Crecimiento microbiano

En microbiologa el crecimiento se define como el

incremento en el nmero de clulas.
La biparticin (fisin binaria) es
el proceso por el cual una
clula se divide para formar dos
clulas iguales.
El intervalo que transcurre en
la formacin de dos clulas a
partir de una clula se llama
generacin y el tiempo
requerido para esto es el
tiempo de generacin o tiempo
de duplicacin.
Fisin binaria
Durante la fisin binaria cada clula hija
recibe una copia del cromosoma, de los
ribosomas, complejos macromoleculares,
as como monmeros y iones inorgnicos
para existir como una clula
independiente.
El ADN se ancla a la membrana y as,
cada clula hija se queda con una copia.
Se forma un septo que dar lugar a cada
una de las clulas, las envolturas rodean a
cada copia del ADN y finalmente se da la
separacin de las clulas.
Protenas Fts
Las protenas Fts (filamentous
temperature sensitive) interactan
para formar el aparato de divisin
llamado divisoma.

FtsZ polimeriza y forman una anillo
en el centro de la clula.
FtsA es una enzima ATP hidrolasa
que provee la energa para
ensamblar protenas en el divisoma.
ZipA ancla a FtsZ a la membrana
citoplasmtica.
FtsI es una protena involucrada en la sntesis de peptidoglucano y
es tambin llamada protena de unin a penicilina (su actividad es
bloqueada por el antibitico).
Replicacin del ADN
La replicacin del ADN ocurre previo a la
formacin del anillo FtsZ, este se forma en el
espacio entre los cromosmas duplicados.

MinC es un inhibidor de la divisin celular y
previene que FtsZ ensamble el anillo hasta que
el centro se encuentre formado.
MinE inhibe la actividad de MinC y se ancla al
centro de la divisin.
FstK participa en la elongacin.
FstZ tambin tiene actividad de GTP hidrolasa,
libera energa para la polimerizacin y
despolimerizacin, as como para el
ensamblaje y desensamblaje del anillo.
Protena MreB y la forma
de las bacterias
La presencia de la protena MreB
se ha relacionado con la forma
de las bacterias no cocoides.

FtsZ tubulina bacteriana.
MreB actina bacteriana.
Nature Cell Biology 5, 175 - 178 (2003)
Autolisinas
Pequeas aberturas son
llevadas a cabo por las enzimas
autolisinas que tiene una funcin
similar a la lisozima.
Las autolisinas se encuentran
presentes en el complejo
divisoma.
La sntesis del nuevo
peptidoglocano deja en la
clulas Gram positivas una
cicatriz.
Las aberturas y la sntesis debe
ser coordinada para evitar la
autolsis de la clula.
Bactoprenol y
transpeptidacin
El bactoprenol acarrea los precursores de la pared celular, en el
periplasma interacta con la enzima que inserta los precursores
de pared celular y cataliza la formacin del enlace glucosdico.
La transpeptidasa forma el enlace peptdico entre las cadenas
de aminocidos de las unidades de murena.
Crecimiento exponencial
Cuando un cultivo se duplica
de manera regular durante
un intervalo de tiempo, se
denomina crecimiento
exponencial.
Una grfica aritmtica del
crecimiento muestra un
incremento constante
mientras una logartmica
(log
10
) permite observar con
respecto al tiempo cuando el
crecimiento es exponencial y
puede entonces calcularse el
tiempo de generacin.
Tiempo de generacin
Tiempo de generacin (G) es el tiempo requerido para
que una clula se divida o una poblacin se duplique.

G = t/n
Si partimos de una clula al cabo de una generacin habr
duplicado su nmero y as sucesivamente en cada generacin.
Como se puede comprobar el crecimiento se produce en
progresin geomtrica:

1 generacin -------------> 2 clulas
2 generaciones -------------> 4 clulas
3 generaciones -------------> 8 clulas
4 generaciones -------------> 16 clulas
5 generaciones -------------> 32 clulas
Tiempo de generacin

lg N - lg No lg N - lg No
n =
___________________
n =
____________________
n = 3.3 (lg N - lg No)

lg 2 0.301

N = No2
n
lg N = lg No + n lg 2
To -------------> No
1 generacin -------------> 2No = No2
1

2 generaciones -------------> 4No = No2
2

3 generaciones -------------> 8No = No2
3

4 generaciones -------------> 16No = No2
4

5 generaciones -------------> 32No = No2
5

n generaciones (T) -------------> N = No2
n


t
G =
___________________________
3.3 (lg N - lg No)
Tiempos de duplicacin
Bacteria

Medio Tiempo de
duplicacin
(minutos)
Escherichia coli Glucosa-sales 17
Bacillus megaterium Sacarosa-sales 25
Streptococcus lactis Leche 26
Staphylococcus aureus Medio de infusin de
corazn
27-30
Streptococcus lactis Medio con lactosa 48
Lactobacillus acidophilus Leche 66-87
Rhizobium japonicum Manitol-sales-extracto
de levadura
344-461
Mycobacterium tuberculosis Medio definido 762-932
Treponema pallidum Testculos de conejo 1980
Curva de crecimiento
A
B
C
D
E
Tiempo
L
o
g

d
e
l

n

m
e
r
o

d
e

m
i
c
r
o
o
r
g
a
n
i
s
m
o
s

Curva de crecimiento
A (Fase Lag). Periodo de latencia o adaptacin: no hay
aumento significativo de la densidad celular, el crecimiento es
asincrnico.
B (Fase Log). Periodo de crecimiento exponencial, el
crecimiento es sincrnico y se alcanza la mxima velocidad
de crecimiento.
C (Fase pre-estacionaria). Periodo de retardo desaparece el
crecimiento exponencial, los microorganismos entran en
estrs.
D (Fase estacionaria). Periodo estacionario: no hay cambios
significativos de la densidad celular con respecto al tiempo,
existe un equilibrio entre los microorganismos vivos y muertos.
E (Fase de muerte). Fase en la que el equilibro desaparece y
predominan los microorganismos muertos. No hay nutrientes
para el recambio y las condiciones del medio de cultivo son
adversas para el crecimiento.
Tipos de cultivo
Cultivo en lote
Cultivo en lote alimentado
Cultivo en continuo
Temperatura
(2). Las reacciones enzimticas aumentan su velocidad.
(3). Las reacciones enzimticas se llevan a cabo a su mxima
velocidad.
(4). Desnaturalizacin de protenas y membrana citoplasmtica.
Lisis trmica.
ptimo
Temperatura
Mximo
Mnimo
(1)
(2)
(3)
(4)
Velocidad de
crecimiento
(1). Gelificacin de la
membrana; los
procesos de
transporte se llevan a
cabo lentamente y
no hay crecimiento.
Temperatura.
Temperatura. Clasificacin.
Clasificacin de microorganismos de acuerdo a su temperatura
ptima de crecimiento
Psicrfilos 0 - 20C Flavobacterium sp. 13C (b-)
Mesfilos 20 - 40C Escherichia coli 37C (b-)
Termfilos 40 60C G. stearothermophylus 60C (b+, esp)
Hipertermfilos 60 80C Thermococcus celer
Termfilos extremos > 80C Pyrodictium brockii
Psicotrficos: Microorganismos que crecen a temperatura ambiente pero
causan contaminacin en condiciones de refrigeracin.
Temperatura.
Nature 409, 1092-1101 (22 February 2001)
Microorganismos
patgenos
E. coli
Helicobacter pylori
Candida albicas
Trichomonas vaginalis
pH
Microorganismos pH
1
2
Acidfilos 3
4
5
6
Neutrfilos 7
8
9
10
Alcalfilos 11
12
13
14
pH
pH 8.88.3
Nature 409, 1092-1101 (22 February 2001)
pH 3.33.5
Temperature and pH requirements
for growth distinguish thermophilic
bacteria and archaea.
Nature Reviews Microbiology 5, 316-323 (April 2007)
Zona en la
que las bacterias
estn mejor
adaptadas.
Zona en la
que las arqueas
estn mejor
adaptadas.
Zona en la
que ambas estn
bien adaptadas.
Oxgeno

Enzimas Metabolismo Ejemplos
Aerobios
Obligados Es necesario para el crecimiento,
contiene SOD y catalasa.
Respiracin
aerobia
Micrococcus luteus
P. aeruginosa
Facultativos Crecen mejor en presencia de
oxgeno, presentan SOD y
catalasa.
Respiracin
aerobia,
anaerobia y
fermentacin
Enterobacter sp.
S. cerevisiae
Microaerofilicos Requieren baja concentracin de
O
2
, presentan SOD y catalasa.
Respiracin
aerobia
Spirillum vollutans
Anaerobios
Aerotolerantes No requieren O
2
, pero crecen en
su presencia. Slo SOD.
Fermentacin S. pyogenes
Clostridium sp.
Obligados El O
2
es letal, no contiene enzimas
destoxificantes
Fermentacin o
respiracin
anaerobia
Metanobacterium
formicicum
Relacin con el O
2
Aerobio
facultativo
Microaeroflico Anaerobio
aerotolerante
Anaerobio
obligado
Aerobio
obligado



Crecimiento en medio fluido de Tioglicolato.
Cultivo de anaerobios
Jarra de anaerobiosis
NaHCO
3
+ NaBH
4
+ O
2
CO
2
+ H
2
O + H
2

Enzimas destoxificantes
O
2
+ e
-
O
2
-
Superoxido
O
2
-
+ e
-
+ 2H
+
H
2
O
2
Peroxido de hidrgeno
H
2
O
2
+ e
-
+ H
+
H
2
O + OH
.
Radical hidroxilo
HO
.
+ e
-
+ H
+
H
2
O Agua
Reaccin general: O
2
+ 4e
-
+ 4H
+
2H
2
O
Peroxidasa
H
2
O
2

+ NADH + H
+
2H
2
O + NAD
+

Superoxido dismutasa (SOD)
O
2
-
+ O
2
-
+ 2H
+
H
2
O
2
+ O
2
Catalasa
H
2
O
2
+ H
2
O
2
2H
2
O + O
2

Concentracin de solutos
Concepto Definicin
No Halfilos Crecen en concentraciones de 1-6 % de NaCl
Halfilos moderados Crecen en concentraciones de 6-15% de NaCl
Halfilos extremos Crecen en concentraciones de 15-30% de NaCl
Halotolerantes Toleran disminuciones en el a
w
pero crecen mejor en
ausencia de solutos.
Osmfilos Son capaces de vivir en altas concentraciones de azcares.
Xerfilos Crecen en condiciones de a
w
bajo.
Actividad del Agua
aw es la relacin entre la presin de vapor del aire
en equilibrio con una sustancia o solucin a la presin
de vapor a la misma temperatura del agua pura.
a
w
Medio de
crecimiento
Microorganismos que
desarrollan
1.000 Agua pura Caulobacter, Spirillum
0.995 Sangre humana Streptococcus, Escherichia
0.980 Agua salada Pseudomonas, Vibrio
0.950 Pan Muchos cocos G+
0.900 Miel de maple, jamn Cocos G-
0.850 Salami Saccharomyces rouxii
0.850 Pastel de frutas, jalea Saccharomyces bailii, Penicillium
0.800 Lagos salados Halobacterium, Halococcus
0.750 Cereales, dulces, frutas
secas
Xeromyces bisporus y otros hongos
xerfilos.
Solutos compatibles

Son compuestos que forman los microorganismos para
compensar la concentracin de solutos exterior.
Aminocidos: Glicina-betana y ectoina








Carbohidratos: Sacarosa y trehalosa
Poli alcoholes: Manitol y glicerol
Otros: KCl y propionato dimetilsulfonico (PDS)
N
CH
3

CH
3

CH
3
CH
2
COO
-

Glicina-Betaina
CH
2

CH
3

CH
2
N
C C
N COO
-

Ectoina
Formacin de solutos
compatibles
Organismo Soluto principal aw mximo
Bacterias no fottrofas Glicina betana , prolina (G+),
glutamato (G-)
0.97 0.90
Cianobacterias de agua dulce Sacarosa, trehalosa 0.98
Cianobacterias marinas
Algas marinas
a-glucosilglicerol
Manitol, glucosidos, prolina,
PDS
0.92
Cianobacterias de lagos salados Glicina betana 0.90 0.75
Bacterias fototrpicas, anoxignicas
haloflicas
( Ectothiorhodospira)
Glinina betana. Ectona,
trehalosa
Arqueas halfilas extremas
(Halobacterium) y algunas
bacterias (Haloanaerobium)
KCl 0.75
Alga verde haloflica (Dunaliella) Glicerol 0.75
Levaduras xerfilas Glicerol 0.83 0.62
Hongos filamentosos xerfilos Glicerol 0.72 0.61