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97 Tapia-Tapia y Col.
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Tapia-Tapia y col.
NANOESTRUCTURA Y PROPIEDADES DE LA
MEMBRANA PLASMTICA DE CLULAS HeLa POR
MICROSCOPIA DE FUERZA ATMICA (AFM)
1
Melina Tapia Tapia , Eva Ramn Gallegos y Nikola Batina . Laboratorio de Nanotecnologa e
Ing. Molecular, Departamento de Qumica, CBI, UAM-Iztapalapa, bani@xanum.uam.mx,
2
melit1@yahoo.com. Laboratorio de Citopatologa Ambiental, Depto. Morfologa ENCB-IPN.,
evaramong@portugalmail.pt
RESUMEN
El estudio estructural de las clulas cancerosas ha sido fundamental en el
desarrollo de las metodologas de identificacin y diagnostico de diversos tipos de cncer.
Los avances en el conocimiento de la estructura de la membrana celular, aportan las
bases para conocer los cambios fisiolgicos asociados a algunos padecimientos
cancerosos, logrando el establecimiento de una relacin entre las condiciones fisiolgicas
y la estructura membranal. La microscopia de fuerza atmica (AFM), representa una
herramienta nueva capaz de realizar anlisis de la superficie de la membrana plasmtica
a nivel nanomtrico, al generar imgenes de alta resolucin en tres dimensiones, aportar
informacin acerca de sus caractersticas mecnicas (fuerzas adhesin y atraccin). En
este estudio la superficie de membrana plasmtica de clulas HeLa fue visualizada a
travs de imgenes de alta resolucin con AFM. Partculas de 20nm y poros de 60nm
fueron identificados exitosamente. Adicionalmente la medicin de fuerzas de interacciones
entre la punta de AFM y la superficie celular, muestra diferencias entre propiedades de
substrato. En el presente trabajo se desarroll una nueva metodologa para la medicin y
evaluacin de propiedades mecnicas para la diferenciacin de valores de fuerzas
cuando la punta interacciona con las clulas o con el medio de cultivo. Por ejemplo la
fuerza de adhesin entre punta y medio de cultivo es alrededor de dos veces mayor que
la interaccin punta-membrana celular. Estos resultados obtenidos son preliminares,
dentro de un objetivo ms complejo, dirigido a desarrollar una nueva metodologa de
identificacin de composicin (protenas y lpidos) de la superficie de membrana a nivel
nanomtrico. La exposicin de este trabajo revela a detalle los pasos de esta nueva
metodologa
Palabras clave: Nanoestructura, Microscopia de Fuerza Atmica, curva de fuerza.
RESUMEN EN EXTENSO
El estudio estructural de las clulas cancerosas ha sido fundamental en el
desarrollo de las metodologas de identificacin y diagnostico de diversos tipos de cncer.
Los avances en el conocimiento de la estructura de la membrana celular, aportan las
bases para conocer los cambios fisiolgicos asociados a algunos padecimientos
cancerosos, logrando el establecimiento de una relacin entre las condiciones fisiolgicas
y la estructura membranal.
El AFM fue diseado originalmente para el estudio de la topografa de superficies,
produce un mapa, a partir de una serie de mediciones, tomadas en los planos cartesianos
X, Y y Z a lo largo de la superficie, proporcionando una imagen tridimensional de
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resolucin manomtrica de la superficie celular sin daarla al momento del anlisis (figura
1).
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E
D
Las propiedades mecnicas de las superficies estudiadas, esta dada por las
imgenes de fase y amplitud en conjunto con la medicin de fuerzas de atraccin y
adhesin. En la medicin de sus propiedades mecnicas, se obtuvieron los valores de
fuerzas de atraccin y adhesin, del sustrato de Au (111), el medio de cultivo (DMEM) y
en la superficie de la membrana celular, donde se observ que las fuerzas presentes en la
superficie de la membrana celular son 0.064 atraccin y 0.64nN de adhesin, los valores
de el medio de cultivo son de 0.18-0.2 atraccin y 1-1.5nN de adhesin y los del sustrato
son de 0.0075nN de atraccin y 0.17-0.2nN de adhesin. Las fuerzas de atraccin del
sustrato con el medio de cultivo se presentaron un mayor valor, siendo seguido por el
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