LISOSOMAS

ORGANELAS CITOPLASMTICAS
LIMITADAS POR UNA SOLA
MEMBRANA.
DESCUBIERTAS POR CHRISTIAN DE
DUVE.
PRESENTES EN TODAS LAS CLULAS
EUCARIOTAS.
CONTIENEN 50-60 ENZIMAS
HIDROLTICAS.
SON LOS DEGRADADORES DE
RESIDUOS O DESECHOS DE LA
CLULA.
SU FUNCION CATABLICA ES
COMPLEMENTADA POR ORGANELAS
ASOCIADAS A LOS LISOSOMAS
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H. Le ama
(LROS).
z

LISOSOMAS
MATRIZ LISOSOMAL CIDA
(PH 4,8) FAVORABLE PARA
ACTIVIDAD ENZIMTICA.
2 CLASES DE PROTENAS
SON ESENCIALES PARA SU
FUNCIONAMIENTO:
HIDROLASAS
LISOSOMALES.
PROTENAS INTEGRALES
DE LA MEMBRANA
LISOSOMAL (LMPs)
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LISOSOMAS

ENZIMAS HIDROLTICAS SON

ELABORADAS EN EL RE Y
MODIFICADAS EN EL APARATO DE
GOLGI.
50-60 ENZIMAS HIDROLTICAS.

DEGRADAN MATERIAL PROCEDENTE

DE:
ENDOCITOSIS
FAGOCITOSIS
AUTOFAGIA
PARTICIPAN EN:
DEGRADACIN EN VOLUMEN
PROCESAMIENTO PROPROTENAS
PROCESAMIENTO DE ANTGENOS
DEGRADACIN DE LA MATRIZ
EXTRACELULAR
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INICIACIN DE APOPTOSIS

LISOSOMAS
PROTENAS INTEGRALES DE LA
MEMBRANA LISOSOMAL (LMPs), APROX.
25 EN LISOSOMAS DE MAMFERO.
CUMPLEN DIVERSAS FUNCIONES:
ACIDIFICACIN DEL LUMEN
LISOSOMAL.
IMPORTACIN DE PROTENAS
DESDE EL CITOSOL.
FUSIN DE MEMBRANAS.
TRANSPORTE DE PRODUCTOS DE
DEGRADACIN AL CITOPLASMA.
LAS MS ABUNDANTES:
PROTENA DE MEMBRANA
ASOCIADA AL LISOSOMA 1 (LAMP1).
PROTENA DE MEMBRANA
ASOCIADA AL LISOSOMA 2 (LAMP2).
PROTENA INTEGRAL DE MEMBRANA
LISOSOMAL 2 (LIMP2).
TETRASPANIN CD63.
BOMBA DE PROTONES TIPO
VACUOLAR.
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CELULAS ESPECIALIZADAS EN
FAGOCITOSIS TIENEN GRAN CANTIDAD DE
LISOSOMAS.
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EVENTOS DURANTE LA
FAGOCITOSIS: FORMACION DEL

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ACTIVIDAD EN LOS FAGOLISOSOMAS

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LAS ENZIMAS DESTRUYEN EL CONTENIDO

DEL FAGOLISOSOMA

LISOSOMAS
BIOGNESIS LISOSOMAL:

REQUIERE INTEGRACIN DE
VAS ENDOCTICA Y
BIOSINTTICA.
FRECUENTEMENTE EMERGE
DEL APARATO DE GOLGI.
EN ALGUNOS CASOS
DESARROLLA
GRADUALMENTE A PARTIR
DE ENDOSOMAS TARDOS .

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FOR ANUSMP-FMH-BCM-2015-II
ANIMATED LOOK AT LYSOSOMAL FUNCTION.
HTTP://HIGHERED.MCGRAW-HILL.COM/SITES/007
2507470/STUDENT_VIEW0/CHAPTER3/ANIMATION_

10

LAS CLULAS CONTIENEN MLTIPLES

SISTEMA PARA
DEGRADAR PROTENAS.
El Sistema Ubiquitin-proteasoma
El Sistema Lisosomal
El Sistema Intra-mitochondria
Calpains (Ca2+-dependiente de proteases)
Caspasas
Proteasas de membranas
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11
9

DEGRADACIN DE
PROTENAS
INTRACELULARES Y EL
SISTEMA DE
PROTEASOMAS UBIQUITIN
(SPU)

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DEGRADACIN DE PROTEINAS
MAL PLEGADAS
MAL PLEGADA = NO
FUNCIONAL.
DESNATURALIZACION.
ROMPE ENLACES
COVALENTES, NO
COVALENTES,
DISULFURO.
CHAPERONA-N
GLUCANASAUBIQUITINA.
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PROTEOSOMA.

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IMPORTANCIA CLINICA
Muchas enfermedades neurolgicas y otras pueden ser causadas por la
acumulacin mas que por la degradaciones protenas con estructuras
anormales.
Enfermedad de Alzheimer (amyloid, tau)
Enfermedad de Huntington (Huntingtin)
Enfermedad de Parkinson (-synuclein)
Tau aggregates
(Azheimers disease)

Enfermedad de ALS Lou Gerhigs (SOD)

Enfermedad de la espina-Bulbar y atrofia

muscular

(receptores de andrgenos )
Enfermedad por Priones Mad Cow disease (prion)
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Lewy Bodies
(Parkinsons Disease)

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ROL FISIOLGICO DE LA DEGRADACIN

INTRACELULAR DE PROTENAS
Control de calidad
Procesamiento antignico
Regulacin en funciones celulares
Adaptacin a estadios fisiolgicos
o patolgicos
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EL MODELO UBIQUITIN-PROTEASOMA
PARA LA DEGRADACIN DE PROTENAS
TIENE DOS FASES.
Proteina
ATP
ADP

Modificacin del substrato

por ubiquitin

Ub
ATP
ADP

Pptidos
y
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amino cidos

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Degradacin del substrato

Por el proteasoma
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UBIQUITINA
76 amino acids

Carboxyl terminus

Gly-C-OH

Mr = 8,000

(glycine 76)

Altamente conservado

Ampliamente distribuido

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(glycine 76)

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Protenas Ubiquitinadas son degradadas

Por el proteasoma.

Proteolisis

ATP

ADP

Peptides and
amino acids

Not degraded
Proteasome
Reconoce la cadena
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Poliubiquitin y no la proteina

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18
Monoubiquitin

LA ESPECIFICIDAD PARA UBIQUITINACION SE LLEVA

A CABO CON MLTIPLES ENZIMAS
DE CONJUGACIN.
degron

E3(n)

E3(n)

Ubiquitin
=

O
-C-OH

E1

E2(n)

E1

E2(n)

ATP

E2(n)

G76

PREMIO NOBEL 2004

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ESTRUCTURA DE UN
PROTEOSOMA

a)Imagen de microscopia de
electronicaproteosoma 26 S
de levadura S. cerevisae
b)Representacin
esquemtica de la estructura
y funcin de de
proteosoma 26 S

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CLASIFICACIN DE MUERTE
CELULAR
APOPTOSIS
NECROSIS
AUTOFAGIA

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MUERTE CELULAR
APOPTOSIS
AUTOFAGIA
CORNIFICACIN
NECROSIS
MODALIDADES ATPICAS (EN ESTUDIO):
CATSTROFE MITTICA (MUERTE
CELULAR PRECEDIDA POR
MULTINUCLEACIN O MUERTE CELULAR
DURANTE METAFASE)
ANOIKIS
EXCITOTOXICIDAD
DEGENERACIN WALLERIANA
PARAOPTOSIS
PIROPTOSIS
PIRONECROSIS
ENTOSIS
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MUERTE CELULAR

23

Hotchkiss R et all. Cell death. N Engl J Med 2009; 361: 1570-83

APOPTOSIS

PRIMERA DENOMINACIN: NECROSIS POR

CONTRACCIN (SHRINKAGE NECROSIS).
1972 KER LA DENOMIN APOPTOSIS.
CAER O MORIR COMO CAEN LOS
PTALOS O LAS HOJAS EN OTOO
(GRIEGO).
OCURRE DURANTE TODA LA VIDA.
FUNDAMENTAL EN LA HOMEOSTASIS.
DE CRUCIAL IMPORTANCIA DURANTE EL
DESARROLLO.
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24

APOPTOSIS CELULAR
H. ROBERT HORVITZ (1986) INVESTIGO EL MODELO GENTICO
IMPLICADO EN LA MUERTE CELULAR PROGRAMADA.

USANDO UN SISTEMA MODELO CONOCIDO Y CARACTERIZADO,

EL NEMATODO CAENORHABDITIS ELEGANS.

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25

APOPTOSIS
LA APOPTOSIS, A DIFERENCIA DE LA NECROSIS, CONSUME
ATP, CUYA ENERGA ES UTILIZADA PARA LA ACTIVACIN DE
UNAS ENZIMAS LLAMADOS

CASPASAS, CUYA

ACTIVACIN EN CASCADA PRODUCEN LOS EFECTOS QUE

PODEMOS VER EN LA CLULA.

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27

Mechanisms of caspase activation

a. Proteolytic cleavage e.g.
pro-caspase 3

b. Induced proximity, e.g.

pro-caspase 8

c. Oligomerization, e.g. cyt c,

Apaf-1 & caspase 9
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28

Back

APOPTOSIS
NO INDUCE RESPUESTA INFLAMATORIA.
CAMBIOS MORFOLGICOS:
PRDIDA DE ADHESIN CELULAR
CONTRACCIN CELULAR POR PRDIDA DE
AGUA Y Na+
CONDENSACIN DE CROMATINA A NIVEL
NUCLEAR (ESTRUCTURAS EN MEDIA LUNA)
NCLEO
SE
FRAGMENTOS

ROMPE

EN

MLTIPLES

FRAGMENTACIN DEL DNA (PIEZAS DE

180-200 PB)
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29

APOPTOSIS
CAMBIOS MORFOLGICOS:
SE MANTIENE INTEGRIDAD DE LA
MEMBRANA PLASMTICA
FORMACIN
DE
CUERPOS
APOPTTICOS
QUE
SON
RPIDAMENTE
RECONOCIDOS
Y
FAGOCITADOS POR MACRFAGOS O
POR CLULAS VECINAS SIN PRDIDA
DE SU CONTENIDO.
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30

APOPTOSIS
MORFOLGICA:
ENCOGIMIENTO
NUCLEAR
Y
CELULAR,
CONDENSACIN
DE
CROMATINA
(PICNOSIS),
FORMACIN
DE
YEMAS,
FRAGMENTACIN NUCLEAR (CARIORREXIS) Y
FORMACIN DE CUERPOS APOPTTICOS.
BIOQUMICA:
PERMEABILIZACIN
DE
MEMBRANA
MITOCONDRIAL
(PMM)
ACTIVACIN MASIVA DE LA CASPASAS.
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LA
Y/O

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PROCESOS EN LOS QUE INTERVIENE

LA APOPTOSIS
1.- En toda etapa del desarrollo o
reparacin tisular en donde se
produzcan clulas en exceso.
2.- Eliminacin de linfocitos.
3.- Eliminacin de clulas infectadas
y tumorales
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ETAPAS DE LA APOPTOSIS:
1.- Activacin (induccin negativa/positiva)
*Receptores
a.- de muerte (Fas, TNF)
b.- normales (glutamato)
*Rutas de transduccin celular (mensajeros: Ca 2+,
radicales libres, protenas codificadas por genes
supresores)
2.- Decisin (mitocondria)
3.- Ejecucin (degradacin de protenas y cidos nucleicos)
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Caspasas

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33

VAS QUE CONDUCEN A LA APOPTOSIS

VA INTRNSECA (MITOCONDRIAL)
VA EXTRNSECA (RECEPTOR DE MUERTE)

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VAS QUE CONDUCEN A LA

APOPTOSIS
VA INTRNSECA (MITOCONDRIAL)
CONTROLADA POR LA INTERACCIN DE PROTENAS
PRO-APOPTTICAS Y ANTI-APOPTTICAS DE LA
FAMILIA BCL2.
REGULADA POR LA CASPASA 9 (DAO CELULAR
ABRUMADOR).
INICIADORES DE LA VA:
INCREMENTO INTRACELULAR DE ROS
DNA DAADO
RESPUESTA DE PROTENAS NO PLEGADAS
DEPRIVACIN DE FACTORES DE CRECIMIENTO
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FAMILIA DE PROTENAS BCL2

ANTIPROAPOPTTICO
APOPTTICO
BCL2

BAX

BCL-XL

BAK

BCLW

BIM

MCL1

BID

A1

PUMA

BOO/DIVA
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VAS QUE CONDUCEN A LA

APOPTOSIS
VA EXTRNSECA (RECEPTOR MUERTE):

INICIA
CUANDO
MIEMBROS
DE
LA
SUPERFAMILIA TNF SE UNEN A RECEPTORES
MUERTE DE LA SUPERFICIE CELULAR.

RECEPTORES
DE
MEMBRANA
DE
SUPERFAMILIA DE RECEPTORES TNF (CD95,
DR3 Y DR4), INDUCEN EL RECLUTAMIENTO
PROXIMAL DEL COMPLEJO ACTIVADOR DE
CASPASA.
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SE ACTIVA LA CASPASA-8.

37

VAS QUE CONDUCEN A LA APOPTOSIS

CASPASA 8 Y CASPASA 9 ACTIVADAS MOVILIZAN A

SU VEZ A LAS CASPASAS 3, 6 Y 7, PROTEASAS
QUE INICIAN LA DEMOLICIN DE LA CLULA A
TRAVS DE LA DEGRADACIN DE NUMEROSAS
PROTENAS Y LA ACTIVACIN DE DNASAS.

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38

VAS DE LA
APOPTOSIS

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39

Apoptosis signal to kill infected cells

Cytolytic lymphocyte/CTL (& natural killer lymphocyte) presents
Fas ligand/CD178 on its surface to tell the infected cell to die

Fas ligand

CT
L

Virally
infected
cell

Externally driven

Apoptotic signals
Cytochrome c

Initiator caspases
The immunological synapse
holds the cells much tighter
together than shown here
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Fas/ CD95 is the

death receptor

Execution caspases
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40

Apoptosis events

NECROSIS
CUANDO LAS CLULAS SUFREN DAOS TALES COMO
QUEMADURAS, ACCIDENTES, RADIACIONES, TRAUMAS,
INFECCIONES, ETC. SE PRODUCE NECROSIS.
NECROSIS
LA MUERTE NO OCURRE DE FORMA ORDENADA, DE
MANERA GENERAL EL NCLEO NO PRESENTA CAMBIOS
APARENTES, LAS MITOCONDRIAS APARECEN
DAADAS, EL AGUA Y IONES FLUYEN HACIA EL
CITOPLASMA Y LA CLULA SE HINCHA, CON LO QUE
TERMINA POR ROMPERSE LIBERANDO EL CONTENIDO
CELULAR QUEDANDO EN EL MEDIO PROTEASAS Y
SEALES QUE ATRAEN CLULAS DEL SISTEMA
INMUNITARIO,
POR LO
QUE TIENE LUGAR UNA
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41
REACCIN INFLAMATORIA EN LA ZONA.

NECROSIS

CARACTERSTICAS MORFOLGICAS:
EDEMA NUCLEAR Y MITOCONDRIAL.
FORMACIN DE PROLONGACIONES EN
LA SUPERFICIE CELULAR.
DESAGREGACIN DE RIBOSOMAS.

Caractersticas morfolgicas (si persiste la

noxa):
Se acentan ms los cambios.
Burbujeo extremo en la superficie
celular.
Gran dilatacin mitocondrial.
Ruptura de la membrana.
Disolucin de las organelas y ncleo.

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42

NECROSIS
CADAVER

(GRIEGO).
RESPUESTA A UNA
NOXA.
EL ESTMULO DE LA
MUERTE ES LA CAUSA
DIRECTA DE LA
DEFUNCIN CELULAR.
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43

NECROSIS

MUERTE CELULAR POR

AGRESIN EXTERNA
(FSICA, QUMICA O
BIOLGICA).
GRAN RESPUESTA
INFLAMATORIA EN EL
LUGAR DE LA INJURIA.
CAMBIOS
GENERALMENTE
DESDE PARTE
EXTERNA HACIA LA
INTERNA.

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AUTOFAGIA
COMERSE UNO MISMO (GRIEGO).
PROCESO POR EL CUAL LA CLULA RECICLA
SUS PROPIAS ORGANELAS Y COMPONENTES
MACROMOLECULARES NO ESENCIALES,
REDUNDANTES O DAADOS.
RESPUESTA ADAPTATIVA AL STRESS SUB-LETAL.
PARTICIPA EN:
SUPRESIN DEL CRECIMIENTO DEL TUMOR.
SUPRESIN DE PROTENAS TXICAS MAL PLEGADAS.
ELIMINACIN DE MICROORGANISMOS
INTRACELULARES.
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48
PRESENTACIN DE ANTGENOS.

 A LO LARGO DEL DESARROLLO CUALQUIER

ORGANISMO NECESITA LA DESHACERSE DE
CIERTAS ESTRUCTURAS Y CREAR OTRAS
DURANTE UN PROCESO DE METAMORFOSIS.

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49

AUTOFAGIA,
CONTROL DE
LA CALIDAD
DE LA
PROTENA Y
NEURODEGE
NERACIN

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50

AUTOFAGIA
TRES FORMAS:

1.MACROAUTOFAGIA
2.MICROAUTOFAGIA
3.AUTOFAGIA MEDIADA POR
CHAPERONAS

REGULA FORMACIN DE
AUTOFAGOSOMA:

FOSFATIDILINOSITOL 3 KINASA
(PI3K)
BECLIN-1 (BECN1)
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MTOR (SIROLIMUS)

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ASPECTOS FISIOLGICOS Y
MOLECULARES
ESTADIOS:

1.VESCULAS NUCLEARES
2.ELONGACIN VESICULAR
3.FUSIN DE UNA DOBLE MEMBRANA (AUTOFAGOSOMA/LISOSOMA) FORMACIN DEL AUTOLYSOSOMA.
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