORIO DE MICROBIOLOGIA MODULO DIGESTIVO NOMBRE DE LOS ALUMNOS:

CISNEROS PELCASTRE MARIANA GUADALUPE CRUZ ESCUTIA GABRIELA ESPINOSA CURIEL YOSANDI BARBARA RIVERA MEZA CESAR VALDES ROMERO YUSAHANDI SARAI

GRUPO: 1305

un vaso de cama o un recipiente cualquiera. QUE VA DENTRO DEL EQUIPO. el cual consiste en un MEDIO DE TRANSPORTE CON UN HISOPO. informe al laboratorio el tratamiento que está recibiendo. Cualquier intento por aislar bacterias patogenas de las heces implica la separación de las especies patógenas. por ejemplo Agar EMB. Agar S-S. La importancia relativa de estos grupos tiene grandes discrepancias en las distintas partes del mundo. Puede ser un plato. microorganismos entéricos grannegativos y S. es preferible realizar un hisopado rectal. debe pedir previamente al laboratorio el material necesario. las Salmonellas y las campilobacterias. que debe . Las heces y los raspados rectales son los especimenes de que se dispone con mayor facilidad. En caso de hacer la recolección en su casa. moco o helmintos en la inspección somera inicial. Instrucciones para la Toma de la Muestra 1. Agar McConkey. estreptococos). ANTECEDENTES ESPECIMENES. Debe recoger las heces en la forma más estéril posible. En caso necesario (como en niños). Guarde este material en un sitio fresco fuera del alcance de los niños. Los microorganismos con mayor prevalencia son los anaerobios ( Bacteroides. La muestra puede ser recogida en su casa o en el laboratorio. Se suspenden los especímenes en un caldo selectivo como el Caldo de Tetrationatoy se cultivan sobre medios ordinarios así como en medios selectivos diferenciales. En caso que esto no sea posible. usualmente a través del empleo de medios selectivos diferenciales y de cultivos enriquecidos. los fermentadores lentos de la lactosa. bácilos grampositivos. las toxinas ( de: estafilococos. faecalis. Obtenga la muestra antes de todo tratamiento con antibióticos. las Shigellas. Debe anotarse la presencia de sangre.. Escherichia coli toxígena). Lo más importante es que hayan sido lavados con agua y jabón y luego con abundante agua hervida. vibriones. 2. 3. pero no pueden utilizarse para diferenciar las bacterias entéricas patógenas de las de la flora normal. Los frotis teñidos pueden revelar una prevalencia de leucocitos y de ciertos microorganismos anormales como Cándida o estafilococos. Las principales causas de transtornos gastrointestinales agudos incluyen a los virus.INTRODUCCION La porción inferior del intestino tiene una flora bacteriana normal excesivamente amplia. bacilos entéricos gramnegativos invasores. para permitir la separación de los bacilos gramnegativos que no ferementan la lactosa de otras bacterias entericas comunes.

ser tomado por el personal entrenado. Favor tener en cuenta las siguientes precauciones:  o destapar el tubo. en especial Salmonella. En lactantes. ni del recipiente. Este método posee la propiedad de inhibir o destruir el crecimiento de Salmonella y Shigella. pueden utilizarse supositorios de glicerina pediátricos. Una vez recogidas las heces. sangre y restos celulares.       Medios de cultivo Para facilitar el aislamiento de bacterias entéricas patógenas se utilizan medios de enriquecimiento y medios selectivos. asegúrese de impregnar bien el hisopo. Contiene. En niños. Introduzca el hisopo hasta el fondo del tubo con el medio gelatinoso. sales biliares y yodo. no tocar con los dedos la parte interior de la tapa. escribiendo claramente en la etiqueta su nombre completo. dejándolo dentro del tubo. hora y fecha de la toma de muestra. Cuando las heces son líquidas. 4. prefiriendo las partes que contengan moco. Las personas que sufren de estreñimiento pueden utilizar un laxante salino (sal de fruta) y recoger para el examen la segunda o tercera evacuación (nunca la primera). ni el algodón del hisopo. de aquí su uso como paso previo a la siembra en placas de medios selectivos. edad. excepto para introducir la muestra. puede recoger la muestra directamente del pañal. pero asegurándose que las heces hayan sido recién emitidas y que no hayan sido absorbidas por el pañal. 5. . tiosulfato de sodio. No llene el tubo con heces: es suficiente con la cantidad que queda adherida al hisopo. impregne con las mismas el hisopo suministrado. Identifique la muestra. Los más empleados son los siguientes: Medios de enriquecimiento Caldo con tetrationato (Mueller y Kauffmann). entre otros. Tápelo inmediatamente y manténgalo en ambiente fresco (nunca en nevera) y llévelo lo más pronto posible al laboratorio. el cuál actúa sobre el medio para determinados géneros.

Se pueden presentar tres tipos de anomalías intestinales: Infección intestinal ! Debida a la producción de cambios ecológicos por la acción directa del microorganismo. como también otros agentes que no fermentan la lactosa. en el cual actúa el indicador de pH. sólido y diferencial. las cuales inhiben la flora grampositiva. Selenito sódico 4 g Peptona 5 g Manitol 4 g Fosfato disódico anhidro (Na2HPO4 ) 10 g Agua destilada 1000 ml 2. aparecen como colonias lisas. mixto. Shigella y Salmonella. Se utiliza especialmente junto al agar-sulfito de bismuto. Agar MacConkey.Caldo con selenito (Leifson). Conviene señalar que la bilis o las sales biliares inhiben el crecimiento de microorganismos grampositivos y esporulados sin interferir en el crecimiento de los bacilos gramnegativos. citrato férrico. como caldo tetrationato y caldo con selenito. lactosa. Este medio selectivo. Agar XLD (Xilosa-Lisina-Desoxicolato). Es un medio selectivo-diferencial que contiene sales biliares. En él crecerán microorganismos quimioheterótrofos formadores de sulfhídrico a partir de sulfato. En la receta aparece rojo fenol. transparentes a opacas. empleado para aislar Salmonella y Shigella ejerce una buena inhibición sobre agentes coliformes. En cambio. verde brillante y rojo neutro como indicador. Medio indefinido. sin limitar el desarrollo de los patógenos gramnegativos. citrato y tiosulfato sódico. las pocas colonias fermentadoras de la lactosa que se pueden desarrollar tienen color rojo y un centro negro. Posee selenito. y permite el rápido desarrollo de salmonelas y shigellas. Contiene sales biliares. . para siembra de materiales provenientes de medios enriquecedores. Salmonella y Shigella sp. forman colonias incoloras. Los agentes del grupo coliforme dan colonias de color rojo. debido a que fermentan la lactosa. ácido de sodio que inhibe parcialmente al grupo coliforme durante las primeras horas de cultivo (12 a 24 horas). Medios selectivos Agar SS (salmonella-shigella).

antes de la ingestión por la persona..El alumno conocerá la importancia del coprocultivo para la identificación de enterobacterias. después de su ingestión por la persona. Hay que tener en cuenta la biota presente en condiciones normales. OBJETIVOS 1. Altos niveles de Bifidobacterium Bajos niveles de E.coli y Enterobacterias Lactantes (alimentación artificial) Altos niveles de grampositivos Bajos niveles de Bifidobacterium Niños y adultos Predominancia de Anaerobios Anaerobios Facultativos y Aerobios: % E. . Así: Lactantes (alimentación materna). 2. 3.El alumno conocerá la técnica de siembra en los medios de cultivo tetrationato y caldo Selenito.El alumno conocerá la técnica de la toma de la muestra para el coprocultivo.. " Dieta rica en hidratos de carbono: predominio de Gramnegativa..coli " 80% % Enterococos " 14% % Staphylococcus y Streptococcus " 4% % Otros " 2% " Dieta rica en proteínas: predominancia de biota Grampositiva.Intoxicación alimentaria ! Producida indirectamente por el microorganismo a través de la producción de toxinas. Toxiinfeción alimentaria ! Producida por el microorganismo a través de la producción de toxinas.

Tomar otra muestra y colocarla en el tubo con medio de selenito 3. como Salmonella e inhiben el desarrollo de la flora acompañante Caldo Selenito. identificando correctamente que porción de la caja esta sembrada a partir de que medio 5. el medio de cultivo contiene peptona que provee los nutrientes necesarios para el desarrollo bacteriano. Efectuar estría de aislamiento en ambas secciones 6.¿Cuál es el objetivo de emplear el medio de caldo selenito y caldo tetrationato para efectuar el coprocultivo? Caldo tetrationato. y carbonato de sodio que neutraliza y absorbe metabolitos tóxicos. Incubar las cajas de medio a 37ºC durante 24 a 48h y leer morfología colonial guiándose por el cuadro adjunto a esta practica 8. La selectividad está dada por la presencia de tosulfato de sodio.. Dividirlas cajas con medio de cultivo a la mitad y sembrar a partir de los medios de selenito y tetrationato tomando la muestra con el hisopo y únicamente descargar en un extremo de la caja. tetrationato y sales biliares. Tomar una muestra con heces con el hisopo en condiciones de esterilidad y colocar en el medio de tetrationato 2. Efectuar un comentario amplio de los resultados obtenidos 1. ácido de sodio que inhibe parcialmente al grupo coliforme durante las primeras horas de cultivo (12 a 24 horas). posee selenito. Seguir el mismo procedimiento para cada medio proporcionado 7. los cuales permiten el desarrollo de bacterias que contienen la enzima tetrationato reductasa.Shigella (S-S) 1caja con medio sulfito y bismuto (SyB) Asa bacteriológica Mechero 2 hisopos estériles PROCEDIMIENTO 1. y permite el rápido desarrollo de Salmonella y Shigella. . Incubar a 37 ºC durante 24 horas (sesión anterior) 4.MATERIAL          Muestra de heces en frasco estéril 1 tubo con caldo tetrationato 1 tubo con caldo selenito 1 caja con medio EMB 1 caja con medio Salmonella.

.¿De qué otra manera además del coprocultivo se podría investigar una infección por Salmonella? Dadas las variadas manifestaciones clínicas de las salmonelosis. la confirmación del diagnóstico de estas infecciones. . requiere de métodos microbiológicos que permitan el aislamiento o identificación del agente causal o de pruebas serológicas que facilitan reconocer anticuerpos específicos presentes en el suero de los pacientes.¿Cuáles son las enfermedades intestinales más frecuentes? Mencione por lo menos cuatro y comente cuál es el agente causal y datos clínicos.. 3.2.

Coincidiendo con la fisiopatología de la infección. Aunque el procedimiento produce una molestia transitoria.  Cultivo de bilis duodenal: obtenido por aspiración o utilizando la técnica que lleva un dispositivo en cápsulas de gelatina. Pueden ser positivos aún cuando los hemocultivos sean negativos. Es particularmente útil para el control postratamiento de los pacientes y para detectar los portadores crónicos. etc. . Su máxima positividad está en la tercera semana.  Diagnóstico inmunoenzimático: la detección de anticuerpos IgM e IgG contra el lipopolisacarido por técnica ELISA aún no está disponible para uso rutinario. se calcula que al final de la tercera semana de positividad solamente alcanza un 50%. cuando se realiza apropiadamente y en medios selectivos a base de bilis. de la secreción bronquial. se observa durante la tercera semana.  Mielocultivo: el cultivo del aspirado de médula ósea se considera como el mejor método para el aislamiento de salmonella en los pacientes con fiebre tifoidea y paratifoidea. En muchos casos de fiebre tifoidea no hay elevación de los títulos de aglutininas durante el curso de la infección y en ocasiones se pueden observar elevaciones no específicas. son positivos especialmente durante la primera semana de la infección. Las aglutininas contra el antígeno "H" no tienen valor diagnóstico aunque puedan observarse títulos elevados de ellas. debido a reacciones cruzadas. La Salmonella también puede ser aislada de otros productos como las manchas rosadas o reoseolas tíficas.  Urocultivo: su valor diagnóstico es muy limitado pues la bacteriuria no es continua.  Coprocultivo: puede ser positivo desde el comienzo de la infección. del líquido articular. en general es bien tolerado y los cultivos son más rápidamente positivos. Hemocultivo: es el procedimiento de elección. en algún momento de la enfermedad. En la infección no tratada sólo cerca del 50% de los pacientes pueden tener un aumento significativo de las aglutininas contra el antígeno "O". Diagnóstico serológico  Reacción de seroaglutinación (Widal): es de poco valor como prueba diagnóstica. No es superior al hemocultivo y con certeza no supera a la asociación del hemocultivo con el coprocultivo. Se recomienda sea practicado por personal con experiencia. aunque su máxima positividad en la infección aguda.

cuál es su acción y cuáles son los microorganismos que las producen Dentro de los microorganismos que afectan el intestino se encuentra Escherichia coli.4.Investigue cuales son las enterotoxinas que más problemas causan a nivel del intestino. las LT que es termolábil y que es muy parecida a la toxina del cólera y la ST que es termoestable.. . También la cepa Enterohemorrágica (EHEC) produce una toxina muy parecida a la shiga llamada SLT. su cepas más virulentas son Enterotoxigénica (ETEC) que producen dos tipos de enterotoxinas.

S.RESULTADOS Y ANALISIS DE RESULTADOS Agar S. Selenito Colonias negras Halo transparente Colonias balncas Tetrationato Colonias negras Halo transparente .

Sulfato de bismuto selenito Colonias verde negrusco convexas Tienen limites bien definidos Tetrationato colonias verdes y algunas negras Convexas Incolora en el centro EMB SELENITO COLONIAS VERDE BRILLANTE COLONIAS ROSAS CON HALO CONVEXAS SELENITO COLONIAS VERDE BRILLANTE COLONIAS ROSAS CON HALO .

y se espera que la técnica de sembramos de buenos resultados para sí poder observar las características de los microorganismos en estudio. Médica Panamericana. Romero Cabello Raúl. Microbiología y Parasitología Humana. 774.. 3ª ed. Madrid 1999. Salvat editores. 2ª edición. Pumarola. et. A. México. La práctica nos sirve como médicos porque mediante un estudio de este tipo podemos identificar los diferentes microorganismos causantes de enfermedades gastrointestinales. editorial médica Panamericana. además de que conociendo el agente causal podemos dar un mejor tratamiento y así prevenir posibles complicaciones. 2007. 3ª edición. Cesarin: Te toca el tema de: Pacientes ulcerosos segun Overbeck y Biebl citados por Inaue BIBLIOGRAFÍA Romero Cabello. 804. Raúl. al.. 785. Ed. págs. México 2007 . Microbiología y parasitología humana.Conclusión Durante la práctica se cumplieron los objetivos planteados para nuestro conocimiento. Microbiología y parasitología médica.

al. Raúl. Pumarola. Salvat editores. Microbiología y Parasitología Humana. A. editorial médica Panamericana. 2007. Microbiología y parasitología humana. Romero Cabello Raúl. 3ª edición.. et. 2ª edición. Madrid 1999. México 2007 . México.Cesarin: Te toca el tema de: Pacientes ulcerosos segun Overbeck y Biebl citados por Inaue BIBLIOGRAFÍA Romero Cabello. 774. 3ª ed. 804. Microbiología y parasitología médica. págs.. Ed. 785. Médica Panamericana.

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