1.

LAS IMÁGENES DIGITALES

La tecnología actual hace posible la captación de las
preparaciones que estamos viendo con el microscopio,
mejorando su calidad y resolución, y aportando más
información y versatilidad de las que podemos obtener a
partir de la visión directa.
Las técnicas fotográficas microscópicas engloban todos
los procesos relacionados con la captura, visualización,
procesamiento, archivo y transmisión de las imágenes
microscópicas.
En oposición a ellas tenemos la fotografía macroscópica,
que se suele definir como la fotografía del acercamiento, ya
que permite la detección de aspectos y detalles que pueden
pasar inadvertidos a simple vista.
APLICACIONES DE LAS TÉCNICAS FOTOGRÁFICAS
MICROSCÓPICAS
Atendiendo a la definición de las técnicas fotográficas microscópicas, vemos que las posibilidades
de esta área de estudio son:
 Observar una preparación microscópica, ya sea en visión directa a través del ocular del
microscopio o en una pantalla.
 Capturar la imagen microscópica que se está observando. Procesar la
imagen digital obtenida para mejorar su calidad.
 Archivar la preparación digital en un formato que sea adecuado para el almacenamiento en
servidores.
 Recuperar, transmitir y compartir las preparaciones archivadas.

La aplicación de todas estas técnicas, en el ámbito específico del trabajo de laboratorio, da lugar a
un sistema complejo de tratamiento digital de las preparaciones microscópicas que forma parte del
campo de aplicación de la MICROSCOPIA DIGITAL.
Para aplicar
correctamente técnicas
fotográficas
microscópicas es
necesario dominar las
técnicas de microscopia
LA IMAGEN DIGITAL
La digitalización consiste en la descomposición de
la imagen en una matriz de puntos en la que cada
uno tiene un valor proporcional a su nivel de
luminosidad.
Cada elemento en que se divide la imagen recibe el
nombre de píxel (picture element). Cada píxel se
almacena en un área de memoria llamada mapa de
bits.
Cada píxel es un conjunto de ceros y unos que
informan sobre la ubicación (resolución espacial) y la
luminosidad (profundidad de color).
Partiendo de estos conocimientos podemos definir los
principales criterios de calidad de una imagen o un
vídeo digital.
 CRITERIOS DE CALIDAD
DE LA IMAGEN DIGITAL
Las principales características que
definen a la imagen digital son las
dimensiones de la imagen, la densidad de
píxeles, la profundidad de color y el
modelo cromático.

Las dimensiones se pueden expresar en píxeles en horizontal

y en vertical o en unidades convencionales de medida
LAS DIMENSIONES DE LA IMAGEN
Las dimensiones de una imagen digital son las medidas de anchura y altura de la imagen. Se pueden
expresar de dos maneras distintas, mediante:
 El número de píxeles en sentido horizontal y vertical (anchura y altura de la imagen), lo cual nos
informa sobre cómo quedará visualizada en la pantalla.
 Con unidades convencionales de medida (centímetros o pulgadas), en anchura y altura.
Emplearemos esta opción cuando vayamos a imprimir la imagen en papel.

LA DENSIDAD DE PÍXELES

La densidad de píxeles expresa la relación entre píxeles y unidades de medida, es decir, la cantidad
de píxeles presentes en un área determinada de la imagen.
En general, se utiliza como unidad de medida la pulgada y, por ello, la densidad se expresa en píxeles
por pulgada (ppp o ppi, del inglés pixels per inch).
A mayor resolución, pues, más píxeles cabrán por pulgada de imagen y, en consecuencia, más
pequeños serán dichos píxeles (lo cual redundará en una mayor calidad de la imagen una vez impresa).
RESOLUCIÓN
RESOLUCIÓN DE UN DISPOSITIVO, por ejemplo una cámara. La resolución en este contexto se
refiere a la cantidad total de píxeles que su sensor es capaz de captar (por ejemplo, cuando se dice que
una cámara es de 12 megapíxeles, Mp). También puede decirse que esa misma cámara tiene una
resolución de 4.288 × 2.848 píxeles, correspondiendo dichas cifras al tamaño máximo de imagen que
es capaz de capturar (4.288 × 2.848 = unos 12 millones de píxeles, esto es, 12 Mp).

RESOLUCIÓN ESPACIAL O DE UNA IMAGEN. La expresamos como la cantidad de píxeles presentes

en la imagen, pero por unidad de superficie. Si la resolución es muy baja, los píxeles son muy grandes,
diremos entonces que la imagen «pixela». En las preparaciones digitales, para un área de tejido de 15 × 15
mm se calcula que las dimensiones del archivo serían:
 Con objetivos 40X de 60.000 × 60.000 píxeles (3.600 Mp).
 Con objetivos 20X de 30.000 × 30.000 píxeles (900 Mp).

RESOLUCIÓN DEL DISPOSITIVO DE SALIDA. Se refiere a la capacidad que tiene una impresora o una
pantalla de ordenador de reproducir los detalles de la imagen original.
Imagen con 300 ppp (a)
y con 72 ppp (b)
PROFUNDIDAD DE COLOR

La profundidad de color es la cantidad de información (en bits) asignada a cada píxel de la imagen
para representar el color. Cuanta más información asignemos a cada píxel, mayor será la riqueza en la
representación de los tonos y colores de la imagen.
Las principales opciones son las siguientes:
 1 bit/píxel. Esta opción solo mostrará dos tonos: o blanco o negro «puros», sin matices. A esta
opción también se la llama bitmap.
 8 bit/píxel. Proporciona una imagen en escala de grises, con 256 (2 8) niveles de grises.
 24 bit/píxel. Es la configuración mínima para representar correctamente el color en toda su riqueza:
color real. Destina 8 bits para el rojo, 8 para el verde, 8 para el azul y proporciona más de 16
millones de colores.
 32 o más bit/píxel. Se utiliza para trabajos profesionales de alto nivel.

Si usamos dos bits, tendremos cuatro combinaciones posibles (00, 01, 10 y 11). Con ocho bits (un byte)
podemos tener hasta 28 = 256 valores diferentes. En general, con un número n de bits pueden
representarse hasta 2n valores diferentes.
EL MODELO CROMÁTICO
Los dos modelos cromáticos más habituales para imágenes en color son el
RGB y el CMYK:

 Modelo RGB. Es el sistema que emplean los dispositivos que utilizan

la luz para visualizar imágenes (monitores, pantallas). La
combinación de luz roja (R, red), verde (G, green) y azul (B, blue) en
diferentes proporciones consigue generar los millones de colores
posibles del espectro luminoso visible. En este caso la imagen tiene
tres canales: el rojo, el verde y el azul.

 Modelo CMYK. Es el sistema que emplean las imágenes impresas

con tinta. Las tintas de impresión son de los colores secundarios: cian
(C, cyan), magenta (M, magenta), amarillo (Y, yellow) y negro puro
(K, black). En este caso la imagen tiene cuatro canales: el cian, el
magenta, el amarillo y el negro.
CRITERIOS DE CALIDAD DEL VÍDEO DIGITAL
El vídeo es una serie de imágenes que van sobreponiéndose una después de otra a cierta velocidad
constante, lo cual proporciona sensación de movimiento. A esta velocidad se le asigna la unidad FPS
(frames per second) o fotogramas o cuadros por segundo. Cuantos más FPS puedan ser desplegados en
un segundo, mayor calidad tendrá el vídeo.

El ojo humano es capaz de distinguir aproximadamente 20 imágenes por segundo. De este modo,
cuando se muestran más de 20 imágenes por segundo, es posible engañar al ojo y crear la ilusión de
una imagen en movimiento.

Además, de la secuencia de imágenes, el vídeo puede estar acompañado de sonido, es decir, de datos
de audio. El vídeo digital consiste en la codificación del vídeo en una sucesión de imágenes digitales.
La frecuencia necesaria para mostrar un vídeo (en bytes por segundo) equivale al tamaño de la imagen
multiplicado por el número de imágenes por segundo. Por ejemplo una sucesión de imágenes que pese
900 KB a 30 FPS necesita 27 MB/s.
2. CREACIÓN DE IMÁGENES DIGITALES
MICROSCÓPICAS
Hemos señalado que la aplicación de técnicas fotográficas microscópicas sigue un proceso de captación
de imágenes, tratamiento de estas imágenes y archivo para su posterior utilización. A continuación
veremos cómo se sucede esta secuencia.

LA CAPTACIÓN DE IMÁGENES

Actualmente la toma de imágenes digitales microscópicas se puede llevar a cabo utilizando cámaras
fotográficas convencionales conectadas mediante un adaptador compatible con el microscopio. También es
posible usar los dispositivos móviles (por ejemplo, los teléfonos inteligentes). Generalmente se necesita un
adaptador para conectar la cámara al tubo preparado para este fin que tienen los microscopios trinoculares.
Otra opción más compleja es la captación mediante los denominados escáneres de
preparación o microscopios robotizados, que capturan todos los detalles a gran
aumento de cada preparación y la habilitan para su estudio en monitores o pantallas
de ordenadores.
Estas cámaras permiten tomar tanto fotografías como vídeos, aunque en la mayoría
de los laboratorios se ha impuesto la grabación de imágenes de vídeo, cuya salida se
puede conectar a un ordenador.
Las videocámaras también se han utilizado, pero como las cámaras fotográficas
digitales son más versátiles y dan la misma calidad, en la práctica las videocámaras
han desaparecido de los laboratorios clínicos.
La obtención de imágenes microscópicas permite superar en calidad y resolución a la
visión directa en un microscopio. Además ofrece otras muchas posibilidades en
cuanto a la observación, análisis y manejo de estas imágenes o grabaciones,
utilizando el software adecuado.
Microscopio trinocular con
dispositivos conectados al «tercer
ocular».
LAS CÁMARAS DIGITALES
Existen modelos compactos y modelos en los que podemos intercambiar los objetivos. De forma
general distinguimos entre el objetivo y el cuerpo de la cámara:

 EL OBJETIVO. En el objetivo además de las lentes se encuentra el diafragma, que es un

mecanismo situado en la parte posterior del objetivo y se utiliza para graduar la cantidad de luz
que llega al sensor.

 EL CUERPO DE LA CÁMARA. La calidad y tamaño del cuerpo de la cámara es un criterio

fundamental para la clasificación de las cámaras fotográficas en gamas baja, media y alta. Las
partes esenciales presentes en el cuerpo de la cámara son:
 La pantalla, que permite ver las fotos realizadas y también la imagen antes de hacer la
fotografía, lo más importante de una pantalla es la resolución que nos dice la nitidez, y el
contraste que permite que se vea bien a pleno sol.
 El visor, que sirve para ver la imagen y encuadrar antes de hacer la foto
 El disparador, que permite realizar la foto. Suele tener dos posiciones: apretando hasta la
mitad la cámara realiza el enfoque y los ajustes de exposición, y si apretamos hasta el final se
realiza la fotografía.
 .

 El sensor, que registra . los impulsos lumínicos (fotones) y los transforma en

impulsos eléctricos (electrones)
. gracias al efecto fotoeléctrico. En las
cámaras tradicionales, . la luz que atraviesa el objetivo impresiona una
superficie químicamente preparada para registrar la imagen (la emulsión
fotográfica); en las digitales este registro lo realiza el sensor electrónico
 El obturador, que es el dispositivo que permite controlar el tiempo que va a
estar expuesto el sensor a la acción de la luz. Su función es semejante a la del
diafragma: regular la luz que va a alcanzar el sensor. El diafragma controla la
intensidad de la luz, el obturador controla el tiempo de exposición
 El procesador, que toma la información captada por el sensor y transforma en
datos (mapa de bits), con un determinado formato y con una determinada
calidad o resolución
 El fotómetro, que mide la cantidad de luz que entra en la cámara y que
permite elegir la combinación adecuada de diafragma y velocidad para que
la foto quede bien expuesta. Es la base de la fotografía en modo automático
 El flash incorporado, que emite una luz adicional si no hay suficiente luz
ambiental.
 La tarjeta de memoria, que es donde se almacenan de forma permanente las
fotos. La capacidad de una tarjeta se mide en GB, gigabytes; el otro
parámetro que define una tarjeta es la velocidad de transferencia, que es el
tiempo que tarda en grabar 1 GB
 La batería, que alimenta los componentes electrónicos de la cámara.
Partes de una cámara digital
EL ENFOQUE
Enfocar es hacer coincidir los rayos de luz que inciden
en la lente (objetivo) de la cámara en un punto llamado
foco, es dejar nítido aquello que está a una distancia
concreta.

Existen dos métodos de enfoque:

 En el enfoque manual, la persona que está haciendo la

foto elige la zona de la imagen que quiere enfocar y se
encarga de mover el objetivo.

 En el enfoque automático, es la propia la cámara la que

mueve el objetivo para enfocar la imagen.

En el enfoque manual, la persona mueve el objetivo para enfocar la imagen

LA EXPOSICIÓN
La exposición es la cantidad de luz que llega al sensor
durante el proceso de captura de la imagen.
El ajuste de la exposición es el aspecto técnico más
importante de la fotografía, pues determina los niveles
de brillo que mostrará la imagen final.
La exposición correcta se consigue si la cantidad de luz
que llega al sensor es la adecuada para reproducir la
escena fotografiada. Esto se consigue ajustando el tiempo
de exposición (el obturador) y la cantidad de luz que
entra en la cámara (abertura del diafragma).
Se pueden conseguir iguales valores de exposición pero
con distintos valores de abertura y velocidad de
obturación.
Los principales ERRORES DE EXPOSICIÓN son:
 Una fotografía subexpuesta, cuando el sensor ha
recibido una cantidad de luz insuficiente. En este
caso, la imagen aparece demasiado oscura, con
pérdida de detalle en las zonas de sombra.
 Una fotografía sobreexpuesta, cuando el sensor
ha recibido una cantidad excesiva de luz. En
esta ocasión, la imagen aparece demasiado clara,
con pérdida de detalle en las zonas de luces.
Todos los sensores tienen un rango dinámico, que
delimita las cantidades mínimas y máximas de luz
que son capaces de registrar. Fuera de ese rango, la
cámara registra el negro (cuando la cantidad de luz
es muy baja), o el blanco (cuando el sensor se satura
por exceso de luz).
El rango dinámico se modifica cuando cambiamos la
sensibilidad ISO del sensor.
EL PROCESAMIENTO DE IMÁGENES
La imagen microscópica digital generalmente requiere algún proceso de adaptación para ajustar
su formato, tamaño o calidad según el destino que vamos a dar: impresión en papel, publicación
en revista, pase de diapositivas, publicación en web, etc.
Algunas de las actuaciones más habituales en el procesamiento de la información son estas:
 Corrección. En una imagen digital podemos corregir los parámetros como el color, la
iluminación, el tamaño o los encuadres. También podemos hacer duplicaciones,
composiciones o mezclas con otras imágenes.
 Retoque. El retoque digital nos permite eliminar fragmentos no deseados, reconstruir zonas
dañadas, introducir fondos y otros elementos, difuminar zonas, virar tonalidades o resaltar
áreas, entre otras posibilidades.
 Señalización. Puede ser necesario para añadir a la imagen digital identificación o datos,
comentarios u observaciones. También puede ser interesante añadir códigos o claves de
búsquedas o incluso enlazarlas con locuciones o sonidos.
HERRAMIENTAS PARA EL TRATAMIENTO DE IMÁGENES
Existen muchas herramientas de software para el tratamiento de imágenes, ya sean
productos comerciales o de software libre.

Probablemente la más potente y utilizada hoy en día sea el Abobe Photoshop, pero hay
otras como PICASA, Paintnet, Pixir o GIMP.

Además muchas casas de cámaras fotográficas disponen de software específico de

edición de imágenes que suministran con la compra de la cámara.
Con el programa elegido, una vez abierta la imagen podremos retocarla, transformarla
y editarla con un sinfín de posibilidades. Si bien cada programa dispone de sus propias
herramientas, en general son muy similares.
Entre las HERRAMIENTAS DIGITALES más habituales están:
Herramientas básicas. Entre ellas están las de pincel, aerógrafo,
clonación, recorte, etc.
Filtros para hacer correcciones en los colores de las imágenes.
Los filtros básicos que comparten la mayoría de los programas de
retoque fotográfico son:
- Brillo y contraste
- Ajuste de curvas de color
- Tono, saturación y luminosidad
- Balance de color
- Niveles de color
- Colorización
- Umbral
Capas o layers. Son como recortes que pueden superponerse
sobre un fondo o sobre otro recorte. Además, cuentan con filtros
propios para la mezcla de las imágenes, así como con efectos de
transparencia.
Los programas para el tratamiento de imágenes
incorporan distintas herramientas para corregir
colores, entre muchas otras opciones
 LA EDICIÓN DE VÍDEOS
Al igual que las imágenes, los vídeos también se pueden procesar con
programas informáticos específicos. Si bien cada vez existen más
programas (muchos de ellos de software libre y gratuito como Sony
Vegas y Movie Maker) y cada vez son más fáciles de utilizar, la
edición de vídeos es una actividad profesionalizada.

2.3. ARCHIVO DE IMÁGENES DIGITALES

Las imágenes digitales, una vez procesadas, se utilizarán para la tarea
que se requiere y se archivarán según el PNT específico. El archivo de
las imágenes digitales se debe establecer teniendo en cuenta que se
puedan almacenar optimizando espacio y procurando que sea fácil
Los programas
recuperarlas cuando se quiera. En este sentido, es importante disponer
ofrecen la
de un sistema de información que organice todo el sistema de archivos y
posibilidad de
facilite la localización y el acceso a las imágenes deseadas.
guardar el archivo en
diversos formatos
COMPRESIÓN DE FOTOGRAFÍAS DIGITALES
Una imagen digital no es más que un archivo que contiene la información de la imagen
trasformada y almacenada en forma de unos y ceros. Estos archivos ocupan mucho espacio y
es necesario comprimir la información. Los formatos de compresión de imagen más comunes
son:
 El formato JPEG. Es el formato más utilizado, sobre todo en cámaras y para fotografías en
internet, debido a su capacidad de conseguir imágenes suficientemente reales y con un gran
número de colores, pero al hacer la compresión de datos se pierde un poco de calidad.
 El formato RAW. Guarda la imagen tal como se captura en la cámara. Los datos se
comprimen sin perder información, por lo que son archivos muy pesados. Para reproducir un
archivo RAW suele ser necesario un software adicional (cada fabricante tiene su versión) y
no es utilizable directamente en páginas web ni para imprimir.
 El formato PSD. Es el formato de trabajo usado por el programa Adobe Photoshop de
tratamiento de imágenes.
Otros formatos de compresión de imágenes son GIF, PNG, TIFF y BMP.
FORMATOS DE VÍDEO
Si bien los conceptos aplicados a la fotografía digital
son válidos en general, el vídeo digital presenta unas
características específicas.

Existen muchos tipos de formatos de vídeo y cada uno

de los formatos necesita un códec de compresión
distinto. Un códec no es más que un programa que
incluye un conjunto de algoritmos e instrucciones para
codificar y descodificar vídeo o audio digitales, de
forma que se reduzca el tamaño que ocupan.

El formato de vídeo más habitual en la actualidad es el

AVI.