APOPTOSIS

Antonio E. Zavaleta Moreno Mdico-Patlogo

APOPTOSIS

Para cada estructura viviente, hay un tiempo de vivir y un tiempo de morir

APOPTOSIS

Cada semana se publican aproximadamente 250 artculos relacionados a la apoptosis. Existen revistas especializadas solamente en Apoptosis.

APOPTOSIS. En griego antiguo apoptosis: acto de caer.

Apoptosis: acto de caer, como los ptalos de las flores y las hojas de los rboles en el otoo

APOPTOSIS
Es un proceso celular genticamente controlado por el que las clulas inducen su propia muerte.

Otras denominaciones:
mecanismo programado de muerte celular muerte celular programada muerte programada de la clula muerte fisiolgica o programada

proceso de suicidio celular

suicidio celular

APOPTOSIS

La apoptosis, o muerte celular programada, es un proceso celular genticamente controlado por el que las clulas inducen su propia muerte en respuesta a determinados estmulos

APOPTOSIS Frecuentemente se describe como "suicidio celular. Es un proceso irreversible. Puede ser considerada opuesta a la muerte celular por necrosis. Lo distintivo: Control que ejercen las clulas sobre su propio destino, cuando "deciden" seguir el camino apopttico.

APOPTOSIS
PARTICIPACION EN:

Homeostasis del organismo.

Desarrollo embrionario
En situaciones patolgicas.

- John Kerr denomin la apoptosis inicialmente

como "shrinkage necrosis" (necrosis contrada).

- Sus observaciones iniciales las realiz en clulas hepticas muertas en sus

estudios de lesin heptica aguda en

ratas (1965). - Posteriormente la renombr John Kerr - El trmino apoptosis fue acuado por Kerr, Wyllie, y Currie (Brit J. Cancer 26:239) en 1972. - Kerr y col., estudiaron organelos en clulas neoplsicas, detectando por m.e. que muchas clulas desaparecan en los cultivos (1972). como "apoptosis.

John Kerr y sus colaboradores: Alastair Currie y Andrew Wyllie. Describieron los cambios morfolgicos de la apoptosis comparndola con la necrosis, en una serie de artculos publicados durante los 70s y los 80s. Reportaron que la apoptosis ocurre en un amplio grupo de estados fisiolgicos y patolgicos. Describieron el rol de la apoptosis en la embriognesis, espermatognesis, cncer, y en la remodelacin de los tejidos durante la regresin funcional.

Apoptosis como proceso necesario para el desarrollo: Ejemplos:

La remocin del tejido que se encuentra entre los dedos en el feto.

El desprendimiento del endometrio al comienzo de menstruacin ocurre por apoptosis. En el estado puerperal, la involucin uterina La formacin de sinapsis entre las neuronas del cerebro requiere que las clulas sobrantes sean eliminadas y este proceso ocurre por apoptosis.

La apoptosis es necesaria para destruir clulas que representan un riesgo para la integridad de organismo Ejemplos - Clulas infectadas con virus. - Los linfocitos T citotxicos destruyen las clulas infectadas por virus mediante la induccin de la apoptosis - Celulas con DNA mutado - La radioterapia y la quimioterapia del cncer inducen apoptosis in algunos tipos de clulas cancerosas.

Caractersticas generales Proceso apopttico >>>> "suicidio celular. Es un proceso irreversible. Puede ser considerada opuesta a la necrosis En la apoptosis existe el control de la misma clula sobre su propio destino. Condensacin del citoplasma y ncleo Fragmentacin celular en cuerpos apoptticos. Degradacion de la cromatina en fragmentos grandes de 50-300 kilobases y posteriormente en fragmentos mas pequenos de monomeros o polimeros de 200 bases.

NECROSIS

APOPTOSIS

Caractersticas morfolgicas Prdida de la integridad de Deformacin de la memb. sin membrana. prdida de integridad . Floculacin de la cromatina. Agregacin de la cromatina en la memb. nuclear interna. Condensacin y/o reduccin celular. Formacin de vesculas limitadas por membrana (cuerpos apoptticos). No hay desintegracin de organelas y permanecen intactas .

Dilatacin de la clula y lisis.

No hay formacin de vesculas, lisis completa. Desintegracin (dilatacin). de organelas

NECROSIS
Prdida de la regulacin de la homeostasis inica.

APOPTOSIS

Caractersticas bioqumicas
Proceso muy regulado, que implica pasos enzimticos y de activacin

No requiere energa (proceso pasivo, tambin sucede a 4C).

Digestin del DNA al azar (patrn en mancha del DNA despus de electroforesis en gel de agarosa). Fragmentacin postltica del DNA (ltimo evento de muerte celular)

Requere energa (ATP) (proceso activo, no sucede a 4C)

Fragmentacin del DNA en mono- y oligonucleosomas, no al azar (patrn en escalera despus de electroforesis en gel de agarosa) Fragmentacin preltica del DNA (primer evento de muerte celular)

NECROSIS

APOPTOSIS

Significado fisiolgico
Muerte de grupos de clulas Originada por estmulos no fisiolgicos Fagocitosis por macrfagos. Muerte de clulas individuales Inducida por estmulos fisiolgicos Fagocitosis por clulas adyacentes o macrfagos

Respuesta inflamatoria significativa

No respuesta inflamatoria

APOPTOSIS

retraccin citoplasmtica. aumento de su eosinofilia. condensacin de la cromatina. ausencia de inflamacin.

APOPTOSIS

APOPTOSIS

Condensacin de la cromatina. Fragmentacin del ncleo. Formacin y fagocitosis de cuerpos apoptticos.

Mecanismo
Ciclo celular-fases:
1. Mitosis 2. Fase de control celular G1 3. Sntesis de ADN y 4. Fase de control G2.

APOPTOSIS: ANTES MUERTO QUE EQUIVOCADO

MECANISMO Caspasas (enzimas) - Proteasas contienen cistena - cortan las protenas donde se encuentra el cido asprtico - destruyen protenas esenciales - activan protenas txicas - inactivan protenas que protectoras 14 tipos; - la caspasa 1 "iniciadora genera una caspasa "ejecutora". - jerarqua en activacin de las caspasas. En todos los casos la resultante es la muerte celular.

Expresin de protena Bcl-2

(m. Ext, de mitocondria, retculo endoplasmtico y envoltura nuclear).

Bcl-2 unido a Apaf-1 y a caspasa 9 (proteasa).

(trmero Bcl-2/Apaf-1/caspasa 9: apoptosoma)

Bcl-2 se libera de Apaf-1 y de caspasa 9

(Apaf-1 y caspasa 9 >>>>>>>>>> citosol).

Caspasa 9 >>>>>>>>>> activa otras caspasas

(cascada proteoltica).

Digestin de protenas estructurales en el citoplasma y a degradacin de ADN cromosmico

Muerte de la clula.

ESTIMULOS DE LA APOPTOSIS

Dependen del tipo celular Agentes quimioteraputicos Radiaciones Gamma y UV Calor Cambios osmticos Altas concentraciones de calcio Oxdo nitrico

Bax-Bcl2 (Inductor-inhibidor de la apoptosis)

BAX (Supresor tumoral) bac Bcl-xs bad bid bik hik

Bcl-2 (Oncogen) Bcl-xl Bcl-w Bfl-1 Bkag-1 Mcl-1 A1

APOPTOSIS INSUFICIENTE
1. CNCER
Linfomas foliculares Carcinomas con mutaciones de p53 Tumores dependientes de hormonas Cncer de mama Cncer de prstata Cncer de ovario 2. ENFERMEDADES AUTOINMUNES Lupus eritematoso sistmico Glomerulonefritis inmune

APOPTOSIS EXCESIVA
1. SIDA
2. ENFERMEDADES DEGENERATIVAS Enfermedad de Alz heimer Enfermedad de Parkinson Esclerosis lateral amiotrpica Retinitis pigmentosa

3. SNDROMES MIELODISPLSICOS Anemia aplstica 4. LESIONES ISQUMICAS Infarto de miocardio Accidente cerebro vascular 5. ENFERMEDADES DEL HGADO INDUCIDAS POR TOXINAS

3. INFECCIONES VIRALES Herpesvirus PoxIvirus Adenovirus

APOPTOSIS
Cncer
El cncer se define como una proliferacin celular excesiva y la prdida de la capacidad de las clulas para morir. En ms de la mitad de los tumores slidos del pulmn, mama y colon, el gen que codifica la protena p53 se encuentra inactivo. Otro tipo de tumores presenta una cantidad excesiva de la protena Bcl-2, inhibidor del suicidio celular, o producen FasL para evitar la apoptosis mediada por el sistema inmune. No se puede iniciar el proceso de muerte celular programada y el tumor crece indiscriminadamente.

APOPTOSIS Y CANCER

-"El cncer es simplemente

la desaparicin de la apoptosis" -Aunque se esperara una relacin

inversa entre la apoptosis y el cncer,

an existen controversias. LINFOMAS -Los linfomas no Hodgkin de bajo grado muestran mayor ndice apopttico que los

de alto grado.
CANCER DE MAMA - La gran extensin de la apoptosis se asocia con Px pobre, se observa mayor apoptosis en los tumores de alto grado.

Apoptosis en las clulas epidrmicas despus de exposicin a radiacin ultravioleta

promueve e inicia el desarrollo de cncer de piel.

APOPTOSIS

La exposicin a la radiacin ultravioleta (UV) de la luz solar es un factor que

La radiacin estimula la cascada de la apoptosis dependiente de p53 en los queratinocitos cuyo ADN ha sido lesionado, un mecanismo homeosttico que erradica las clulas precancerosas de la piel y ha sido denominado correccin celular (cellular proofreading). (Science, agosto 6, 1999) .

Ca epidermoide moderadamente diferenciado

CARCINOMA ENDOMETRIAL La apoptosis esta aumentado en los adenocarcinoma endometriales de alto grado.

CANCER DE PROSTATA - Deprivacin andrognica===> Apoptosis de cel. epitel. normales y tumorales CANCINOMAS GASTROINTESTINALES - Los ndice apoptticos bajos ====> Estadios tempranos

LESIONES PREMALIGNAS Las lesiones pre-malignas==> Alto grado de apoptosis.

APOPTOSIS
TIROIDITIS DE HASHIMOTO -Interaccin entre la protena FasL y su receptor (Fas) -Estimulacin de la muerte celular programada - Destruccin celular - Hipotiroidismo resultante.

Endometriosis: un trastorno de la apoptosis

APOPTOSIS

La endometriosis es localizacin ectpica de tejido endometrial funcionante, en lugar distinto al de la cavidad uterina. La apoptosis juega un papel importante en el ciclo menstrual, ayudando a eliminar clulas senescentes durante las fase secretora y menstrual. En las mujeres con endometriosis, el porcentaje de clulas que sufre apoptosis es significativamente menor que en las pacientes sanas, aumentando de manera considerable la posibilidad de supervivencia de las clulas endometriales.
(Fertility and Sterility, junio, 1998) .

APOPTOSIS
TRATAMIENTO DE LA OSTEOPOROSIS Los bisfosfonatos evitan la apoptosis de los osteocitos.
(Bone 1998, 23: S157)

Tcnicas para la identificacin de la apoptosis EJEMPLOS

Deteccin de apoptosis en colon humano, usando M30 CytoDEATH.

Fluorescent microscopic analysis of apoptotic cells stained with DAPI. DAPI stains the nuclei of all cells (blue). Result: The characteristic condensed nuclei of apoptotic cells are clearly visible here

Detection of p53 in a human ovarianadenocarcinoma monoclonal antibody polyclonal antibody.

Detection of apoptotic. cells by TUNEL and peroxidase. staining in rabbit endometrium. A subpopulation of apoptotic.cells, scattered throughout the tissue section, are intensely stained (brown) by the TUNEL treatment and subsequent peroxidase immunostaining. Detection of apoptotic cells by TUNEL and alkaline phosphatase. (spinal cord) Result: A few apoptotic cells (red) are.clearly visible after TUNEL treatment and subsequent alkaline phosphatase.immunostaining (Panel A). The apoptotic cells are not visible in the.same slide after staining with propidium.iodide (Panel B).