Articulo Cientifico

CRIOPRESERVACION DE EMBRIONES DE TRUCHA ARCOIRIS (Oncorhynchus
mykiss) EN EL LABORATORIO DE BIOTECNOLOGIA DE LA REPRODUCCION

DE LA CARRERA DE MEDICINA VETERINARIA DE LA UNIVERSIDAD
TECNICA DE COTOPAXI
Anchacaisa Velasco Darwin Omar1, M.V.Z. Rafael Alfonso Garzn Jarrin2
1. Egresada de la carrera de Medicina Veterinaria .Universidad Tecnica de Cotopaxi
2. Docente.Universidad Tcnica de Cotopaxi
RESUMEN
una estructura completa e intacta. Con 8
La presente investigacin se llev a cabo

con
el
objetivo
de
evaluar
la
criopreservacin de embriones de Trucha

Arcoris, aplicando un protocolo a base de
1.5 M de etilenglicol y 0.1 M de sacarosa
como
ViGROR
crioprotectores,
Ethylene
Glycol
Freeze
Plus
with
Sucrose, se utilizaron embriones en

estadio de blastocisto tras ocho horas pos
fertilizacin,
de
calidad
posteriormente evaluamos la morfologa

presentada
posdescongelacin
categorizndola
resultados
de
acuerdo
obtenidos.
investigacin
no
Aplicamos
experimental
los
la
con
estadstica descriptiva para describir el

protocolo sin alterar las variables.
De
esta especie utilizamos 2 hembras y 2

machos, fueron fertilizadas las ovas,
categorizarlas y finalmente clasificar y
utilizar las de calidad A por mantener
horas posteriores, en el laboratorio fueron

clasificados de acuerdo a su estructura,
utilizando
las
ovas
de
calidad
A,
seguidamente se mantuvo los embriones

seleccionados en una plancha trmica a
una temperatura de 23C en solucin
Holding de mantenimiento. Luego se los
embriones de la solucin anterior para
colocarlos en la solucin de 1.5 molar de
etilenglicol con 0.1 M de sacarosa, se
envasaron los embriones en vainas para
inseminar
bovinos,
siguiendo
el
procedimiento estndar de envasado de

embriones con etilenglicol y dejando
espacios de aire a los extremos. Se
empez el proceso de descenso de
temperatura estabilizando la misma a
-7C, luego el seeding y el descenso de
temperatura de -0.7C por minuto hasta
llegar a los -33 donde luego fueron
depositados en un tanque de nitrgeno
lquido a 196C. Se realiz la
from Rainbow Trout specie were used,
descongelacin para analizar y evaluar su
after that, the trout eggs were fertilized
estructura
posdescongelacin,
and finally, these were classified in order
encontrando embriones N 1, 2, 4 y 6, en
to use the fertilized eggs with quality A
Tipo A morfologa intacta; embrin N 8,
to keep a complete and intact structure.
Tipo B morfologa buena; embriones N
Eight hours after, the fertilized eggs were
3,7, embriones Tipo C morfologa regular,
classified according to the structure, using
embrin N 5, Tipo D morfologa nula,
quality A eggs, then the selected
deterioro por efecto del frio.
embryos were maintained on a thermal
PALABRAS
CLAVE:
Embrin,
Etilenglicol, Sacarosa, Seeding, Trucha.
iron with a temperature of 23 C in a

Holding maintenance solution. Then the
embryos were taken from the previous
solution to be collocated in a solution of
1.5 molar of ethylene with 0.1 M of
ABSTRACT
saccharose, the embryos were packaged

The following research was conducted in
order to evaluate the cryopreservation of
Rainbow Trout embryos, for this research
was applied a protocol based on 1.5 M
ethylene and 0.1 M of saccharose as
cryoprotectants,
Glycol
Freeze
ViGROR
Plus
with
Ethylene
Sucrose.
Embryos with quality A in a blastocyst

stage after eight hours post fertilization
were used and subsequently we evaluate
the morphology post thawing presented,
then the procedure of categorization
according to the results was performed. It
was
applied
non
experimental
investigation with descriptive statistics to

describe the protocol without altering
variables. Two females and two males
in insemination sheaths according to the

standard procedure of packaging embryos
with ethylene as well as spaces with air at
the top and the bottom were left. Later,
the process of temperature decrease was
started as well as the stabilization of it to
-7C, after that the seeding and the
temperature
decrease
to
-0.7C
per
minute up to -33, at that period of time

the selected fertilized eggs were deposited
in a tank with liquid nitrogen with a
temperature of 196C. Afterwards, the
thawing of fertilized eggs was performed
to analyze and evaluate it structure post
thawing, the results were: embryos N 1,
2, 4 and 6, Type A, presented an intact
morphology; embryo N 8, Type B,
que se carece de informacin suficiente y
presented a good morphology; embryos
de conocimiento previos del objeto de
N 3, 7, Type C presented a regular
estudio, resulta lgico que la formulacin
morphology;
D,
inicial del problema es imprecisa. En este
presented a null morphology, it was
caso la exploracin permiti obtener
deteriorated as a result of the cold.
nuevo datos y elementos que pueden
KEY WORDS: Embryo, Ethylene

Glycol, Seeding, Trout
conducir a formular con mayor precisin
embryo
N5, Type
las preguntas de investigacin.

A ms del trabajo de Robles en el 2007,
INTRODUCCIN
microinyectando
A nivel mundial y local las explotaciones

de trucha arcoris (Oncorhynchus mykiss)
ocupa una demanda sustentable siendo
est ocupada para la pesca deportiva, la
acuacultura
alimentacin.
elaborado
obviamente
Segn el
por
Investigaciones
el
Acucolas
para
la
censo 2006
Centro
de
(CENIAC),
sostiene que el Ecuador cuenta con un

total de 213 criaderos y con una
produccin promedio de 982.3 toneladas
al ao de trucha arcoris. La reproduccin
y transporte de material gentico est
limitada a la manipulacin humana,
siendo la forma fe embriones frescos la
protenas
anticongelantes en embriones de peces

para hacerlos resistentes al frio no se tiene
ms referencias de ensayos exitosas, dado
que dicha investigacin culmino con el
deterioro
del
corion
por
daos
estructurales mecnicos al microinyectar,

por
ende
la
crioconcervacin
de
embriones de peces, ha sido un objetivo

aun no alcanzado hasta el momento.
Tomando en cuenta estas deficiencias, as
como la falta de referencias en el tema se
plante un protocolo apropiado que nos
lleve al xito y la realizacin de
informacin
para
investigaciones
posteriores.
ms aceptada y riesgosa por la prdida de
En el Captulo I incluiremos todo sobre
material gentica por el mismo tiempo al
referencias
no
de
investigacin. En el captulo II detallamos
transportar ovas y embriones.

En la presente formulamos de forma ms
la ubicacin geogrfica en donde se
precisa problema de investigacin, dado
utilizados
existir
una
manera
ptima
realiz
el
bibliografas
estudio,
para
su
los
de
esta
materiales
ejecucin,
la
metodologa y los pasos empleados para
Fuente: Registros administracin
el desarrollo del experimento. En el
CEYPSA/2007.
captulo III expondremos los resultados

obtenidos
en
el
proceso
de
la
investigacin, as como la discusin sobre

dichos
resultados
sus
respectivas
representaciones grficas.
MATERIALES Y MTODOS
El presente estudio se realiz en el barrio

Salache bajo, de la parroquia Eloy Alfaro,
DESCRIPCIN DEL ENSAYO

Los factores que intervinieron en la
presente investigacin se muestran en el
siguiente cuadro
Protocolo de
crioconservacin de
embriones de Trucha
Arcoris
(Oncorhynchus
mykiss)
1.5 M de etilenglicol
y 0.1 M de sacarosa
cantn Latacunga, provincia de Cotopaxi,
intacta
Porcentual (%)
de la reproduccin de la Universidad
coordenadas : 00 5947.68 latitud S y
Jalapeo
(Capsicum
annuum)
Morfologa
Mortalidad
ubicado en el laboratorio de biotecnologa

Tcnica de Cotopaxi, en Salache. con
Embriones en
estadio
Blastocistos
Elaborado por la autor
78 319.16 longitud W, a 2757.591
Para
m.s.n.m donde se presentan las siguientes
criopreservacin de embriones de trucha
caractersticas climticas y edafolgicas
arcoris se procedi a extraer las ovas de
Variables
Precipitacin
media anual
Temperatura
media anual
Humedad relativa
Heliofania hora
luz mes
Topografa
Textura
Altitud
Caractersticas
climticas y
edafolgicas
170 m.m
10.7C
70-75%
12.0
Plana
Franco arenoso
2757.591 m.s.n.m
empezar
el
protocolo
de
una hembra y semen de un macho de las

especies
mencionadas,
para
la
fertilizacin y produccin de embriones,

de dicha especie de sujetos de la
explotacin
pisccola
Tambuyaco
ubicado frente a la Brigada de fuerzas

especiales N9 Patria en la parroquia
Alquez del cantn Latacunga.
Luego de ocho horas, los embriones
fueron clasificados para apartar los de
mejor calidad para proceder con el
protocolo con los mismos, dadas sus
solucin de etilenglicol con sacarosa,
caractersticas optimas de fecundidad.

Posteriormente los embriones fueron
ViGRO Ethylene Glycol Freeze Plus with
transportados en un termo cooler a

temperatura de 14 C al laboratorio de la
Sucrose
(Bioniche),
en la cual
permanecieron un instante y despus se
reproduccin de la Universidad Tcnica
repiti el procedimiento.
Luego de esto
se envasaron los
de Cotopaxi, aprovechando el clima fra
embriones en pajuelas adaptadas de
por la maana los embriones podran
catteres de inseminacin artificial de
mantenerse viables durante un tiempo
bovinos, dado que estos son de tamao
muy prolongado dada la reproduccin de
apropiado para los embriones antes
esta especie el climas extremos y fros
mencionados. El proceso se realiz
como pramos.
Ya en el laboratorio se procedi a ubicar a
envasando etilenglicol luego dejando un
los
embriones
en
cajas
Petri
para
posteriormente colocarles solucin de

mantenimiento de Holding.
Luego fueron observados y seleccionados
espacio con aire y luego etilenglicol con

el embrin, luego otro espacio de aire y
otra parte de etilenglicol y se sell con un
sellador de plsticos a calor.
Con las pajuelas ya cargadas con los
bajo estereomicroscopio (NIKON SMZ

745) con lentes 30x conservando a
aquellos que haban sido fertilizados
positivamente y con desarrollo posterior a
embriones se procedi a colocar en la

crioconservadora
(Cryologic
Freeze
Control CL 5500) el cual previamente ya
este, con los cuales se procedera con el

protocolo para su crioconservacin.
Aplicacin del protocolo para
crioconservacin de embriones.
Una vez seleccionados lo embriones
fueron colocados en cajas Petri con
haba sido cargado de nitrgeno lquido y

estabilizado para que proceda con la etapa
de descenso de temperatura de las
pajuelas.
Empezamos
programando
mantencin las cuales se encontraban en
crioconservadora
la plancha trmica a 23 C.
Posteriormente se procedi con una micro
inicial de 23 C para posteriormente
ViGRO Holding
(Bioniche), para
pipeta a extraer de la solucin anterior a

los embriones y colocarlos en una
una
la
temperatura
estabilizarlo a -7C donde se realiz un

siding con un objeto metlico en nuestro
caso una pinza, para empezar el proceso
de descenso de temperatura de -0.7C por
observar
minuto hasta llegar a los - 33 C.

Al haber alcanzado la temperatura bajo
morfolgicos a nivel celular sufridos por
cero de -0.33 C en el Freezer, el proceso
los
principales
cambios
el descenso de temperatura que pudiesen
continu al sacar las pajuelas del mismo
causar posibles alteraciones.

Para descongelar las pajuelas se procedi
ya enfriadas y transportarlas y colocarlas
a sacar las pajuelas del tanque de
las el tanque de nitrgeno lquido a
nitrgeno lquido, donde se encontraban
196C para finalizar con el proceso de
almacenados, y a colocarlos en agua a una
crioconcervacin
temperatura de 15C durante 15 segundos
su
posterior
almacenamiento.
con el fin de descongelarlos.

Tras la descongelacin los embriones
fueron extrados de los catteres donde se
encontraban,
para
ser
lavados
DE
cuidadosamente en tres baos sucesivos
TEMPEREATURA DE USADO PARA
de solucin isotnica de cloruro de sodio
LA
DE
al 9%, con el fin de eliminar residuos de
TRUCHA
sustancias crioprotectoras.
Posteriormente se procedi a colocar los
RAMPA
DE
DESENSO
CRIOCONCERVACION
EMBRIONES
DE
ARCOIRIS.
embriones en la caja Petri, manteniendo

una temperatura de 14 C con la ayuda
de una plancha trmica, para mantener su
estado de incubacin, para su posterior
observacin
bajo
estereomicroscopio
(NIKON SMZ 745) con lentes 30x.

El objeto de la observacin posterior a la
descongelacin fue evaluar la capacidad
crioprotectora
del
protocolo
seguido
sobre los embriones sometidos al mismo,

Descongelacin de embriones.
supervivencia embrionaria o porcentaje

a
de embriones que presentan la morfologa
descongelarlas pajuelas que contenan los
normal o en el caso para demostrar la
embriones de trucha arcoris, con el fin de
existencia de actividad enzimtica de
Posteriormente,
se
procedi
ciertas encimas citoplasmticas tras la
criopreservacin lo que demostrara que
muestra daos de estructurales externos e
aunque no haya desarrollo embrionario
internos
algunas clulas se mantienen viables.

Se observ y registro fotogrficamente las
viabilidad y desarrollo.
Categora D (embrin N 5): representa el
principales
12.5 %, embrin de mala calidad con nula
alteraciones
morfolgicas
lo que imposibilitara
provocadas por la exposicin a los
posibilidades
crioprotectores
coloracin blanquecina
mantenindoles
en
la
congelacin
incubacin
demuestra
de
desarrollo
como
su
la
y oscura nos
resultado
dao
observacin a 14 C, obteniendo as las
estructural causado por la falta de
siguientes clasificaciones:
Embriones Categora A (Embriones N 1,
penetracin de crioprotector dndonos
2,
4,
6)
coloracin
anaranjada
representan al 50% de las muestras:

embriones de ptima calidad con mxima
capacidad
de
desarrollo
pos
como
resultado
la
degradacin
del
embrin interna y externa de abertura del

corion y por ende dao total lo que
imposibilita todas las expectativas de
desarrollo de dicha muestra
descongelacin, que nos muestra la

normalidad
en
el
embrin
al
ser
descongelado con altas posibilidades de
METODOLOGIA
supervivencia.
Categora B (embrin N 8): representa el
DATOS
12.5% de la muestra, embrin de buena

calidad
con
media
capacidad
de
desarrollo posdescongelacin la el corion

o membrana externa intacta nos muestra
una
buena
relacin
descongelacin
al
proceso
de
descongelacin,
al
mismo tiempo que el vitelo blanquecino

nos da seales ende posibles daos
intracelulares.
Categora C
(embriones
3,7):
representa al 25 % de la muestra,
embriones
posibilidades
regulares
de
con
implantacin,
bajas
nos
DE
TOMA
DE
La metodologa empleada fue
no
experimental, aplicamos el mtodo no

experimental ya que realizamos una
bsqueda emprica y casi sistemtica sin
manipular
las
variables
donde
bsicamente se utiliz un protocolo para

crioconservacin de embriones de trucha
previamente establecido
es decir
modificamos el entorno, al no manipular

Se aplicaba la estadstica descriptiva ya
que hemos analizando cada uno de los
hechos
que
encontramos
en
la
investigacin y describimos de manera

minuciosa y concreta el proceso para la
criopreservacin de embriones de trucha
arcoris, y para finalizar se pudo tabular la
informacin, y representarlo mediante
graficos de barras y pasteles .

En la Tabla 3 y Grfico N2 se muestra
los embriones totales empleados (150) de
los cuales fueron de categorizados de la
siguiente manera:
Categora A,
RESULTADOS Y DISCUSION
ptima calidad embrionaria y mxima

capacidad de desarrollo y eclosin, con
membranas
TABLA 3. CATEGORA DE LOS

EMBRIONES DE TRUCHA
UTILIZADOS.
Categoras
Nmero
Porcentaje
A
B
C
D
TOTAL
8
51
41
50
150
%
5.33
34.00
27.33
33.33
100
8 embriones Excelente
intactas,
citoplasma
homogneo y formacin de numerosas

clulas citoplasmticas.
Categora B, 50 embriones
buena calidad
capacidad de
Buenos
embrionaria y
eclosin,
elevada
rodeados
parcialmente por saco vitelino grueso y

con citoplasma irregular
Categora C, 41 embriones, Media
embrin de calidad media con una
GRFICO N2. CATEGORA DE LOS

EMBRIONES
UTILIZADOS.
DE
TRUCHA
capacidad baja de eclosin y desarrollo

Categora
D,
50
embriones,
Baja,
embrin de no muy buena calidad con

una capacidad nula de desarrollo y
posterior eclosin, fue tomada en cuenta
al momento de la crioconservacin por
sus sacos vitelinos recin formados y
permeables adems de su desarrollo
celular.
El degrado de embriones de trucha
TABLA 4. MORFOLOGA DE
arcoris esta mediado por el deterioro de
ESTRUCTURAS INTACTAS POS
su estructura, de donde partimos para su
DESCONGELACIN.
clasificacin, podemos incluir entonces a

los embriones de categora C y D, al
ser los embriones de la peor categora,
como ovas no fertilizadas, que por
situaciones de cambio de temperatura
drstico, el cambio brusco del medio
interno de la reproductora hacia el
exterior, o incluso al ser ovas muy
avejentadas no lograron completar su
periodo de fertilizacin por ende estn
expuestas a una degradacin inmediata
por no contar con el material gentico del
macho
para
desarrollo.
seguir
su
Adems
proceso
en
de
estas
clasificaciones se incluyen aquellos que

por daos mecnicos en su estructura, se
ven inviables a seguir un proceso de
desarrollo. La luz solar es otro de los
factores
que
provocan
mortalidad
embrionaria dentro de esta clasificacin.
La representacin de membranas externas

o corion
intactos
representadas en la
tabla 4 adems del grafico 3 nos

representa los valores obtenidos sobre
daos
estructurales
sufridos
por
congelacin de los embriones o
la
la
descongelacin de los mismos, al tiempo

que nos representara la viabilidad de cada
embrin tras la aplicacin del protocolo,
congelacin y descongelacin de los
mismos, los resultados dados serian
embriones con membranas intactas con

las posibilidad de viabilidad alta.
Mientas que las que han mostrado
membranas
semi
intacta
nos
dan
posibilidades bajas o nulas de un posible
que ingresara a la crioconservadora,
posterior desarrollo, as como los que
entonces este embrin se vio afectado al
indican aberturas en el corion, muestran
estar en contacto directo con las paredes
por daos aparentes durante el proceso de
del
congelacin y/o descongelacin, adems
descongelarlo
de la manipulacin lo que nos dan una
degradacin del corion, con una abertura,
posibilidad
que al momento de hidratarlo provoco
nula
de
desarrollo
post
catter
que
este
contena,
presentaba
resultado un 50 % de membrana intacta,
perivitelino y visto ms detenidamente se
un 25 % de membranas semi intactas y 25
mostrara
% de estructuras con aberturas.

Al ser el etilenglicol un compuestos de
posterior desarrollo lo que nos llev a que
teora, actan desplazando el agua del

interior de la clula evitando as la
formacin
de
cristales
de
hielo
rota,
en
del
una
que
de la membrana, como nos indica la
aumento
al
descongelacin . Entonces tenemos como
bajo peso molecular y permeable a travs
hubiera
lo
espacio
imposibilite
su
este embrin era inviable y haba sido

afectado directamente por la congelacin
al estar en contacto con las paredes no
permiti la salida total de agua lo que lo
llevo a la formacin de cristales de hielo
intercelulares los cuales actan como
que daaros su estructura.

Los embriones de tipo A y B presentan
cuchillos
estructuras
una estructura al descongelar intacta,
intracelulares dentro de los embriones. El
igual al momento que se los congel,
etilenglicol fue el crioprotector utilizado
podemos notar que tuvieron el tiempo
por ser el apropiado en protocolos de
suficiente para
congelacin a velocidad muy lenta, lo que
ingresara,
nos proporcion el tiempo suficiente para
osmtico, y desplazara el agua evitando
que pudiese ingresar desplazando el agua
as daos en el corion al momento de la
de las clulas proporcionando as una
congelacin. Es as que el tiempo de
proteccin
de
descenso de temperatura a -0.7C por
temperatura.
Al primer intento de envasar un embrin
minuto resulta eficaz al momento de
destruyendo las
ante
el
descenso
notamos la consistencia dura que este

tena, por ende se envaso en catteres que
haban sido reducidos de dimetro para
que el crioprotector
manteniendo
el
equilibrio
congelar los embriones, ya que si fuera

muy rpida habra formacin de cristales
de hielo intra y extracelulares, mientras si
fuera demasiada lenta habra colapso
vea con una tonalidad de color anaranjado
celular.
blancuzco.
Los embriones N 3 y 7, tipo C,
Al
categorizar
los
embriones
posdescogelacin, despus de haber sido

sometidos a podemos determinar por ende
la superioridad de supervivencia a la
crioconservacin de los embriones 1, 2, 4
y 6
por sus caractersticas ptimas al
momento de la descongelacin, presentan

estructura intacta, en el corion que es la
membrana
externa,
as
mismo
al
observarse bajo microscopio se ven de
catalogados
como
embriones
de
desarrollo regular, presentan una abertura

en el corion con aumento del espacio
perivitelino y coloracin ms blanquecina
lo que nos da como resultado del degrado
por formacin de cristales de hielo
extracelular lo que deterioro el corion,
adems de cristalizacin en el espacio
perivitelino lo que llevo a un aumento de
su tamao al hidratarse, y al mismo
coloracin ms anaranjado similar a
tiempo le dio apariencia ms clara.

Y el embrin N5, tipo D, con posibilidad
cuando fueron sometidos al protocolo
nula,
para criopreservacin, en cuanto al
muestran dao a la congelacin de dichos
tamao del
embriones,
espacio peri vitelino estas
dado
sus
caractersticas
obviamente
nos
encontramos
permanecieron sin mucha variacin lo
daos aparentes en la estructura como son
que nos proporciona la informacin que
rotura del corion, abertura que pone en
hubo
del
contacto el espacio perivitelino con el
crioprotector, lo que permiti que no
exterior del embrin, su coloracin bajo
exista formacin de cristales de hielo.
microscopio es de tonalidad oscura, lo
Mientas que el embrin N 8 tendra una
que nos permite aparentemente darnos
posibilidad
se
cuenta que el frio causo quemaduras
clasifico de tipo B, en hubo un ligero
intracelular, as como la formacin de
aumento del saco perivitelino, no muy
cristales de hielo durante el descenso de
significativo en lo que se concluye que
temperatura, no le dio tiempo para que
hubo una ligera abertura en el corion, as
ingresara
mismo la hidratacin puede provocar la
formaciones que actuaron a modo de
entrada de lquido intracelular a travs del
cuchillas daando as la estructura celular
buena
media
permeabilidad
de
desarrollo,
corion, esto ocasiona que el embrin se
el
crioprotector,
dichas
en su totalidad dejando al embrin

invalido para su posterior desarrollo.
CONCLUSIONES
Para el transporte de las muestras se
Para dar respuesta a los objetivos e

hiptesis planteados, se establecen las
siguientes conclusiones:
protocolo de crioconservacin de
embriones de trucha arcoris
2. La aplicacin del protocolo de
medios
apropiados como un cooler para mantener

la temperatura constante durante el
crioprotectores
3. En la valoracin morfolgica de
embriones
se
determin
respuestas
del
los
1. Hay que mantener a los donadores

24 horas antes en ayuno para
fecas de los mismos individuos.

2. Es
necesario
para
la
etilenglicol, y sacarosa como
caracterizando
en
ovas y la lechaza del macho con
eficaz, al usar como base el
aplicacin
realizarlo
evitar la contaminacin de las
embriones de trucha arcoris fue
diferentes
recomienda
traslado
1. Fue exitosa la aplicacin del
los
RECOMENDACIONES
la
crioconcervacin de embriones de
trucha
que
aumentemos
la
posibilidad de permeabilidad de
membrana y disminuyamos la
protocolo,
toxicidad
de
las
sustancias
embriones
crioprotectoras, adems de cuidar
nula
que la estructura de los embriones
viabilidad.
4. De acuerdo a la morfologa y su
no se vean afectadas durante y
viables,
regulares
de
caracterizacin los embriones se
despus de la congelacin.
3. A fin de obtener un mtodo
los clasifico en: embriones N 1,
apropiado para la investigacin se
2, 4 y 6, en Tipo A morfologa
recomienda
intacta; embrin N 8, Tipo B
alternos como la vitrificacin para
morfologa buena; embriones N
comparar resultados y beneficiarse
3,7, embriones Tipo C morfologa
del mejor.
regular, embrin N 5, Tipo D
realizar
mtodos
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CRIOPRESERVACION DE EMBRIONES DE TRUCHA ARCOIRIS (Oncorhynchus

mykiss) EN EL LABORATORIO DE BIOTECNOLOGIA DE LA REPRODUCCION

una estructura completa e intacta. Con 8

La presente investigacin se llev a cabo

criopreservacin de embriones de Trucha

Sucrose, se utilizaron embriones en

posteriormente evaluamos la morfologa

estadstica descriptiva para describir el

esta especie utilizamos 2 hembras y 2

horas posteriores, en el laboratorio fueron

seguidamente se mantuvo los embriones

procedimiento estndar de envasado de

lquido a 196C. Se realiz la

from Rainbow Trout specie were used,

descongelacin para analizar y evaluar su

after that, the trout eggs were fertilized

and finally, these were classified in order

to use the fertilized eggs with quality A

Tipo A morfologa intacta; embrin N 8,

to keep a complete and intact structure.

Tipo B morfologa buena; embriones N

Eight hours after, the fertilized eggs were

3,7, embriones Tipo C morfologa regular,

classified according to the structure, using

embrin N 5, Tipo D morfologa nula,

quality A eggs, then the selected

deterioro por efecto del frio.

embryos were maintained on a thermal

Etilenglicol, Sacarosa, Seeding, Trucha.

iron with a temperature of 23 C in a

saccharose, the embryos were packaged

Embryos with quality A in a blastocyst

investigation with descriptive statistics to

in insemination sheaths according to the

minute up to -33, at that period of time

morphology; embryo N 8, Type B,

que se carece de informacin suficiente y

presented a good morphology; embryos

de conocimiento previos del objeto de

N 3, 7, Type C presented a regular

estudio, resulta lgico que la formulacin

inicial del problema es imprecisa. En este

presented a null morphology, it was

caso la exploracin permiti obtener

deteriorated as a result of the cold.

nuevo datos y elementos que pueden

KEY WORDS: Embryo, Ethylene

conducir a formular con mayor precisin

las preguntas de investigacin.

A nivel mundial y local las explotaciones

sostiene que el Ecuador cuenta con un

anticongelantes en embriones de peces

estructurales mecnicos al microinyectar,

embriones de peces, ha sido un objetivo

ms aceptada y riesgosa por la prdida de

En el Captulo I incluiremos todo sobre

material gentica por el mismo tiempo al

investigacin. En el captulo II detallamos

transportar ovas y embriones.

la ubicacin geogrfica en donde se

precisa problema de investigacin, dado

metodologa y los pasos empleados para

Fuente: Registros administracin