PRACTICA N° 4 DE BIOQUIMICA APLICADA

INFLUENCIA DE LA DIETA EN LA COMPOSICION DE LA ORINA

OBJETIVOS

1- influencia de la dieta en la composición de la orina

2-balance nitrogenado

3-determinacion de urea y creatinina en orina de 24 horas

 BALANCE DE NITROGENO
Se dice que hay balance nitrogenado cuando la ingesta
dietética de nitrógeno (ingerido) es igual a las pérdidas. Es
decir el balance nitrogenado equivale al nitrógeno ingerido
menos el nitrógeno eliminado presente en la orina en
forma de urea y creatinina, además se elimina 4 gramos
diarios por las heces y piel. Es importante saber que una
persona con buena salud si ingiere una cantidad de
proteínas mayores a sus necesidades diarias aumentara
su excreción de nitrógeno ureico en la orina, y si la ingesta
de proteínas es menor que sus requerimientos, su balance
nitrogenado será negativo que ira en deterioro de su
composición corporal por disminución de su masa magra.
EL balance de nitrógeno puede ser positivo cuando el
organismo retiene mayor N que el N perdido.
El balance de nitrógeno es negativo cuando la perdida de
N es mayor que el que se retiene.
 FACTORES QUE AFECTAN AL BALANCE DE NITROGENO
El balance de nitrógeno puede ser afectado por factores
como: la edad, determinadas hormonas, procesos
traumáticos, por la calidad de las proteínas dietéticas. Los
estudios de balance de nitrógeno han servido para
establecer los requerimientos promedios de proteínas, por
que en realidad cada persona, igual que para la energía,
tiene sus propios requerimientos. La calidad de las
proteínas afecta el balance de nitrógeno y es un factor a
considerar si las proteínas tienen un valor biológico bajo
existe algún aminoácido que no se ingiere en las
cantidades requeridas para su síntesis.
La calidad proteica va depender del contenido de
aminoácidos de un alimento, de su concentración
disponibilidad, digestibilidad, utilización y la presencia de
fibra dietética, polifenóles, inhibidores de proteasas y
vitaminas.
 PROCEDIMIENTO PARA LA REALIZACION DE ESTA PRACTICA
1-Selección de alumnos para la dieta:
Realizaran la dieta tres alumnos:
A: Dieta Normal, consumo de proteínas entre 30 a 70
gramos por día
B: Dieta Hipoprotéica, consumo de proteínas menos de 30
gramos/dia
C: Dieta Hiperproteica, 120 gramos de proteína por día.
Los alumnos seguirán la dieta asignada durante tres días
consecutivos antes de la practica.
2-Recoleccion de orina de 24 horas:
 El alumno colectara la orina durante 24 horas en un botella de
plástico limpia de 3 litros.
 El inicio de la colecta es a las 8 am. Del día anterior a la practica, el
alumno deberá orinar y eliminar el volumen, luego, deberá colectar
toda la orina emitida hasta las 8 am del día de la practica.
 Finalización de la colecta, el alumno deberá orinar a las 8 am del día
de la practica, durante la practica deberá mantener refrigerada la
muestra.
 DETERMINACION DE UREA Y EN ORINA DE 24 HORAS
FUNDAMENTOS DEL METODO:
La ureasa descompone específicamente a la urea
produciendo dióxido de carbono y amoníaco; éste
reacciona con fenol e hipoclorito en medio alcalino
produciendo azul de indofenol que se determina
colorimétricamente.
MATERIALES Y REACTIVOS

Kit para determinar Espectrofotometro

Orina de 24 horas Azul de indofenol
urea
 DETERMINACION DE CREATININA EN ORINA DE 24 HORAS
FUNDAMENTOS DEL METODO:
La creatinina reacciona con el picrato alcalino (reacción
de Jaffe) produciendo un cromógeno rojo. La velocidad de
esta reacción, bajo condiciones controladas, es una
medida de la concentración de creatinina de la muestra
puesto que se comporta como una reacción cinética de
primer orden para la creatinina. Por otra parte, se ha
demostrado que los cromógenos no-creatinina que
interfieren en la mayor parte de las técnicas
convencionales, reaccionan dentro de los 30 segundos de
iniciada la reacción. De manera que entre los 30 segundos
y los 5 minutos posteriores al inicio de la reacción, el
incremento de color se debe exclusivamente a la
creatinina.
 MATERIALES Y REACTIVOS PARA DETERMINAR CREATININA EN ORINA DE 24
HORAS

Orina de 24 horas Orina diluida 1/50 Kit para creatinina

Creatinina en orina
(g/24 hs) = x V S2 - S1 siendo:
V = volumen de la diuresis expresado en
litros/24 hs La fórmula surge de: D2 - D1
Creatinina en orina (g/24 hs) = x 0,020 g/l x 50 x
V S2 - S1
0,020g/I= concentracion del standard
50 = factor dr dilucion

Lectura en el espectrofotometro Hallar la concentracion de la creatinina

MUCHAS GRACIAS