Determinacin de arsnico en agua por espectrometra de absorcin atmica

con generacin de hidruro (HG-AAS)

Morand, Enzo E.
1
- Gimnez, Mara C.
1
- Benitez, Mnica E.
1
- Garro, Oscar A.
2


1. Ctedra de Qumica Analtica General - 2. Ctedra de Microbiologa de los Alimentos.
Facultad de Agroindustrias - UNNE.
Comandante Fernndez 755 - (3700) Pcia. Roque Senz Pea - Chaco - Argentina.
Tel./Fax: +54 (03732) 420137
E-mail: cgimenez@fai.unne.edu.ar

ANTECEDENTES

La Espectrometra de Absorcin Atmica de Llama (FAAS) es una tcnica sencilla, conocida desde hace mucho tiempo
y claramente arsenoselectiva, sin embargo, los lmites de deteccin con esta tcnica no son lo suficientemente bajos
como para llevar a cabo la determinacin de arsnico en la mayora de las muestras reales.
El acoplamiento de un generador de hidruros al espectrmetro de absorcin atmica (GH-AAS) aporta la sensibilidad
requerida. La tcnica de Generacin de Hidruro, basada en la reaccin de Marsh y Gutzeit en la cual se emplea zinc
como reductor, se conoce bien desde hace bastantes aos (Burguera et al., 1991). Ya en 1969, Holak la utiliz para
mejorar la determinacin de arsnico, cuya baja longitud de onda (193,7nm) dificulta su anlisis por AAS. En la
actualidad se usa con xito para reducir los lmites de deteccin.
La tcnica de GH-AAS consta de tres etapas fundamentales: la generacin y volatilizacin del hidruro, la transferencia
del mismo y su posterior atomizacin en el espectrmetro de AA. La generacin del hidruro, en el presente trabajo se
consigue, tratando la muestra que contiene arsnico con una disolucin de Borohidruro de sodio (NaBH
4
) en medio
cido (HCl).






Donde H* es el hidrgeno naciente, A es el elemento formador de hidruro y m su estado de oxidacin (que puede o
no coincidir con n , el ndice de coordinacin).
Si bien, el reductor utilizado universalmente es el Borohidruro de sodio, la reaccin es completa y rpida cuando se trata
de la especie inorgnica As (III), en el caso de As(V) y las especies orgnicas Monometilarsnico (MMA) y
Dimetilarsnico (DMA), la reaccin es muy lenta por lo que es necesaria una reduccin previa, para lo cual se utiliza
yoduro de potasio o L-cystena..

Entre los sistemas de generacin de hidruros, los que combinan las ventajas de la inyeccin en flujo, con la posterior
deteccin por espectrometra por absorcin atmica, es de los ms usadas en la determinacin total de arsnico, por que
es sensible, rpido y minimiza los efectos de las interferencias, si se lo compara con los mtodos tradicionales (Jimnez
de Blas et al. 1996), adems resulta ser ms cmodo de usar y apropiado para el anlisis (Anderson et al., 1986).
Los mtodos continuos de anlisis (Flow Injection Anlisis) se refieren a aquellos procesos analticos en los que la
concentracin del analito es medida sin interrumpir un flujo de lquido o gas. La mezcla del hidruro con el resto de la
dilucin es bombeada a un separador gas-lquido, donde una corriente de gas inerte (generalmente argn) impulsa el
hidruro hacia la llama liberndolo de la disolucin (Menndez Alonso, 1995). La atomizacin del hidruro se realiza en
un tubo de cuarzo en forma de T que, calentado por la llama, aumenta el tiempo de residencia de los tomos y evita la
dispersin de los mismos y el ruido de fondo. La seal generada se almacena en un registrador de tipo continuo
(Cantle, 1982).
Dado el gran nmero de variables que intervienen en los mtodos continuos de anlisis, uno de los primeros pasos debe
ser la optimizacin de aquellas variables que influyen en la seal analtica que se obtenga. Este trabajo describe el
procedimiento seleccionado para la determinacin de arsnico total en muestras de agua y tiene como propsito
optimizar las variables ms importantes (flujo de gas de arrastre y concentracin de reactivos) que permiten una
respuesta analtica en forma rpida y con un bajo consumo de reactivo.
El presente trabajo forma parte de un proyecto de investigacin ms amplio que tiene por objeto realizar la especiacin
del arsnico en diferentes muestra madioambientales.

MATERIALES Y METODOS

Aparatos y procedimiento analtico: Se trabaj con un Espectrofotmetro UV-Visible METROLAB Mod. 4200 con
microcomputador y corrector de fondo incorporado. En este caso fue usado un generdor de hidruro/separador gas-
lquido construido en el laboratorio. El equipamiento empleado en el presente trabajo se representa esquemticamente
NaBH
4
+ 3H
2
O + HCl H
3
BO
3
+ NaCl + 8 H*

8H* + A
m+
AH
n
+ (8-n)/2 H
2
(exceso)
en la figura 1. Este consiste en una bomba, de cuatro vas, una para el ingreso de la muestra (0,50 ml/min), y tres para
los reactivos: la solucin pre-reductora de Yoduro de potasio, la solucin reductora de Borohidruro de sodio y el cido
clorhdrico (todos con velocidad de flujo de 0,50 ml/min),
Se trabaj con un sistema de pre-reduccin, seleccionndose para este trabajo solucin de KI al 1% para todos los
anlisis realizados.
Reactivos: En todos los casos se emplearon reactivos grado analtico. El agua destilada usada para la preparacin de
todas las soluciones reactivas y estndar ha sido lo suficientemente pura para nuestro propsito. La solucin estndar de
1,0 g ml
1
de As (III) fue preparada por disolucin del correspondiente xido en solucin 0,5% (m/v) de NaOH.
Todo el material volumtrico de vidrio utilizado en la preparacin de reactivos y disoluciones se mantuvo en un bao de
HNO
3
al 30% durante 24 hs., el que fue enjuagado con agua destilada y secado previo a su utilizacin.
Diseo analtico: Considerando las limitaciones impuestas por sistema empleado, se estudi la influencia de las
concentraciones del reductor y del cido, as como del flujo del gas de arrastre (Argn) seleccionado para este trabajo.
Para la evaluacin estadstica de la influencia de la concentracin del cido clorhdrico y del flujo de Argn, y del
Bororhidruro de sodio se emple un diseo factorial con 3
5
y 3
7
niveles respectivamente.
Curva de calibracin: Establecidas las mejoras condiciones experimentales para las variables estudiados se valid el
mtodo por medio de una curva de adiciones estndar de una muestra de arsnico (III) a una muestra de agua, en el
rango de 25 g l
-1
a 250 g l
-1
, con tres repeticiones.

RESULTADOS Y DISCUSION

Optimizacin del sistema de generacin de hidruro:
Las influencia de la concentracin del agente reductor en la respuesta generada en funcin de la concentracin del
reactivo utilizado (NaBH
4
) se muestran en la figura 2. En ella se puede observar que la intensidad de la respuesta se
incrementa con el incremento de la concentracin del reductor, llega a un mximo cuando alcanza una concentracin
del 1%, para luego decrecer.
















El efecto de la concentracin del cido clorhdrico sobre la respuesta generada se puede ver en la figura 3. La
intensidad de la respuesta aumenta abruptamente entre las concentraciones de 0,25 y 0,5 (M), para luego hacerlo ms

Figura 2: Efecto de la concentracin de NaBH
4
en la
respuesta de la seal analtica para la determinacin
de arsnico.
Figura 3: Efecto de la concentracin de HCl en la
respuesta de la seal analtica para la determinacin de
arsnico.
(%)
Figura 1: a) Representacin sistemtica del acoplamiento HG-AAS . b) Separador gas-lquido.
(a) (b)
lentamente. El anlisis de los datos experimentales obtenidos al aplicar el test LSD para un nivel de confianza del 95%
muestra que existen diferencias significativas entre las concentraciones de Borohidruro de sodio estudiadas,
observndose que la mayor respuesta se alcanza al utilizar una solucin al 1% de agente reductor. En cuanto al cido
clorhdrico se puede decir que concentraciones de cido 2 M son suficientes para generar una respuesta analtica
satisfactoria.

Para estudiar el efecto del flujo de Argn -gas de arrastre de la arsina producida a la celda de cuarzo- en la respuesta de
la seal analtica se probaron diferentes flujos, los mismos se muestran en la figura 4. En la misma se observa, con un
nivel de confianza del 95%, que la mxima respuesta se obtuvo al trabajar con un flujo Argn de 70 ml min
-1.

















Condiciones instrumentales de operacin:
Los resultados obtenidos permitieron encontrar las condiciones experimentales que permitan lograr una respuesta
analtica ptima, rpida y con bajo consumo de reactivo. Las mismas se vuelcan en la tabla 1.


Tabla 2: Condiciones instrumentales de operacin para la determinacin de HG-AAS

Condiciones operativas
Generacin de Hidruro
Agente reductor NaBH
4
1% (m/v) ( en 0,5 % de NaOH); flujo 0,5 ml min
-1

Solucin de HCl 3 M; flujo 0,5 ml min
-1

Muestra Flujo 0,5 ml min
-1

Pre-reductor KI 1,5% (m/v)
Gas de arrastre Argn; flujo 100 ml min
-1



Espectrmetro de Absorcin atmica
Longitud de onda 193,7 nm.
Ancho de banda 1,5 nm
Tiempo de integracin 5 seg.
Corriente de la lmpara 8,5 mA
Aire - Acetileno (2,25 bar- 1,00 bar)


Calibracin:
La regresin de la curva de calibrado obtenida muestra que los resultados experimentales ajusta a un modelo lineal y
describe la relacin estadsticamente significativa que existe entre absorbancia y concentracin en el rango que va de 20
a 200 g l
-1
para un nivel de confianza del 99%, figura 5. El coeficiente de correlacin es igual a 0,9983. La curva
decrece a concentraciones mayores. La ecuacin de calibracin que ajusta el modelo, para la matriz estudiada es la
siguiente:

Y = 0,0289553 + 0,00106455 x

Figura 4: Efecto del flujo de Argn en la respuesta de
la seal analtica para la determinacin de arsnico

Caractersticas analticas:
Las caractersticas analticas del mtodo para la determinacin de arsnico por HG-AAS se muestran en la tabla 3.

Tabla 3: Caractersticas analticas del mtodo para la determinacin de arsnico total por HG-AAS.

Parmetros HG-AAS
Lmite de deteccin (g l
-1
)
a
7,2

Lmite de Cuantificacin (g l
-1
)
b
24, 0
Precisin R.S.D. (%)
c
3,0
Recuperacin (%)
d
95
a

a
Definido como 3 /pendiente.
b
Definido como 10 /pendiente.
c
Definido sobre las desviacin
estndar de 6 rplicas de 100 g l
-1
.
d
Para n=6.

CONCLUSION

De acuerdo con los resultados obtenidos se podra concluir que los mejores resultados en la determinacin de arsnico
por HG-AAS en continuo, para el sistema estudiado, se logran cuando se trabaja con concentraciones de cido
clorhdrico 2 M, Borohidruro de sodio al 1% y con un flujo de gas de arrastre (Argn) de 100 ml min
-1
, siempre que se
mantengan las condiciones operativas del ensayo.

BIBLIOGRAFIA

[1] Anderson, R. K.; Thompson,M; Culbard,E. (1986). Selective Reduction of Arsenic by Continuous Hydride
Generation. Parte I. Reaction Media. Analyst. Vol. 111: 1143- 1152.
[2]. Anderson, R. K.; Thompson M.; Culbard E. (1986). Selective Reduction of Arsenic Species by Continuous Hydrire
Generation. Part II . *Validation of Methods for Application to Natural Waters. Analyst. Vol 111: 1152-1158
[3] Benitez, M.E. (2000). Influencia de la Concentracin de Reactivo y del Gas Carrier en la Determinacin de
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[4] Burguera, M,; Burguera, J. K.; Brunetto, M. R. (1991) Flow-injestion Atomic Spectrometric Determination of
Inorganic Arsenic (III) and Arsenic (V) Species by use of an Aluminium-Column Arsine Generator and Cold-
Trapping Arsine Collection :105-128.
[5] Cantle, J.E. (1982). Atomic Absorption Spectrometry. Techniques instrumentation in Analytical Chemistry..Elsevier
Scientific Publishing Company.Amsterdam Vol. 5: 384-390 .
[6] Jimnez de Blas et al.; Jornal of AOAC Inernational, (1996) .Determination of Total Arsenic and Selenium in Soils
and Plants by Atomic Absorption Spectrometry with Hydride Generation and Flow Injection Analysis Coupled
Techniques. Vol. 79, N.3: 764-768.
[7] Menndez Alonso,M.E. (1995).Investigacin de Nuevos Mtodos Enzimtico de Extraccin para el Anlisis de
Especies de Arsnico en Alimentos. Tesis de Licenciatura, Universidad de Oviedo. Espaa.
[8] Standars Methods. (1992).Continuous Hydride Generation/Atomic Absorption Spectrometric Method (PROPOSED)
18 Th Edition 3 :32-33.

Figura 4: Curva de calibracin por adiciones
estndar de Arsnico (III) en agua.