Saltar a navegacin, bsqueda ? Mycobacterium leprae
Clasificacin cientfica Reino: Bacteria Filo: Actinobacteria Orden: Actinomycetales Familia: Mycobacteriaceae Gnero: Mycobacterium Especie: M. leprae Nombre binomial Mycobacterium leprae Hansen, 1874 Mycobacterium leprae, es una especie bacteriana, tambin conocida con el nombre de bacilo de Hansen, es la bacteria que causa la lepra o "enfermedad de Hansen" 1 . Es intracelular y pleomrfica 2 , aunque usualmente tiene forma de bastn, acido alcohol resistente, aerobia y slo remotamente emparentada con Mycobacterium tuberculosis. Fue la primera bacteria patgena descubierta en tejidos infectados. Fue descubierta en 1874 por G. Armauer Hansen en Noruega 3
4 . Presenta una longitud entre 1 y 7 micras y un espesor entre 0,3-0,5 micras. Este organismo nunca ha podido ser multiplicado exitosamente en un medio de cultivo artificial. 2
Mycobacterium leprae es sensible a las dapsonas (el primer tratamiento efectivo descubierto para la lepra), pero resistente a los antibiticos desarrollados posteriormente. Normalmente se necesita una combinacin de dapsona, rifampicina y clofazimina (tratamiento recomendado por la OMS). Las bacterias del gnero Mycobacterium contienen una membrana citoplasmtica formada por una bicapa lipdica similar a las restantes eubacterias. Por encima de esta membrana se encuentra el rgido peptidoglicano que contiene N-glucolilmurmico en lugar de N-acetilglucosamina. Por medio de una unin fosfodister, el peptidoglicano se halla unido covalentemente al arabinogalactano, un polmero de arabinosa y galactosa. En la porcin ms distal y externa de los arabinogalactanos se hallan fijados los cidos miclicos que tienen cadenas carbonadas largas (C60 a C90). Los glucolpidos son un grupo de compuestos (micolatos de trealosa, sulfolpidos, micsidos, etc) que se encuentran asociados no covalentemente a los cidos miclicos y se ubican perifricamente en la pared. Los micolatos de trealosa (llamados factores de cordn porque su presencia produce cultivos que tienen forma de cordones serpenteantes) y sulfolpidos se encuentran principalmente en las cepas de Mycobacterias ms virulentas. El lipoarabinomanano (LAM) es un compuesto que se halla anclado en la membrana citoplasmtica. El LAM es considerado como el equivalente mycobacteriano del lipopolisacrido de las Gram negativas debido a que provoca una importante respuesta antimicrobiana en macrfagos. En las cepas de Mycobacterias ms virulentas la arabinosa terminal del LAM est recubierta con residuos de manosa (manLAM) a diferencia de las cepas no virulentas no estn recubiertas (AraLAM). Adems, el LAM tambin podra servir como poro para el paso de los nutrientes a travs de la pared celular. En la pared celular tambin se encuentran protenas inmunoreactivas que son utilizadas con fines diagnsticos (PPD). La lepra es una infeccin causada por el Mycobacterium leprae que es un parsito intracelular obligado que se multiplica lentamente en clulas fagocitarias mononucleares como los histiocitos de la piel y en las clulas de Shwan de los nervios. Contenido [ocultar] 1 Genoma 2 Enlaces externos 3 Referencias 4 Enlaces externos Genoma [editar] Mycobacterium leprae tiene el periodo ms largo de duplicado de todas las bacterias conocidas. 5 Comparando la secuecia genmica de Mycobacterium leprae con el de Mycobacterium tuberculosis se ve claramente las explicaciones de sus propiedades, revelando un caso extremo de evolucin reductiva. Menos de la mitad del genoma contiene funcionales genes. La destruccin y decaimiento de genes aparece sustancial para eliminar muchas e importantes actividades metablicas, incluyendo produccin de sideroforos, parte de las razas oxidativas y muchas microaeroflico y anaerobios respiratorios, y numerosos sistemas de catabolismo y sus circuitos regulatorios. 6
La secuencia genmica de una raza de M. leprae, originalmente aislada en Tamil Nadu y designada TN, ha sido completada recientemente. Esa secuencia se obtuvo por combinaciones de aproximacin, empleando anlisis automticos de secuecnias de ADN de seleccionados csmidos y clones de genomas enteros del tipo 'shotgun' . Luego de finiquitado el proceso, su secuencia de genoma contena 3.268.203 de pares de bases (bp), y un promeido de contenido G+C de 57,8%, valores mucho ms bajos que los que corresponden a M. tuberculosis, que son de 4.441.529 bp y 65,6% G+C. Hay 1.500 genes comunes a ambos M. leprae & M. tuberculosis. Su anlisis comparativo sugiere que ambos micobacterias derivan de un ancestro comn y, en un estadio, tienen pool de genes de similares tamaos. La reduccin desde un genoma de 4,42 Mb, tal como en M. tuberculosis, a uno de 3,27 Mb necesita de una prdida de 1.200 secuencias de cdigos de protenas. Hay evidencia que muchos de los genes presentes en el genoma de M. leprae realmente se han perdido. 7
Mycobacterium leprae La informacin del genoma completado puede ser util en el desarrollo de tests diagnsticos cutneos, al entender el mecanismo de dao nervioso, resistencia a drogas y a poder identificar nuevas drogas para ms racionales diseos de nuevas terapias en tratar lepra y sus complicaciones.
Mycobacterium leprae:
1. Enfermedades causadas: Lepra: infeccin de los nervios asociada a anestesia; desfiguracin extensa por lesin de la nariz, dedos de manos y pies, y otras partes del cuerpo.
2. Patogenia: Microorganismo intracelular obligado que invade la piel y el tejido nervioso perifrico donde crece lentamente. El glucolpido 1 fenlico (PGL-1) contribuye a la invasin y desmielinizacin. Perodo de incubacin: 5-7 aos. Tipos: a) tuberculoide (LT), menos grave, lepromatosa (LL), ms grave, con formas intermedias (polares) borderline, b) BT y BL. Los primeros signos de LT son grandes placas eritematosas en la piel, anestsicas, que progresan hasta LL, con afectacin cutnea y lesiones nodulares con hasta 109 microorganismos/g de tejido. Como consecuencia de la insensibilidad y del propio efecto de M. leprae, lesiones que pasan inadvertidas (destruccin de los dedos). Cuando los antibiticos reducen la carga bacteriana y tiene lugar una hiperreaccin de IC que causa lesin inmunolgica, se desarrollan reacciones inversas.
3. Inmunidad: Gravedad de la lepra inversamente relacionada con el estado de IC. Las respuestas HTR a antgenos proteicos de M. leprae (lepromina) son buenas en la LT pero ausentes en la LL.
4. Epidemiologa: Dos veces ms frecuente en varones. La pobreza, el medio rural y la gentica (tipo HLA) son factores de riesgo. Los niveles de anticuerpos y positividad de prueba cutnea sugieren que el 90 % de individuos expuestos no contraen la enfermedad. El armadillo es un reservorio de la infeccin. Contribuyen a la transmisin secreciones nasales en aerosoles, contacto directo con piel
infectada e insectos vectores.
5. Diagnstico: a) Signos clnicos en regiones endmicas. b) Tincin acidoalcoholresistente del tejido anestsico que revela 1) tpicos bacilos finos y largos, o 2) globi. c) Anticuerpos monoclonales para PGL-1. d) Proliferacin ML en almohadilla plantar del ratn (en especial para examinar la sensibilidad antibitica). ML no crece bien en cultivos.
6. Control: a) El tratamiento multiantibitico agresivo (OMS) ha disminuido el nmero de casos en todo el mundo. b) Mejora de las condiciones de vida de individuos en reas endmicas. c) La vacunacin BCG ha demostrado resultados variables. d) No est disponible vacuna especfica.
Mycobacterium leprae
Mycobacterium leprae
Revista Cubana de Medicina Tropical, julio-diciembre, 1995 Instituto de Medicina Tropical "Pedro Kour" Utilizacin del medio de cultivo UIT-A en la obtencin de biomasa para la identificacin bioqumica micobacteriana Lic. LILIAN M. MEDEROS CUERVO,<1> Dra. CARIDAD FERRA SALAZAR<2> y Dr. JOSE A. VALDIVIA<3> RESUMEN Se compara el medio de cultivo slido UIT-A con el Lowenstein Jensen, para la obtencin de biomasa en el montaje del test bioqumico de identificacin de micobacterias "no tuberculosas" (MNT), con el objetivo de valorar la posibilidad de utilizacin como medio de cultivo para el montaje y anlisis de dichas pruebas bioqumicas. Los resultados obtenidos en los 2 medios de cultivo utilizados fueron iguales, por lo que se recomienda el uso del medio de cultivo UIT-A fundamentalmente para aquellas cepas con crecimiento pobre o escaso. Palabras clave: MEDIOS DE CULTIVO/mtodos. INTRODUCCION Mediante la nutricin los organismos extraen del ambiente todas las sustancias que requieren para satisfacer sus demandas de materia prima para la biosntesis y generacin de energa, estas sustancias son denominadas nutrientes.1,2 Este tema ha sido desarrollado por muchos autores por su vital importancia para lograr un buen crecimiento microbiano. Diversos investi gadores han determinado que al variar las condiciones de nutricin podran producirse variaciones en el desarrollo bacteriano y en sus respuestas a determinadas pruebas bioqumi- cas.3-6 En 1982, nuestro laboratorio formul un medio de cultivo slido denominado UIT-A, para el crecimiento de cantidades significativas de biomasa micobacteriana.7,8 Para la clasificacin e identificacin de micobacterias "no tuberculosas" (MNT) es necesario realizar diferentes pruebas bioqumi cas a partir del cultivo y crecimiento en medio de Lowenstein Jense modificado (UIT) de las cepas objeto de estudio.9,10 El presente estudio tiene como objtivo comprobar si al utilizar el medio de cultivo UIT- A para obtener biomasa en el montaje de estas pruebas no se producen variaciones con los resultados obtenidos con el medio UIT. MATERIAL Y METODO Se analizaron 7 cepas de referencias pertenecientes a la coleccin de Laboratorio Nacional de Referencia de Micobacterias y Tuberculosis del Instituto de Medicina Tropical "Pedro Kour" (IPK): Mycobacterium flavescens, Mycobactyerium xenopi, Mycobacterium scrofula ceum, Mycobacterium fortuitum y Mycobacterium avium- intracellulare. Las cepas fueron cultivadas simultneamente en los 2 medios de cultivo seleccionados: Lowenstein Jensen modificado (UIT) y UIT- A.7-10 A partir de la obtencin dela biomasa procedente de los medios de cultivo anterior mente mencionados, se elaboraron los patrones de 1 mg/mL, para montaje de las pruebas bioqumicas de identificacin segn la tcnica descrita.9,10 Las pruebas bioqumicas utilizadas fueron: ureasa, hidrlisis del Tween, toleran cia al NaCl 5 %, catalasa semicuan- titativa > 45 mm, arylsulfatasa 3 y 14 das y reduccin del telurito de potasio. RESULTADOS Y DISCUSION Al observar los resultados obtenidos en los medios de cultivos seleccionados, vemos que la cantidad de biomasa obtenida en el medio UIT-A es mayor. La respuesta bioqumica fue la misma en los 3 medios de cultivo seleccionados para este estudio, loque comprueba la posibili dad de utilizacin para estos fines del medio de cultivo slido UIT-A (tablas 1 y 2). Se evalu positivamente la eficacia del medio UIT-A mediante los resultados obtenidos con el medio UIT, y qued demostrado que las caractersticas de las propiedades nutricionales del medio UIT-A cumple con las exigencias nutricionales, lo cual se pone de manifiesto con la cantidad de biomasa micobacteriana obtenida en este medio. Los resultados con respecto a la produccin de masa obtenida superior al medio UIT ya se han discutido en otros estudios realizados.7,8 Por lo cual recomendamos la utilizacin del medio UIT-A como medio de cultivo para la identificacin bioqumica de las MNT. TABLA 1. Resultados de las pruebas bioquimicas realizadas a las cepas cultivadas en medio UIT
Medio de Hidrolisis Tolerancia Catalasa Arylsulfatasa Arylsulfatasa Telurito Especie cultivo Ureasa del Tween al NaCl 5 % semicuantitativa 3 dias 14 dias de potasio
M. flavescens UIT + + + + - + -
M. xenopi UIT - - - - + + -
M. seroflaceum UIT + - - + - + -
M. szulgae UIT - +/- - + + + -
M. gordonae UIT - + - + + + -
M. fortuitum UIT + + + + + + +
M. avium-
-intracellulare UIT - - - - D D -
D: Dudoso.
M.: Mycobacterium.
TABLA 2. Resultados de las pruebas bioquimicas realizadas a las cepas cultivadas en medio UIT-A
Medio de Hidrolisis Tolerancia Catalasa Arylsulfatasa Arylsulfatasa Telurito Especie cultivo Ureasa del Tween al NaCl 5 % semicuantitativa 3 dias 14 dias de potasio
M. flavescens UIT-A + + + + - + -
M. xenopi UIT-A - - - - + + -
M. seroflaceum UIT-A + - - + - + -
M. szulgae UIT-A - +/- - + + + -
M. gordonae UIT-A - + - + + + -
M. fortuitum UIT-A + + + + + + +
M. avium-
-intracellulare UIT-A - - - - D D +
D: Dudoso.
M.: Mycobacterium.
REFERENCIAS BIBLIOGRAFICAS 1. Pazos VC, Rojas NM, Jorge DE. Temas de Bacteriologa. La Habana: Pueblo y Educacin, 1985. 2. Martnez J, Snchez AI, Quintana M, Pazos V. Microbiologa General. La Habana: Pueblo y Educacin, 1985. 3. Tsukamura M. Identification of mycobacteria. Mycobacteriosis Research Laboratory of the National Chubu Hospital, Obu, Aichi 474, 1984. 4. Larsson L, Valero-Guillen P, Luengo Martn H, Pacheco F. Influence of culture medium and incubation time on the fatty acids composition of some rapid-growing mycobacteria as analysed by packed and capillary column gas chromatography. Acta Pathol Microbiol Immunol Scand 1985;93 Sect B:354-7. 5. Ratledge C. Nutrition, growth and metabolism. En: Ratledge C, Stanford J, eds. Biology of the Mycobacteria. London: Academic, 1992;vol 1:186-212. 6. Wheeler PR, Ratledge C. Metabolism in Mycobacterium leprae, Mycobacterium tuberculosis and other pathogenic mycobacteria. Br Med Bull 1988;44(3):547-61. 7. Mederos LM, Jimnez CA, Valdivia JA. Ensayo del medio UIT modificado UIT-A en estudios cromatogrficos. Rev Cubana Med Trop 1982;34:70-4. 8. . Estudio comparativo de diferentes medios de cultivo incluyendo la modificacin UIT- A. Rev Cubana Med Trop 1986;38:25-8. 9. Kantor I. Bacteriologa de la tuberculosis humana y animal. Buenos Aires: Centro Panamericano de Zoonosis, 1979. 10. Casal M. Microbiologa clnica de las enfermedades por micobacterias (tuberculosis, lepra y micobacteriosis). Crdova: Universidad de Crdova, 1990. Recibido: 18 de agosto de 1994. Aprobado: 30 de diciembre de 1994. Lic. Lilian M. Mederos Cuervo. Instituto de Medicina Tropical "Pedro Kour". Apartado 601, Marianao 13, Ciudad de La Habana, Cuba. <1>Licenciada en Microbiologa. Investigadora Auxiliar. <2>Especialista de II Grado en Microbiologa. <3>Epecialista de II Grado en Microbiologa. Jefe del Laboratorio Nacional de Referencia de Micobacterias y Tuberculosis. Indice Anterior Siguiente