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LUIS HUAYANAY CONDE

201520111313A

DISTRIBUCIN UNIVERSAL DE
MICROORGANISMOS
MICROBIOLOGA

-DISTRIBUCIN UNIVERSAL DE
MICROORGANISMOS -

-Valor CreativoDISTRIBUCIN UNIVERSAL DE

MICROORGANISMOS
Contenido
OBJETIVOS..................................................................................................................... 2
MARCO TERICO........................................................................................................... 3
MORFOLOGA DE LAS COLONIAS BACTERIANAS.......................................................5
LOS MEDIOS DE CULTIVO........................................................................................... 5
CONDICIONES GENERALES PARA EL CULTIVO DE MICROORGANISMOS......................6
MEDIOS DE CULTIVOS MS USADOS EN MICROBIOLOGA INDUSTRIAL......................8
METODOLOGA.............................................................................................................. 8
PROCEDIMIENTO A................................................................................................... 10
PROCEDIMIENTO B................................................................................................... 10
RESULTADOS Y OBSERVACIONES:................................................................................11
* Lugar: Laboratorio microbiologa...........................................................................11
* Lugar: Fotocopiadora de la FIA.............................................................................. 12
DISCUSIONES.............................................................................................................. 14
DETECCIN Y MEDIDA DEL CRECIMIENTO...............................................................15
CICLO DE CRECIMIENTO DE POBLACIONES..............................................................16
FACTORES FSICOS Y QUMICOS QUE INFLUYEN EN EL CRECIMIENTO BACTERIANO.17
CONCLUSIONES........................................................................................................... 19
RECOMENDACIONES................................................................................................... 20
BIBLIOGRAFA.............................................................................................................. 21
ANEXOS....................................................................................................................... 21
CUESTIONARIO............................................................................................................ 22
Procedentes del suelo y las plantas.........................................................................22
Procedentes de animales y personas.......................................................................22
Procedentes del aire del mar................................................................................... 23

-DISTRIBUCIN UNIVERSAL DE
MICROORGANISMOS OBJETIVOS

-Valor Creativo-

Reconocer la importancia que tienen los microorganismos en el cual nos encontramos y saber en que
condiciones habitan.
Considerar la importancia que tiene la adecuada preparacin del medio de cultivo en la prctica de
microbiologa.
Entender la necesidad de evitar la contaminacin tanto de los medios del cultivo como de los
instrumentos utilizados en el laboratorio de microbiologa.
Observar y catalogar los diferentes tipos de microorganismos que se desarrollan en diferentes
ambientes de la facultad.
Familiarizarse con los materiales y su uso en el laboratorio de microbiologa para futuros laboratorios.

MARCO TERICO

Cultivar un microorganismo significa promover intencionalmente el desarrollo de ste en medios de

cultivo y condiciones de laboratorio controladas. La poblacin de microorganismos desarrollada en un
medio se de nominacultivo. Cuando ste contiene una sola especie de microorganismo, se denomina
cultivo puro oaxnico, cuandocontiene ms de una especie de microorganismos se denominacultivo
mixto. Un cultivo tipo contiene una especieconocida de microorganismos y es conservada en el
laboratorio para realizar diversos ensayos y estudios.Un cultivo axnico consiste en una sola especie
microbiana, proveniente de una sola clula. Los cultivos axnicosson muy raros en la naturaleza. En
los medios naturales -por ejemplo, en el suelo, agua, o en el cuerpo humano-existen cultivos mixtos.
En un cultivo mixto, viven muchas y diferentes especies de forma conjunta. Un cultivoaxnico se
obtiene artificialmente en el laboratorio. A la hora de obtener un cultivo axnico se han
detomar precauciones especiales, ya que los microorganismos estn por todas partes, en la
naturaleza, en el laboratorio yen los instrumentos y recipientes usados en los experimentos. Estos
microorganismos no deseados ocontaminantes deben ser eliminados de un cultivo para que ste
pueda ser axnico. El segundo paso paraobtener un cultivo axnico es inocular o introducir, una sola
clula de un microorganismo en un medio slido oliquido, esterilizado previamente. De esta manera,
aislamos un solo microorganismo del resto y se podrmultiplicar en condiciones favorables. Un clon
est constituido por una poblacin de clulas descendientes de unsolo microorganismo. Una colonia
es un clon lo suficientemente grande como para ser visible sobre la superficiede un medio slido.Un
cultivo microbiano que ha estado creciendo por cierto tiempo en el mismo tubo o matraz, debe ser
transferidoa un medio de cultivo nuevo, de otra manera el crecimiento y sobrevivencia no pueden
continuar. En estatransferencia se deben considerar dos aspectos bsicos referentes a: no introducir
microorganismos indeseables(contaminantes) y concentracin o carga microbiana de la muestra
(inculo) a sembrar.
Para impedir la contaminacin de los cultivos, es necesario tener plena conciencia de la ubicuidad de
los microorganismos, lo que determina que el are y todas las superficies estn densamente pobladas
por microorganismos, de este modo en la transferencia de una muestra microbiolgica a otro
recipiente, se debentener una serie de cuidados que eliminen los riesgos de contaminacin. Estos
incluyen el rea de trabajo, ellavado de las manos, la esterilizacin de todos los utensilios y medios
de cultivo a emplear y realizar latransferencia del microorganismo en una zona estril, la que se
obtiene trabajando cerca de la flama del mechero.Al conjunto de procedimientos realizados para
prevenir o evitar la contaminacin se le llama tcnica asptica; elseguimiento cuidadoso y detallado
de la misma evita accidentes tales como: o

-DISTRIBUCIN UNIVERSAL DE
MICROORGANISMOS

La contaminacin y prdida del cultivo en estudio o La salida y dispersin de microorganismos del

cultivo, lo que ocasionara la contaminacin de utensilios,productos y del personal. Este ltimo
aspecto es particularmente importante cuando se trabaja concultivos de microorganismos
patgenos.Con relacin a la concentracin del inculo, un error frecuente del principiante consiste en
tomar muestrasgrandes, lo que es innecesario. Una colonia de bacterias del tamao de la cabeza de
un alfiler contiene variosmillones de microorganismos, es obvio que con una cantidad pequesima
(casi invisible) que se adhiera al asa, ser ms que suficiente para efectuar una transferencia exitosa.
Dispositivos empleados en la transferencia de muestras microbianas: hisopo, pipeta (para uso
microbiolgico sonterminales y la parte superior o boquilla debe estar protegida con filtro de algodn),
pipeta pasteur, cable de Kolleo portasa con alambre de platino dispuesto en forma de: aguja, asa,
esptula y/o gancho.En la transferencia de microorganismos se emplean agujas, asas de inoculacin,
hisopos, pipetas o pipetaspasteur que debern esterilizarse previamente. La utilizacin de estos
dispositivos, as como de los diferentesmedios de cultivo tienen aplicaciones especficas. Por
ejemplo: los medios lquidos se preparan en tubos omatraces que se cubren con tapones de algodn
o tapones especiales. Un cultivo lquido puede ser transferidomediante un asa microbiolgica, un
hisopo, pipeta o pipeta pasteur; el inculo se deposita dentro del caldo omedio lquido. En este tipo
de cultivos los microorganismos presentan un desarrollo particular que se manifiestaen la superficie o
a travs de todo el lquido. Una de las ventajas que presenta este tipo de cultivo se refiere a
laposibilidad de agitarlos acelerando la velocidad de microorganismos anaerobios, por otra parte, en
este tipo decultivos, las poblaciones se encuentran suspendidas y e fcil homogenizarlas, lo que
permite estandarizar laconcentracin del inculo. La desventaja que presentan, e que en ellos e difcil
detectar contaminacin a simplevista.Los medios semislidos e preparan en tubos, se inoculan con
aguja de siembra (asa recta) o pipeta pasteur; eneste ltimo caso es necesario calentar el medio y
cuando se encuentra en estado lquido y a una temperatura deaproximadamente 42C se agrega el
inculo, se homogeniza y se deja solidificar. Estos medios se emplean paraestudiar la movilidad de
los microorganismos
y para
favorecer
la
separacin
de
microorganismos
con
diferentesrequerimientos de oxgeno.Los medios slidos e preparan en tubos o matraces
dependiendo de la cantidad o de las necesidades, despusde esterilizarlos, estos se inclinan o
vierten en cajas de petri. La siembra se realiza con el asa, inoculando lasuperficie del agar con
mucha suavidad; en estos medios, los microorganismos al multiplicarse forman agregadosque se
hacen visibles a simple vista; a estos agregados se les denominan colonias, las que presentan
caractersticas que varan con el tipo de microorganismo cultivado y el medio de cultivo empleado.En
cualquier medio de cultivo es de primordial importancia ajustar el pH, ya que an cuando la mayora
de losmicroorganismos crecen mejor en pH neutro, algunos requieren de pH alcalino o cido, por lo
que al proporcionar un pH adecuado se favorecer el crecimiento del microorganismo de inters y la
obtencin del cultivo. Con estemismo propsito durante la incubacin se deben proporcionar las
condiciones adecuadas para el microorganismoen estudio. El crecimiento ptimo de los
microorganismos se presenta a temperaturas que la mayora de lasveces estn relacionadas con la
de su hbitat natural.Algunos microorganismos crecen por debajo de 15C, otros requieren
temperaturas ms elevadas (30 a 45C) yalgunos hasta 80C. Para alcanzar y mantener estas
temperaturas se puede usar una incubadora microbiolgicao un bao de agua a temperatura
constante, en tanto que para lo microorganismos que presentan su crecimientoptimo a temperaturas
entre 20 y 25C se pueden incubar en la gaveta o cajn del laboratorio, a temperaturaambiente.En
general las incubadoras microbiolgicas satisfacen las necesidades en cuanto a los rangos de
temperaturarequeridas por los microorganismos. La desventaja que tienen es que estos aparatos
funcionan con are seco, lo que determina la deshidratacin de los medios de cultivo. Por lo tanto, el
crecimiento de cualquier cultivo experimental que se realice en incubadora no debe prolongare por
ms de nueve das. Con relacin a las necesidades gaseosas, no todos los microorganismo crecen
en presencia de oxgeno atmosfrico; los que slocrecen en presencia de are se llaman aerobios
obligados; los que slo crecen en ausencia de oxgeno sedenominan anaerobios obligados o
estrictos, un tercer grupo se adapta a las dos condiciones y se le conocecomo facultativos. Existe
una cuarta categora que comprende bacterias que requieren oxgeno, pero slo loutilizan cuando

-Valor Creativo-

-DISTRIBUCIN UNIVERSAL DE
MICROORGANISMOS ste existe en concentraciones reducidas; a estos se les llama microaeroflicos. El desarrollo deestos
diferentes grupos e favorece mediante la agitacin de los cultivos o mediante la exclusin de oxgeno
paralo que se emplean sustancias reductoras o equipos especiales.Las bacterias son organismos
procariticos, se encuentran ampliamente distribuidas en la naturaleza, habitan enel agua, el suelo,
en la superficie o en el interior de plantas y animales incluyendo al hombre. Pueden vivir enforma
libre o en simbiosis con otros organismos, ya sea como parsitos, comensales o mutualistas.
Fisiolgicamente este grupo presenta caractersticas muy variables, hay bacterias mviles e
inmvilesfotosintticas y quimiotrficas, auttrofas y hetertrofas; se desarrollan en un rango muy
amplio de temperatura,pH y condiciones gaseosas.En el estudio de cultivos bacterianos algunos de
los criterios que se emplean para caracterizarlas incluyen:tamao, morfologa celular, forma de
agrupacin, reaccin a la tincin de Gram, formacin de esporas, movilidad,presencia de inclusiones
de reserva y caractersticas culturales en medios lquidos y slidos en los que presentan patrones de
desarrollo en cuanto a la forma, tamao, elevacin y color de las colonias.

-Valor Creativo-

MORFOLOGA DE LAS COLONIAS BACTERIANAS

El desarrollo de colonias sobre las superficies de un agar permite al microbiologa identificar las bacterias
porque las especies forman a menudo colonias con una forma y aspecto caractersticos.
La identificacin presuntiva o preliminar de una bacteria se basa en la morfologa colonial, para ello se forma
en cuenta las siguientes caractersticas:
1. Elevacin: Plana, bajo convexa, convexa rugosa, crateriforme y convexa y cncava.
2. Bordes: liso, dentado, ondulado, lobulado, cremado, ciliado y ramosa (mas comn liso)
3. Superficie: Lisa y Rugosa
4. Forma: Circular, ondulada y obulada.
5. Tamao: puntiforme, pequea, mediana y grande.
6. Transmisin de la luz: opaca o translucida.
7. Reflexin de la luz: Mate y Brillante.
8. Aspecto: Hmedo y Seco.
9. Consistencia: Butirosa (brillante, hmeda y translucida), Mucoide (como moco), Vitrea (opaca, seco)
y seca (si es dura).
10. Pigmento: Color (rojas, verdes, etc.) y olor.
La morfologa bacteriana es comparable a una estadstica ya que se deriva de una clula individual pero es la
caracterstica de la masa celular. As pues, por ejemplo, la pigmentacin es aparente en la colonia, pero no
en la clula individual, en el caso de la consistencia mucosa de algunas colonias esta se deriva de la
sustancia capsular en aquellas bacterias con cpsula muy grande.

LOS MEDIOS DE CULTIVO

-DISTRIBUCIN UNIVERSAL DE
MICROORGANISMOS Uno de los sistemas ms importantes para la identificacin de microorganismos es observar su crecimiento
en sustancias alimenticias artificiales preparadas en el laboratorio. El material alimenticio en el que crecen los
microorganismos es el Medio de Cultivo y el crecimiento de los microorganismos es el Cultivo. Se han
preparado ms de 10.000 medios de cultivo diferentes.

-Valor Creativo-

Para que las bacterias crezcan adecuadamente en un medio de cultivo artificial debe reunir una serie de
condiciones como son: temperatura, grado de humedad y presin de oxgeno adecuado, as como un grado
correcto de acidez o alcalinidad. Un medio de cultivo debe contener los nutrientes y factores de crecimiento
necesarios y debe estar exento de todo microorganismo contaminante.
La mayora de las bacterias patgenas requieren nutrientes complejos similares en composicin a los lquidos
orgnicos del cuerpo humano. Por eso, la base de muchos medios de cultivo es una infusin de extractos de
carne y Peptona a la que se aadirn otros ingredientes.
El agar es un elemento solidificante muy empleado para la preparacin de medios de cultivo. Se lica
completamente a la temperatura del agua hirviendo y se solidifica al enfriarse a 40 grados. Con mnimas
excepciones no tiene efecto sobre el crecimiento de las bacterias y no es atacado por aquellas que crecen en
l.
La Gelatina es otro agente solidificante pero se emplea mucho menos ya que bastantes bacterias provocan
su licuacin.
En los diferentes medios de cultivo se encuentran numerosos materiales de enriquecimiento como hidratos
de carbono, suero, sangre completa, bilis, etc. Los hidratos de Carbono se adicionan por dos motivos
fundamentales: para incrementar el valor nutritivo del medio y para detectar reacciones de fermentacin de
los microorganismos que ayuden a identificarlos. El suero y la sangre completa se aaden para promover el
crecimiento de los microorganismos menos resistentes.
Tambin se aaden colorantes que actan como indicadores para detectar, por ejemplo, la formacin de
cido o como inhibidores del crecimiento de unas bacterias y no de otras (el Rojo Fenol se usa como
indicador ya que es rojo en pH bsico y amarillo en pH cido. La Violeta de Genciana se usa como inhibidor
ya que impide el crecimiento de la mayora de las bacterias Gram-positivas).

CONDICIONES GENERALES PARA EL CULTIVO DE

MICROORGANISMOS
El desarrollo adecuado de los microorganismos en un medio de cultivo se ve afectado por una serie de
factores de gran importancia y que, en algunos casos, son ajenos por completo al propio medio.

1- disponibilidad de nutrientes adecuados

Un medio de cultivo adecuado para la investigacin microbiolgica ha de contener, como mnimo, carbono,
nitrgeno, azufre, fsforo y sales inorgnicas. En muchos casos sern necesarias ciertas vitaminas y otra
sustancia inductoras del crecimiento. Siempre han de estar presentes las sustancias adecuadas para ejercer
de donantes o captadores de electrones para las reacciones qumicas que tengan lugar.
Todas estas sustancias se suministraban originalmente en forma de infusiones de carne, extractos de carne o
extractos de levadura. Sin embargo, la preparacin de estas sustancias para su aplicacin a los medios de
cultivo provocaba la prdida de los factores nutritivos lbiles.
Actualmente, la forma ms extendida de aportar estas sustancias a los medios es utilizar peptona que,
adems, representa una fuente fcilmente asequible de nitrgeno y carbn ya que la mayora de los
microorganismos, que no suelen utilizar directamente las protenas naturales, tienen capacidad de atacar los
aminocidos y otros compuestos ms simples de nitrgeno presentes en la peptona.
Ciertas bacterias tienen necesidades nutritivas especficas por lo que se aade a muchos medios sustancias
como suero, sangre, lquido asctico, etc. Igualmente pueden ser necesarios ciertos carbohidratos y sales
minerales como las de calcio, magnesio, manganeso, sodio o potasio y sustancias promotoras del
crecimiento, generalmente de naturaleza vitamnica.
Muy a menudo se aaden al medio de cultivo ciertos colorantes, bien como indicadores de ciertas actividades
metablicas o bien por sus capacidades de ejercer de inhibidores selectivos de ciertos microorganismos.

-DISTRIBUCIN UNIVERSAL DE
MICROORGANISMOS 2- consistencia adecuada del medio
Partiendo de un medio lquido podemos modificar su consistencia aadiendo productos como albmina,
gelatina o agar, con lo que obtendramos medios en estado semislido o slido.
Los medios solidificados con gelatina tienen el gran inconveniente de que muchos microorganismos no se
desarrollan adecuadamente a temperaturas inferiores al punto de fusin de este solidificante y de que otros
tienen la capacidad de licuarla.
Actualmente los medios slidos son de uso universal, por su versatilidad y comodidad, pero hay tambin gran
cantidad de medios lquidos cuyo uso est ampliamente extendido en el laboratorio.

-Valor Creativo-

3- presencia (o ausencia) de oxgeno y otros gases

Gran cantidad de bacterias pueden crecer en una atmsfera con tensin de oxgeno normal. Algunas pueden
obtener el oxgeno directamente de variados sustratos. Pero los microorganismos anaerobios estrictos slo
se desarrollarn adecuadamente en una atmsfera sin oxgeno ambiental. En un punto intermedio, los
microorganismos microaerfilos crecen mejor en condiciones atmosfricas parcialmente anaerobias (tensin
de oxgeno muy reducida), mientras los anaerobios facultativos tienen un metabolismo capaz de adaptarse a
cualquiera de las citadas condiciones.

4- condiciones adecuadas de humedad

Un nivel mnimo de humedad, tanto en el medio como en la atmsfera, es imprescindible para un buen
desarrollo de las clulas vegetativas microbianas en los cultivos. Hay que prever el mantenimiento de estas
condiciones mnimas en las estufas de cultivo a 35-37C proporcionando una fuente adecuada de agua que
mantenga la humedad necesaria para el crecimiento de los cultivos y evitar as que se deseque el medio.

5- Luz ambiental
La mayora de los microorganismos crecen mucho mejor en la oscuridad que en presencia de luz solar. Hay
excepciones evidentes como sera el caso de los microorganismos fotosintticos.

6- pH
La concentracin de iones hidrgeno es muy importante para el crecimiento de los microorganismos. La
mayora de ellos se desarrollan mejor en medios con un pH neutro, aunque los hay que requieren medios
ms o menos cidos. No se debe olvidar que la presencia de cidos o bases en cantidades que no impiden el
crecimiento bacteriano pueden sin embargo inhibirlo o incluso alterar sus procesos metablicos normales.

7- Temperatura
Los microorganismos mesfilos crecen de forma ptima a temperaturas entre 15 y 43C. Otros como los
psicrfilos crecen a 0C y los termfilos a 80C o incluso a temperaturas superiores (hipertermfilos). En
lneas generales, los patgenos humanos crecen en rangos de temperatura mucho ms cortos, alrededor de
37C, y los saprofitos tienen rangos ms amplios.

8- Esterilidad del medio

Todos los medios de cultivo han de estar perfectamente estriles para evitar la aparicin de formas de vida
que puedan alterar, enmascarar o incluso impedir el crecimiento microbiano normal del o de los especmenes
inoculados en dichos medios. El sistema clsico para esterilizar los medios de cultivo es el autoclave (que
utiliza vapor de agua a presin como agente esterilizante)

-DISTRIBUCIN UNIVERSAL DE
MICROORGANISMOS -

-Valor
CreativoMEDIOS DE CULTIVOS MS USADOS EN
MICROBIOLOGA
INDUSTRIAL
Caldo nutritivo
Es un medio emprico de uso general para el cultivo de la mayora de las bacterias.
Los ingredientes son:
Pluripetona 5g
Extracto de carne 3g
Cloruro de sodio 5 gr.
Agua destilada 1000 ml
Se pesan los ingredientes y se calientan hasta que se disuelven. Una vez que se ha enfriado, se ajusta el pH
a 6.9 +- 0.2. En el autoclave a 1 atmsfera durante 15 minutos para precipitar los fosfatos. Se filtra y se
reparte en tubos tapados con algodn o con tapones a rosca (en esta ltimo caso no se ajusta
completamente las tapas). Se esteriliza a 1 atmsfera durante 20 minutos. Ajustar las tapas a roscar
antes de retirar del autoclave.

Agar nutritivo
El Agar nutritivo es un medio de cultivo usado normalmente como rutina para todo tipo de bacteria. Es muy
util porque permanece solido incluso a relativas altas temperaturas. Adems, el crecimiento bacteriano en
este agar lo hace en la superficie, por lo que se distinguen mejor las colonias pequeas.
En un caldo de nutrientes, la bacteria crece en el lquido, y aparece como una sustancia espesa, con colonias
dificilmente observables. El agar nutritivo contiene normalmente (w/v):

0.5 % Peptona

0.3 % extracto de carne/extracto de levadura

1.5 % agar

0.5% [[NaCl]

Agua destilada

pH casi neutro (6.8) a 25 C

-DISTRIBUCIN UNIVERSAL DE
MICROORGANISMOS METODOLOGA
El medio de cultivo constituye el aporte de nutrientes indispensables para el crecimiento de los
microorganismos. La composicin precisa depender de la especie que se quiera cultivar, porque las
necesidades nutricionales varan considerablemente. Hay microorganismos muy poco exigentes que crecen
bien en medios de laboratorio normales y microorganismos muy exigentes que necesitan determinadas
sustancias como vitaminas, suero o sangre para crecer.

-Valor Creativo-

Preparacin de agar nutritivo

1. Pesar 2,4 gr. De agar

2. Verter el agar en un
,mover con la bagueta.

3. Si el agar que no se
bao mara, hasta que

vaso precipitado y agregar 120ml. de agua

disuelve por completo se disuelve por medio de

hierva.

4. Calentar hasta 80c y despus colocar en 12 tubos de prueba de 15 ml. Agar tapar los tubos con
algodn
5. Colocar los tubos en una rejilla luego llevarlo al autoclave para esterilizarlos.
6. Luego esperar que la temperatura en el autoclave se eleve hasta 120 c despus de 15 min.
7. Despus sacar los 12 tubos y distribuirlos a los respectivos grupos.

Procedimiento para obtener caldo nutritivo

1. Emplear 8gr. por litro de agua destilada.
2. Si es necesario calentar hasta disolverlo completamente.
3. Distribuir y esterilizar en autoclave a 118C 121C durante 15 min.

-DISTRIBUCIN UNIVERSAL DE
MICROORGANISMOS PROCEDIMIENTO A

-Valor Creativo-

Tomar 4 tubos de agar nutritivo.

Vaciar el tubo de agar nutritivo en cada una de las 3 placas Petri estriles y en la
placa Petri no estril. Numerar las placas estriles del #1 al #3 y la placa no
estril con el #4.

Tubos con agar

Nutritivo fundido
Estril

Placas Petri
#1

#2

#3

#4

estriles #1, #2 y
#3. Placa Petri
No estril #4.

Una vez que el agar se haya solidificado, se debe destapar la placa Petri #1y exponer el
agar al aire del laboratorio de microbiologa de la FIA (grupo 2) y (grupo 3) la
fotocopiadora por 10 min o 15 min.
//Dividir la placa #2 en 4 partes, trazando lneas perpendiculares (cuatro cuadrantes) con
algn marcador.
//A. Pelo
B. Huella Digital
///C. Inoculador Estril
C
D. Inoculador no Estril
B
Las placas #3 y #4 no se deben abrir.
Invertir las placas petri e incubarlos a 37c por 48 horas.
Examinar las placas y dar la explicacion de lo ocurrido en cada caso

PROCEDIMIENTO B
Pipeta estril

pipeta no estril

pipeta estril

///

-DISTRIBUCIN UNIVERSAL DE
MICROORGANISMOS Pipeta estril

pipeta no estril

pipeta estril

-Valor Creativo-

1
Tubo estril

2
Tubo estril

3
Tubo no estril

///
1. Transferencias:
1.1.
Usando una pipeta estril, transferir el caldo nutritivo esterilizado de un tubo a un tubo de
prueba estril.
1.2.
Usando una pipeta no estril, transferir el caldo estril del segundo tubo a un tubo de
prueba estril, marcado con el n 2
1.3.
Usando una pipeta estril, transferir el caldo nutritivo a un tubo no esterilizado n 3.
2. Poner los tubos en el incubador a 37C e incubarlos por 48 horas.
3. Despus de las 48 horas examinar los tubos y explicar qu ha ocurrido.

RESULTADOS Y OBSERVACIONES:
Despus de 48 horas se revisaorn las placas petri para ver la presencia de microorganismos.
Los grupos #2 y #4 que se encargaron del procedimiento A, El grupo #4 se encarg de dejar la placa petri en
el laboratorio de microbiologa mientras que el grupo #2 se encarg de llevarlo a la fotocopiadora de la
facultad. Se observaron los siguientes resultados a las determinadas condiciones:

* Lugar: Laboratorio microbiologa

* 8 personas
* No limpio
* Ventilacin
* Polvo
*01 de abril del 2014 Hora: 1:45 pm

-DISTRIBUCIN UNIVERSAL DE
MICROORGANISMOS No se observ crecimiento de colonias en el sector C donde se puse el inoculador estril.

Grupo

Placa N1
estril

Placa N2 estril

-Valor CreativoPlaca
Placa N4 no
N3
estril

estril

Ambiente:
Laboratorio de
Microbiologa

Sector A:
Pelo

Sector B:
Huella

Sector
C:
Inocul
ador
estril

Sector D:
Inoculador no
estril

No abrir

No abrir

N de Colonias
(X)

21

41

20

Tamao

X= 1 mm(1)

1 mm(18)
2 mm(2)
10 mm(1)

1 mm(41)

1mm

X= 3mm(1)
X= 4mm(2)

X= 1 mm(2)
X= 2mm(2)
X= 3mm(1)
X= 4mm(1)

Margen

Entero(4)

Entero(5)
Ondulante(1)

Entero(21)

Entero(41)

Entero

Elevacin

Plana(4)

Plana(6)

Plana(21)

Plana(41)

Plana

Cremas(6)

Cremas(21)

Cremas(41)

Cremas

Opacas(6)

Opacas(21)

Opacas(41)

Opacas

Cromognesis

Cremas(4)

Caracteres
pticos

Opacas(4)

* Lugar: Fotocopiadora de la FIA

* 2 personas
* Limpio
* Ventilacin
* Polvo

-DISTRIBUCIN UNIVERSAL DE
MICROORGANISMOS *Sin Radiacin

-Valor Creativo-

*01 de abril del 2014 Fecha: 1:35 pm.

Grupo

Placa N1
estril

Placa N2 estril

Placa
N3
estril

Placa N4 no
estril

Ambiente:
Laboratorio de
Microbiologa

Sector A:
Pelo

Sector B:
Huella

Sector
C:
Inocul
ador
estril

Sector D:
Inoculador no
estril

No abrir

No abrir

N de Colonias
(X)

60

50

12

Tamao

X= 1 mm(1)

1 mm
2 mm

1 mm(41)

10mm

X= 2mm(1)

Xprom= 1
mm

Margen

Entero(2)

Entero(60)

Entero(50)

Entero(12)

Lobulado

Elevacin

Plana(2)

Plana(60)

Plana(50)

Plana(12)

Plana

Cremas(60)

Cremas(50)

Cremas(12)

Cremas

Opacas(60)

Opacas(50)

Opacas(12)

Opacas

Cromognesis

Caracteres
pticos

Cremas(2)

15 mm

Opacas(2)

El procedimiento B lo hicieron los grupos #1, #3 y #5. Se observaron los siguientes resultado en los caldos
nutritivos.
GRUPO 1

TUBO 1 ESTERIL/PIPETA
ESTERIL

TUBO 2
ESTERIL/PIPETA NO
ESTERIL (DEBE
HABER)

CANTIDAD DE
CRECIMIENTO

NO HAY CRECIMIENTO

NO HAY

TUBO 3 NO
ESTERIL/PIPETA ESTER

ESCASO

-DISTRIBUCIN UNIVERSAL DE
MICROORGANISMOS DISTRIBUCION DE
CRECIMIENTO

NO HAY DISTRIBUCION

NO HAY

POCO TRUBIO

OLOR

NO HAY OLOR

NO HAY

PUTRIDO

-Valor Creativo-

GRUPO 3

TUBO 1 ESTERIL/PIPETA
ESTERIL

TUBO 2 ESTERIL/PIPETA
NO ESTERIL (DEBE
HABER)

CANTIDAD DE
CRECIMIENTO

NO HICIERON EL TUBO

ABUNDANTE

NO HAY

DISTRIBUCION DE
CRECIMIENTO

SEDIMENTO

NO HAY

OLOR

PUTRIDO

NO HAY

GRUPO 5

TUBO 3A NO
ESTERIL/PIPETA
ESTERIL

TUBO 3B NO
ESTERIL/PIPETA
ESTERIL

CANTIDAD DE
CRECIMIENTO

ABUNDANTE

MODERADO

DISTRIBUCION
DE CRECIMIENTO

PELICULA

PELICULA

OLOR

PUTRIDO

PUTRIDO

TUBO 3 NO
ESTERIL/PIPETA
ESTERIL (DEBE HABE

DISCUSIONES
El aislamiento de bacterias a partir de muestras naturales se realiza, en la mayora de los casos, mediante la
produccin de colonias aisladas en cultivos slidos.
El crecimiento explosivo de las bacterias produce un gran nmero a partir de una nica clula inicial de forma
que, tras un periodo de tiempo de incubacin en las condiciones ambientales adecuadas, se produce una
colonia de individuos iguales.
Para crecer, un microorganismo necesita nutrientes que le aporten energa y elementos qumicos para la
sntesis de sus constituyentes celulares.
Dependiendo de la fuente de carbono que utilizan, los microorganismos se pueden clasificar en:
autotrofos: si es el CO2 atmosfrico (microorganismos que fotosintetizan)
heterotrofos si utilizan carbono orgnico.

-DISTRIBUCIN UNIVERSAL DE
MICROORGANISMOS Los microorganismos de importancia clnica son todos ellos hetertrofos.
La frmula elemental de un microorganismo es, aproximadamente, C4H7O2N lo que supone que los
componentes de las clulas son: carbono que representa alrededor del 50% del peso seco, oxgeno (32%),
nitrgeno (14%) y debe estar disponible, normalmente, en forma de NH4 o de aminocidos a los que se
pueda tomar su grupo amino; fsforo (3%) y debe estar en forma de PO43-, azufre que representa en torno al
1% y procede de aminocidos sulfurados o de SO42-; y otros elementos traza entre los que se encuentran
Fe, K, Mg, Mn, Co, Mb, Cu y Zn.

-Valor Creativo-

La elaboracin de medios de cultivo que permitan aislar microorganismos a fin de iniciar posteriores cultivos
puros requiere proporcionar los nutrientes antes citados y, en ciertos casos, algunos aminocidos o vitaminas
que determinados tipos de microorganismos no pueden sintetizar.
Los medios de cultivo se pueden clasificar en definidos cuando su composicin qumica se conoce totalmente
y complejos cuando no es el caso porque estn compuestos por mezclas de extractos de materiales
complejos (extracto de levadura, extracto de carne, etc.).
Por otra parte, los medios de cultivo pueden ser lquidos o bien slidos si se aade algn agente solidificante
que no sea consumible por los microorganismos (normalmente agar).
En funcin de los microorganismos que pueden crecer en ellos, los medios pueden ser:
selectivos cuando favorecen el crecimiento de ciertos microorganismos mientras suprimen el de otros (por
ejemplo, el medio SPS para clostridios),

diferenciales cuando alguno de sus componentes permite identificar las colonias de un tipo de
microorganismos (por ejemplo medios con hemates para identificar colonias de microorganismos
hemolticos)

selectivo-diferenciales cuando combinan las dos caractersticas anteriores (por ejemplo, el agar de
MacConkey para identificar Escherichia coli),

medios de enriquecimiento que permiten aislar un tipo determinado de microorganismo a partir de

una mezcla una poblacin mixta de gran tamao.

DETECCIN Y MEDIDA DEL CRECIMIENTO

Existen diferentes sistemas para detectar y medir el crecimiento de microorganismos; los principales son:
recuento directo, medida de la masa de las clulas, recuento d viables, medida del nmero de partculas,
medida de parmetros bioqumicos y medida de la actividad metablica.

Recuento directo: consiste en la observacin al microscopio de volmenes muy pequeos de

suspensiones de bacterias. Se usan unos portaobjetos especiales denominados cmaras de PetroffHausser. Para que la medida sea correcta es necesario que la densidad de clulas sea del orden de
105 por ml.
Medida de la masa de clulas: el sistema se basa en que las clulas en suspensin dispersan la luz
causando la turbidez del cultivo. La turbidez depende de la masa en suspensin y, por tanto,
midiendo esta se puede estimar aquella. Este es el parmetro de medida ms fcil de usar en los
cultivos de laboratorio. La densidad de clulas debe ser del orden de 105 por ml.
Recuento de viables: consiste en sembrar un volumen determinado de cultivo o muestra sobre el
medio de cultivo slido adecuado para estimar el nmero de viables contando el nmero de colonias
que se forman puesto que cada una de estas deriva de una UFC. Para que la medida sea correcta
desde el punto de vista estadstico, es necesario contar ms de 300 UFC.

-DISTRIBUCIN UNIVERSAL DE
MICROORGANISMOS En ciertas ocasiones en las que la densidad de microorganismos es demasiado baja, stos se pueden
recolectar por filtracin a travs de una membrana (de 0.2 m de tamao de poro) y posterior colocacin de
la membrana en un medio de cultivo adecuado para que se formen las colonias.

-Valor Creativo-

Medida del nmero de partculas usando contadores electrnicos de partculas. Estos sistemas no
nos indican si las partculas corresponden a clulas vivas o muertas; pero nos pueden dar una idea
del tamao de las partculas.
Medida de parmetros bioqumicos tales como la cantidad de ADN, ARN, protenas,
peptidoglicano, etc. por unidad de volumen.
Medida de actividad metablica de las bacterias como que respiran producen una disminucin del
potencial redox del medio en que se encuentran como consecuencia del consumo de oxgeno
(utilizacin de colorantes sensibles a oxidacin-reduccin tales como el azul de metileno).

CICLO DE CRECIMIENTO DE POBLACIONES.

En un cultivo bacteriano en medio lquido, se pueden diferenciar cuatro fases en la evolucin de los
parmetros que miden el crecimiento microbiano:

Fase lag o de adaptacin: Durante la que los microorganismos adaptan su metabolismo a las nuevas
condiciones ambientales (de abundancia de nutrientes) para poder iniciar el crecimiento exponencial.
Fase exponencial o logartmica: en ella la velocidad de crecimiento es mxima y el tiempo de
generacin es mnimo. Durante esta fase las bacterias consumen los nutrientes del medio a
velocidad mxima. La evolucin del nmero de clulas durante esta fase se explica con el modelo
matemtico descrito anteriormente. Esta fase corresponde a la de infeccin y multiplicacin dentro
del organismo del agente infeccioso.
Fase estacionaria: en ella no se incrementa el nmero de bacterias (ni la masa u otros parmetros
del cultivo). Las clulas en fase estacionaria desarrollan un metabolismo diferente al de la fase de
exponencial y durante ella se produce una acumulacin y liberacin de metabolitos secundarios que
pueden tener importancia en el curso de las infecciones o intoxicaciones producidas por bacterias.

/
Los microorganismos entran en fase estacionaria bien porque se agota algn nutriente esencial del medio,
porque los productos de desecho que han liberado durante la fase de crecimiento exponencial hacen que el
medio sea inhspito para el crecimiento microbiano o por la presencia de competidores u otras clulas que
limiten su crecimiento.

-DISTRIBUCIN UNIVERSAL DE
MICROORGANISMOS La fase estacionaria tiene gran importancia porque probablemente represente con mayor fidelidad el estado
metablico real de los microorganismos en muchos ambientes naturales.

Fase de muerte: se produce una reduccin del nmero de bacterias viables del cultivo.

-Valor Creativo-

Las fases, parmetros y cintica de crecimiento discutidas para el caso de los medios lquidos se presentan
tambin en los slidos. La cintica de crecimiento, en este caso, slo se puede seguir utilizando unos
sistemas de deteccin especiales siendo el ms sencillo, la medida del nmero de clulas viables por unidad
de superficie o por unidad de masa.

FACTORES FSICOS Y QUMICOS QUE INFLUYEN EN EL

CRECIMIENTO BACTERIANO.

Temperatura: Cada microorganismo tiene una temperatura de crecimiento adecuada. Si

consideramos la variacin de la velocidad de crecimiento en funcin de la temperatura de cultivo,
podemos observar una temperatura mnima por debajo de la cual no hay crecimiento; a temperaturas
mayores se produce un incremento lineal de la velocidad de crecimiento con la temperatura de cultivo
hasta que se alcanza la temperatura ptima a la que la velocidad es mxima. Por encima de
esta temperatura ptima, la velocidad de crecimiento decae bruscamente y se produce la muerte
celular.

El aumento de la velocidad de crecimiento con la temperatura se debe al incremento generalizado de la

velocidad de las reacciones enzimticas con la temperatura. Se denomina coeficiente de temperatura a la
relacin entre el incremento de la velocidad de reaccin y el de temperatura. En trminos generales, la
velocidad de las reacciones bioqumicas suele aumentar entre 1.5 y 2.5 veces al aumentar 10C la
temperatura a la que tienen lugar.
La falta de crecimiento a temperaturas bajas se debe a la reduccin de la velocidad de las reacciones
bioqumicas y al cambio de estado de los lpidos de la membrana celular que pasan de ser fluidos a
cristalinos impidiendo el funcionamiento de la membrana celular.
La muerte celular a altas temperaturas se debe a la desnaturalizacin de protenas y a las alteraciones
producidas en las membranas lipdicas a esas temperaturas.
Es importante tener en cuenta que a temperaturas bajas, el metabolismo celular es lento y las clulas paran
de crecer; aunque suelen morir. Sin embargo, cuando la temperatura es superior a la ptima, se produce la
muerte celular rpidamente y las clulas no pueden recuperar su capacidad de divisin si baja posteriormente
la temperatura. Esto permite esterilizar por calor y no por fro.
Hay varios tipos de microorganismos en funcin de sus temperaturas de crecimiento mnima, mxima y
ptima.

Temperatura

Temperatura

Temperatura

Tipo de
microorganismo

mnima

ptima

mxima

Mesfilo

5 - 15

30 - 45

35 47

Psicrfilo

-5 + 5

12 - 15

15 20

Psicrtrofo

-5 + 5

25 - 30

30 35

-DISTRIBUCIN UNIVERSAL DE
MICROORGANISMOS Termfilo

40 - 45

55 - 75

60 - 90

-Valor Creativo-

Los microorganismos psicrtrofos son mesfilos que pueden crecer a temperaturas bajas. Por tanto, se les
puede considerar como psicrfilos facultativos. Esto es importante desde el punto de vista aplicado porque
cuando se encuentran contaminando alimentos, son capaces de crecer en condiciones de refrigeracin (4 8C) y de producir infecciones en los consumidores del alimento (30 - 35 C).
Desde el punto de vista clnico, los microorganismos capaces de producir infecciones en pacientes son los
mesfilos y algunos psicrtrofos ya que sus temperaturas ptimas de crecimiento coinciden con las
corporales.
Actividad de agua (aw): Se denomina actividad de agua a la relacin entre la presin de vapor de agua del
substrato de cultivo (P) y la presin de vapor de agua del agua pura (P0). El valor de la actividad de agua
est relacionado con el de la humedad relativa (HR).
El valor de la actividad de agua nos da una idea de la cantidad de agua disponible metablicamente. Por
ejemplo: comparemos el agua pura donde todas las molculas de agua estn libremente disponibles para
reacciones qumicas con el agua presente en una disolucin saturada de sal comn (NaCl) donde una parte
importante de las molculas de agua participa en la solvatacin de los iones de la sal disuelta. En este ltimo
caso, la actividad de agua mucho menor que en el primero. conforme aumenta la cantidad de solutos en el
medio, disminuye su actividad de agua.
El agua es un substrato en muchas reacciones bioqumicas (proteasas y lipasas, por ejemplo). Cuando no
hay agua disponible, estas reacciones se detienen y el metabolismo se para. Esta falta de agua tambin
detiene muchas de las enzimas que podran degradar las estructuras biolgicas. Por ello, las clulas que no
crecen por falta de agua no mueren rpidamente: los sistemas de degradacin tampoco funcionan y no las
degradan.
Es decir: cuando un microorganismo se encuentra en un substrato con actividad de agua menor que la que
necesita, su crecimiento se detiene. Esta detencin del crecimiento no suele llevar asociada la muerte del
microorganismo, sino que ste se mantiene en condiciones de resistencia durante un tiempo ms o menos
largo. En el caso de las esporas, la fase de resistencia puede ser considerado prcticamente ilimitada.
La gran mayora de los microorganismos requiere valores de actividad de agua muy altos para poder crecer.
Los valores mnimos de actividad para diferentes tipos de microorganismos son, a ttulo orientativo, los
siguientes: bacterias aw>0.90, levaduras aw>0.85, hongos filamentosos aw>0.80.
Como puede verse, los hongos filamentosos son capaces de crecer en substratos con actividad de agua
menor (ms secos) de la que permite el crecimiento de bacterias o de levaduras. Por esta razn se puede
producir deterioro de alimentos de baja actividad de agua (por ejemplo, el queso o almbares) por mohos
(hongos filamentosos) y no por bacterias.
En funcin de su tolerancia a ambientes con baja aw, los microorganismos que pueden crecer en estas
condiciones se clasifican en halotolerantes, halfilos y xerfilos segn toleren o requieran condiciones salinas
o hipersalinas, respectivamente.
La reduccin de la actividad de agua para limitar el crecimiento bacteriano tiene importancia aplicada en
industria alimentaria. La utilizacin de almbares, salmueras y salazones reduce la actividad de agua del
alimento para evitar su deterioro bacteriano.

pH: Es un parmetro crtico en el crecimiento de microorganismos ya que cada tipo de

microorganismo tiene un rango de pH en el que puede vivir adecuadamente, fuera de este rango
muere.

-DISTRIBUCIN UNIVERSAL DE
MICROORGANISMOS El pH intracelular es ligeramente superior al del medio que rodea las clulas ya que, en muchos casos, la
obtencin de energa metablica depende de la existencia de una diferencia en la concentracin de protones
a ambos lados de la membrana citoplsmica.

-Valor Creativo-

El pH interno en la mayora de los microorganismo est en el rango de 6,0 a 8,0. Los rangos de pH tolerables
por diferentes tipos de microorganismos son, tambin, distintos. Hay microorganismos acidfilos que pueden
vivir a pH=1.0 y otros alcalfilos que toleran pH=10.0.
Hay que considerar que, como consecuencia del metabolismo, el pH del medio de crecimiento suele tender a
bajar durante el cultivo. Por otra parte, la bajada del pH del medio que producen ciertos microorganismos les
confiere una ventaja selectiva frente a otros competidores. As, por ejemplo, las bacterias lcticas que
producen grandes cantidades de cido lctico como consecuencia de su metabolismo primario reducen el pH
del medio a valores inferiores a los soportables por otras bacterias competidoras (llegan a bajar el pH del
medio hasta 4.5). De esta forma, las bacterias competidoras mueren y las lcticas se convierten en la
poblacin dominante.
La bajada del pH se puede deber a varios factores, uno de los cuales es la liberacin de cidos orgnicos de
cadena corta (frmico, actico, lctico) por ciertas bacterias.
En este sentido, hay que tener en cuenta que la accin bactericida de estos cidos orgnicos de cadena
corta es ms potente que la debida nicamente a la bajada del pH que producen. Esto es, los cidos
orgnicos de cadena corta son txicos para algunas bacterias por s mismos.
El efecto letal del pH cido sobre los microorganismos tiene aplicacin en la conservacin de alimentos
acidificndolos. De esta forma, la adicin de cido actico en forma de vinagre permite la conservacin de
alimentos perecederos (escabeches, por ejemplo) y la produccin de cidos en el curso de fermentaciones
naturales permite alargar la vida de los alimentos (coles fermentadas, por ejemplo).

Potencial redox: nos indica la capacidad del substrato para aceptar o donar electrones, esto es: sus
caractersticas oxidantes o reductoras. Uno de los factores que intervienen en el potencial redox, aunque no
el nico, es la concentracin de oxgeno [O2].
Hay microorganismos que requieren ambientes oxidantes para crecer, mientras que otros necesitan
ambientes reductores. El metabolismo de ambos tipos de microorganismos presenta diferencias notables. El
requerimiento de condiciones oxidantes o reductoras no debe confundirse con la necesidad de presencia o
ausencia de oxgeno para que se produzca el crecimiento.
En general, cuando un microorganismo requiere un ambiente oxidante se dice que desarrolla un metabolismo
oxidativo (o respirativo) mientras que los microorganismos que requieren ambientes reductores (o menos
oxidantes) realizan un metabolismo fermentativo.
Un microorganismo es aerobio cuando necesita oxgeno para vivir y es anaerobio cuando o bien no lo
necesita (anaerobios facultativos como las bacterias entricas, o como Saccharomyces cerevisiae; o
anaerobios aerotolerantes como las bacterias lcticas) o cuando muere en presencia de oxgeno (anaerobios
estrictos como los clostridios).
Hay microorganismos que, aunque viven en presencia de oxgeno, no son capaces de utilizarlo como aceptor
final de electrones y deben desarrollar un metabolismo fermentativo (los estreptococos, por ejemplo).
Por otra parte, hay microorganismos que pueden desarrollar ambos tipos de metabolismo. Esto es: en
presencia de oxgeno desarrollan un metabolismo oxidativo y en su ausencia, fermentativo. El rendimiento de
los procesos fermentativos es menor que el de los respirativos: las bacterias y las levaduras producen menos
biomasa cuando crecen fermentando que cuando lo hacen respirando.
En el curso de ciertas reacciones metablicas redox se forman compuestos altamente reactivos (radicales
libres, formas superxido) que pueden daar las protenas, membranas y cidos nucleicos produciendo la
muerte de las clulas. Las clulas se defienden de estos compuestos reactivos mediante las enzimas de:

-DISTRIBUCIN UNIVERSAL DE
MICROORGANISMOS superxido dismutasa (SOD) y catalasa. Los anaerobios estrictos carecen de SOD y de catalasa o tienen
niveles muy bajos de estas enzimas de forma que no pueden sobrevivir en presencia de oxgeno. La
deteccin de estas enzimas tiene valor taxonmico.

-Valor CreativoCONCLUSIONES
El nmero de colonias que crecieron, tanto el tamao como la forma y su dems caracterstica vara
segn al ambiente al que fue expuesto ya que las condiciones para el desarrollo no son las mismas.
El nmero de colonias que creci en el pelo del grupo #2 fue en exceso ya que probablemente el
pelo no ha tenido la debida limpieza.
El nmero de colonias que crecieron en la huella se debi al incorrecto aseo de las manos.
De acuerdo a lo observado en el laboratorio, los microorganismos estn ms concentrados en
algunos ambientes de nuestra facultad, los factores para que haya ms microorganismos en estos
lugares pueden ser la humedad, poca iluminacin y poca ventilacin. Por ejemplo en el laboratorio de
microbiologa encontramos casi la misma cantidad de colonias que el bao de nuestra facultad, y si
vemos las condiciones de estos ambientes, son similares como la humedad, la poca iluminacin y
ventilacin en el bao de la facultad (que es evidente), y en el laboratorio de microbiologa que
tampoco est demasiado ventilado porque no tenemos ventanas abiertas, tambin est claro que en
el laboratorio trabajamos con una gran cantidad de compuestos qumicos y anlisis de aguas
servidas que pueden actuar como nutrientes para la formacin de bacterias.
El desarrollo de las bacterias en el caldo nutritivo, se hace notar con la aparicin de precipitados y
coloracin de la muestra, esto es porque la pipeta o el tubo de ensayo no estuvieron esterilizados, de
aqu concluimos que nuestros instrumentos utilizados en el laboratorio no estn libres de
contaminacin a pesar de haberlas lavado con agua destilada.
Cuando se traslada una muestra de un recipiente estril a otro estril el crecimiento de
microorganismos es casi nulo o nulo en comparacin, si se usaran recipientes no estriles esto se
debe a que los microorganismos no se generan espontneamente como lo dice Pasteur.
Pudimos notar que el aire en el ambiente no tiene una concentracin definida de la flora bacteriana,
ya que los microorganismos que habitan en l no son autctonos sino que son llevados del suelo o
del agua.
Tambin se observ (con la teora) que de acuerdo al tipo de bacteria que se requiera sembrar, ser
el tipo de medio de cultivo, esto, ya que cada bacteria requiere cierto tipo de nutrientes
para subsistir y formar sus colonias, adems de que cierto tipo de medios de cultivo, nos pueden
mostrar de acuerdo a su composicin ciertas caractersticas que presentan determinado tipo de
bacterias, ya sea por su pH y que este sea indicado por los indicadores de los medios o por
que reaccione con ciertos componentes del medio creando colores o formas.

RECOMENDACIONES
1. Para realizar un trabajo ms exacto, trate de utilizar materiales de cultivo cuya fecha de
vencimiento sea posterior al trabajo de laboratorio.
2. Lavar bien los instrumentos a utilizar para evitar contaminacin.
3. El mechero no es eficaz para la esterilizacin del inoculador.
4. Esterilizar todo material a utilizar en la preparacin de medios de cultivo.
5. Al introducir las placas Petri a la incubadora, colocarlas invertidas.
6. Tapar bien los tubos de ensayo con algodn al momento de esterilizarlas.

-DISTRIBUCIN UNIVERSAL DE
MICROORGANISMOS 7. Hacer un buen uso del autoclave y horno utilizando todos los instrumentos preventivos para
evitar accidentes en el laboratorio.
8. Una vez concluido el laboratorio, lavarse bien las manos y descontaminarlas con alcohol.

-Valor Creativo-

9. Se debe tener presente, la adecuada esterilizacin de los instrumentos a utilizar para tener un
mejor resultado en los experimentos.

BIBLIOGRAFA

MICROBIOLOGIA ROGER STANIER; JOHN INGRAHAM; M. WHEELES; P. PAINTER. Segunda

edicin. Editorial Revert S.A.

http://es.wikipedia.org/wiki/Conteo_bacteriano
http://microbitos.wordpress.com/2010/06/14/morfologia-colonial-bacteriana/

ANEXOS
PROCEDIMIENTO A: Agar nutritivo
//

//

PROCEDIMIENTO B: Caldo nutritivo.

-DISTRIBUCIN UNIVERSAL DE
MICROORGANISMOS -

-Valor Creativo-

CUESTIONARIO
1. Explique 3 factores que influyen en la flora bacteriana del aire.

Procedentes del suelo y las plantas

La poblacin microbiana del suelo es superior a la de los dems ambientes naturales, por lo que puede
considerarse la principal fuente para el aire, en dependencia de la actividad del ambiente y de la cantidad de
polvo agitado, entre otros factores. Segn el tipo de suelo variar la microflora del aire.
Los terrenos frtiles y cultivados contienen ms microorganismos que los infrtiles y sin cultivar, por lo que el
aire de encima de los primeros ser ms enriquecido microbiolgicamente que el de los segundos. De la
misma forma, al aire pueden llegar los microorganismos procedentes de la microflora epiftica de las hojas y
tallos.
Entre los microorganismos se tienen:

Bacterias saprfitas pigmentarias: Bacillus subtilis, B. Megaterium, B cereus.

Actinomicetos

Esporas e hifas vegetativas de hongos

Procedentes de animales y personas

Al aire pueden llegar, junto con las gotitas de moco, esputo, saliva, etc.; de los animales y de las personas,
lanzados al toser, al estornudar y al hablar; los microorganismos que componen la microflora normal de la
boca, las fauces, las vas respiratorias superiores de stos o tambin agentes etiolgicos de muchas
enfermedades que encuentran un medio propicio para su diseminacin. Los microorganismos suspendidos
en el aire estn en forma de aerosol bacteriano (gotas, ncleos goticulares y en polvo).
Entre las enfermedades que se transmiten por esta va se tienen:

Pleuroneumona bovina
Peste aviar

-DISTRIBUCIN UNIVERSAL DE
MICROORGANISMOS

Influenza

Sarampin

Varicela

Rubeola

Tuberculosis

-Valor Creativo-

Procedentes del aire del mar

Se han aislado microorganismos del aire del mar, pero ste suele contenerlos en menor nmero que el de
origen continental o terrestre.
Entre los microorganismos se tienen: esporas bacterianas, conidios y fragmentos de hongos, que localizados
en estratos superiores pueden ser llevados a grandes distancias y llegan al pas, procedentes de las zonas
continentales.
Las composiciones cualitativa y cuantitativa de los microorganismos del aire varan entre grandes lmites y
depende de su procedencia, naturaleza y de diversos factores que influyen sobre la misma. El estudio del
contenido microbiano del aire debe hacerse al considerar el aire exterior y el aire interior. Adems, la
composicin y la cantidad de la microflora del aire varan segn la poca del ao en las diferentes latitudes.
2. Explique 3 enfermedades que son transmitidas por el aire.
La trasmisin area es una va de transmisin estresante para el microorganismo ya que el aire carece de los
nutrientes y la humedad neccesarios para permitir una larga supervivencia de muchos patgenos.

Muchas bacterias son transmitidas a travs del aire en gotas o aerosoles producidos al toser, estornudar o
hablar. Son especialmente importantes los aerosoles producidos por tos o estornudo porque la gran velocidad
con la que se emiten las partculas en estas condiciones reducen mucho el tiempo de trayectoria de la
partcula hasta llegar al nuevo husped y, de esta forma, se hace mnima la desecacin.
En general, esta va requiere una estrecha proximidad entre la fuente y el receptor para que se produzca el
contagio.

El polvo es un coadyuvante para la transmisin de microorganismos por va area porque permite a stos
resistir ms tiempo en suspensin en el aire, y facilitan la entrada en el husped. Este factor (el polvo),es
importante en la transmisin de infecciones nosocomiales por esta va.

Enfermedades bacterianas transmitidas por va area:

Tuberculosis (Mycobacterium tuberculosis)

Faringitis causada por (Streptococcus pyogenes)

Neumona causada por (Streptococcus pneumoniae)

Difteria (Corynebacterium diphteriae)

-DISTRIBUCIN UNIVERSAL DE
MICROORGANISMOS

Legionelosis causada por (Legionella pneumophila)

Tosferina causada por Bordetella pertusis.

-Valor Creativo-

4. Qu grupo de agentes causa la mayor incidencia de enfermedades respiratorias?

Agentes causales
Rinovirus

25-29

Gripe

28-35

Parainfluenza

8,5-90

Adenovirus

22-35

Coronavirus

25-63

Mycoplasma pneumoniae

3-37

Chlamydophila
pneumoniae
Streptococcus pyogenes
Metapneumovirus humano

5.

30

2,3-19
4-91

Mencione las caractersticas principales; Rhizompus nigricans ,alternara ,sacharomyze

cerevisiae

Rhizopus: Es un gnero de mohos que incluyen especies cosmopolitas de hongos

filamentosos hallados en el suelo, degradando frutos y vegetales, heces

animales,
y
residuos.
Las especies de Rhizopus producen esporos asexuales y sexuales. Los
esporangiosporos asexuales se producen dentro de una estructura aguzada, el
esporangium, y son genticamente idnticos a su padre. En Rhizopus, el
esporangio es soportado por una gran columela apofisada, y el esporangiforo
asoma entre rizpodes distintivos. Cigosporos negros se producen despus de dos
fusiones compatibles de micelios durante la reproduccin sexual. Y hacen
colonias que pueden ser genticamente diferentes de sus padres.
Diagrama
equemtico
de
Rhizopus
spp.
Algunas spp. de Rhizopus son agentes oportunistas de cigomicosis humana.
Pueden causar serias (y con frecuencia fatales) infecciones en humanos y en
animales debido a su rpido crecimiento a relativamente altas temperaturas.
Algunas especies son patgenos vegetales. Dos son usados en fermentacin:
Rhizopus oligosporus, en la produccin de tempeh, un alimento fermentado

-DISTRIBUCIN UNIVERSAL DE
MICROORGANISMOS

derivado de grano de soja; R. oryzae se usa en la produccin de bebidas

alcohlicas, en partes de Asia y de frica.
Alternara: Es un hongo de los que se registran con mayor frecuencia en las
muestras de aire atmosfrico de exteriores. Habita en hojas cadas, plantas y
material orgnico en descomposicin, y sus esporas flotan en el aire.
Se registra todo el ao, pero ms en los das calurosos y hmedos. Su presencia
en el interior de las viviendas es reflejo de su concentracin exterior y la
proporcin encontrada entre aire exterior e interior es de 4 a 1
aproximadamente.
Se le asocia indiscutiblemente con la produccin de cuadros de rinoconjuntivitis
alrgica y asma bronquial y aisladamente a neumonitis por hipersensibilidad.
A diferencia de los plenes , que producen principalmente rinoconjuntivitis
alrgica, la alternaria produce con mayor frecuencia la asociacin de esta con
asma , sobre todo en nios y en situaciones de exposicin como lo son lugares
hmedos con material orgnico Ej.: pastizales jardines , regados etc.
Los sntomas por alergia a este hongo son ms frecuentes en primavera tarda y
otoo.

-Valor Creativo-

Alternaria sp

S. cerevisiae: es uno de los modelos ms adecuados para el estudio de problemas

biolgicos. Es un sistema eucariota, con una complejidad slo ligeramente

superior a la de la bacteria pero que comparte con ella muchas de sus ventajas
tcnicas. Adems de su rpido crecimiento, la dispersin de las clulas y la
facilidad con que se replican cultivos y aslan mutantes, destaca por un sencillo y
verstil sistema de transformacin de ADN. Por otro lado, la ausencia de
patogenicidad permite su manipulacin con las mnimas precauciones.

-S. cerevisiae es un sistema gentico que, a diferencia de la mayora de los otros

microorganismos, presenta dos fases biolgicas estables: haploide y diploide. La

-DISTRIBUCIN UNIVERSAL DE
MICROORGANISMOS fase haploide permite generar, aislar y caracterizar mutantes con mucha
facilidad,

mientras

que en la diploide

se pueden realizar estudios

de

complementacin. Una levadura haploide contiene 16 cromosomas que varan

en tamao de 200 a 2200 kilobases (kb).

-Valor Creativo-

-Una ventaja adicional de este microorganismo consiste en que se conoce la

secuencia completa de su genoma y se mantiene en constante revisin. Ello ha
permitido la manipulacin gentica de los casi 6600 genes que codifica el
genoma de levadura, el uso extensivo de micromatrices de ADN para investigar
el transcriptoma y estudios a escala genmica de, entre otros muchos aspectos,
la expresin gnica, localizacin de protenas y la organizacin funcional del
genoma y el proteoma.
/