Instituto Politcnico Nacional Escuela Nacional de Ciencias Biolgicas

Diferencias entre cromatografa plana y en columna

Diferencias entre cromatografa plana y en columna

Cromatografa plana La separacin se realiza por distancias. La velocidad de la fase mvil se da por fuerzas capilares. Se controla de forma indirecta. El tiempo que dura la separacin es el tiempo necesario para que el frente de disolvente llegue a una zona determinada del lecho cromatogrfico y es independiente del camino recorrido por los componentes de la muestra. La separacin de varias muestras se realiza de manera simultnea, siendo todas ellas sometidas al mismo tiempo al proceso separativo. Cromatografa en columna La separacin se hace por tiempos o volmenes. La velocidad de la fase mvil depende del gradiente de presin. Se controla fcilmente. Cada soluto debe atravesar completamente la longitud de la columna, por lo que el tiempo que dura la separacin esta determinado por el tiempo que tarda el componente mas lento en llegar al detector. La separacin de varias muestras se realiza de forma individual. Se debe someter cada una de ellas al mismo proceso por separado y se debe de reequilibrar la columna para la introduccin de una nueva muestra. La fase mvil debe elegirse de forma que eluya todos los componentes de la muestra para que no se produzca el envenenamiento de la columna.

La eleccin de la fase mvil se realiza de forma que d la separacin requerida, no importando que algunos componentes queden en el origen, ya que las placas se desechan despus de cada separacin. La deteccin es un proceso esttico. La deteccin es un proceso dinmico, pasa cada soluto eluido a travs del detector. Los disolventes utilizados como fase mvil, El grado de pureza de los disolventes debe

la pureza o propiedades de los mismos no son tan criticas ya que estos se evaporan completamente entre el desarrollo y la medida Los solutos retenidos forman manchas compactas, por lo que se detectan con mayor sensibilidad.

ser elevado, si no lo que se detectara ser la absorbancia de estos.

Los solutos mas retenidos son los que dan picos ms anchos y menos resueltos y sensibles.