PROYECTO DE TESIS IDENTIFICACIN Y RECUENTO DE MICROORGANISMOS FIJADORES LIBRES DE NITRGENO ATMOSFRICO (Beijerinckia sp. Y Derxia sp.

) EN HUMUS DE LOMBRIZ Ercilia Mara Salas E-mail: echisalas@hotmail.com LU: 22329 INTRODUCCION Y ANTECEDENTES DEL TEMA La fijacin biolgica de nitrgeno (FBN) consiste en la habilidad de algunas especies de microorganismos de convertir el nitrgeno atmosfrico en formas que puedan ser utilizadas por las plantas y los animales. Esto ocurre gracias a que estas bacterias poseen en su interior la enzima nitrogenasa quien rompe el triple enlace de la molcula de nitrogeno. La lombricultura es una biotecnologa que permite recuperar y reciclar todo tipo de materia orgnica y que utilizando como herramienta de trabajo una especie de lombriz, la roja californiana, se obtiene como producto final el humus, que es la defecacin de la lombriz. El humus es un abono orgnico de coloracin oscura que resulta de la descomposicin de desechos vegetales y animales que sufren la accin digestiva de la lombriz y de microorganismos que se encuentran presentes en el tracto digestivo de la misma (Gabriel I. M.). Paralelamente a la mineralizacin de la materia orgnica realizada por los microorganismos, ocurre la sntesis de las sustancias hmicas, que consiste en la policondensacin de fragmentos hacia complejos coloides amorfos. El paso del material orgnico de desecho a travs del aparato digestivo de la lombriz, no slo permite su humificacin sino tambin logra cambios qumicos en el nitrgeno y minerales que l contiene, logrando su transformacin hacia formas que los vegetales puedan utilizar Gabriel I.M. (2009). HIPOTESIS Existen microorganismos fijadores libres de nitrgeno atmosfrico en humus de lombriz. OBJETIVO GENERAL

Demostrar la importancia de la fabricacin de humus a partir de residuos orgnicos domiciliarios, utilizando Eisenia fotida.

OBJETIVOS ESPECFICOS

Detectar la presencia de microorganismos fijadores libres de nitrgeno atmosfrico (Derxia sp. y Beijerinckia sp.) en humus de lombriz. Cuantificar la microflora de fijadores libres de nitrgeno (Derxia sp. y Beijerinckia sp.) en vermicompuesto. Evaluar el uso de residuos domiciliarios como sustrato para la obtencin de lombricompuesto.

MATERIALES Y METODOS

El muestreo del material a investigar se har con residuos domiciliarios para transformarlo en humus a travs de lombrices, para esto se eligi a la especie Eisenia fotida, de sub-reino metazoa, phylum annelida, familia lombricidos, nombre comn lombriz roja californiana. El estudio microbiolgico consistir en preparar medios de cultivo para Derxia sp., medio LG segn Dbereiner (1980); y, para Beijerinckia sp. se preparar el medio Jensen modificado por Frontera (1982). Las muestras sern procesadas en el laboratorio de la Facultad de Agronoma y Zootecnia de la Universidad Nacional de Tucumn. Para esto se pesarn 10 g. de la muestra de humus de lombriz, luego se realizarn las diluciones suspensiones de la muestra de humus, y se tomarn alcuotas de 0,2 ml. para sembrar en cada uno de los medios antes citados. Para realizar el recuento de microorganismos por g. de humus se emplear la tabla de Fisher y Yates (1963). La identificacin de los microorganismos se realizar segn la metodologa del manual de Bergey`s (1991. Los resultados sern analizados con ANVA Y Test Tukey (p. 0,05). 3. RESULTADOS Y DISCUSIN 3.1. Identificacin: pruebas bioqumicas para Derxia.

Para las propiedades bioqumicas se procedi a sembrar en diferentes medios segn el Manual de Bergey`s (1991) y los resultados obtenidos para Derxia fueron: Tabla 3.1. Resultados de propiedades bioqumicas Fuentes de Carbono Acetato Malato Oxalato Citrato Peptona Resultados No se observ No se observ No se observ No se observ S se observ crecimiento crecimiento crecimiento crecimiento crecimiento, las clulas se

presentaron en forma alargada y con Lactosa-Peptona muchos cuerpos refractiles En dos repeticiones no se encontr crecimiento, en una se encontr un Manitol Etanol crecimiento escaso S se observ un crecimiento excelente En algunas repeticiones hay un

crecimiento excelente y en otras se observ un crecimiento escaso. 3.2. Identificacin: pruebas bioqumicas para Beijerinckia.

Para Beijerinckia tambin se prepararon medios con diferentes fuentes de carbono, procediendo de acuerdo al Manual de Bergeys (1991) y los resultados observados fueron: Tabla 3.2. Resultados de propiedades bioqumicas Fuentes de Carbono Lactosa Acetato Malato Resultados Hay crecimiento abundante Crecimiento escaso En una repeticin se observ un crecimiento excelente y en otras un Citrato Oxalato Peptona (fuente de nitrgeno) Etanol Almidn crecimiento escaso. No se observ crecimiento No se observ crecimiento No se observ crecimiento S se observ crecimiento S se observ crecimiento

3.3. Nmero ms probable de Beijerinckia y Derxia por gramo de humus de lombriz. Tabla 3.3: NMP de Beijerinckia y Derxia por gramo de lombricompuesto. Noviembr Beijerincki a Derxia e 8.5x105 29x105 0.85x105 2.9x105 Diciembre 85x105 900x105 0.0085x105 0.085x105 Enero 85x105 85x105 0.085x105 0.085x105 Febrero 85x105 85x105 0.85x105 0.85x105 Marzo 295x105 85x105 2.9x105 8.5x105 Abril 85x105 85x105 0.85x105 2.9x105

4. CONCLUSIN En conclusin el presente trabajo nos permiti, reportar la presencia de bacterias fijadoras libres de nitrgeno atmosfrico (Beijerinckia y Derxia) en humus de lombriz.

Se encontraron las especies D. gummosa y B. mobilis, B. fluminensis, B. indica y B. derxii. En cuanto al recuento se observ mayor presencia del gnero Beijerinckia (900x105) que del gnero Derxia (8.5x105).