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PVMSP8 COMO NOVELA

PLASMODIUM VIVAX
SEROMARCADOR DE MALARIA PARA
LA AMAZONÍA PERUANA
Alumnos:
• Silva Oclocho Carlos Eduardo
• Diaz Villegas Luz Amalia
• Mundaca Núñez Mayra Rubby

Docente:
Rocío Jara Vilca
Modelo de Investigación

 Estudio evaluó las respuestas serológicas a una


proteína de superficie de merozoíto 8
 Luminex midió las IgG contra las proteínas PvMSP8 y
PvMSP10 en una cohorte de 422 individuos amazónicos
con antecedentes conocidos de exposición a Pv 
 En una segunda evaluación, el análisis por ELISA de
1251 muestras de plasma, recolectadas durante una
encuesta transversal de base poblacional, confirmó el
buen desempeño de las IgG anti-PvMSP8
 
Resultados:
Evaluación preliminar después de la producción de proteína
PvMSP8
  ( A ) Producción de proteína recombinante PvMSP8. La
proteína recombinante se purificó por afinidad a partir de
sobrenadantes de cultivo con cromatografía de afinidad con
níquel
  ( B ) Evaluación de las respuestas de IgG frente a la proteína
recombinante PvMSP8 y PvMSP10 mediante ELISA.
 ( C ) Ensayos de reactividad cruzada para la evaluación de
respuestas de anticuerpos IgG específicos de PvMSP8
mediante ELISA. Niveles de IgG total en muestras de plasma
Evaluación utilizando muestras de
individuos con antecedentes
conocidos de exposición a P. vivax
(estudio de cohortes)
 Luminex analizó muestras de plasma
recolectadas al final de un estudio de cohorte
longitudinal  para medir las respuestas de
anticuerpos IgG específicos de antígeno contra
dos proteínas recombinantes.
Rendimiento de las respuestas
serológicas frente a PvMSP8 y
PvMSP10 para detectar la
exposición a P. vivax 
 ( A ) Curvas de características operativas del
receptor (ROC) validadas de forma cruzada y áreas
bajo la curva (AUC) de las respuestas serológicas
contra PvMSP8, PvMSP10 y la combinación de
ambos antígenos para detectar la exposición a
P. vivax .
  ( B ) Indicadores de desempeño de respuestas
serológicas dicotomizadas contra PvMSP8 y
PvMSP10 para detectar P. vivaxexposición.
  ( C ) Diagrama de Venn que muestra el número y
porcentaje de individuos seropositivos a uno o
ambos antígenos entre los individuos expuestos a P.
vivax con seropositividad a cualquiera de ambos
antígenos.
 ( D ) Diagrama de Venn que muestra el número y
porcentaje de individuos seropositivos a uno o
ambos antígenos entre individuos de P. vivax no
expuestos con seropositividad a cualquiera de
ambos antígenos.
Cinética de descomposición
dependiente del tiempo de las
respuestas serológicas contra
PvMSP8 y PvMSP10 desde la
última infección por P. vivax

 ( A , B ) Gráficos de caja (percentiles 25 a 75)


de valores de IgG (log 10 MFI) obtenidos por
Luminex para PvMSP8 y PvMSP10. Las barras
horizontales dentro de los recuadros
representan la mediana de log 10 valores de
MFI en cada grupo.
  ( C , D ) Gráficos de puntos de la sensibilidad
de los resultados serológicos dicotomizados
para PvMSP8 y PvMSP10 en la detección de la
exposición a la malaria, que muestran la media
y los límites de confianza del 95 % en cada
grupo estimados mediante el método de
puntuación de Wilson. 
Curvas de características operativas del
receptor (ROC) validadas de forma cruzada
y áreas bajo la curva (AUC) de las
respuestas serológicas contra PvMSP8
para detectar la exposición a la malaria.

 Las respuestas serológicas contra PvMSP8 se


midieron por ELISA en una población de 1251
individuos en comunidades ribereñas en
Mazan. Una primera definición de exposición
a P. vivax fue un resultado positivo de P.
vivax (por microscopía y/o qPCR) en el
momento de la recolección de la muestra (línea
azul), mientras que una segunda definición
incluyó individuos con un resultado positivo y/o
el antecedente de paludismo por P. vivax en el
último mes (línea roja). No se encontraron
diferencias significativas entre los resultados
( p > 0,05).
Curvas de características
operativas del receptor (ROC)
validadas de forma cruzada y
áreas bajo la curva (AUC)

 Para detectar la exposición a la malaria por P.


vivax entre individuos < 15 años y entre
aquellos > 15 años. Se encontraron diferencias
significativas entre los resultados ( p = 0,01). La
exposición se definió como un diagnóstico
confirmado de P. vivax por qPCR y/o
microscopía y el antecedente de paludismo
por P. vivax en el último mes (segunda
definición).
Respuestas serológicas contra
PvMSP8 en individuos
expuestos y no expuestos de las
comunidades de Mazan.
 ( A ) Diagramas de caja (percentiles 25 a 75) de valores
de densidad óptica corregidos para PvMSP8. Las barras
horizontales dentro de los cuadros representan la
mediana de los valores de densidad óptica (OD) en cada
grupo.
 ( B ) Gráficos de puntos de la sensibilidad de los
resultados serológicos dicotomizados para PvMSP8 en la
detección de la exposición a la malaria, que muestran la
media y los límites de confianza del 95 % en cada grupo
estimado mediante el método de puntuación de
Wilson. La exposición se definió como un diagnóstico
confirmado de P. vivax por qPCR y/o microscopía
parasitológica y antecedente de paludismo por P.
vivax en el último mes.
Conclusiones

 La proteína PvMSP8 producida por baculovirus es un buen biomarcador de


exposición reciente para la identificación de poblaciones afectadas por la transmisión
continua de malaria vivax en la Amazonía peruana, incluso a baja intensidad, lo cual
es fundamental para los esfuerzos de control y eliminación de la malaria. La alta
eficiencia y el rendimiento de nuestra proteína recombinante PvMSP8 producida
internamente por baculovirus, y su buen desempeño como SEM para la infección por
P. vivax a nivel de población, nos hacen pensar en un posible escenario futuro donde
la producción de PvMSP8 se puede escalar. para su uso como SEM en una
plataforma de punto de atención (PoC) a nivel de programa de control de malaria en la
Amazonía peruana.

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