CONTROL DE CALIDAD DEL GENERADOR

Cuando se eluye el generador de 99Mo/99mTc solo debe obtenerse

una eluido que es una solución salina, isotónica, estéril y
apirógena de Tc-99m en forma química de pertecnectato sódico.

No obstante, el generador puede presentar algunas deficiencias,

roturas, alteraciones, etc, que originen contaminaciones en el
eluido de diversa naturaleza (microbiológica, radionucleídica, etc.
El control de calidad del eluído tiene por objeto comprobar y
garantizar la calidad radioquímica y radiofarmacéutica de ese
eluído para poder asegurar su conformidad con las
especificaciones dadas para el eluído del generador en las
monografías específicas de la Farmacopea Europea.

Los aspectos fundamentales que es preciso controlar en el

eluído del generador son:
- LOS ASPECTOS FÍSICO-QUÍMICOS.
- LOS ASPECTOS RADIOLÓGICOS.
- LOS ASPECTOS BIOLÓGICOS.
 1.- CONTROL FÍSICO-QUÍMICO

En este conjunto de controles se comprobará:

- ASPECTO DEL ELUÍDO.
- PH.
- TONICIDAD.
- AUSENCIA DE ALUMINIO.
- EL ASPECTO DEL ELUÍDO
El eluído debe ser incoloro, sin turbidez y sin que se observen
materias en suspensión.
Solo debe ser una solución salina con cantidades traza de
99m
TcO4-.
La presencia de color, turbidez o materias en suspensión
indicaría una alteración grave del eluído.
- PH DEL ELUÍDO
La adsorción del molibdato a la columna de alúmina del
generador se efectúa a pH ácido.
Si el pH se hace alcalino, el molibdato se desprendería de la
alúmina en la elución.
El pH del eluído debe estar comprendido entre 4,0 - 8,0,
siendo el pH óptimo de 5,5 aprox.

La determinación del pH puede hacerse con un pHmetro,

pero el electrodo quedaría contaminado de radiactividad, y
por otra parte el volumen de eluído que se obtiene es
pequeño, de 5-10ml normalmente, lo que puede dificultar la
determinación con pHmetro.
Por ello, el pH también puede determinarse con papel
indicador cuantitativo.
- TONICIDAD
El eluído del generador debe ser isotónico para poder ser utilizado
directamente como radiofármaco inyectable.

Normalmente este punto no se comprueba porque para eluir el

generador se emplea suero salino fisiológico isotónico que ha sido
controlado previamente.
- AUSENCIA DE ALUMINIO: PUREZA QUÍMICA
El eluido del generador puede contener ciertas impurezas químicas
que habitualmente van a proceder:
- Del material cromatográfico de la columna ( Al+3 proveniente
de la alúmina, Al2O3) es el más habitual, pudiendo interferir en
posteriores marcajes de radiofármacos.
- Del eluyente utilizado para realizar la elución.

El límite permitido por la REAL FARMACOPEA es que esta impureza,

debida al material cromatográfico, debe ser menor de:
10µg de Al+3/ml de 99mTc del eluído.

La presencia de esta impureza en el eluído nos indica inestabilidad

en la columna cromatográfica.
El aluminio se detecta por reacciones colorimétricas (reacción
del clomazurol, de la murina, azul mordiente etc.).
Tambien hay papeles indicadores comercializados para la
detección de Al3+ en el eluído de los generadores.
 2.- CONTROL RADIOLÓGICO

Entre los aspectos radiológicos que se deben controlar están:

- LA CONCENTRACIÓN RADIACTIVA.
- LA PUREZA RADIONUCLIDA.
- LA PUREZA RADIOQUÍMICA.
- CONCENTRACIÓN RADIACTIVA:
En cada elución, es preciso determinar lo más exactamente posible
la actividad eluída para controlar el rendimiento del generador, y
para preparar posteriormente los radiofármacos tecneciados con
las actividades correctas.
La actividad se determina con un activímetro o milicurímetro.

La actividad del generador y la fecha y hora de calibración vienen

indicadas en la etiqueta del generador por el fabricante para que el
usuario pueda calcular:
- La actividad de 99mTc disponible.
- El rendimiento de la elución.
- La actividad específica del eluído.
- CÁLCULO DE ACTIVIDAD ELUIDA
El cálculo de la actividad que se puede obtener de un generador
de 99Mo/99mTc no es fácil, dado que el proceso de elución no es
capaz de extraer todo el tecnecio existente en la columna.

La desintegración del 99Mo solo genera 99mTc en el 87,5 % de las

mismas y los tiempos transcurridos desde la carga del generador
con el 99Mo y el tiempo entre las eluciones pueden ser mal
conocidas.
Sin embargo, el conocimiento de la estimación de actividad de
99m
Tc que podemos eluir en un momento dado es de suma
importancia para conocer el rendimiento de elución y poder
planificar el trabajo.

No es lo mismo eluir una pequeña cantidad de 99mTc-Pertecnetato

que permita usarlo para realizar pocas gammagrafías que eluir una
gran cantidad que no vamos a utilizar en su totalidad y, por otro
lado, dejaría a “cero” el generador durante un tiempo.
La actividad de elución del 99mTc que se puede obtener en un
momento dado se puede formular matemáticamente a partir de
la expresión siguiente:

ATc(t) = 1,09833 AMo(0)( e- 0,01034 t – e- 0,11550 t)

Donde:
ATc(t) es la actividad de 99mTc que podemos eluir en el momento
actual.
AMo(0) es la actividad inicial de 99Mo
t es el tiempo trascurrido desde la última elución, expresado en
horas.
Esta fórmula debe ser corregida:
- Por un factor que tenga en cuenta el hecho de que solo el
87,5 % de las desintegraciones el 99Mo decae a 99mTc.
- Por otro factor que tenga en cuenta la imposibilidad de eluir
todo el 99mTc existente en la columna.

ATc(t) = AMonominal x F1x F2

Donde:
ATc(t) es la actividad de 99mTc que podemos eluir en el momento
actual
AMonominal es la actividad inicial de 99Mo, viene en la etiqueta del
generador.
F1 es el factor que valora el decay del molibdeno
F2 es el factor que tiene en cuenta el crecimiento de la actividad
debida al Tc desde la última elución.
(Estos factores están tabulados)
- CALCULO DE LA MASA DE TECNECIO Y ACTIVIDAD ESPECÍFICA.
En el generador de Mo99/Tc99m, continuamente está generándose
Tc-99 y Tc-99m, que a su vez, decae a Tc-99, estableciéndose un
equilibrio transitorio entre el Mo-99 y el Tc-99m que se genera y
que decae.
De esta forma, un generador está acumulando continuamente
también Tc frío (Tc), no radiactivo, por lo que si el generador no se
eluye regularmente se va acumulando el núclido frío, y al eluirlo al
cabo de un tiempo se obtendrá en el eluido una mezcla de las dos
formas de Tc, radiactivo y frío, que tiene el mismo comportamiento
físico-químico.
Si se utiliza ese eluído para preparar un radiofármaco los átomos
fríos también reaccionarán con el sustrato, compitiendo con el Tc
radiactivo, y puede motivar bajos rendimientos en reacciones de
marcaje, y puede llegar incluso a inutilizar el radiofármaco.
Para evitar estos extremos es necesario considerar la ACTIVIDAD
ESPECÍFICA DEL ELUÍDO, es decir, la cantidad de actividad por
unidad de masa de Tc-99m existente en el eluido (Tc-99m + Tc-99).
El cálculo de la masa de Tc se hace mediante la fórmula:

μg Tc =

Donde:
F es un factor que relaciona el número de átomos de 99mTc con el
número total de átomos de Tc en función del tiempo transcurrido
desde la última elución del generador.
Es un valor tabulado.
VALOR DEL FACTOR F PARA EL CÁLCULO DE LA MASA DE
TECNECIO EN EL ELUIDO
Conociendo la masa de tecnecio en el eluido y la actividad, se
calcula la actividad específica como la actividad por unidad de
masa:

Actividad específica (mCi/μg) =

- RENDIMIENTO DE ELUCIÓN
Se define como la proporción de radionúclido hijo en el interior
del generador que es separado durante el proceso de elución.

El rendimiento de elución viene dado por:

RENDIMIENTO =

Su valor habitual se encuentra entre el 85-95 %.

- PUREZA RADIONÚCLIDA
Se controlará que en el eluído obtenido haya solo Tc-99m como
pertecnectato (valencia 7), sin presencia del otros contaminantes
radiactivos, o que estos estén dentro de los límites aceptables.

Los contaminantes radiactivos que se pueden encontrar:

- En eluídos de Mo-99, obtenido por fisión, son:
Ru-103, I-131, Te-132, Cs-137, Zr-99.
- En eluídos de Mo-99 obtenido por activación neutrónica
también se han detectado Re-188 y Re-186.

No obstante, el contaminante radiactivo más frecuente en

eluídos del generador es el propio Mo-99.
El Mo-99 puede aparecer en los eluídos debido a:
- Defectos en los filtros de la columna.
- Fallos en la adsorción del Molibdato sobre alúmina de la
columna.
- Por variaciones en el pH.
- Al empaquetamiento defectuoso de la alúmina, que deja
canales o burbujas, etc…
La detección del Mo-99 como impureza se realiza en base a las
diferencias entre los radionúclidos padre e hijo:

- ESPECTRO DE EMISIÓN:
El Tc-99m solo emite un pico a 140keV, mientras que el Mo-99
emite fotones de 181, 740 y 778 keV.
- ESPESOR DE SEMIRREDUCCIÓN (CHE):
Un blindaje de plomo de 5mm de espesor atenúa la radiación
del Tc-99m y la reduce al 0,002%, mientras que el mismo grosor
solo es el espesor de semirreducción del Mo-99, mucho más
energético.
 - PERÍODO DE SEMIDESINTEGRACIÓN:
El semiperiodo del Tc-99m es de 6h, mientras que si hay Mo-99
presente en el eluído la actividad inicialmente aumenta porque
el Mo-99 continúa generando Tc-99m, y cuando se alcanza el
equilibrio entre el Tc-99m que se genera y que se desintegra
comienza a decaer la actividad con un semiperíodo de 66h.
- REACCIONES QUÍMICAS:
la fenil-hidracina forma un complejo con el Mo-99 que se puede
detectar con un colorímetro.
 El Mo-99 no es deseable en el eluído por:
- Producir una irradiación innecesaria en el paciente debido
a su gran energía de emisión, ya que emite partículas β, y a su
semiperíodo de 66h.
- Disminuye la calidad de la imagen obtenida.

La actividad máxima de 99Mo que permite LA REAL FARMACOPEA

ESPAÑOLA es de 1 μCi de 99Mo por cada 1mCi de 99mTc.

En términos de concentración, la concentración máxima de Mo-99

permitida en el eluído del generador es el 0,1% de la radiactividad
total.
- PUREZA RADIOQUÍMICA
Se define como la fracción de la radiactividad total que está
en la forma química deseada.
El 99mTc en el eluido ha de estar en forma química de
pertecnetato (99mTcO4Na) y cualquier otra forma química ha de
ser considerada como impureza radioquímica.

El límite de impurezas radioquímicas que admite LA REAL

FARMACOPEA es del 5 %, es decir, una pureza superior al 95%.

Para su detección y cuantificación se utilizan diferentes

procedimientos, siendo los más utilizados la cromatografía en
papel y la cromatografía en capa fina(TLC),cromatografía en gel,
extracción en fase sólida o en fase líquida, la HPLC, etc…
 3.- CONTROL BIOLÓGICO

Los aspectos biológicos que hay que controlar en el eluído de

un generador, son los necesarios para una solución inyectable: -
APIROGENICIDAD.
- ESTERILIDAD.
- APIROGENICIDAD
La Farmacopea Europea establece la necesidad de que las
preparaciones radiofarmacéuticas de administración parenteral
superen el adecuado control de apirogenicidad.

- La apirogenicidad es la ausencia de sustancias contaminantes

que produzcan fiebre.

- El término parenteral hace referencia a la vía de

administración de los fármacos.
Esto es, atravesando una o más capas de la piel o de las
membranas mucosas mediante una inyección.
La apirogenicidad puede ser controlada por dos métodos cuando
ello sea necesario:

1.- MÉTODO DE LOS CONEJOS:

Es el método clásico, indicado por numerosas Farmacopeas, pero
tiene el inconveniente de que la radiactividad puede causar
pequeñas elevaciones de temperatura en el animal que falseen el
resultado del ensayo, y además el carácter perecedero de los
radiofármacos impone una metodología mucho más rápida para
tener el resultado antes de que decaiga su actividad.
Por eso el ensayo oficial puede no ser aplicable a los radiofármacos,
y ser conveniente el ensayo de LAL.
2.- MÉTODO DEL LISADO DE AMEBOCITOS DE LÍMULUS (LAL)
Se basa en el empleo de un lisado de amebocitos aislados del
cangrejo de herradura (Límulus polyphemus), que forma un gel
opaco al calentarlo a 37⁰C en presencia de endotoxinas bacterianas
(pirógenos).
El método necesita entre 15 y 60 minutos para su realización, y está
aceptado por la Farmacopea Europea.
De este método existen algunas modificaciones que permiten
realizarlo con muestras muy pequeñas (micrométodos) que pueden
ser aplicables al control de radiofármacos.
- ESTERILIDAD
El generador de Mo-99/Tc-99m va esterilizado al autoclave tras el
montaje de la columna, y puede incorporar un filtro esterilizante.
De esta forma se puede obtener el eluído del generador con las
necesarias características de esterilidad si se eluye y manipula en
condiciones higiénicas y con material estéril.

A nivel industrial es necesario verificar un control de esterilidad

sobre un muestreo al azar de cada lote de fabricación mediante los
métodos generales de control de la esterilidad establecidos por la
Farmacopea Europea.
 EJERCICIOS
1.- A las 11:00 AM, el 99mTc tenía una actividad de 9mCi
(333MBq). ¿Qué actividad tendría a las 08:00 AM y a las 04:00
p.m. del mismo día? (T1/2 =6 h ).

2.- Un generador de 99Mo/99mTc calibrado para el martes a

mediodía (A=2700mCi), fue eluído a las 12:00 del mediodía
(tiempo de calibración) .
¿Cuánto 99mTc tendría disponible si se eluyera el generador de
nuevo a las 16:00 del martes?
(T1/2 99Mo=66h y T1/2 99mTc =6h).
3.- Calcular el Nº total de átomos y la masa total de 99mTc
presente en una muestra cuya actividad es 15 mCi (555 MBq).
(T1/2= 6h.)

4.- Un generador de 99Mo/99mTc con una actividad de 2700 mCi

calibrado el miércoles a las 12:00, se eluye el lunes a las 06:00.
El generador ha sido previamente eluído por otro compañero a las
02:00 del lunes.
Se desea preparar cinco radiofármacos marcados con 99mTc a las
6:00 y se requieren para ello 1000 mCi.
El eluído obtenido de ese generador a las 06:00 ¿nos proporcionará
la actividad necesaria?
5.- En una prueba médica se le inyecta a un paciente un
radiofármaco constituido por un isótopo radiactivo con periodo
de semidesintegración T1/2 = 17,8 h
Para obtener la resolución deseada, en el momento de realizar
la prueba la actividad de la sustancia inyectada debe ser 2·10⁸
Bq. Entre la fabricación del radiofármaco y la realización de la
prueba pasan 20 h.

Calcula:
a) La actividad que debe tener el radiofármaco en el
momento de su fabricación.
b) El número inicial de núcleos de dicho isótopo y la masa
que se necesita fabricar.

Datos: la masa molar del isótopo es 74 g/mol.

6.- Una muestra de material contiene 1 microgramo de yodo-131.
(Tenga en cuenta que el yodo-131 desempeña un papel importante
como isótopo radiactivo presente en los productos de fisión
nuclear, y es un importante contribuyente a los riesgos para la
salud cuando se libera a la atmósfera durante un accidente).
El yodo 131 tiene una vida media de 8.02 días.

Calcular:
a) El número de átomos de yodo-131 inicialmente presentes.
b) La actividad del yodo-131 en curies.
c) El número de átomos de yodo-131 que permanecerán en 50
días.
d) El tiempo que le llevará a la actividad alcanzar 0.1 mCi.