Manual para La Toma de Muestras de EEB - 3a Ed - 2007

PARA LA TOMA DE
MUESTRAS
encefalopata
espongiforme bovina
3
edicin
Prefacio
Desde el reconocimiento de la Encefalopata Espongiforme Bovina en
1986, esta enfermedad se ha convertido en una amenaza potencial
para los sistemas productivos de ganado bovino a nivel mundial.
La vigilancia epidemiolgica de la encefalopata espongiforme bovina
es una necesidad para los pases que comercializan productos y
subproductos de origen bovino a diferentes partes del mundo,
teniendo que proteger su industria pecuaria para evitar posibles
barreras no arancelarias en el comercio exterior, as como comprobar
su inocuidad con respecto a esta enfermedad, salvaguardando la salud
de los consumidores.
Este manual es una gua para los mdicos veterinarios, inspectores
sanitarios en rastros y tcnicos de campo, que participan en las
actividades de vigilancia epidemiolgica de la enfermedad, mediante la
notificacin y envo de muestras de bovinos.
En esta tercera edicin se incluye un captulo sobre la estimacin de la
edad de los bovinos a travs de la denticin, la gua de identificacin
de bovinos objetivo para el muestreo de EEB, los mtodos para la
obtencin de la muestra idnea y el formato actualizado para el envo
de muestras.
ndice
Definicin............................................................................................. 1
Encefalopatas Espongiformes Transmisibles ....................................... 1
Etiologa............................................................................................... 1
Mecanismo de transmisin ................................................................... 2
Periodo de incubacin .......................................................................... 2
Signos clnicos ..................................................................................... 3
Vigilancia epidemiolgica en Mxico .................................................... 4
Poblacin objetivo de la vigilancia epidemiolgica de EEB ................... 4
Estimacin de la edad de los bovinos ................................................... 5
Medidas de bioseguridad y recomendaciones previas en la
recoleccin de muestras enceflicas .................................................... 7
Obtencin del tallo cerebral en rastro (tcnica de la cucharilla) .......... 9
Extraccin completa del encfalo en campo ....................................... 13
Empaque y envo de muestras............................................................ 17
Reportes de sospecha de enfermedad extica y solicitud de
informacin........................................................................................ 23
Formato para el envo de muestras .................................................... 24
Coordinaciones Regionales de la CPA ................................................. 26
Definicin
La Encefalopata Espongiforme Bovina (EEB) tambin conocida como
enfermedad de las vacas locas, es una enfermedad no febril, crnica,
degenerativa y fatal; que afecta al sistema nervioso central de los bovinos.
Pertenece
al
grupo
de
enfermedades
denominadas
Espongiformes Transmisibles (EET), caracterizadas por:
Encefalopatas
Ser producidas por la forma patognica de la protena prinica

(desprovistas de cido nucleico).
Presentar prolongados perodos de incubacin (meses o aos
previo al inicio de signos clnicos).
Ser de evolucin lenta, progresiva y mortal.
Producir degeneracin del sistema nervioso central.
Ausencia de lesiones macroscpicas.
Causar un proceso de vacuolizacin en el tejido cerebral, que a la
observacin microscpica se aprecia en forma de esponja.
No existir respuesta inmune.
Generalidades
Encefalopatas espongiformes transmisibles

Entre estas enfermedades se encuentran clasificadas:
Scrapie (ovinos y caprinos).

Encefalopata Transmisible del Visn.
Enfermedad Crnica Desgastante de los Crvidos (ciervos y alces).
Encefalopata Espongiforme Felina.
Encefalopata Espongiforme Bovina.
En los humanos, se han podido identificar las siguientes EET:
Kuru.
Enfermedad de Creutzfeldt-Jakob (CJD).
Variante de la Enfermedad de Creutzfeldt-Jakob (vCJD).
Sndrome de Gerstmann-Straussler-Scheinker (GSS).
Insomnio Fatal Familiar (FFI).
Etiologa
La enfermedad es producida por una partcula infecciosa de naturaleza proteica
denominada prin, carente de ADN, muy resistente al calor, a los rayos
ultravioleta, a la radiacin ionizante y a los desinfectantes qumicos que
habitualmente inactivan los virus. El agente no causa reacciones inflamatorias
o inmunitarias identificables.
1
En la actualidad, no hay pruebas diagnsticas para detectar la enfermedad en

seres vivos; slo puede confirmarse la presencia de la enfermedad despus de
la muerte o sacrificio del animal, hasta seis meses antes de la manifestaciones
clnicas mediante la deteccin del agente por medio de pruebas rpidas y a
travs de la identificacin de las lesiones histopatolgicas en el tejido cerebral,
despus del comienzo de los signos de la EEB.
Mecanismo de transmisin
Los principales tejidos capaces de transmitir la enfermedad conocidos como

materiales de riesgo especificado (MRE) son aquellos tejidos que representan
un alto riesgo para los humanos y los animales, por haber estado expuestos al
prin y porque en algn momento durante el perodo de incubacin de la
enfermedad, llegan a infectarse; entre ellos se encuentran:
Cerebro.
Mdula espinal.
Ojo.
Ganglio trigmino.
Ganglio de la raz dorsal.
Ileon.
Tonsilas.
No se ha detectado infecciosidad en ms de 40 diferentes tejidos u rganos,

incluso de animales clnicamente afectados, como el msculo esqueltico, piel,
testculos, tero, glndula mamaria, corazn y rin, as como leche y semen.
Perodo de incubacin
El periodo de incubacin de la enfermedad vara entre 2 y 8 aos, con un
promedio de 5 aos, de acuerdo con estudios de patognesis realizados en el
Reino Unido, considerando que los bovinos afectados se infectaron en los
primeros 2 aos de vida.
Generalidades
El prin se transmite cuando los bovinos consumen alimentos que contienen

harinas de carne y hueso, elaboradas con tejidos procedentes de rumiantes
infectados; sin que haya evidencia de que se transmita horizontalmente por
contacto directo, y la transmisin vertical de madres infectadas a sus cras, no
tiene significancia epidemiolgica.
Signos clnicos
La EEB desarrolla cambios tanto en el comportamiento del animal, como en
aspectos locomotores y sensoriales relacionados con la afectacin del sistema
nervioso central; sin embargo, estos signos no son patognomnicos, por lo que
se puede confundir con otras enfermedades como la rabia, listeriosis,
meningoencefalitis
tromboemblica,
polioencefalomalacia,
seudorrabia,
enfermedades metablicas, deficiencias minerales, intoxicacin con plantas
txicas o metales pesados; y con otras enfermedades asociadas a la baja de
produccin de leche, disminucin de la condicin corporal y pododermatitis.
Generalidades
Los bovinos afectados se ven nerviosos, temblorosos, tambaleantes,

aprehensivos y con cambios de comportamiento, de ah el nombre de vacas
locas. El comportamiento nervioso se observa en la mayora del ganado
afectado y se interpreta cuando el animal se asla del resto del rebao, se
resiste a entrar a la sala de ordeo y a ser ordeado. Los primeros signos
locomotores son pequeos cambios en los movimientos de los cuartos traseros
y dificultad a la hora de incorporarse a partir de una posicin normal, que
puede confundirse con hipomagnesemia y cetosis nerviosa. Los cambios
locomotores se traducen por caminar tambaleante, zancadas cortas y torpeza
en el momento de girar.
Los principales signos neurolgicos de la EEB consisten en aprensin (temor o
nerviosismo), ataxia (incoordinacin al andar) e hiperestesia (sensibilidad
excesiva y dolorosa). Los animales con cualquiera o con una combinacin de
estos signos durante ms de un mes, deben ser considerados como casos
sospechosos de EEB. Podemos encontrar adems salivacin excesiva,
disminucin de la rumia acompaada con bradicardia (disminucin de la
frecuencia cardiaca) y arritmia (irregularidad y desigualdad en el ritmo
cardiaco), as como trismus (rechinar de dientes).
Cuadro 1. Signos clnicos que pueden sugerir la presencia de EEB
Delgadez excesiva / estado de salud en malas condiciones en general.
Ansiedad / miedo / irritabilidad excesiva o exagerada reaccin al ruido.
Hipersensibilidad (hiperestesia) al tacto con la mano o con la ayuda de algn objeto fino,
sobre todo en la regin de la ubre y del cuello / tremores y estremecimientos musculares.
Nerviosismo / agresividad que se expresa al patear como respuesta a un ligero contacto
en los miembros posteriores o cuando alguien se aproxima por detrs del animal.
Temor a pasar por una puerta o a pequeos obstculos en el suelo.
Los animales que durante la revisin ante mortem en rastros o

presenten signos sugerentes a EEB, deben ser sacrificados al
matanza con el propsito de evitar cualquier contaminacin y
actividades de lavado y desinfeccin correspondientes al concluir
asimismo, se debern tomar muestras de estos animales para su
por laboratorio.
mataderos,
final de la
realizar las
la jornada;
diagnstico
Vigilancia epidemiolgica en Mxico
En Mxico, la Direccin General de Salud Animal (DGSA) dependiente del

Servicio Nacional de Sanidad, Inocuidad y Calidad Agroalimentaria
(SENASICA), inici una serie de medidas zoosanitarias para prevenir que la
enfermedad se introduzca al hato Nacional, entre las cuales se encuentran: la
prohibicin de la importacin de rumiantes vivos de pases afectados
establecida en 1991; la notificacin obligatoria; el reconocimiento de la
enfermedad y la promocin de su reporte en 1994; las actividades de vigilancia
para la bsqueda de casos, es decir el Programa de Vigilancia Epidemiolgica
que realiza la Comisin Mxico-Estados Unidos para la Prevencin de la Fiebre
Aftosa y otras Enfermedades Exticas de los Animales (CPA) desde 1996; las
especificaciones de los alimentos para consumo animal, establecidas en la
Norma Oficial Mexicana NOM-061-ZOO-1999, publicada en el 2000; las
especificaciones zoosanitarias para la transformacin de despojos animales y su
empleo en la alimentacin animal, reguladas por la Norma Oficial Mexicana
NOM-060-ZOO-1999, publicada en 2001; el uso de tcnicas de diagnstico
rpidas desde 2004; y las acciones de rastreabilidad de bovinos importados de
Canad y Estados Unidos, debido a la presencia de casos a partir de 2003.
Poblacin objetivo de la vigilancia epidemiolgica de EEB

Las caractersticas de los bovinos seleccionados para la toma de muestra como
parte de las actividades de vigilancia epidemiolgica son:
I.
Bovinos mayores de 30 meses de edad con al menos una de las

siguientes caractersticas:
Presenta signologa nerviosa como trastornos de comportamiento
(agresividad, miedo, ansiedad, nerviosismo), locomotores (miedo a
pasar por una puerta o a saltar pequeos obstculos en el suelo) o
sensoriales (hiperexcitabilidad a estmulos tctiles, al ruido o a la luz o
tremores musculares).
Sacrificio de emergencia (por enfermedad o accidente) en el rastro.
Generalidades
La EEB se diagnostic por primera vez en el Reino Unido en el ao de 1986,

posteriormente aparecieron casos en otros pases de Europa, as como en
Japn, Israel, Canad y en los Estados Unidos de Amrica, con gran impacto
econmico negativo para la industria derivada del ganado bovino.
II.
Muertos en la unidad de produccin sin causa aparente.

Cado o no ambulatorio.
Aquellos cuya canal o vsceras han sido marcadas como inspeccionadas y
rechazadas.
Delgadez excesiva o estado de salud en malas condiciones.
Bovinos de 48 a 84 meses de edad que no presenten signos
clnicos aparentes (sacrificio de rutina).
Podr incluirse en esta categora el envo de muestras de animales con
otras caractersticas de riesgo (como bovinos importados), pero sin dejar
de cumplir con la edad indicada.
Estimacin de la edad de los bovinos
Generalidades
Considerando que la edad del animal muestreado constituye uno de los

principales factores para identificar la poblacin objetivo de la vigilancia
epidemiolgica de EEB, es necesario obtenerla de los registros del propietario.
En ausencia de documentacin o de informacin que determine la edad, es
posible estimarla por medio de la denticin del animal, para garantizar que
cumple con la edad requerida.
Bovinos menores de 18 meses de edad, tienen exclusivamente dientes

temporales.
Bovinos entre los 18 y 24 meses de edad, brota el primer par de incisivos

permanentes.
Bovinos entre los 24 y 30 meses de edad, presentan el primer par de

incisivos permanentes.
Bovinos entre los 30 y 36 meses de edad, surge el segundo par de

incisivos permanentes.
Bovinos entre los 36 y 42 meses de edad, surge el tercer par de incisivos

permanentes.
Bovinos entre los 42 y 48 meses de edad, surge el cuarto par de incisivos

permanentes.
Generalidades
Generalidades
Bovinos de 48 a 83 meses de edad, tienen la dentadura permanente

completa y pueden presentar desgaste en los dientes incisivos.
Bovinos de 84 a 107 meses de edad, presentan mayor desgaste en los

dientes incisivos.
Bovinos de 108 meses de edad o mayores, presentan desgaste marcado

en todas las piezas dentarias.
Medidas de bioseguridad y recomendaciones previas en la

recoleccin de muestras enceflicas
Durante la necropsia o la toma de muestra deben respetarse las prcticas de
bioseguridad para evitar o minimizar los riesgos en el uso de herramientas y
equipo que puedan causar cortaduras o heridas punzantes, considerando la
posibilidad de transmisin de EEB al humano y que puede confundirse con
rabia, listeriosis y otras enfermedades zoonticas. Entre estas medidas de
bioseguridad podemos mencionar las siguientes:
7
Realizar el procedimiento antes de que el tejido se encuentra en estado

de descomposicin. El grado de putrefaccin de la muestra depende de
las horas transcurridas entre la muerte del animal y la toma de
muestra; la temperatura y humedad ambiental a la que ha estado
expuesta; la masa corporal que la contiene y la grasa de cobertura
presente; as como el uso adecuado de conservadores.
El proceso de sacrificio no debe daar el encfalo, principalmente al

tallo cerebral, por lo que deber utilizarse la pistola de perno cautivo
en el sacrificio de bovinos, de acuerdo a la Norma Oficial Mexicana
NOM-033-ZOO-1995, sacrificio humanitario de los animales domsticos
y silvestres.
Para la obtencin de una muestra, no debe haber transcurrido ms de

12 horas de la muerte del animal.
Cubrir cortadas, abrasiones y lesiones existentes en la piel.
Evitar contacto con tejidos infectados por contaminacin de heridas o

lesiones abiertas de la piel, salpicaduras a membranas mucosas (ojos y
boca) o excepcionalmente ingerirlos.
Utilizar ropa protectora como mandil impermeable, overol, bata, careta

de proteccin, gogles o lentes protectores, cubrebocas, botas y
guantes gruesos de hule.
Al cortar los huesos craneales, evitar la formacin de aerosoles o

partculas que puedan entrar en contacto con los ojos.
Evitar comer, beber, fumar, tomar algn medicamento, usar el telfono

o ir al bao, al realizar la necropsia o durante la toma de muestra.
Los nicos tejidos que han mostrado infectividad son: el cerebro, la

retina y la mdula espinal y experimentalmente por va oral, la parte
distal del leon.
El equipo y el material utilizado deber lavarse y desinfectarse,

eliminando todo resto de materia orgnica.
La desinfeccin del material utilizado se deber hacer con una solucin

de hipoclorito de sodio al 4% (40,000 ppm) por ms de 1 hora a 20C.
Se recomienda que la desinfeccin del material se realice durante toda
la noche.
Al terminar el procedimiento de la toma, debe lavarse las manos y la

piel expuesta.
Generalidades
Obtencin del tallo cerebral en rastro

(tcnica de la cucharilla)
Para el diagnstico de la EEB es necesario obtener el tallo cerebral. Esta debe
ser la tcnica de eleccin para la obtencin de la muestra en rastros.
Material:
Obtencin del tallo cerebral en rastro (tcnica de la cucharilla)
Adems de la ropa apropiada (botas, overol y mandil), deben utilizarse careta

de proteccin, gogles o lentes, as como guantes de ltex.
Cuchara especial.
Tijeras (rectas).
Pinzas de ratn.
Dos envases de plstico de cierre hermtico

de 120 ml (frascos utilizados para el Examen
General de Orina EGO). Uno de ellos deber
llenarse con formalina al 10 % hasta la marca
de 70 ml.
Formalina al 10% 1 .
Plumn indeleble (para marcar los envases).
Procedimiento:
1. Una vez separada la cabeza del cuerpo del animal a nivel de la
articulacin atlanto-occipital, hay que colocarla sobre una superficie
limpia con la cara hacia abajo.
Comercialmente se encuentra formalina al 38 a 40%. Para preparar un litro de solucin al 10% hay que mezclar 900 ml. de agua
destilada con 100 ml. de formalina comercial. Se recomienda que bufere para lo cual deber agregar previamente al agua destilada
3.4 gr. de fosfato de sodio monobsico y 6.1 gr. de fosfato de sodio dibsico antes de mezclarlo con la formalina comercial.
4. Una vez que la cucharilla haya llegado hasta el tope (cresta esfenooccipital), realizar un giro de 180 hacia la derecha y posteriormente
hacia la izquierda.
10
ica de la cucharilla)
3. Introducir la cucharilla a travs de la parte superior del agujero magno

con la punta hacia abajo.
2. Separar los pares craneales con un dedo o con la ayuda de las pinzas de
ratn y tijeras.
5. Extraer la cucharilla obteniendo nicamente el puente y la mdula

oblonga con el bex.
6. En caso de atorarse, desprender con pinzas y tijeras los nervios craneales

XII, XI y X (hipogloso, espinal accesorio y vago) de las meninges y retirar
el tallo cerebral
7. En caso de encontrar cogulos alrededor del tallo cerebral, eliminarlos

con pinzas o tijeras.
8. Identificar los dos frascos de cierre hermtico de 120 ml. con y sin
conservador (formol) con plumn indeleble, asignndole un nmero
consecutivo. El nmero asignado debe identificar ambas muestras, en
refrigeracin y formol, as como el formato para el envo de muestras.
11
10. Una vez dividida la muestra en dos partes iguales, colocar una mitad del
tallo cerebral en el interior de un frasco sin conservador (sin formol)
cerrndola perfectamente.
11. La otra mitad del tallo cerebral colocarla en el frasco de 120 ml, con
formalina al 10% verificando cubrir totalmente la muestra con el
conservador (preferentemente deber tener una relacin de una parte de
tejido por diez de formalina), es decir hasta los 110 ml y sellarla
perfectamente.
12
9. Realizar un corte sagital medio de la muestra antes de proceder a su

empaque.
12. Cada muestra colectada deber incluir la informacin epidemiolgica por

medio del Formato para el Envo de Muestras CPA-ST-F-048 de la
Vigilancia Epidemiolgica de la EEB, identificados con el mismo nmero
utilizado en las muestras en refrigeracin y formol.
Extraccin completa del encfalo en campo

Este procedimiento se recomienda cuando se presenta un cuadro clnico
sugestivo a EEB o a otra enfermedad que requiera de diagnstico diferencial
como la rabia.
Material:
Adems de la ropa apropiada (botas, overol y mandil), deben utilizarse lentes
protectores o careta de proteccin, as como guantes de ltex y cubrebocas.
Segueta o sierra de carnicero.
Cuchillo.
Tijeras (curvas de preferencia).
Pinzas de ratn.
Envase de boca ancha de cierre hermtico con un volumen de 1.5 litros,

de preferencia de plstico (para evitar que se rompa durante el envo).
Una bolsa de plstico transparente de cierre hermtico de 1.5 Kg. (de 20

X 30 cm), tipo sandwichera.
Formalina al 10% (preparacin similar a la utilizada en la tcnica de la

cucharilla).
13
Procedimiento:
2. El primer corte de hueso es transversal y posterior a las cuencas

oculares, los cuales sirven para sujetar la cabeza y como puntos de
referencia.
Primer corte
3. Hacer dos cortes, uno en cada hueso parietal, tomando como referencia
la comisura externa del ojo y la porcin lateral del agujero magno
exactamente encima de los cndilos del occipital, evitando cortar la masa
enceflica.
Segundo corte
14
1. Una vez separada la cabeza del cuerpo del animal a nivel de la

articulacin atlanto-occipital, colocarla sobre una superficie limpia con la
cara hacia arriba. Retirar la piel del crneo y cortar los huesos con
segueta o sierra de carnicero.
4. Al desprender la bveda craneana queda al descubierto el encfalo.
5. Cortar con tijeras las meninges que cubren la superficie del cerebro, las
cuales se caracterizan por ser muy duras en los bovinos. Extraer
cuidadosamente la masa enceflica.
6. Una vez extrado el encfalo, realizar un corte sagital medio

(longitudinal), dividiendo toda la muestra en dos porciones. La tcnica
requiere que las estructuras se separen correctamente para poder llevar
a cabo un buen diagnstico.
a) Encfalo completo
b) Hemisferios separados, junto con el tallo

cerebral.
15
7. Identificar con plumn indeleble con el nmero de caso asignado, la bolsa

sandwichera y el envase de 1.5 lts. con formalina al 10 %.
9. Colocar el otro medio encfalo con medio tallo cerebral en el frasco de

1.5 lts. con suficiente formalina al 10% cubriendo todo el tejido (a una
relacin de 1 parte de tejido por 10 de conservador) y cerrar
hermticamente el envase
10. Cada caso de neuropata deber incluir la informacin epidemiolgica

por medio del Formato para el Envo de Muestras Vigilancia
Epidemiolgica de la EEB (CPA-ST-F-048) y del formato SIVE 02, los
cuales debern llevar el mismo nmero de identificacin de las
muestras.
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8. Colocar la mitad del encfalo, incluyendo la mitad del tallo cerebral en la

bolsa tipo sandwichera y sellarla.
Empaque y envo de muestras

El envo de las muestras deber hacerse inmediatamente despus de haberlas
obtenido, evitando demoras para que los cambios posmortem no afecten la
integridad de las estructuras anatmicas y el resultado diagnstico. El envo
requiere del correcto envasado, identificacin y sellado de las muestras.
El Laboratorio de Alta Seguridad de la CPA cuenta con lineamientos especficos
sobre bioseguridad que incluyen el paso de los empaques a travs de una
exclusa o puerta especial, evitando contaminacin de otras reas, por lo cual,
el tamao de los empaques no debe exceder de 40 cm de alto X 40 cm de
ancho X 85 cm de largo.

17
Hielera del tamao adecuado para las muestras en refrigeracin.
Refrigerantes (los necesarios) para conservar las muestras a temperatura

de refrigeracin durante el envo.
Plumn indeleble.
Caja de cartn del tamao adecuado para las muestras en formol.
Etiquetas rotuladas con los datos del Remitente y del Destinatario tipo
autoadheribles o para ser pegadas con lpiz adhesivo, pegamento o cinta
adhesiva.
Originales de los formatos para el envo de muestras de EEB (CPA-ST048) y cuando corresponda a un caso de neuropata, original y copia del
formato SIVE 02 debidamente llenados.
Cinta adhesiva, lpiz adhesivo o pegamento.
Procedimiento:
1. Colocar las muestras frescas en una hielera aadiendo refrigerantes
alrededor para su conservacin.
18
Material:
2. Cerrar y sellar la hielera para mantener las muestras a temperatura

adecuada.
3. Introducir en el interior de la caja de cartn, la(s) muestra(s) en formol.
Cuando se enva tanto el encfalo en formol como en refrigeracin, hay

que colocar la muestra en refrigeracin (dentro de su hielera) y en formol
en la misma caja de cartn.
4. Agregar material de embalaje a la caja de cartn, para evitar que los

frascos se muevan, evitando derrames y daos a las muestras por
maltrato durante el traslado.
19
5. Cerrar la tapa de la caja y sellarla perfectamente con cinta adhesiva.
7. Colocar la hielera sellada con las muestras en refrigeracin sobre la caja

de cartn y unirlas con tape para que no se separen durante el envo.
8. Sealar con una flecha el lado que indica la parte superior de la caja
(Esquema 1), para evitar derrames de conservadores.
Esquema 1. Ejemplo de flecha.
20
6. Introducir en un sobre, los formatos originales correspondientes a las

muestras (formato para el envo de muestras CPA-ST-048 y cuando
corresponda el formato SIVE-02) y pegarlo en el exterior de la tapa
superior de la caja.
9. Colocar una etiqueta autoadherible o para ser pegada con lpiz adhesivo
o pegamento en ambos costados de la hielera, a la altura del extremo
superior izquierdo, con la identificacin del remitente (nombre, direccin
y telfono) de acuerdo al ejemplo del esquema 2.
Esquema 2. Ejemplo de etiqueta de Remitente.
REMITENTE
REMITENTE
NOMBRE:
Direccin:
Telfono(s):
NOMBRE:
Direccin:
Telfono(s):
10. Colocar otra etiqueta con los datos del Destinatario (Comisin Mxico
Estados Unidos para la Prevencin de la Fiebre Aftosa y Otras
Enfermedades Exticas de los Animales, Km 15.5 Carretera Mxico
Toluca, 4to. Piso, Col. Palo Alto, Delegacin Cuajimalpa, CP. 05110,
Mxico, Distrito Federal) en el centro de ambos costados donde coloc la
etiqueta del remitente, como se muestra en el esquema 3.
Esquema 3. Ejemplo de etiqueta de Destinatario.
REMITENTE
NOMBRE:
Direccin:
Telfono(s):
DESTINATARIO
Comisin Mxico-Estados Unidos para la Prevencin de la
Fiebre Aftosa y Otras Enfermedades Exticas de los
Animales.
Km. 15.5 Carretera Mxico - Toluca, 4to. piso, Col. Palo Alto,
Delegacin Cuajimalpa, CP. 05110, Mxico Distrito Federal.
DESTINATARIO
Comisin Mxico Estados Unidos para la Prevencin de
la Fiebre Aftosa y Otras Enfermedades Exticas de los
Animales
Km 15.5 Carretera Mxico Toluca, 4to. Piso, Col. Palo
Alto, Delegacin Cuajimalpa, CP. 05110, Mxico,
DISTRITO FEDERAL.
21
El envo eficiente de muestras requiere una buena coordinacin entre el

remitente, los coordinadores de la CPA, la compaa de transporte y el
destinatario (Laboratorio de la CPA), para asegurar que el material es
transportado de forma segura y que llega a su destino oportunamente y
en buenas condiciones. Este tipo de coordinacin depende de una
comunicacin bien establecida y de una relacin de colaboracin entre las
partes involucradas.
12. El remitente deber seleccionar la ruta ms directa del envo de
muestras, evitando que su llegada sea en fines de semana o da inhbil.
13. En caso de efectuar el envo en forma directa, deber notificarse a la
Coordinacin Regional o de Zona correspondiente y a las Oficinas
Centrales de la CPA, a los telfonos: 5259 1441 / 5259 3035 / 5259
5048 / 01 800 751 21 00 / 01 800 903 88 00, con el propsito de
preparar el material de diagnstico y estar al pendiente para su
recepcin.
22
11. Una vez identificado el paquete, llevarlo a la empresa de mensajera

cuyas ciudades de reparto incluyan la Ciudad de Mxico o comunicar al
Coordinador Regional o de Zona de la CPA, para que sean ellos quienes
recojan las muestras.
Recuerda:
Ante la sospecha de cualquier caso de enfermedad extica, notifica
inmediatamente a:
Reportes de sospecha de enfermedad extica y solicitud de informacin
Coordinaciones Regionales y de Zona de la CPA.

Oficinas Centrales de la CPA.
Delegaciones Estatales de la SAGARPA.
Comits Estatales de Fomento y Proteccin Pecuaria.
Secretaras de Desarrollo Rural o Agropecuario.
Centros de Salud Animal.
Distritos de Desarrollo Rural (DDR).
Centros de Apoyo al Desarrollo Rural (CADER).
Asociaciones Ganaderas Locales.
Para mayor informacin o comunicacin sobre el envo de

muestras, as como para solicitar los formatos indicados en
este manual, favor de llamar a:
Comisin Mxico Estados Unidos para la Prevencin de la

Fiebre Aftosa y otras Enfermedades Exticas de los Animales
(CPA)
Km. 15.5 de la Carretera Mxico Toluca, 4to. piso, Col. Palo Alto,
Delegacin Cuajimalpa, CP. 05110, Mxico, D.F.
Telfonos:
(01 55) 52 59 30 35 - 52 59 48 77 - 52 59 14 41
52 59 50 48 - 52 59 67 51 - 52 59 66 26
Fax: Extensin 15 de cualquier lnea al (01 55) 52 59 73 47

Telfonos de Emergencia: 01 800 903 88 00
01 800 751 21 00
Consultar la pgina de internet:
23
www.senasica.sagarpa.gob.mx
SERVICIO NACIONAL DE SANIDAD, INOCUIDAD Y CALIDAD AGROALIMENTARIA

DIRECCIN GENERAL DE SALUD ANIMAL
COMISION MEXICO - ESTADOS UNIDOS PARA LA PREVENCION DE LA FIEBRE AFTOSA
Y OTRAS ENFERMEDADES EXOTICAS DE LOS ANIMALES
VIGILANCIA EPIDEMIOLGICA DE LA ENCEFALOPATIA ESPONGIFORME BOVINA

FORMATO PARA EL ENVO DE MUESTRAS
CPA-ST-F-048
Favor de leer el instructivo al reverso. Utilice un formato por cada muestra enviada.
El tiempo mximo para el envo de muestras es de siete (7) das a partir de la fecha de la
toma, cumpliendo con las condiciones de conservacin.
I.
CPA
IDENTIFICACIN
1. N de Muestra en Origen:
2. Fecha de la toma de muestra:

DIA
II.
DATOS DEL RASTRO
III.
3. Nombre del rastro:
MES
AO
DATOS DEL PROPIETARIO
7. Actividad de la persona que lleva a sacrificio al animal:

Propietario
Introductor
Empresa o Empacadora
8. Nombre:
4. Tipo de Rastro:
Municipal
Planta TIF
N
9. Telfono y/o Fax:
Particular
Otro
5. Estado:
10. Documento que permita la rastreabilidad:
6. Municipio:
IV.
Gua de trnsito
Factura
Certificado zoosanitario
Otro:
DATOS DE LA EXPLOTACIN DE ORIGEN
13. Tipo de Explotacin:
11. Nombre de la explotacin:

Intensivo
12. Ubicacin:
Calle
Semintensivo
Nmero
Extensivo
Localidad
Municipio
Traspatio
Entidad
V.
Nm. Telefnico y Fax
DATOS DEL ANIMAL
14. Identificacin de animal:
15. Edad:
16. Sexo: Hembra
18. Funcin zootcnica del animal:

Leche
Doble propsito
19. Si es un animal de Importacin, anote

la fecha de importacin:
Carne
y el pas de origen:
DIA
Otra:
MES
AO
20. Si es de origen Nacional, seale si es: Descendiente de un animal importado
semen:
Pie de cra
VI.
17. Raza:
Macho
MESES
21. En caso afirmativo, anote el pas

de origen de los padres o del
Producto de inseminacin con semen importado
INSPECCIN ANTEMORTEM
22. Present signos clnicos antes del sacrificio?
Si
No
23. Fecha de inicio:

DIA
24. Signos
MES
AO
26. Seale con una X si

corresponde a:
No
Bovino de sacrificio de rutina
Delgadez excesiva, estado de salud en malas condiciones
Bovino de desecho
Ansiedad, miedo, irritabilidad excesiva, reaccin excesiva al ruido
Bovino decomisado
Hipersensibilidad (hiperestesia) al tacto con la mano o con la ayuda de algn objeto fino, sobre todo en la regin de
la ubre y del cuello; tremores y estremecimientos musculares
Bovino cado
Nerviosismo, agresividad que se expresa como patear en respuesta a un ligero contacto de los miembros
posteriores o cuando alguien se aproxima por detrs del animal
Bovino muerto o sacrificado

de emergencia
Bovino con signos neurolgicos
Temor a pasar por alguna puerta o pequeos obstculos puestos en el suelo (fosas)
25. Otros signos neurolgicos
VII.
Especifique:
27. Diagnstico presuntivo:
ENVIO DE MUESTRAS
28. Tipo de muestra:
29. Conservador utilizado:
30. Fecha de envo:
Tallo Cerebral
Refrigeracin
Encfalo Completo
Formol
DIA
MES
AO
Medio Encfalo
VIII.
DATOS DEL MVZ RESPONSABLE DE LA TOMA DE MUESTRA
IX.
DATOS DEL MVZ RESPONSABLE DEL ENVO
31. Nombre:
36. Nombre:
Nombre(s)
Apellido Paterno
Apellido Materno
Nombre(s)
32. Cargo:
37. Cargo:
33. Empresa:
38. Empresa:
34. Domicilio:
C.P.
Municipio
Estado
Calle
Colonia o Localidad
35. Firma:
N Telefnico y Fax
Apellido Materno
39. Domicilio:
Calle
Colonia o Localidad
Apellido Paterno
C.P.
Municipio
Estado
40. Firma:
N Telefnico y Fax
KM. 15.5 CARRETERA MXICO TOLUCA, COL. PALO ALTO, DEL. CUAJIMALPA, C.P. 05110, MEXICO, D. F.
TELS. 5259 - 1441, 5259 - 3035, 5259 - 5048, DE EMERGENCIA 01 (800) 9038 - 800 Y 01 (800) 7512 100
ORIGINAL: LABORATORIO
COPIA: REMITENTE
SERVICIO NACIONAL DE SANIDAD, INOCUIDAD Y CALIDAD AGROALIMENTARIA

DIRECCIN GENERAL DE SALUD ANIMAL
COMISION MEXICO-ESTADOS UNIDOS PARA LA PREVENCION DE LA FIEBRE AFTOSA
Y OTRAS ENFERMEDADES EXOTICAS DE LOS ANIMALES
VIGILANCIA ACTIVA DE LA ENCEFALOPATIA ESPONGIFORME BOVINA

CPA-ST-F-048
INTRUCTIVO DE LLENADO DEL

Favor de escribir con letra de molde y llenar un formato por cada muestra enviada a laboratorio.
No llene el espacio donde se registrar el N de la CPA.
I.
IDENTIFICACIN
1.
Registre el nmero de identificacin de la muestra en origen (nmero asignado en el rastro, laboratorio, explotacin o por el coordinador de la CPA).
2.
Anote la fecha de la toma de muestra (da, mes y ao).
II.
DATOS DEL RASTRO

4.
Registre el nombre completo del rastro o unidad de sacrificio.
5.
Indique con una X el tipo de rastro de donde se obtuvo la muestra. En caso de ser una Planta TIF, anote el nmero de planta.
6.
Escriba la entidad federativa donde se localiza el rastro.
7.
Anote el nombre del municipio donde se localiza el rastro.
III.
DATOS DEL PROPIETARIO

8.
Marque con una X el tipo de actividad de la persona que lleva a sacrificio al animal.
9.
Escriba el nombre del propietario del animal o de la persona que lo lleva a sacrificio.
10.
Anote el nmero telefnico y/o fax del propietario o introductor.
11.
Indique con una X el documento que puede apoyar la rastreabilidad del animal (certificado zoosanitario, gua de trnsito, factura de compra). En caso de
contar con otro documento (por ejemplo: pase para sacrificio de la asociacin de productores), favor de anotarlo en el espacio.
IV.
DATOS DE LA EXPLOTACIN DE ORIGEN

12.
Escriba el nombre de la explotacin de origen del animal.
13.
Registre la ubicacin de la explotacin de origen: incluyendo la calle, nmero oficial si lo tiene, localidad o colonia, delegacin o municipio, entidad
federativa, nmero telefnico y fax.
14.
Marque con una X el tipo de explotacin (intensivo, semintensivo, extensivo o traspatio).
V.
DATOS DEL ANIMAL

15.
Anote la identificacin del animal (bovino), de acuerdo al mtodo utilizado (arete de la campaa de tuberculosis, arete particular, marcas de fuego, etc.).
16.
Indique la edad del animal segn el nmero de meses cumplidos. Para propsitos de la vigilancia de EEB, se debe considerar preferentemente una
edad mayor de 30 meses con alguna caracterstica de riesgo y/o la presencia de signos clnicos compatibles con EEB. En caso de no conocer
esa informacin por parte del propietario o introductor, debe estimarla de acuerdo a la denticin del animal (consulte el Manual para la toma de muestras
de la Encefalopata Espongiforme Bocina).
17.
Marque con una X el sexo del animal.
18.
Anote la raza del animal.
19.
Seale con una X la funcin zootcnica del animal (leche, carne, doble propsito pie de cra), en caso de tener otra funcin antela en el espacio
correspondiente.
20.
Si el animal es de Importacin, anote la fecha de importacin y el pas de origen. Si es Nacional, no conteste esta pregunta y pase a la siguiente.
21.
En caso de origen Nacional, marque con una X si es descendiente de un animal importado o es producto de inseminacin con semen importado.
22.
Slo en caso de marcar una de las categoras anteriores (descendiente de un animal importado o producto de inseminacin con semen importado),
indique el pas de origen de los progenitores o del semen.
VI.
INSPECCIN ANTEMORTEM
23.
Seale con una X si el bovino muestreado present signos antes del sacrificio. En caso negativo, marque una X en No y pase a la pregunta 26.
24.
En caso afirmativo, anote la fecha de inicio (fecha en que se presentaron los primeros signos) (da, mes y ao).
25.
En el siguiente recuadro seale con una X si present o no los signos anotados en cada rengln.
26.
Si present otros signos neurolgicos, marque una X en el recuadro y anote los signos, despus de la palabra Especifique:.
27.
Seale con una X, si corresponde a un bovino de sacrificio de rutina (aquel que se enva a sacrificio por haber cumplido su ciclo productivo), bovino
de desecho (aquel que por su bajo nivel de produccin, problemas reproductivos o bajo peso ha sido enviado a sacrificio), bovino decomisado (animal
cuya canal o vsceras sean marcadas como inspeccionadas y rechazadas), bovino cado (animal que por su condicin recumbente est imposibilitado a
entrar a la sala de sacrificio),bovino muerto o sacrificado de emergencia (aquel que muri en la explotacin o aquel que por haber sufrido
recientemente lesiones traumticas o alguna afeccin fue sacrificado) o bovino con signos neurolgicos (aquel que present signos neurolgicos
compatibles con EEB).
28.
En caso de sospechar algn padecimiento en particular que sugiera la signologa presentada, anote su diagnstico presuntivo.
VII.
ENVIO DE MUESTRAS
29.
Marque con una X el tipo de muestra enviada. La muestra indicada para el diagnstico de encefalopata espongiforme bovina (EEB) es el Tallo
Cerebral Completo.
30.
Seale con una X el conservador utilizado. Para el diagnstico de EEB debe hacerse un corte sagital del Tallo Cerebral, colocar la mitad en
refrigeracin y la otra mitad en formalina al 10% (preferentemente buferada). La relacin de muestra y conservador es de una parte de muestra por
10 de conservador. Cuando corresponda a un animal muestreado en una explotacin o rancho por signologa sugerente de EEB (vaca cada, etc.),
realice un corte sagital al encfalo completo incluyendo el tallo cerebral, coloque una mitad del encfalo en refrigeracin para el diagnstico de EEB y
rabia por inmunoflourescencia directa. La otra mitad debe enviarse en formol para la prueba de inmunohistoqumica.
31.
Anote la fecha del envo de la muestra (da, mes y ao).
VIII.
DATOS DEL MVZ RESPONSABLE DE LA TOMA DE MUESTRA y IX. DATOS DEL MVZ RESPONSABLE DEL ENVO
32.
y 36.
Anote el nombre completo del responsable de la toma de muestra y del envo.
33.
y 37.
Registre el cargo de los responsables.
34.
y 38.
Anote el nombre de la empresa o institucin a la que prestan sus servicios.
35.
y 39.
Registre la direccin completa incluyendo nmero telefnico y fax, para cualquier aclaracin.
36.
y 40.
Firme este formato con el propsito de validar la informacin.
El tiempo mximo para el envo de las muestras es de siete (7) das a partir de la fecha de la toma,
cumpliendo siempre con las condiciones de conservacin mencionadas en el punto 29 y
en el Manual para la toma de muestras de Encefalopata Espongiforme Bovina
KM. 15.5 CARRETERA MXICO TOLUCA, COL. PALO ALTO, DEL. CUAJIMALPA, C.P. 05110, MEXICO, D. F.
TELS. 5259 - 1441, 5259 - 3035, 5259 - 5048, DE EMERGENCIA 01 (800) 9038 - 800 Y 01 (800) 7512 100
ORIGINAL: LABORATORIO
COPIA: REMITENTE
Coordinaciones Regionales de la CPA
Regin II
Coahuila, Durango,
Nuevo Len y
Regin Lagunera
Regin III
San Lus Potos,
Tamaulipas y Veracruz Norte
Regin IV
Aguascalientes, Colima,
Guanajuato, Jalisco,
Michoacn y Zacatecas
Regin V
Guerrero, Puebla,
Tlaxcala y Veracruz Centro
Regin VI
Chiapas, Oaxaca,
Tabasco y Veracruz Sur
Regin VII
Sede: Hermosillo, Son.

01(662) 259 98 26
01(662) 259 98 20
Sede: Monterrey, N.L.

01(81) 8126 75 08
01(81) 8126 75 32
Sede: San Lus Potos, S.L.P.

01(444) 822 70 21
01(444) 822 49 12
Sede: Guadalajara, Jal.

01(33) 3838 64 36
01(33) 3635 36 06
Sede: Puebla, Pue.

01(222) 235 48 75
01(222) 235 33 99
Sede: Tuxtla Gutirrez, Chiapas

01(961) 602 02 56
01(961) 602 02 80
Sede: Mrida, Yuc.
Campeche, Yucatn
y Quintana Roo
01(999) 943 15 35
01(999) 943 34 35
Regin VIII
Distrito Federal,
Hidalgo, Mxico,
Morelos y Quertaro
Sede: Mxico, D.F.

01(55) 5259 14 41
01(55) 5259 30 35
Reporte de Sospecha de Enfermedad Extica de los Animales
Regin I
Baja California, Baja
California Sur, Sonora,
Chihuahua, Sinaloa y Nayarit
DIRECTORIO
ALBERTO CRDENAS JIMNEZ
Secretario de Agricultura, Ganadera, Desarrollo
Rural, Pesca y Alimentacin.
ENRIQUE SNCHEZ CRUZ
Director en Jefe del Servicio Nacional de
Sanidad, Inocuidad y Calidad Agroalimentaria.
FRANCISCO VELARDE GARCA
Director General de Salud Animal.
IGOR ROMERO SOSA
Director de la Comisin Mxico - Estados
Unidos para la Prevencin de la Fiebre Aftosa y
otras Enfermedades Exticas de los Animales
(CPA).
DIODORO BATALLA CAMPERO
Director del Centro Nacional de Servicios
de Diagnstico en Salud Animal
(CENASA).
SENASICA
Direccin General de
Salud Animal
www.sagarpa.gob.mx
www.senasica.sagarpa.gob.mx

Manual para La Toma de Muestras de EEB - 3a Ed - 2007

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Manual para La Toma de Muestras de EEB - 3a Ed - 2007

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PARA LA TOMA DE

Ser producidas por la forma patognica de la protena prinica

Encefalopatas espongiformes transmisibles

Scrapie (ovinos y caprinos).

En los humanos, se han podido identificar las siguientes EET:

En la actualidad, no hay pruebas diagnsticas para detectar la enfermedad en

Los principales tejidos capaces de transmitir la enfermedad conocidos como

No se ha detectado infecciosidad en ms de 40 diferentes tejidos u rganos,

El prin se transmite cuando los bovinos consumen alimentos que contienen

Los bovinos afectados se ven nerviosos, temblorosos, tambaleantes,

Los animales que durante la revisin ante mortem en rastros o

Vigilancia epidemiolgica en Mxico

En Mxico, la Direccin General de Salud Animal (DGSA) dependiente del

Poblacin objetivo de la vigilancia epidemiolgica de EEB

Bovinos mayores de 30 meses de edad con al menos una de las

La EEB se diagnostic por primera vez en el Reino Unido en el ao de 1986,

Muertos en la unidad de produccin sin causa aparente.

Estimacin de la edad de los bovinos

Considerando que la edad del animal muestreado constituye uno de los

Bovinos menores de 18 meses de edad, tienen exclusivamente dientes

Bovinos entre los 18 y 24 meses de edad, brota el primer par de incisivos

Bovinos entre los 24 y 30 meses de edad, presentan el primer par de

Bovinos entre los 30 y 36 meses de edad, surge el segundo par de

Bovinos entre los 36 y 42 meses de edad, surge el tercer par de incisivos

Bovinos entre los 42 y 48 meses de edad, surge el cuarto par de incisivos

Bovinos de 48 a 83 meses de edad, tienen la dentadura permanente

Bovinos de 84 a 107 meses de edad, presentan mayor desgaste en los

Bovinos de 108 meses de edad o mayores, presentan desgaste marcado

Medidas de bioseguridad y recomendaciones previas en la

Realizar el procedimiento antes de que el tejido se encuentra en estado

El proceso de sacrificio no debe daar el encfalo, principalmente al

Para la obtencin de una muestra, no debe haber transcurrido ms de

Cubrir cortadas, abrasiones y lesiones existentes en la piel.

Evitar contacto con tejidos infectados por contaminacin de heridas o

Utilizar ropa protectora como mandil impermeable, overol, bata, careta

Al cortar los huesos craneales, evitar la formacin de aerosoles o

Evitar comer, beber, fumar, tomar algn medicamento, usar el telfono

Los nicos tejidos que han mostrado infectividad son: el cerebro, la

El equipo y el material utilizado deber lavarse y desinfectarse,

La desinfeccin del material utilizado se deber hacer con una solucin

Al terminar el procedimiento de la toma, debe lavarse las manos y la

Obtencin del tallo cerebral en rastro

Obtencin del tallo cerebral en rastro (tcnica de la cucharilla)

Adems de la ropa apropiada (botas, overol y mandil), deben utilizarse careta

Dos envases de plstico de cierre hermtico

Plumn indeleble (para marcar los envases).

3. Introducir la cucharilla a travs de la parte superior del agujero magno

Obtencin del tallo cerebral en rastro (tcnica de la cucharilla)

5. Extraer la cucharilla obteniendo nicamente el puente y la mdula

Obtencin del tallo cerebral en rastro (tcnica de la cucharilla)

6. En caso de atorarse, desprender con pinzas y tijeras los nervios craneales

7. En caso de encontrar cogulos alrededor del tallo cerebral, eliminarlos

Obtencin del tallo cerebral en rastro (tcnica de la cucharilla)

9. Realizar un corte sagital medio de la muestra antes de proceder a su

12. Cada muestra colectada deber incluir la informacin epidemiolgica por

Extraccin completa del encfalo en campo

Extraccin completa del encfalo en campo

Segueta o sierra de carnicero.

Tijeras (curvas de preferencia).

Envase de boca ancha de cierre hermtico con un volumen de 1.5 litros,

Una bolsa de plstico transparente de cierre hermtico de 1.5 Kg. (de 20

Formalina al 10% (preparacin similar a la utilizada en la tcnica de la

2. El primer corte de hueso es transversal y posterior a las cuencas