Filial Norte

CICLO DE KREBS.
TRANSPORTE DE ELECTRONES

Mg. Helda C. Del Castillo C.

 Repaso de clases anteriores

• ¿Destino de la glucosa?
Piruvato
Glucólisis

• ¿Destino del piruvato?

Anaerobios vías fermentativas
Aerobios CO2 + H20 + energía

Respiración celular

Liberación de la energía de CHOs, AA y Ac grasos mediante reacciones

bioquímicas

Fases

A- La oxidación de ácidos grasos, glucosa y algunos aminoácidos produce Acetil-

CoA
B- El Acetil-CoA se oxida a CO2 en una vía cíclica con producción de coenzimas
reducidas y energía
C- Oxidación de las coenzimas en la cadena de transferencia de electrones y
generación de ATP

2
Ciclo de Krebs
 PROCEDENCIAS DE PIRUVATO
Fuente exógena
(Glucosa, fructosa,
• VIA GLICOLITICA galactosa, Manosa)
Fuente endógena
(glucógeno ó almidón)

Por transaminación
(alanina)
• AMINOACIDOS Por Degradación
(serina, triptófano)
 DESTINO DE PIRUVATO EN AEROBIOSIS

• Ingresa a la mitocondria, por un transportador

específico.
• Dentro de la mitocondria por descarboxilación
oxidativa se transforma en Acetil-CoA.
• Interviene un complejo multienzimático:
piruvato deshidrogenasa.
Degradación del piruvato
• DESTINO DEL PIRUVATO EN
CONDICIONES ANAERÓBICAS:
FERMENTACIONES
• En ausencia de O2, y en
algunas células, el
piruvato se metaboliza
hacia compuestos mas
reducidos para recuperar
el NAD+, necesario para
que siga actuando la vía
glucolítica; manteniendo
así constante la relación
NAD+/NADH
citoplasmática.
 FERMENTACIÓN LÁCTICA

• La fermentación es la degradación de glucosa en

ausencia de oxígeno; comprende las reacciones
glucolíticas y otras reacciones de reducción finales.
Algunos microorganismos y las células musculares,
en anaerobiosis, reducen el piruvato a lactato. Así
pueden regenerar el NAD+ necesario para continuar
la glucolisis.
SITUACIÓN INICIAL
• Piruvato en el
citosol..
• Se ha de continuar la
RESPIRACIÓN
CELULAR: conjunto
de etapas que
terminan la
oxidación del
piruvato hasta CO2 y
agua generando
poder reductor para
la síntesis de ATP.
8
 PASOS PREVIOS AL CAT
• Paso del piruvato al
interior de la matriz
mitocondrial.
– Membrana
mitocondrial
externa:
permeable
– Membrana mit.
interna:
selectiva.
Pasan:
• ADP y ATP
• Ácido pirúvico
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 ETAPAS DE LA RESPIRACIÓN CELULAR

• Oxidación del ácido pirúvico.

• Ciclo de Krebs
– Ciclo del ácido cítrico o Ciclo de los ácidos
tricarboxílicos
• Cadena respiratoria

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 OXIDACIÓN DEL PIRUVATO

• Piruvato deshidrogenasa. Complejo

multienzimático.
• Se forma NADH+H+ (en realidad 2 por
glucosa)
• Producto: ACETIL COENZIMA A

11
 COMPLEJO DE PIRUVATO
DESHIDROGENASA
• Se encuentra en la matriz
mitocondrial
• E1: Piruvato
• No forma parte del Ciclo de deshidrogenasa
Krebs 
• Sintetiza Acetil-CoA • E2: Dihidrolipoamida
• 3 enzimas distintas y cinco transacetilasa
coenzimas.
• E3: Dihidrolipoamida
deshidrogenasa
• Las cadenas de E1 contienen • 5 Coenzimas: TPP,
TPP ( pirofosfato de tiamina),
• E2: ác. Lipoico unido Acido lipoico, FAD,
covalentemente NAD, CoA-SH
• E3 : FAD fuertemente unido
REGULACIÓN
La actividad de la
PDH está regulada
alostéricamente por
varios metabolitos,
como se aprecia en
la siguiente figura.
Los metabolitos que
indican alta energía
celular la inhiben y el
AMP la activa.
16
 Ciclo de los ácidos tricarboxílicos (Ciclo de
Krebs).
LOCALIZACION: Mitocondria

FUNCION: catabólica, oxidación de glúcidos, ácidos

grasos y proteínas para obtener ENERGIA

VISION GENERAL: es una serie cíclica de 8 reacciones que oxidan el Acetil- CoA a CO 2 y con
obtención de: ATP, NADH+H y FADH2

PROCESO AEROBICO: la ausencia de O2 inhibe el ciclo

 CICLO DE KREBS
 Definición :

• Es un conjunto de
reacciones
bioquímicas que
utilizan los organismo
aerobios para liberar la
energía química
almacenada en el
grupo acetilo de los
carbonos de la acetil-
CoA.
 PAPEL CENTRAL DEL CICLO DEL ÁCIDO CÍTRICO
EN EL METABOLISMO

La degradación de los componentes

celulares, glucógeno, proteínas o ácidos
grasos, y de los nutrientes termina
produciendo Acetil-CoA, molécula en la
que convergen muchas rutas
degradativas.
El Acetil-CoA se degrada en el ciclo de
Krebs para producir energía cuando las
necesidades celulares así lo demanden.
A este ciclo metabólico también se le
denomina como ciclo del ácido cítrico o
ciclo de los ácidos tricarboxílicos (C.A.T.)
 CICLO DE KREBS
 Este ciclo se genera en
condiciones aerobias
 Cuando no hay oxigeno
disponible en la célula, la
velocidad del ciclo
disminuye o se inhibe
completamente
 Se lleva a cabo en la matriz
mitocondrial de todas las
células del organismo
( excepto eritrocitos)
 Durante una vuelta del
ciclo de Krebs, a partir de
una molécula de acetil-
CoA, se producen:

A. Tres moléculas de NADH

B. Una molécula de FADH2
C. Dos moléculas de CO2
D. Una molécula de GTP
( ATP),el ATP se forma por
la catalizacion de La
nucleósido difosfato
quinasa
 CICLO DE KREBS
• Funciones :
( vía anfibolica (es
decir, catabólica y
anabólica al mismo
tiempo)

1. Producción de energía
(oxidación de la acetil-
CoA )
2. Sus intermediarios son
sustratos de diversas
reacciones de síntesis
 CiCLO DE KREBS
• Reacciones;

 Esta formado por ocho reacciones que tienen lugar

en dos fases:

1. El grupo acetilo de dos carbonos de la acetil-CoA

entran en el ciclo al reaccionar con el compuesto
de cuatro carbonos oxaloacetato ( reacciones 1-4)

2. El oxaloacetato se regenera de forma que pueda

reaccionar con otra acetil-CoA ( reacciones 5-8)
 CICLO DE KREBS
1. Introducción de dos carbonos como acetil-CoA.
El ciclo del ácido cítrico comienza con la
condensación del la acetil-CoA para formar citrato,
catalizado por la enzima citrato sintasa
 CICLO DE KREBS
2. El citrato se convierte de forma reversible en
isocitrato por la aconitasa
3. El isocitrato se oxida para formar NADH y CO2.
la descarboxilacion oxidativa del isocitrato se produce en dos pasos:

a. El isocitrato se oxida para formar oxalsuccinato

b. El oxalsuccinato se descarboxila para formar alfa-cetoglutarato

c. Enzima: isocitrato dehidrogenasa

4. El alfa-cetoglutarato se oxida para formar una segunda
molécula de NADH.
La conversión del alfa-cetoglutarato en succinil-Coa esta
catalizado por la actividad enzimático del complejo alfa-
cetoglutarato deshidrogenasa
5. La ruptura de la succinil-CoA esta acoplada a una
fosforilación a nivel de sustrato.
ruptura del enlace tioester de energía elevada de la
succinil-CoA para formar succinato, catalizado por La
enzima succinil CoA sintetasa
6. La molécula de cuatro carbonos succinato se
oxida para formar fumarato y FADH2
la succinato deshidrogenasa (unida a la
membrana mitocondrial interna) cataliza la
oxidación del succinato para formar fumarato
7. Hidratación del fumarato.
el fumarato se convierte en L- malato en una
hidratación reversible catalizada por la fumarasa
( fumarato hidratasa )
8. El malato se oxida para formar oxalacetato y un
tercer NADH
cataliza la enzima malato deshidrogenasa
 Balance químico del CAT:

Acetil-CoA + 3 NAD+ + FAD + GDP + Pi + H2O

---------->2 CO2 + CoA-SH + 3 NADH + FADH2 +
GTP + 3 H+
Regulación del Ciclo de Krebs

Regulación alostérica de enzimas claves

Citrato sintasa
Inhibidores: NADH, Succinil-CoA, Citrato, ATP
Activadores: ADP

Isocitrato deshidrogenasa
Inhibidores: ATP
Activadores: Ca+2 (músculo), ADP

Alfacetoglutarato deshidrogenasa
Inhibidores: Succinil-CoA, NADH
Activadores: Ca+2 (músculo)

Regulador clave: relación mitocondrial de

[NAD+] / [ NADH]

34
Cadena de transporte electrónico y
fosforilación oxidativa..
 LA MITOCONDRIA

FÁBRICA DE ENERGÍA CELULAR

ES EL SITIO DONDE TIENEN LUGAR

EL TRANSPORTE ELECTRÓNICO Y
LA FOSFORILACIÓN OXIDATIVA
 Localización

30ATP

32ATP
 La cadena transportadora de
electrones
• El NADH+H y el FADH2, obtenidos en el
ciclo de Krebs, van a entrar en una
cadena transportadora de electrones o
cadena respiratoria, donde pasan los
electrones, de una molécula reducida a
otra oxidada, hasta el aceptor final que
será el oxígeno molecular, que al
reducirse formará agua.
Reacciones de la cadena de transporte de electrones

Con excepción de la coenzima Q, todos los miembros

de esta cadena son proteínas.

Pueden funcionar como enzimas como en el caso de

varias deshidrogenasas.

Pueden contener hierro como parte de su centro

hierro-azufre .

Los citocromos a y a3 contienen cobre.

 Componentes de la cadena respiratoria

Transportadores de electrones
-Coenzimas hidrosolubles:

NAD+ coenzimas de las deshidrogenasas

NADP+

FMN se unen covalentemente a flavoproteínas

FAD (grupo prostético), transportan 2 e- y 2 H+

- Quinonas: Coenzima Q – Ubiquinona, transportadores en medio no acuoso

(membrana), transporta 1 e- y libera 2 H+ a la matriz

- Citocromos b, c, c1, a y a3 : proteínas con grupo prostético hemo, transportan

1 e-

- Proteínas ferro-sulfuradas: proteínas con Fe asociado a átomos de S,

transfieren 1 e- por oxidación o reducción del Fe
Grupos prosteVcos de
Los citocromos
Estructura
De los centros
Fe--‐S
 Reacciones que proveen de NADH
a la cadena respiratoria

• Piruvato deshidrogenasa

• Isocitrato deshidrogenasa

CICLO DE KREBS
• Malato deshidrogenasa

• a-cetoglutarato deshidrogenasa
CR
Sustrato + NAD+ Producto + NADH + H
Componentes de la Cadena de transporte electrónico

Complejo enzimático Grupos prostéticos

Complejo I (NADH deshidrogenasa o FMN, FeS

NADH CoQ oxidorreductasa)
Complejo II ( succinato deshidrogenasa) FAD, FeS
o Succinato CoQreductasa)
Complejo III (citocromo bc1) Hemo, FeS
o Ubiquinol citocromo c oxidorreductasa)
Citocromo c Hemo

Complejo IV (citocromo oxidasa) Hemo, Cu

Complejo V (ATP sintasa)

La Cadena de Transporte de Electrones comprende
dos procesos:

1.- Los electrones son transportados a lo largo de la

membrana, de un complejo de proteínas
transportadoras a otro.

2. Los protones son translocados a través de la

membrana, desde el interior o matriz hacia el espacio
intermembrana de la mitocondria.

Esto constituye un gradiente de protones

El oxígeno es el aceptor terminal del electrón,

combinándose con electrones e iones H+ para
producir agua.
• La transferencia de electrones desde el NADH a través
de la cadena respiratoria hasta el O2 es un proceso
altamente exergónico.

• La mayor parte de esa energía se emplea para bombear

protones fuera de la matriz.

• Por cada par de electrones transferidos al O2  los

complejos I y III bombean 4 H+ y 2 el complejo IV.

• El complejo II no transfiere H+ ya que no atraviesa la

membrana interna como los demás.

• Así esta energía electroquímica generada por el

gradiente protónico impulsa la síntesis de ATP.
 Flujo de electrones y protones a través de los cuatro complejos que
forman la cadena respiratoria

El oxígeno es el aceptor terminal del electrón, combinándose con electrones e iones

H+ para producir agua.
 COMPLEJO V :ATP sintasa

• F1 : 9 subunidades: a3 b3 g d e y
3 sitios catalíticos
• Fo: Proteína integral , canal
transmembrana para protones
con 3 subunidades: a, b2 y c12
• Esta enzima es la que
transforma la energía cinética
del ATP en energía química.
• El Dr. Boyer (1964) recibió el
Premio Nobel al describir la
ATP sintasa.
 INHIBICION DEL TRANSPORTE
ELECTRÓNICO
• Inhibidores del transporte electrónico
Inhiben solamente el transporte de e-

• Inhibidores de la fosforilación
Inhiben la síntesis de ATP, indirectamente el transporte
de e-

• Desacoplantes
Impiden la síntesis de ATP pero no inhiben el transporte
de electrones. Actúan como ionóforos eliminando el
gradiente de protones.

• Inhibidores de la translocasa
Inhiben la entrada de ADP y la salida de ATP desde la
mitocondria
ACCIÓN DE INHIBIDORES
 Inhibidores de la fosforilación
Oligomicina:
• Bloquea el flujo de protones a través de F0, impidiendo la fosforilación.
• Se inhibe la síntesis de ATP
• Se acumulan protones y se produce una fuerza inversa deteniéndose el
transporte de electrones.

Desacoplantes:
• Compuestos que impiden la síntesis de ATP, pero no bloquean el flujo de
electrones, de esa manera desacoplan la cadena respiratoria de la
fosforilación oxidativa.
• El 2,3-dinitrofenol (DNF) transfiere iones hidrógeno desde el lado externo
hacia la matriz y anula el gradiente de protones creado por la cadena
respiratoria.
 POSTULADOS DE LA TEORIA QUIMIOSMOTICA

• Pasaje de H+ durante la transferencia de electrones desde la matriz al

espacio intermembrana.

• Generación de un gradiente electroquímico : flujo electrónico

acompañado de la transferencia de protones.

• Los protones acumulados en el espacio intermembrana crean una

fuerza: «protón-motriz», por la tendencia de volver a pasar al interior
para igualar el pH a ambos lados de la membrana.

• Esa fuerza es utilizada para el pasaje de los H+ a través de Fo y así

activan la ATP sintasa
 Sistemas de lanzaderas
Surgen de la necesidad de recuperar el NAD+ citosólico, dado que la
membrana mitocondrial es impermeable a este compuesto
Mas activa en hígado y corazón
 REACCIONES ANAPLERÓTICAS Y OTRAS
FUNCIONES DEL CICLO
Para que el ciclo sea funcional es necesario que haya cierta concentración de
oxalacetato, el cebador del ciclo. La degradación de algunos aminoácidos
proporciona metabolitos intermediarios del C.A.T. que pueden alimentar al
ciclo. Otra reacción que puede suministrar oxalacetato es la de carboxilación
del piruvato:

Piruvato + CO2 + ATP + H2O             oxalacetato + ADP + Pi + 2 H+

A estas reacciones, que procuran

intermediarios al C.A.T., se les
denomina anapleróticas.
 Interrelaciones del ciclo de Krebs con otras vías
metabólicas

Vía anfibólica

vías metabólicas con roles anabólicos y catabólicos a la

vez

68
 Degradación de aminoácidos
Los carbonos de los AA entran al ciclo en diferentes puntos

69
Degradación de ácidos grasos (Beta oxidación)

70
 Rol del ciclo de Krebs en el anabolismo

Reacciones anapleróticas: en rojo 71

Reposición de intermediarios por reacciones anapleróticas

A estas reacciones, que procuran

intermediarios al C.A.T., se les
denomina anapleróticas. 72
 Ciclo de Krebs, conclusiones globales

• En eucariotes transcurre en la mitocondria.

• Vía central del metabolismo aerobio: es la vía oxidativa final

en el catabolismo de los carbohidratos, ácidos grasos y
aminoácidos.

• La acción acoplada del ciclo del ácido cítrico y la cadena de

transporte de electrones son responsables de la mayoría de la
energía producida.

• Fuente importante de intermediarios de vías biosintéticas.

73
BALANCE ENERGÉTICO DE LA DEGRADACIÓN
DE LA GLUCOSA
En células con metabolismo
aeróbico, los NADH
formados en las reacciones
de oxidación biológica - en la
glucolisis, descarboxilación
oxidativa del piruvato o en el
CAT- descargan sus
electrones en la cadena
respiratoria mitocondrial,
donde con la fosforilación
oxidativa acoplada al
transporte electrónico se va
a generar abundante ATP.