UNIVERSIDAD AUTÓNOMA METROPOLITANA

UNIDAD XOCHIMILCO

Extracción de clorofila de espinaca (Spinacia oleracea)

Alumnos:

Cárdenas Buendía Claudio Alexis

Córdova Peña Brenda

Hernández Rodríguez  Jorge

Pantoja Nájera Ana Patricia

 Porfirinas

Absorben a una Las clorofilas tienen en el anillo

longitud de onda tetrapirrólico un ion Mg2+ unido
al centro de los nitrógenos, un
próxima a los 400 y 500 anillo de ciclopentanona, un
nm, o sea que no éster de fitol que provee a la
absorben el verde molécula de una cola lipófila y
un sistema de dobles enlaces
conjugados

Pigmentos solubles en
disolventes orgánicos
 ¿Dónde se encuentra?
Las clorofilas se encuentran en las membranas de los tilacoides, que en las cianobacterias son
invaginaciones de la membrana plasmática, y en los cloroplastos de las células eucarióticas.

Hoja

Epidermis

Células
parenquimatosa
s
 le ?
mp
n cu
n ci ó Gracias a sus propiedades pueden absorber la radiación solar lo que permite que
éfu se lleven a cabo diversos procesos, estos liberan los electrones necesarios para
¿Qu la formación del ATP y del NADPH durante el proceso de fotosíntesis

Clorofila
La clorofila, in vivo, consta de una pequeña proporción (0,1% del total) de clorofila
fotoactiva que absorbe la energía luminosa y se excita, el resto recoge y dirige la energía
hacia la clorofila fotoactiva. Esta última, produce una capacidad reductora y una capacidad
oxidante que son usadas para poner en marcha gran cantidad de reacciones redox
 Formación de ATP
 Formación de NADPH+
 Fotolisis del agua
 Spinacia oleracea
Es una planta herbácea anual o perennes dioicas y con genotipos monoicos y autoalógamos, de hasta
1m de altura, lampiñas, con raíz fusiforme y blanquecina, tallos simples o poco ramificados, hojas
algo carnosas, las caulinares alternas y más pequeñas y las basales arrosetadas, oblongas, sagitadas o
triangular-hastadas, lampiñas y pecioladas, de 15-30 cm de longitud.
Tiene flores verdosas, ovarios uniloculares y uniovulado con 4 estilos apicales. Utrículo inerme o con
2-4 espinas
 Sus usos …
 Sensibilizador en fotografía por sus propiedades fotoquímicas
 Colorante de dulces, chicles, pastas, gelatinas, etc.
Colorante de perfumes, lociones, jabones, dentífricos, etc.
 Conservación de alimentos dentro de bolsas, pues absorbe el oxígeno e inhibe el crecimiento
bacteriano.
 Compuesto de abonos, pues es un buen transportador de micronutrientes metálicos.
 Protector solar en cremas, lociones y pomadas por su capacidad de absorber la radiación solar.
 Agente desodorante pues reduce o elimina el olor del bencil mercaptano (olor a humo/tostado), del
ácido tioglicólico (olor a azufre) y de la trimetilamina (olor a pescado),.
 Debido a su semejanza con el pigmento de la sangre (hemoporfirina), las primeras aplicaciones
terapéuticas se dirigieron al tratamiento de la anemia.
 Las sales de clorofila provocan una débil actividad hemolítica y aceleran la coagulación de la
sangre, así como el proceso de cicatrización.
 Propiedades antiinflamatorias
 Todas las plantas con clorofila poseen pigmentos carotenoides y vitamina C, una vez ingeridas
se convierten en vitamina A necesaria para el crecimiento normal de las células corporales y en
particular de los epitelios
 Indica la cantidad de nitrógeno presente y con eso podemos conocer la “salud” de la planta

Por los usos terapéuticos e industriales tan variados que tiene es importante conocer un método de
extracción eficaz y seguro para poder obtener la clorofila per se o conocer su concentración
 Metodología
Preparación • Se adquirió una muestra de espinaca en el mercado de
San Andrés Totoltepec, delegación Tlalpan

de la • Se lavaron y secaron las hojas de espinaca, eliminando la

nervadura más gruesa, se trituraron 10 g de la muestra
con 1 g de carbonato de calcio y se adicionaron pequeños

muestra
volúmenes de acetona al 80%. Se filtro al vacío

Extracción •En un embudo de separación, al filtrado se le adicionaron 25 mL

de la
de n-hexano y 60 mL de cloruro de sodio al 10%. Se elimino
fase acuosa
•A la fase orgánica se le adicionó sulfato de sodio anhidro y se
filtró

clorofila
•Se evaporó el n-hexano a baño maría.
Cromatog •Se utilizaron placas de sílice de gel
•El proceso se desarrolló en cuatro diferentes

rafía fases móviles: cloroformo-acetona (7:3),

etanol-acetona (7:3), n-hexano-acetona (7:3)

Espectro •Se utilizó un espectrofotómetro UV-1800

Shimadzo

UV/Vis •El rango en que se hizo la medición fue 200-

800 nm de longitud de onda
 Resultados y discusión
Rendimiento

Ensayo 1 Ensayo 2
2.4 mL 5.0 mL
Promedio 3.7 mL
Cromatografía

Compuesto Distancia recorrida Factor de

por el compuesto retención
Etanol/Acetona (7:3)
No hubo separación No hubo separación.
Cloroformo/Acetona (7:3)
Clorofilas 30 mm 0,75
Xantofilas 39 mm 0,975
Hexano/Acetona (7:3)
Clorofila b 10 mm 0,25
Clorofila a 14 mm 0,35
Xantofilas 39 mm 0,975
Placa etanol/acetona Placa cloroformo/acetona Placa hexano/acetona
Espectro UV/Vis

Los máximos de absorción en el ensayo Los máximos de absorción en el ensayo 2

1 fueron a 410, 435, 469, 663 y 741 nm. fueron a 412, 429, 449, 535, 611 y 665 nm.
 Conclusiones
 Spinacia oleracea presenta un rendimiento significativo en la extracción de clorofila.

 Para realizar la cromatografía, los mejores resultados se obtuvieron con la mezcla 7:3 hexano/acetona.

 El n-hexano no es recomendado para realizar la lecturas en espectro UV/Vis.

 Para trabajos posteriores se recomienda:

 Mantener un mayor control de la clorofila aislada, pues la exposición a la luz puede variar los
resultados.
 Experimentar con otros solventes en espectro UV/Vis.