PHOSPHORUS -UV

Fosforo
Fosfomolibdato. UV
Determinacin cuantitativa de fsforo
IVD

CALCULOS
( A ) Muestra
Suero:
x 5 (Conc. Patrn) = mg/dL de fsforo en la muestra
( A ) Patrn

Conservar a 2-8C
PRINCIPIO DEL METODO
Mtodo directo para la determinacin de fsforo inorgnico.
El fsforo inorgnico reacciona en medio cido con molibdato amnico
formando un complejo fosfomolibdico de color amarillo.
La intensidad del color formado es proporcional a la concentracin de
fsforo inorgnico presente en la muestra ensayada1,2.
SIGNIFICADO CLINICO
El fsforo, es esencial para la formacin del tejido seo y el metabolismo
energtico celular. Aproximadamente un 85% se encuentra en el hueso y
en los dientes.
Niveles bajos de fsforo pueden ser debidos a hipervitaminosis D,
hipertiroidismo primario, desordenes renales, ingestin de anticidos o
mala absorcin.
Niveles altos son atribuidos a la dieta, metstasis de huesos, alteraciones
en el hgado, alcoholismo, diarreas y vmitos1,5,6.
El diagnostico clnico debe realizarse teniendo en cuenta todos los datos
clnicos y de laboratorio.
REACTIVOS

R
Molibdico
PHOSPHORUS CAL

Molibdato amnico
0,40 mM
cido sulfrico (SO4H2)
210 mM
Detergente
Patrn primario acuoso de Fsforo 5 mg/dL

PRECAUCIONES
Corrosivo (C). R35: Provoca quemaduras graves.
S24: Evtese el contacto con la piel. S26: En caso de contacto con los
ojos, lvense inmediata y abundantemente con agua y acudir a un
mdico. S30: No echar jams agua a este producto. S45: En caso de
accidente o malestar, acdase inmediatamente al mdico.
PREPARACION
Reactivo y Patrn listos para su uso.
CONSERVACION Y ESTABILIDAD
Todos los componentes del kit son estables, hasta la fecha de caducidad
indicada en la etiqueta, cuando se mantienen los frascos bien cerrados a
2-8C, protegidos de la luz y se evita la contaminacin durante su uso. No
usar reactivos fuera de la fecha indicada.
Indicadores de deterioro de los reactivos:
- Presencia de partculas y turbidez.
- Absorbancia (A) del Blanco a 340 nm 0,54.
MATERIAL ADICIONAL
- Espectrofotmetro analizador para lecturas a 340 nm.
- Cubetas de 1,0 cm de paso de luz.
- Equipamiento habitual de laboratorio(Nota 1).
MUESTRAS
- Suero o plasma1,5:
Libre de hemlisis. El suero o plasma deben separarse lo antes posible
de los eritrocitos con el fin de evitar la liberacin de fsforo de los
hematies. Estabilidad: 7 das a 2-8C.
- Orina1,2 (24 h):
Recoger la orina en recipientes conteniendo 10 mL de cido clorhdrico
(ClH) al 10% (v/v) para evitar la precipitacin de fosfatos. Ajustar pH 2.
Diluir la muestra 1/10 con agua destilada. Mezclar. Multiplicar el
resultado por 10 (factor de dilucin). Estabilidad: 10 das a 2-8C.

PROCEDIMIENTO
1. Condiciones del ensayo:
Longitud de onda: . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 340 nm
Cubeta:. . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .. .1 cm paso de luz
Temperatura . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .37 / 30 / 25C
2. Ajustar el espectrofotmetro a cero frente a agua destilada.
3. Pipetear en una cubeta:
R (mL)
(Nota 2,3)
Patrn
( L)
Muestra ( L)
4.
5.

Blanco
1,0
---

Patrn
1,0
10
--

Muestra
1,0
-10

Mezclar e incubar 5 minutos.

Leer la absorbancia (A) del Patrn y la muestra, frente al
Blanco de reactivo.

BSIS15-E

22/06/11

Orina 24 h:

( A ) Muestra
x 5 x vol. (dL) orina/24h = mg/24 h de fsforo
( A ) Patrn

Factor de conversin: mg/dL x 0,323= mmol/L.

CONTROL DE CALIDAD
Es conveniente analizar junto con las muestras sueros control valorados:
SPINTROL H Normal y Patolgico (Ref. 1002120 y 1002210).
Si los valores hallados se encuentran fuera del rango de tolerancia, revisar el
instrumento, los reactivos y el calibrador.
Cada laboratorio debe disponer su propio Control de Calidad y establecer
correcciones en el caso de que los controles no cumplan con las tolerancias.
VALORES DE REFERENCIA1
Suero o plasma:
Nios
4,0 7,0 mg/dL
1,29 2.26 mmol/L
Adultos
2,5 5,0 mg/dL
0.80 1.61 mmol/L
Orina:
Adultos
0,4 1,3 g /24 h
Estos valores son orientativos. Es recomendable que cada laboratorio
establezca sus propios valores de referencia.
CARACTERISTICAS DEL METODO
Rango de medida: Desde el limite de deteccin de 0,07 mg/dL hasta el limite de
linealidad de 15 mg/dL.
Si la concentracin de la muestra es superior al limite de linealidad, diluir 1/2 con
ClNa 9 g/L y multiplicar el resultado final por 2.
Precisin:
Media (mg/dL)
SD
CV (%)

Intraserie (n= 20)

3,44
5,84
0,02
0,04
0,64
0,64

Interserie (n= 20)

3,45
5,83
0,02
0,04
0,72
0,68

Sensibilidad analtica: 1 mg/dL = 0,053 A.

Exactitud: Los reactivos de SPINREACT (y) no muestran diferencias
sistemticas significativas cuando se comparan con otros reactivos comerciales
(x). El ensayo con 50 muestras dio los siguientes resultados:
Coeficiente de correlacin (r): 0,9938.
Ecuacin de la recta de regresin: y= 0,9902x + 0,0749.
Las caractersticas del mtodo pueden variar segn el analizador utilizado.
INTERFERENCIAS
No realizar la prueba con muestras hemolizadas ya que los hematies contiene
una alta concentracin de esteres de fsforo orgnico, que es hidrolizado a
fsforo inorgnico durante su conservacin, el incremento es de 4-5 mg/dL por
da 5. Se han descrito varias drogas y otras substancias que interfieren en la
determinacin del fosforo3,4.
NOTAS
1.
PHOSPHORUS CAL: Debido a la naturaleza del producto, es aconsejable
tratarlo con sumo cuidado ya que se puede contaminar con facilidad.
2.
La mayora de detergentes utilizados para el lavado de material contienen
quelantes y fosfatos que interfieren en el ensayo.
Se recomienda limpiar el material con cido ntrico diluido y enjuagar
abundantemente con agua desionizada.
3.
La calibracin con el Patrn acuoso puede dar lugar a errores sistemticos
en mtodos automticos. En este caso, se recomienda utilizar calibradores
sricos.
4.
Usar puntas de pipeta desechables limpias para su dispensacin.
5.
SPINREACT dispone de instrucciones detalladas para la aplicacin de
este reactivo en distintos analizadores.

BIBLIOGRAFIA
1.
2.

Farrell E C. Phosphorus. Kaplan A et al. Clin Chem The C.V. Mosby Co. St
Louis. Toronto. Princeton 1984; 1072-1074 and 418.
Daly J A. et al. Clin Chem 1972; 18 (3): 263-265.

3.
4.
5.
6.

Young DS. Effects of drugs on Clinical Lab. Tests, 4th ed AACC Press, 1995.
Young DS. Effects of disease on Clinical Lab. Tests, 4th ed. AACC 2001.
Burtis A. et al. Tietz Textbook of Clinical Chemistry, 3rd ed. AACC 1999.
Tietz N W et al. Clinical Guide to Laboratory Tests, 3rd ed. AACC 1995.

PRESENTACION
Ref: 1001155
Ref: 1001156

Cont.

R: 2 x 150 mL, CAL: 1 x 5 mL

R:1 x 100 mL, CAL: 1 x 2 mL

SPINREACT,S.A./S.A.U. Ctra.Santa Coloma, 7 E-17176 SANT ESTEVE DE BAS (GI) SPAIN

Tel. +34 972 69 08 00 Fax +34 972 69 00 99. e-mail: spinreact@spinreact.com