Microbiologa clnica

2008 - 2009
Antonio G. Pisabarro
Catedrtico de Microbiologa

Estructura de los
microorganismos
Clulas procariotas y eucariotas.
Tamao y morfologa de las bacterias.
Observacin microscpica de los microorganismos.
Tinciones.
Membrana bacteriana y peptidoglicano.
Bacterias Gram-positivas y Gram-negativas.
Ribosomas bacterianos.
Elementos facultativos de la clula procariota.
Cpsula y capas mucosa.
Apndices bacterianos: flagelos y fmbrias.
Endosporas.
Estructura de los virus.

Estructura de los microorganismos

Clulas procariotas y eucariotas.
Tamao y morfologa de las bacterias.
Observacin microscpica de los microorganismos.
Tinciones.
Membrana bacteriana y peptidoglicano.
Bacterias Gram-positivas y Gram-negativas.
Ribosomas bacterianos.
Elementos facultativos de la clula procariota.
Cpsula y capas mucosa.
Apndices bacterianos: flagelos y fmbrias.
Endosporas.
Estructura de los virus.

rbol filogentico universal

Eucariontes

Patgenas

Procariontes
Microorganismos Prescott

rbol filogentico universal

Biologa de los Microorganismos de Brock

Estructura interna de una clula eucariota

1- Ncleo con varios cromosomas

2.- Organismos diploides
3.- Citoplasma con orgnulos celulares (mitocondrias, retculo
endoplsmico, Golgi, vacuolas, etc).
4.- Ribosomas eucariticos 80S
Los microorganismos eucariticos ms relevantes en clnica incluyen
ciertos animales de pequeo tamao productores de enfermedades
parasitarias, protozoos y hongos unicelulares o pluricelulares.

Morfologa de bacterias (G+)

Mesosoma

Protenas
Superficiales

Flagelo

Ncleo

Pared Celular

Ribosoma

Cuerpos de
Inclusin

Espacio
Periplsmico

Cpsula

Membrana
Plasmtica

No existe la separacin entre ncleo y citoplasma

Haploides

Estructura de los
microorganismos
Clulas procariotas y eucariotas.
Tamao y morfologa de las bacterias.
Observacin microscpica de los microorganismos.
Tinciones.
Membrana bacteriana y peptidoglicano.
Bacterias Gram-positivas y Gram-negativas.
Ribosomas bacterianos.
Elementos facultativos de la clula procariota.
Cpsula y capas mucosa.
Apndices bacterianos: flagelos y fmbrias.
Endosporas.
Estructura de los virus.

Tamao y morfologa de las bacterias.

La forma de una bacteria viene
determinada por la rigidez de su
pared celular.
Las bacterias poseen una de las
tres formas fundamentales:
esfrica, cilndrica o hlice.

Formas L: estado de una bacteria que

carece de peptidoglicano (pared celular)
Las formas L son
conocidas desde 1930
Las formas L son similares
a los micoplasmas
Las formas L son resistentes
a los antibiticos -lactmicos
No se sabe si en la naturaleza las formas L son
un accidente o una adaptacin que permite a
algunas bacterias escapar del sistema inmune y
emigrar a otras localizaciones en el cuerpo

Tamao y morfologa de las bacterias.

Formas L
A

Clulas normales de Bacillus subtilis (A) y formas L de esta bacteria (B)

Ryuji Shingaki et al. 2003. Induction of L-form-like cell shape change of Bacillus
subtilis under microculture conditions. Microbiology (2003), 149, 25012511

Formas L

Micrografas electrnicas
de formas L de B. subtilis

Tamao y morfologa de las bacterias.

Ryuji Shingaki et al. 2003. Induction of L-form-like cell shape change of Bacillus
subtilis under microculture conditions. Microbiology (2003), 149, 25012511

Tamao y morfologa de las bacterias.

Las clulas esfricas se
denominan cocos y suelen ser
redondeadas aunque pueden
ser ovoides o elpticas.
Estafilococo

Estreptococo
Diplococo

Tamao y morfologa de las bacterias.

A las de forma cilndrica se
las denomina bacilos. Los
extremos de estas clulas
suelen ser redondeados,
rectos, en forma de huso o
cuerno.

Bacillus anthracis

Escherichia coli

Tamao y morfologa de las bacterias.

A las de forma espiral o
helicoidal se las denomina
espirilos y se caracterizan por
su forma de sacacorchos.

Treponema pallidum

Tamao y morfologa de las bacterias.

Existen modificaciones a
estas tres formas
fundamentales y aunque la
mayor parte de las bacterias
mantienen constante su
forma, algunas especies
pueden variar la forma por lo
que se les llama pleomrficas.
Arthrobacter es un ejemplo
de pleomorfismo debido a que
su forma cambia en funcin de
la edad del cultivo.

Arthrobacter spp.

Tamao y morfologa de las bacterias.

Tamao: Invisibles al ojo
humano las bacterias se miden
en m que equivale a 10-3 mm.
El tamao de las bacterias
vara dependiendo de las
especies entre menos de 1 m
y 250 m; siendo lo ms
habitual entre 1 y 10 m.
En las clulas bacterianas la
relacin superficie y volumen
de la clula es muy alta lo que
permite la entrada de muchos
nutrientes para alimentar a un
pequeo volumen y una alta
actividad metablica

1 mm

10 m
Lmite de resolucin ocular

Estructura de los
microorganismos
Clulas procariotas y eucariotas.
Tamao y morfologa de las bacterias.
Observacin microscpica de los microorganismos.
Tinciones.
Membrana bacteriana y peptidoglicano.
Bacterias Gram-positivas y Gram-negativas.
Ribosomas bacterianos.
Elementos facultativos de la clula procariota.
Cpsula y capas mucosa.
Apndices bacterianos: flagelos y fmbrias.
Endosporas.
Estructura de los virus.

Antonie van Leeuvenhoek

Delft, Holanda 1632-1723
Fue el primero en ver
espermatozoides, clulas de
la sangre y bacterias

Antonie van Leeuvenhoek

Bacterias de la placa dental

Microscopio ptico
Debido a su pequeo tamao, la observacin de los
microorganismos ha de realizarse mediante el uso de
microscopios.
En el caso de la mayora de los microorganismos
procariticos, la observacin microscpica se limita a
determinar la forma, el modo de agrupamiento, el
movimiento y la presencia de algunos elementos
extracelulares tales como las cpsulas. En el caso de
microorganismos eucariticos, la informacin que se
obtiene de la observacin microscpica es mucho
mayor porque tambin lo es su diversidad morfolgica
y anatmica.

Resolucin de microscopios
La resolucin indica el tamao mnimo distinguible
La resolucin del mejor microscopio ptico est limitado unas 0,2
m con un de 540 nm (luz verde)
La resolucin de un microscopio electrnico de transmisin
(MET) es de cerca de 2 nm
La resolucin del microscopio electrnico de barrido (MEB) es de
1 - 10 nm

Estructura de los
microorganismos
Clulas procariotas y eucariotas.
Tamao y morfologa de las bacterias.
Observacin microscpica de los microorganismos.
Tinciones.
Membrana bacteriana y peptidoglicano.
Bacterias Gram-positivas y Gram-negativas.
Ribosomas bacterianos.
Elementos facultativos de la clula procariota.
Cpsula y capas mucosa.
Apndices bacterianos: flagelos y fmbrias.
Endosporas.
Estructura de los virus.

Tinciones
TINCIN SIMPLE
Permite observar la forma, tamao y agrupamiento de
las bacterias usando un nico colorante (normalmente
bsico).

Escherichia coli

Bacillus coagulans

Tinciones
TINCIN DIFERENCIAL: Tincin de Gram
Es un sistema de dos tinciones simples sucesivas,
separadas por una fase de decoloracin selectiva.
Permite diferenciar las bacterias que retienen el
primer color (Gram-positivas) de las que no lo retienen
(Gram-negativas). Esta diferencia en comportamiento
refleja diferencias estructurales y fisiolgicas entre
ambos grupos de bacterias.

Staphylococcus aureus

Neisseria meningitidis

Tinciones
TINCIN DIFERENCIAL: Tincin de Gram

Bacillus cereus

Klebsiella pneumoniae

Tinciones
TINCIN DIFERENCIAL: Tincin de Gram

Tincin de Gram de una muestra de lquido

cerebroespinal infectado con B. anthracis

Tinciones
TINCIN DIFERENCIAL Tincin de esporas

Bacillus cereus

Clostridium botulinum

Tinciones
TINCIN DIFERENCIALTincin de Ziehl-Neelsen
(cido-alcohol resistencia)
Es un tipo especial de tincin que permite la
identificacin de microorganismos de los grupos
Mycobacterium y Nocardia de gran relevancia clnica

Mycobacterium
leprae

Mycobacterium
tuberculosis

Tinciones
TINCIN DIFERENCIAL Tincin de cpsulas
Se trata de una tincin negativa usando tinta china
que permite determinar la presencia de cpsulas
polisacardicas.

Cryptococcus neoformans

Tinciones
TINCIN DIFERENCIAL Tincin de flagelos
Permite teir flagelos usando un mordiente para
incrementar su grosor y hacerlos visibles al
microscopio ptico.

Vibrio cholerae

Proteus sp.

Estructura de los
microorganismos
Clulas procariotas y eucariotas.
Tamao y morfologa de las bacterias.
Observacin microscpica de los microorganismos.
Tinciones.
Membrana bacteriana y peptidoglicano.
Bacterias Gram-positivas y Gram-negativas.
Ribosomas bacterianos.
Elementos facultativos de la clula procariota.
Cpsula y capas mucosa.
Apndices bacterianos: flagelos y fmbrias.
Endosporas.
Estructura de los virus.

Membrana bacteriana
ESTRUCTURA DE LA MEMBRANA INTERNA
La membrana interna est formada por una bicapa
lipdica. En las bacterias los lpidos que forman esta
membrana son generalmente fosfolpidos y no se
encuentran esteroles (salvo en el caso de los
micoplasmas). Esto diferencia claramente las
membranas bacterianas de las de clulas eucariticas
que s tienen esteroles en sus membranas
FUNCIONES DE LA MEMBRANA INTERNA
1.- Barrera de permeabilidad selectiva
2.- Soporte ordenado de sistemas enzimticos

Membrana plasmtica
Grupos
Hidroflicos

Fosfolpidos

Grupo
Hidro fbicos

Fosfolpido
Protenas de Membrana
Biologa de los Microorganismos de Brock

Acciones de las Protenas de

Transporte
Exterio
r

Uniporte

Simporte

Antiporte

Interio
r

Molcula Transportada
Molcula
Cotransportada

Biologa de los Microorganismos de Brock

Comparacin del Transporte Activo

con la Difusin Simple

Transporte
activo
Concentracin
Interna de
solutos

Difusin Simple

Concentracin Externa de solutos

Biologa de los Microorganismos de Brock

ESTRUCTURA DEL PEPTIDOGLICANO

Macromolcula que rodea a bacterias proporcionando
resistencia mecnica y confiriendo la forma.
Est formada por un polmero complejo (murena) que
forma una macromolcula que recubre completamente
la clula.
Estructuralmente est formado por cadenas
glucosdicas en que se repite una unidad elemental de
N-acetil-glucosamina unida por un enlace glicosdico
14 a cido N-acetil-murmico. Las unidades
elementales estn entre s mediante enlaces
glicosdicos 14.

ESTRUCTURA DEL PEPTIDOGLICANO

Las cadenas
glucosdicas estn
orientadas de forma
paralela y estn unidas
entre s mediante
puentes peptdicos
formados por cadenas
de aminocidos que
estn unidos al resto
de cido N-acetilmurmico.

ESTRUCTURA DEL PEPTIDOGLICANO

En las cadenas
peptdicas se
alternan aminocidos
con configuracin L y
con configuracin D.

Subunidades del Peptidoglicano

Sntesis del peptidoglicano

-lactmicos

Exterior

Punto de crecimiento
de la pared celular

Peptidoglicano
Peptidoglicano

Pentapptido
Membrana
citoplasmtica
Interior

Bactoprenol

Biologa de los Microorganismos de Brock

Estructura de los microorganismos

Clulas procariotas y eucariotas.
Tamao y morfologa de las bacterias.
Observacin microscpica de los microorganismos.
Tinciones.
Membrana bacteriana y peptidoglicano.
Bacterias Gram-positivas y Gram-negativas.
Ribosomas bacterianos.
Elementos facultativos de la clula procariota.
Cpsula y capas mucosa.
Apndices bacterianos: flagelos y fmbrias.
Endosporas.
Estructura de los virus.

ESTRUCTURA DEL PEPTIDOGLICANO

La capa de peptidoglicano de las bacterias Grampositivas es ms gruesa que la de las Gram-negativas
Gram Positiva

PG

PG
MI

MI

PG
MI

ME
ME
MI
PG

Gram
Negativa

Capa externa de Lipopolisacridos y

Protenas (LPS)

O-Polisacrido

Ncleo
Polisacrido
Capa
Externa de
Gram
Negativa

Protena

LPS

Lpido Porina
A

8 nm
Fosfolpido
Espacio
Periplsmico

Lipoproten
a
Peptidoglicano
Membrana Citoplasmtica

Biologa de los Microorganismos de Brock

Estructura de los
microorganismos
Clulas procariotas y eucariotas.
Tamao y morfologa de las bacterias.
Observacin microscpica de los microorganismos.
Tinciones.
Membrana bacteriana y peptidoglicano.
Bacterias Gram-positivas y Gram-negativas.
Ribosomas bacterianos.
Elementos facultativos de la clula procariota.
Cpsula y capas mucosa.
Apndices bacterianos: flagelos y fmbrias.
Endosporas.
Estructura de los virus.

Ribosomas bacterianos.
Los ribosomas, procariticos o eucariticos, estn formados por
protenas y ARN; sin embargo, ambos tipos de ribosmas son
diferentes de suerte que puede disponerse de inhibidores
(antibiticos) especficos de ribosomas procariticos que no
afectan a los eucariticos y viceversa.

Estructura de los
microorganismos
Clulas procariotas y eucariotas.
Tamao y morfologa de las bacterias.
Observacin microscpica de los microorganismos.
Tinciones.
Membrana bacteriana y peptidoglicano.
Bacterias Gram-positivas y Gram-negativas.
Ribosomas bacterianos.
Elementos facultativos de la clula procariota.
Cpsula y capas mucosa.
Apndices bacterianos: flagelos y fmbrias.
Endosporas.
Estructura de los virus.

Elementos facultativos
La capa S formada por protenas y glicoprotenas
Participa en la adhesin de las bacterias a superficies,
la proteccin frente a la fagocitosis y acta como
barrera frente a enzimas o substancias que pudieran
daar a las bacterias que la poseen.

Elementos facultativos
Las cpsulas estn formadas por polisacridos o polipptidos
Participan en la adhesin de las bacterias a superficies, retardan
la desecacin de las bacterias en ambientes secos y proporcionan
proteccin frente a la fagocitosis.
No solo las bacterias presentan cpsulas sino que tambin han
sido descritas en algunos hongos unicelulares (Cryptococcus
neoformans).
Una caracterstica macroscpica fcilmente observable de los
microorganismos con cpsula es que forman colonias de aspecto
mucoso y liso.
Las diferentes variantes de cpsula de distintas cepas de una
misma especie se pueden identificar mediante mtodos
serolgicos. El antgeno capsular se conoce como antgeno K.

Elementos facultativos
Las cpsulas estn formadas por polisacridos o
polipptidos
Participan en la adhesin de las bacterias a
superficies, retardan la desecacin de las bacterias
en ambientes secos y proporcionan proteccin frente
a la fagocitosis.
No solo las bacterias presentan cpsulas sino que
tambin han sido descritas en algunos hongos
unicelulares (Cryptococcus neoformans).
Las diferentes variantes de cpsula de distintas
cepas de una misma especie se pueden identificar
mediante mtodos serolgicos. El antgeno capsular
se conoce como antgeno K.

Estructura de los
microorganismos
Clulas procariotas y eucariotas.
Tamao y morfologa de las bacterias.
Observacin microscpica de los microorganismos.
Tinciones.
Membrana bacteriana y peptidoglicano.
Bacterias Gram-positivas y Gram-negativas.
Ribosomas bacterianos.
Elementos facultativos de la clula procariota.
Cpsula y capas mucosa.
Apndices bacterianos: flagelos y fmbrias.
Endosporas.
Estructura de los virus.

Apndices bacterianos: flagelos y

fmbrias.

FLAGELOS

FIMBRIAS

PELO F

PROLONGACIONES DE ADHESIN

Bacterias mviles El antgeno flagelar se conoce como antgeno H.

Las bacterias flageladas pueden tener entre uno y 20 flagelos por clula.
Composicin proteica
Tamao es de unos 20 nm de dimetro y de entre 5 y 20 m de longitud.

Pequeas fibras proteicas

Su nmero vara entre 100 y 1000 por bacteria
Tamao entre 2 a 9 nm de dimetro y 1 a 5 m de longitud.
Gran importancia en la adhesin

Es un tipo especial de fimbria producido por bacterias capaces de transmitir

su informacin gentica a otras mediante conjugacin bacteriana. Cuando
est presente hay slo uno por clula. Su naturaleza es proteica. Su longitud
llega a alcanzar las 10 m.
Algunos tipos de microorganismos son portadores de prolongaciones con
forma de ventosa que les permiten adherirse a las clulas animales que
infectan. Esto ocurre, por ejemplo, en ciertos micoplasmas.

Apndices bacterianos: flagelos y

fmbrias.
PELO F
Es un tipo especial de
fimbria producido por
bacterias capaces de
transmitir su
informacin gentica a
otras mediante
conjugacin bacteriana.
Cuando est presente
hay slo uno por clula.
Su naturaleza es
proteica. Su longitud
llega a alcanzar las 10
m.

Estructura de los
microorganismos
Clulas procariotas y eucariotas.
Tamao y morfologa de las bacterias.
Observacin microscpica de los microorganismos.
Tinciones.
Membrana bacteriana y peptidoglicano.
Bacterias Gram-positivas y Gram-negativas.
Ribosomas bacterianos.
Elementos facultativos de la clula procariota.
Cpsula y capas mucosa.
Apndices bacterianos: flagelos y fmbrias.
Endosporas.
Estructura de los virus.

Esporas

Biologa de los Microorganismos de Brock

Ciclo Celular
Clula Vegetativa

Clula
Espolulante

Espor
a

Germinacin
Espora

Clula Vegetativa
Biologa de los Microorganismos de Brock

Fases de formacin de la Endoespora

Biologa de los Microorganismos de Brock

cido dipicolnico

Grupos
Carboxilo

Biologa de los Microorganismos de Brock

Estructura de los
microorganismos
Clulas procariotas y eucariotas.
Tamao y morfologa de las bacterias.
Observacin microscpica de los microorganismos.
Tinciones.
Membrana bacteriana y peptidoglicano.
Bacterias Gram-positivas y Gram-negativas.
Ribosomas bacterianos.
Elementos facultativos de la clula procariota.
Cpsula y capas mucosa.
Apndices bacterianos: flagelos y fmbrias.
Endosporas.
Estructura de los virus.

Estructura de los virus.

Poliovirus

Rhinovirus
Adenovirus

Poxvirus

Virus hepatitis A

Estructura de los virus.

Virus influenza

Estructura de un Bacterifago

Cabeza

Ncleo

Base

Biologa de los Microorganismos de Brock

Priones

Concepto de prin

Depsitos amiloides en un
paciente con CreutzfeldtJakob