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PROTOCOLO DE INVESTIGACIN
Presentan las Alumnas: Garca Valencia Anah Rodrguez Chvez Zeyri Deniz Vences Martnez ri!a "eonor
GRUPO: 602
Q.F.B
INDICE
RESUMEN...1 CARACTERSTICAS GENERALES.....2 Fi i!"#$!%!&'# S()!$i"!
MTODO DE CULTIVO.....4 A&#) Hi())! T)( A*+,#)( -TSI. / A&#) 0%i&%() A&#) Li i1# Hi())! -LIA. P)2(3# 4( I14!% P)2(3# 4( %# 56G#%#,$! i4#
RESUMEN
La Shigella Fue descubierta hace 115 aos por el cientfico japons Kiyoshi Shiga, de quien to ! su no bre" Shigella es un bacilo gra negati#o perteneciente a la fa ilia $nterobacteriaceae, que se encuentra estrecha ente relacionada con el gnero $scherichia, por sus propiedades bioqu icas, serol!gicas y por si ilitudes genticas" Se caracteri%a por no fer entar la lactosa, ser in !#il, no produce lisina decarbo&ilasa y rara ente produce gas a partir de hidratos de carbono" Su identificaci!n se basa en caractersticas bioqu icas y antignicas" Las lesiones infla atorias en la ucosa col!nica afectada por shigella se hallan funda ental ente a ni#el de las placas de 'eyer, lo que sugiere que la bacteria podra ingresar inicial ente por las clulas (, natural ente fagocticas encargadas de antgenos de la lu% intestinal y presentarla al tejido linfoide de la placa de peyer subyacente" $sta bacteria tiene un periodo de incubaci!n relati#a ente corto, general ente de unas )* horas, pero #ara de + a ,, horas, 'redo ina en los eses de #erano y la tras isi!n intrafa iliar ocurre frecuente ente" -abitual ente se presenta con snto as que e#idencian colitis infla atoria se#era. diarrea con sangre, ucus, fiebre ele#ada aspectos t!&icos, dolor abdo inal, tense o y prolapso rectal" 'ara el culti#o se utili%an di#ersos edios de culti#o habitual ente /agar (ac 0on1ey lactosa, agar Sal onella, Shigella" etc2 3tili%an acetato co o fuente de carbono y no fer entan la lactosa con e&cepci!n de algunas cepas de S" sonnei, que lo hacen en for a lenta" 4especto a la trans isi!n a tra#s de ali entos es por /leche, frutas y #erduras crudas, ali entos preparados y luego anipulados por personas infectados2, as co o al consu o de aguas recreati#as, la piscina" 3na #e% que el indi#iduo ingiere el icroorganis o este debe fijarse al intestino delgado y ultiplicarse5 en esta etapa no se obser#a ning6n fen! eno clnico y los snto as sola ente aparecen despus de que la bacteria se traslada a tra#s del epitelio, se ultiplica for ando c6 ulos bacilares en el interior de la pared se presenta la infla aci!n, la lesi!n progresa y desciende al colon dando lugar a fen! enos he orr7gicos, necrosis y a la for aci!n de ulceras" 8lgunos de los snto as incluyen diarrea, dolor abdo inal, fiebre y #o ito"
CARACTERISTICAS GENERALES
La Shigella Fue descubierta hace 115 aos por el cientfico japons Kiyoshi Shiga, de quien to ! su no bre" Shigella es un bacilo gra negati#o perteneciente a la fa ilia $nterobacteriaceae, que se encuentra estrecha ente relacionada con el gnero $scherichia, por sus propiedades bioqu icas, serol!gicas y por si ilitudes genticas" Se caracteri%a por no fer entar la lactosa, ser in !#il, no produce lisina decarbo&ilasa y rara ente produce gas a partir de hidratos de carbono" Su identificaci!n se basa en caractersticas bioqu icas y antignicas" $n los en edios de culti#o diferenciales, e pleados habitual ente para culti#o de negati#os entricos, aparecen co o colonia no fer entan la lactosa bacilos gra
edios de culti#o diferenciales /agar (ac 0on1ey lactosa, agar Sal onella,
Shigella, etc"2 9odas son in !#iles, no producen -:S y la producci!n de gas a partir de la glucosa s!lo se obser#a en algunas cepas de S" fle&neri, lo que las diferencia de Sal onella" La infecci!n por Shigella, tpica ente co ien%a por conta inaci!n fecal;oral" <ependiendo de la edad y la condici!n del hospedador, puede que solo sea suficiente alrededor de :== organis os para causar una infecci!n" La Shigella causa disentera, resultando en destrucci!n de las clulas epiteliales de la ucosa intestinal a ni#el del ciego y el recto" 8lgunas cepas producen una endoto&ina y la to&ina Shiga, si ilar a la #eroto&ina de la E. coli >15+.-+": 9anto la Shiga to&ina, co o la #eroto&ina est7n in#olucradas en el sndro e ur ico he oltico"
Fi i!%!&'# La Shigella sonnei pertenece a la categora de bacteria gra significa que poseen una delgada que parece una e brana e&terna, una negati#a, lo que
anaer!bicas, por lo que pueden lle#ar a cabo la respiraci!n celular con o&geno o sin l" 8l igual que la $" coli, fer entan glucosa, lo que quiere decir que utili%an un proceso bioqu ico lla ado fer entaci!n para e&traer energa de la glucosa" S()!$i"! 3n antgeno es una olcula que el siste a in unol!gico puede reconocer" Los
cientficos algunas #eces clasifican la bacteria bas7ndose en los antgenos que anifiestan" La bacteria Shigella se di#ide en cuatro especies diferentes dependiendo de su serotipo o el tipo de antgenos que poseen en su pared celular" $sta bacteria posee serotipo <"
METODO DE CULTIVO
Las ,!%!1i# ! "(,;! # de Shigella crecidas en 8gar Salmonella-Shigella son transparentes, transl6cidas u opacas y suelen ser lisas" $n este edio las colonias de otros icroorganis os que fer entan la lactosa /colifor es2 son colonias roji%as y en uchos casos ucoides" Las ,!%!1i# ! "(,;! # de Shigella crecidas sobre 8gar @ilosa Lisina <eso&icolato /@L<2 son transparentes y del is o color que el edio de culti#o /rojo2" $ste gnero bacteriano al no fer entar la &ilosa, la lactosa ni la sacarosa, no da lugar a que #ire a a arillo el rojo fenol" 0o o ta poco descarbo&ilan la lisina, no se produce color rojo p6rpura alrededor de las colonias, al no haberse producido cada#erina" Las ,!%!1i# ! "(,;! # de Shigella en 8gar (ac0on1ey son incoloras y transparentes" $n este edio las colonias de otros icroorganis os que fer entan la lactosa /colifor es2 son colonias roji%as" A&#) Hi())! T)( A*+,#)( -TSI. / A&#) 0%i&%() I. Principio $l edio fue diseado para deter inar la habilidad de las bacterias de fer entar hidratos de carbono y producir sulfuro de hidr!geno /S-:2" $l edio contiene 1 parte /="1A2 de glucosa B 1= partes /1"=A2 de lactosa y sacarosa" $l indicador de p- es el rojo fenol y el sulfato ferroso pone en e#idencia la for aci!n de S-:" Si el icroorganis o fer enta glucosa, tanto la punci!n co o la estra aparecer7n de color a arillo" Si el organis o fer enta lactosa yCo sacarosa, la estra per anecer7 7cida /a arilla2" Si no fer enta lactosa, la estra se #uel#e alcalina /roja2" Los organis os que no fer entan glucosa no producen ca bios en el pdel edio o producir7n productos alcalinos y el edio 9SD per anecer7 rojo" La producci!n de S-: se anifiesta por un ennegreci iento del edio" $l agar de Kligler contiene dos a%6cares. lactosa /1A2 y glucosa /="1A2" $ste edio puede ree pla%ar al 9SD, la diferencia entre a bos es la ausencia de sacarosa" Los funda entos bioqu icos y la interpretaci!n de los resultados son los is os para a bos edios"
A&#) Li i1# Hi())! -LIA. I. Principio La decarbo&ilaci!n de la lisina a cada#erina produce una alcalini%aci!n del edio y un #iraje al #ioleta del indicador p6rpura de bro ocresol" 0o o la reacci!n tiene lugar en edio 7cido, es necesaria la fer entaci!n pre#ia de la glucosa" Los icroorganis os que no decarbo&ilan lisina, pero fer entan la glucosa producen un #iraje al a arillo en todo el edio" La for aci!n de S-: produce una coloraci!n negra debido al sulfuro de hierro producido" Las bacterias del grupo Proteus-Providencia, con e&cepci!n de Morganella morganii, desa inan la lisina a 7cido;cetocarb!nico que for a co puestos pardo;roji%os en el edio de culti#o con la sal de hierro y en aerobiosis" P)2(3# D(% I14!% D" 'rincipio $l indol es uno de los productos del etabolis o del a ino7cido triptofano" 0on un edio rico en triptofano, el indol se puede detectar por su habilidad para co binarse con ciertos aldehdos para for ar un co puesto coloreado" $l ensayo constituye un todo r7pido para detectar organis os productores de indol" 0o o indicador de la presencia del aldehdo se usa el reacti#o de $rlich" $s especial ente 6til en la identificaci!n preli inar de $scher i,;i# ,!%i< / "#)# 4i=()(1,i#) E4>#)4 i(%%# -?. 4( S#%@!1(%%# -6. P)2(3# 4( %# 56G#%#,$! i4# # D" 'rincipio La fer entaci!n de la lactosa requiere dos en%i as5 ientr # A2( %# "()@(# # =#,i%i$# %# "(1($)#,iB1 4( %# @!%C,2%# 4( %#,$! # 4(1$)! 4( %# ,C%2%# 3#,$()i#1#< %# 56&#%#,$! i4# # ;i4)!%i*# %# %#,$! # "#)# =!)@#) &#%#,$! # / &%2,! #. L# 3#,$()i# 1! =()@(1$#4!)# 4( %#,$! # ,#)(,(1 4( #@3# (1*i@# D i1 (@3#)&! ;#/ 3#,$()i# A2( $i(1(1 56&#%#,$! i4# # "()! 1! "()@(# #. E% !61i$)!=(1i%656D6&#%#,$B i4! -ONPG. ( 21 ,!@"2( $! i1,!%!)! ( $)2,$2)#%@(1$( i@i%#) # %# %#,$! #. E1 ")( (1,i# 4( 56&#%#,$! i4# #< ONPG ( )!@"( (1 &#%#,$! # / !61i$)!=(1i%< 21 ,!@"2( $! ,!%!) #@#)i%%!. C!@! %# =#@i%i# E1$()!3#,$()i#,(#( ( #&)2"# 4( #,2()4! # 2 ;#3i%i4#4 4( =()@(1$#) %#,$! #< ( $( $( $ ( +$i% (1 %# i4(1$i=i,#,iB1 4( =()@(1$#4!)( 4( %#,$! #.
PRUEBAS BIOQUMICAS
E1$)( ( "(,i( 4( S;i&(%%# $n la diferenciaci!n de los cuatro ie bros del gnero se deben tener en cuenta algunas ")!"i(4#4( 3i!A2'@i,# E 6 S;i&(%%# 4/ (1$()i#(E la ayora de las cepas no fer entan el anitol, son ornitina 4( ,#)3!Fi%# # 1(&#$iG# / $i(1(1 ")!"i(4#4( 3i!A2'@i,# 4i=()(1,i#%( (1$)( %! ()!$i"! . P#)$i,2%#)@(1$(< S; 4/ (1$()i#( 1 ( #)#3i1! # ( i14!% 1(&#$iG! / ONPG "! i$iG! @2/ )H"i4!. 6 S;i&(%%# =%(F1()iE la gran 4( ,#)3!Fi%# # 1(&#$iG!. ayora de las cepas fer entan anitol y son ornitina
6 S;i&(%%# 3!/4ii. la gran ayora de las cepas fer entan anitol, son ornitina descarbo&ilasa 1(&#$iG! / $i(1(1 ")!"i(4#4( 3i!A2'@i,# 4i=()(1,i#%( (1$)( %! ()!$i"! . 6 S;i&(%%# !11(i. indol negati#o, ornitina descarbo&ilasa pos i$iG!< ONPG "! i$iG! / @#1i$!% "! i$iG!.
METODO D8
Se la conoce ta bin co o disentera bacilar" $st7 a plia ente difundida, en especial en las %onas en desarrollo A&(1$( ($i!%B&i,!. $species del gnero Shigella, bacilos gra negati#os, in !#iles, aerobios, di#idido en cuatro grupos o especies. Shigella dysenteriae /grupo 82, Shigella fle&neri /grupo E2, Shigella boydii /grupo 02, Shigella sonnei /grupo <2" Los grupos 8;0 se subdi#iden en serotipos /n6 ero ar7bigo2 y subtipo /letra in6scula2 que son 1:, 1) y 1* respecti#a ente" $l grupo < tiene un solo serotipo" S" dysenteriae tipo 1 es productora de una to&ina citoletal, to&ina Shiga" Shigella spp" son productoras de otras citoto&inas y de enteroto&inas /Sh $91 i Sh$9:2" La dosis infectante es baja 1=;1== bacterias y #ara por especie /1= para S. dysenteriae y 1== para S. flexneri y S. Sonnei2" E"i4(@i!%!&'#E La >rgani%aci!n (undial de la Salud esti a la ocurrencia de 1,5 illones de casos y 1"1 illon de uertes por ao" La pre#alencia de las cepas #ara por 7rea. S. fleneri en los pases en desarrollo, S. boydii en los industriali%ados" S. sonnei y S. dysenteriae tienen enor frecuencia" Son icroorganis os de reser#orio hu ano aunque se han co unicado brotes en colonias de pri ates" $l ho bre es husped natural" La trans isi!n es fecal;oral por contacto directo o por agua y ali entos conta inados con heces" Las oscas y cucarachas son #ectores i portantes en las %onas donde la eli inaci!n de e&cretas es abierta" La ayor incidencia se registra en los eses 7s calurosos y en enores de 5 aos" Las epide ias ocurren en situaci!n de desastres naturales /terre oto, inundaci!n, ha bruna2, en ca pos de refugiados /Faire, 1GG), H="=== uertos2 o prisioneros y en instituciones se icerradas /instituciones para discapacitados2" Los brotes por el consu o de ali entos conta inados afectan fa ilias o grupos de personas en reuniones /cruceros, festi#ales, restaurantes, etc"2" La susceptibilidad es uni#ersal" R( (I# 4( 3)!$( )(,i(1$( E 0uarenta y tres brotes /nI1"555 casos2 fueron estudiados durante el perodo 1GGH;1GG+ en los $stados 3nidos" $ntre los aos 1GGH al :==1 fueron notificados a SD4J$98 1:) brotes /nI1*)H= y H fallecidos2 3n brote por jugo de naranja e&pri ido conta inado con S. flexneri ocurri! entre turistas en una reser#a /Sud7frica2" -an sido co unicados brotes de shigelosis producidos por perejil picado en cuatro estados de los $stados 3nidos y en dos pro#incias de 0anad7" 3n brote interestatal en $stados 3nidos, debido al consu o de un plato tpico e&icano co erciali%ado pro#oc! H= casos confir ados de diarrea por S. sonnei"
Los productos i portados conta inados pueden pro#ocar brotes en los pases desarrollados /por eje plo por perejil, ariscos, etc"2" $n 8rgentina fueron co unicados en el ano :===. un brote por S. flexneri /nI+=2 en el co edor de una e presa y otro por Shigella spp" /nI1525 los ali entos incri inados" Fueron ilanesa y ayonesa, respecti#a ente" $n (onte#ideo /3ruguay2 fue estudiado un brote /nI:=2 por el consu o de ensopado de carne conta inado con S. sonnei en un co edor" Fi i!"#$!&(1i#. Shigella spp" son resistentes al p- 7cido /sobre#i#en a p- :2" 3na #e% en el intestino se adhiere y penetra en la clula del epitelio intestinal por un proceso tipo fagocitosis y se ultiplica" 'ro#oca la uerte celular lo que deter ina la respuesta infla atoria caracterstica /ulceraci!n de la ucosa y icroabscesos2 y llega a la l7 ina propia" <entro de las 1: horas de infecci!n, se ultiplica alcan%ando concentraciones de 1=+;1=GC l en la lu% intestinal" La densidad bacteriana es ayor en la superficie de la ucosa que hacia el interior de la pared intestinal" La locali%aci!n es en leon ter inal y colon" C%'1i,#. $l perodo de incubaci!n es de 1;H das /rango 1: horas;+ das2" $l perodo de estado cursa con fiebre, dolor abdo inal y diarrea acuosa inicial que entre el pri ero y segundo da se transfor a en deposiciones frecuentes, poco #olu inosas con oco y sangre" La te peratura dis inuye, au entan el dolor abdo inal y los ruidos hidroareos" 'uede presentarse tenes o, urgencia para la defecaci!n y defecaci!n dolorosa" 9a bin cursa con diarrea acuosa tipo disentrica" ?o se ha aclarado el ecanis o por el que ocurren las con#ulsiones generali%adas en algunos pacientes" La enfer edad, en general, es autoli itada en 5;+ das" Las co plicaciones son. alteraci!n del estado de conciencia asociada a alteraciones etab!licas /hipogluce ia, hiponatre ia2, proctitis, prolapso rectal, perforaci!n col!nica o del leon distal, egacolon t!&ico, sepsis, sindro e ur ico he oltico, artritis reacti#a" La e&creci!n fecal se antiene alrededor de cuatro se anas despus de la enfer edad" <efinici!n de caso sospechoso. $nfer edad diarreica febril aguda con dolor abdo inal y deposiciones que #aran de acuosas a ucosanguinolentas" <efinici!n de caso confir ado. 0aso sospechoso con aisla iento de Shigella spp" $n uestras de heces, sangre o con ne&o epide iol!gico con un caso confir ado""
Di#&1B $i,! 4( (1=()@(4#4E $pide iol!gico. /ali entos consu idos, residencia, #iajes, ocupaci!n, enfer edad en contactos2" 0lnico. /fiebre, dolor abdo inal y diarrea2" 'or todos au&iliares. $&a en bacteriosc!pico de heces /leucocitos, pus, clulas epiteliales del intestino, acr!fagos y he ates25 coproculti#o, aisla iento, identificaci!n y tipificaci!n, ante la sospecha de bacterie ia C sepsis deben practicarse he oculti#os" ?otificaci!n. >bligatoria, se anal en la de brote" ayora de los pases e in ediata en caso
A1H%i i 4( #%i@(1$! / !$)# @2( $)# . 0ulti#o, aisla iento, identificaci!n y tipi; ficaci!n en uestras de ali entos" T)#$#@i(1$!. $l trata iento especfico con antibi!tico es te a de contro#ersia por cuanto la for a co 6n es autoli itada" $st7 indicado en las for as gra#es y la selecci!n se reali%ar7 de acuerdo al patr!n de sensibilidad;resistencia en el 7rea, la disponibilidad y los costos" $l trata iento antibi!tico podra dis inuir la se#eridad y duraci!n de la enfer edad, reducir la trans isi!n al lograr la eli inaci!n del icroorganis o del intestino" $l trata iento de sostn co prende el adecuado aporte hidroelectroltico en for a oral /soluci!n de sales de rehidrataci!n2 y el aporte nutricional regulado por el apetito" La rehidrataci!n con soluciones parenterales queda li itada a las for as gra#es" $n los casos con hiponatre ia, la reposici!n debe ser controlada por cuanto si es r7pida se aco paa de anifestaciones del siste a ner#ioso central" <urante la con#alescencia debe indicarse una dieta con alto contenido proteico" Se reali%a el trata iento sinto 7tico de las con#ulsiones" M(4i4# 4( ")(G(1,iB1 / ,!1$)!%E Si el paciente requiere internaci!n o en el hogar el cu pli iento de las precaucionesCaisla iento entrico es estricto" La in#estigaci!n epide iol!gica y el control de foco se reali%an de rutina ante un brote" L# @(4i4# 3H i,# !1E 'ro#isi!n de agua segura" $li inaci!n sanitaria de e&cretas" $ducaci!n para la salud especial ente referida a la higiene personal y la higiene de los ali entos
$l trata iento de los ali entos que se consu en crudos debe reali%arse con agua segura para el la#ado y el agregado de #inagre en la preparaci!n"
PATOLOGA
3na #e% que el indi#iduo ingiere el icroorganis o este debe fijarse al intestino delgado y ultiplicarse5 en esta etapa no se obser#a ning6n fen! eno clnico y los snto as sola ente aparecen despus de que la bacteria se traslada a tra#s del epitelio, se ultiplica for ando c6 ulos bacilares en el interior de la pared se presenta la infla aci!n, la lesi!n progresa y desciende al colon dando lugar a fen! enos he orr7gicos, necrosis y a la for aci!n de ulceras" Las anifestaciones clnicas pueden #ariar pero algunos de los snto as incluyen diarrea, dolor abdo inal, fiebre y #o ito" $sta bacteria tiene un periodo de incubaci!n relati#a ente corto, general ente de unas )*horas, pero #ara de + a ,, horas, 'redo ina en los eses de #erano y la tras isi!n intrafa iliar ocurre frecuente ente" La te peratura opti a de creci iento de los agentes causales es de H+oc, creciendo dentro de un inter#alo de te peraturas co prendido entre 1= y )=oc" $stos icroorganis os toleran concentraciones de sal del 5 al , A y son relati#a ente ter osensibles ta bin liberan una endoto&ina de naturale%a polisacardica que ataca la ucosa intestinal" 'ara el trata iento de la shigelosis y cualquier enfer edad diarreica la pri era consideraci!n en tratar es la correcci!n de las anor alidades que resulta de la deshidrataci!n. la acidosis etab!lica y la prdida significati#a de potasio, aunque la deshidrataci!n se#era es rara en shigelosis, con hidrataci!n apropiada la shigelosis es general ente una enfer edad autoli itada" La decisi!n para prescribir antibi!ticos es indicada por la se#eridad de la enfer edad, la edad del paciente y la probabilidad de ayor trans isi!n de la infecci!n" Los antibacterianos /tri etropi ;sulfa eto&a%ol, ciproflo&acina u oflo&acina en adultos sulfa etopri ;sulfa eto&a%ol, a picilina o 7cido nalid&ico en nios2 acortan el curso de enfer edad y su intensidad y la duraci!n de la e&creci!n del agente pat!geno5 deben utili%arse en aquellos casos que lo justifiquen la gra#edad de la enfer edad, o co o la protecci!n a los contactos /co o guarderas o instituciones2 cuando este indicado desde el punto de #ista epide iol!gico" La elecci!n de edica entos especficos depender7 del antibiogra a de la cepa aislada o de los patrones de sensibilidad local a los agentes anti icrobianos"
Dn#aden su hospedador penetrando las clulas epiteliales del intestino delgado" 3sando un siste a de secreci!n especfico, la bacteria inyecta una protena lla ada Ipa, en la clula intestinal, lo que subsecuente ente causa lisis de las e branas #acuolares" 3tili%a un ecanis o que le pro#ee de otilidad en la que se dispara una poli eri%aci!n de actina en la clula intestinal, co o un chorro de propulsi!n lo hara en un cohete, contagiando una clula despus de la otra" Los snto as 7s co unes son diarrea, fiebre, n7usea, #! itos, cala bres esto acales y otras anifestaciones intestinales" Las heces pueden tener sangre, oco, o pus. cl7sico de la disentera" $n casos enos frecuentes, los nios 7s j!#enes pueden tener con#ulsiones" Los snto as pueden to ar hasta una se ana, pero por lo general duran entre : y ) das en aparecer despus de la indigesti!n" Los snto as pueden per anecer #arios das hasta se anas" La Shigella est7 i plicada en uno de los casos patognicos de artritis reacti#a a ni#el undial"H La disentera se#era puede ser tratada con a picilina, 9(';S(@ o quinolonas, co o la ciproflo&acina" 'ertenece al gnero de las enterobacterias
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