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INFECCIONES POR

ANAEROBIOS

SERVICIO DE INFECTOLOGIA
DR : JESUS ROBLES BARZOLA
HOSPITAL ALBERTO SABOGAL SOLOGUREN
INTRODUCCION
INTRODUCCION

 Bacterias mas frecuentes en la microflora


 Membranas mucosas
 Daño de mucosa con entrada a sitio estéril
 Sinergia en infecciones mixtas
 Difíciles de cultivar e identificar
 Resistencia en aumento

Hecht DW. Anaerobe 2006;12:115


INFECCIONES POR ANAEROBIOS.

 ANAEROBIOS ESTRICTOS: Para su metabolismo y crecimiento no emplean O2 sino


reacciones de fermentación mediante las cuales obtienen energía. No crecen en
presencia de O2 ( tóxico ) pues no tienen :

* Citocromo oxidasa.
* Superoxido dismutasa:2O2- + 2H2+ H2O2 + O2.
* Catalasa:2H2O2 2H2O + O2.
Ej: Bacteroides y Clostridios.

 ANAEROBIOS FACULTATIVOS: Contienen pequeñas cantidades de las enzimas y por


lo tanto toleran los radicales O2-. E coli, Streptococcus.

 AEROBIOS: Solamente crecen en presencia de O2.


DEFINICIONES
DEFINICIONES

 Anaerobios Estrictos:
no crecen a niveles O2 mayor a 0.5%

 Anaerobios microaerofilicos:
toleran 5 a 10% O2 (superoxido dismutasa)

 Anaerobios Facultativos:
crecen en presencia o ausencia O2
Jousimies-Somer H. Clin Infect Dis 2002;35 (suppl 1):S17
FLORA ANAEROBIA

Gram negativos: Gram positivos:


 Bacteroides  Clostridium
 Fusobacterium  Peptostreptococcus
 Prevotella  Actynomices
 Porphyriomonas  Propionibacteium
 Sutterella  Lactobacillus
 Bilophila  Bifidobacterium

Jousimies-Somer H. Clin Infect Dis 2002;35 (suppl 1):S17


CLASIFICACION DE GENEROS

Esporulados BG+
Clostridium

Cocos G+
Peptoestreptococcus Clostridium tetani
Peptococcus
Sarcina
Gemella

Cocos G-
Veillonella Sarcina Veillonella
CLASIFICACION DE GENEROS

No Esporulados BG+
Actinomyces
Bifidobacterium
Lactobacillus
Propionibacterium

Lactobacillus

Bacilos G-
Bacteroides Helicobacter
Borrelia Porphyromonas
Capnocytophaga Prevotella
Campylobacter Fusobacterium

Bacteroides
IMPORTANCIA

 Resistencia a la colonización patógena


 Depletan el oxigeno
 Depletan nutrientes
 Producen enzimas y toxinas

 Producción de vitamina K
 Absorción grasa
 Regulación del colesterol

Barenfanger J. Clin Infect Dis 2002;35 (suppl 1):S78


Bacterias Anaerobias
Efecto tóxico del oxígeno

• Efecto tóxico directo

• Formación de anión peróxido y superóxido

• Oxidación de enzimas esenciales que contengan grupos SH-

• Inhibición del metabolismo de flavoproteínas y NADH oxidasa

• Imposibilidad para alcanzar potenciales redox bajos

• Déficit o ausencia de catalasa y/o superóxido dismutasa (presente en

aerotolerantes)
Mas importantes !!
HABITA
T
Cavidad oral - TRS Intestino grueso

Prevotella Bacteroides frágilis


Porphyromonas Porphyromonas
Bacteroides fusobacterium
Fusobacterium Clostridium
Peptoestreptococcus Bifidobacterium
Veilonella Propionibacterium
Actinomyces

Intestino Delgado
Estómago

Lactobacillus Estreptococos
Lactobacillus
HABITAT

Vagina y cervix Uretra


Prevotella
Prevotella
Porphyromonas
Peptoestreptococcus
Peptoestreptococcus
Fusobacterium
Bacteroides
Veillonella Propionibacterium
Lactobacillus
Eubacterium
Propionibacterium Otros hábitat

Piel Pantanos, suelos, lagos,


Sedimentos de ríos y océanos,
Peptoestreptococcus Aguas negras, alimentos y
Propionibacterium Animales.
Flora normal anaerobia

Cavidad oral y TRS:


Piel: Bacilos gram-negativos:
Porphyromonas
Propionibacterium acnes
Prevotella, Fusobaterium
Peptostreptococcus nucleatum –
Cocos gram-positivos
Actinomyces
100:1 (ANA/AER)

Tracto genital Colon


femenino:
Bacilos gram-negativos:
Bacilos gram-negativos: Bacteroides grupo
Porphyromonas fragilis– Cocos gram-
Prevotella bivia-disiens positivos - Clostridium,
Cocos gram- Eubacterium,
positivos Lactobacillus - Bifidobacterium
Clostridium
1000:1 (ANA/AER)
Características de las infecciones por
Anaerobios

ENDOGENAS

•Polimicrobianas

•Relacionadas a mucosas

• Sinérgicas
Características de las infecciones por
Anaerobios

EXOGENAS

• Clostridiales

• No Clostridiales
AREAS FRECUENTEMENTE COMPROMETIDAS
ENDOGENAS:
EXOGENAS:
FACTORES PREDISPONENTES

• Infectados con VIH


• Trasplantados
• Diabéticos
• Hospitalización prolongada
• Niños y ancianos
• Trauma o cirugía
• Cuerpo extraño
• Destrucción, hipoxia o anoxia tisular
• Mordeduras o quemados
• Insuficiencia vascular

Aldridge K. Antimicrob Agents Chemother 2001;45:1238


CARACTERISTICAS GENERALES

 Producción de pus FETIDA


 Formación de abscesos
 Gran destrucción de tejidos
 Polimicrobianas
 Próximo a superficie mucosa
 Producción de gas (CREPITA)
 Necrosis
 Mordeduras

Aldridge K. Antimicrob Agents Chemother 2001;45:1238


INFECCIONES POR ANAEROBIOS.

 Bacteroides: Bacilos delgados ó cocobacilos, algunas especies reclasificadas como


géneros Prevotella ó Porphyromona.
Causan infecciones mixtas con peptoestreptococos, facultativos ( FN como E.Coli )
y clostridios.

B fragilis produce SOD lo que le permite vivir en aerobiosis.

Virulencia por polisacáridos capsulares que causan abscesos y lipopolisacáridos no


Endotoxinas.
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Son habitantes normales de intestino y boca, hay 10 / gramo


de materia fecal.

Producen peritonitis post heridas ó cirugías.

Clasificación por pruebas bioquímicas y patrones de ácidos grasos de cadena corta


en cromatografía de gases.
INFECCIONES POR ANAEROBIOS.

 Prevotellas: Bacilos delgados ó cocobacilos, algunas especies de Bacteroides


reclasificadas como géneros Prevotella ( B melaninogénicus ) ó Porphyromona.

Causan infecciones mixtas con fusobacterias y peptoes-treptococos.

 Porphyromonas: Flora normal en boca, piel e intestino.

 Fusobacterias: produce infecciones sólos y asociados como en la angina de


Vincent.

Los anaerobios producen heparinasa, colagenasa y endotoxinas que generan choque


séptico.
Recolección,
transporte y
conservación de muestras
Muestras NO aptas para cultivo
anaerobios
 Heces o materiales que estén contaminados
con contenido intestinal (excepción C.
difficile)
 Exudados vaginales o cervicales
 Orinas tomadas por micción espontánea o
sonda
 Esputos, secreciones nasofaringeas o
materiales tomados por broncoscopía sin
protección.
Muestras aptas para cultivo
anaerobios
 Líquidos normalmente estériles: LCR, pleural,
peritoneal, etc.
 Muestras tomadas por punción a través de
piel sana (Heridas, hematomas, colecciones,
punción suprapúbica, etc.)
 Muestras de endometrio, pulmón, etc.,
tomadas por biopsia o cepillos recubiertos.
 Biopsias (de sitios sin flora habitual)
Transporte y conservación de
muestras
 Las muestras líquidas, purulentas y de volumen considerable
pueden transportarse en tubos estériles.
 Las colecciones claras o de volúmenes reducidos pueden
inyectarse en frasquitos con tapón de goma y atmósfera inerte,
sin introducir aire.
 No es conveniente el sistema de transporte de muestras en
jeringas, porque permite la difusión del oxígeno al interior de la
muestra.
 Los raspados, hisopados y piezas de tejido pequeñas pueden
colocarse en tubos que contengan medio de Stuart, Cary-Blair,
pre-reducido.
 Las piezas de tejido con un volumen mayor a 1 cm3, pueden
transportarse en recipientes estériles, sin conservantes.
Transporte de Muestras

• Frascos para hemocultivos


anaeróbicos
• Jeringa y aguja con tapón de goma

(No se aconseja por cuestiones de


bioseguridad)
• Frascos con medios prerreducidos
Tiempo de transporte sugerido según: volumen,
método de conservación y tipo de muestra

Tiempos hasta la
Muestra
siembra
Aspirados
< 1 ml 10 minutos
1-2 ml 30 minutos
> 2 ml 2 – 3 horas

Tejidos y biopsias
- +) en recipiente estéril sin anaerobiosis 30 minutos
- +) en bolsa anaeróbica 2- 3 horas
Diagnóstico microbiológico:
Cultivo

 Utilizar medios frescos, recientemente preparados


o pre-reducidos

 Procesar rápidamente

 Evaluar qué microorganismos buscamos para elegir


el medio: suplementos específicos
Diagnóstico microbiológico:
Medios
 Medios sólidos NO selectivos: (Agar base enriquecido:
Brucella, Columbia, Schaedler, etc)
 Agar Base + Vit K (1 mg/ml) + Hemina (5 mg/ml) +
sangre lacada al 5% (BHKA)
 Medios sólidos selectivos:
 BHKA + KAN (30 a 50 µg/ml)
 BHKA + VAN (5 µg/ml)

 Medios líquidos: Resguardo (“Backup”)


 Caldo BHI, tioglicolato suplementado con cisteína, Vit K
y hemina.
Cultivo de anaerobios: Atmósfera

 Sistemas de incubación:
a)     Jarras anaerobias
b)     Cámara anaerobia
c)      Bolsas anaerobias
Obtención de atmósfera anaerobia

2H2 + O2 2H2O

H2
CO2
Obtención de atmósfera anaerobia

Cámara Anaerobia
RECOLECCION DE LA
MUESTRA

 Adecuada asepsia
 Elegir la forma de recolección
 Aspirado
 Biopsia de Tejido

65 % mal recolectadas
15% de sitios colonizados

Behra-Miellet J. Anaerobe 2003;9:105


QUE SI CULTIVAR !!

• Líquidos estériles:
• Serosas

• Sangre
• Orina solo con sonda

• Pus de abscesos por punción

Citron DM. J Clin Microbiol 2007;45:2819


QUE NO CULTIVAR !!

• Materia fecal

• Hisopados (piel, vagina, heridas)

• Trayectos fistulosos

• Orina por micción

Citron DM. J Clin Microbiol 2007;45:2819


EL PROCESO…

Exámen microscópico: Gram


macroscópico: olor, color, fluorescencia,
presencia de gránulos

Medios de Cultivo para aislamiento:

Agar Brucella+VitK+Hemina+sangre 5%
Anaerobios agar Bacteroides Bilis-esculina (BBE)
agar sangre Kanamicina + Vancomicina
Fenil etil agar+Vit K+Hemina+sangre 5%
Caldo: Tioglicolato

Incubación: hasta 10 días


Género clostridium
INFECCIONES POR ANAEROBIOS.

CLOSTRIDIOS.

Bacilos gram + formadores de esporas, muchos de ellos producen exotoxinas.

C botulinum: Sus esporas se alojan en alimentos enlatados ó en conserva ( an-


aerobiosis ), los clostridios germinan y elaboran las neurotoxinas que actúan
sobre el SNP inhibiendo la liberación de Acetil colina en las sinapsis colinér-
gicas causando parálisis. La fijación de la toxina es irreversible y los síntomas
se deben a la acción anticolinérgica: Disfagia, sequedad de boca, diplopía y
broncoespasmo.

El botulismo infantil se debe a la ingestión del clostridio y su germinación, una


fuente importante de esporas es la miel de abejas.

Tratamiento: Antitoxina.
Fuente de clostridios.
Clostridium botulinum

 Se encuentran en la tierra y sedimentos acuáticos


 La fuente más común de intoxicación es la ingestión de conservas o
fiambres caseros.
 Al alcanzarse el potencial redox adecuado la espora germina en el
alimento y la forma vegetativa produce una exotoxina.
 La toxina ingresa por vía digestiva y difunde por vía humoral hasta las
neuronas motoras.
 La toxina bloquea la liberación de acetilcolina dando como resultado una
parálisis fláccida de los músculos esqueléticos.
 El paciente muere por parálisis de los músculos respiratorios.
Clostridium botulinum
Inhibición presináptica
Clostridium botulinum - Prevención
 Deben cumplirse estrictamente las normas de seguridad
en la manipulación de los alimentos
en la industria alimentaria.
 Debe educarse a la población general respecto
de los procedimientos seguros de envasado de los
alimentos.
 En caso de dudar del origen de los alimentos, deben
calentarse 10 minutos a 100ºC para destruir la toxina.
 No debe administrarse miel a lactantes menores de 1
año de edad (Botulismo del lactante).
 No existe vacuna de aplicación universal.
INFECCIONES POR ANAEROBIOS.

CLOSTRIDIOS.

 C perfringens: Gangrena gaseosa, tiene varias exotoxinas.


* Toxina α : Lecitinasa, es toxina
necrotizante y hemolítica.
* Otras toxinas con acciones similares.
Patogenia : Contaminaciónde tejidos blandos en politrauma,
aborto séptico y heridas de guerra.

Los microorganismos se multiplican, elaboran las toxinas


necrosantes y se acumulan CO2 y H2 como gas en la gangrena;
tambien hay edema e insuficiencia vascular que aumentan la
hipoxia. Bacteremia y choque séptico.

Intoxicación alimentaria, mediante una


enterotoxina liberada durante la esporulación causa diarrea, dolor
abdominal y náuseas después de 8 a 24 horas de incubación.
Clostridium perfringens
Clostridium perfringens

 Se encuentran en el suelo e intestino del hombre y animales.


 La bacteria ingresa a través de heridas en forma endógena o exógena.
 Al alcanzarse el potencial redox adecuado la espora germina:
REDUCCIÓN DE MIOGLOBINA .
 La forma vegetativa produce varias exotoxinas
 Las toxinas difunden por contigüidad produciendo necrosis tisular y
abundante cantidad de gas:
 La infección se manifiesta como gangrena gaseosa cuando afecta al
tejido subcutáneo o como mionecrosis cuando afecta al tejido muscular:
Taponamiento capilar / uso de glucógeno.
 Con frecuencia debe amputarse el miembro afectado.
Clostridium perfringens
Clostridium perfringens - Prevención

 No existe vacuna de aplicación universal.


 Deben extremarse las medidas de asepsia durante las cirugías
abdominales o al aplicar inyecciones intramusculares profundas.
 Deben tratarse rápidamente con antibióticos las heridas
contaminadas.
 Cámaras hiperbáricas.
Clostridium perfringens
Clostridium difficille
Ingresa VO

 Anaerobios estrictos.
 Ubicuos en el ambiente Esporas superan
HCL
 Flora de TGI (2-4%).
 20-25 % hospitalizados. Esporas germinan
 Toxinas A y B

Behra-Miellet J. Intern J Antimicrob Agents 2006;26:25


Clostridium difficille
Altera flora normal
de colon por AB
Se forma
pseudomembrana

DX:
• Diarrea
• Pseudomem en la colonsocopia O
toxina positiva
• Sin otra causa de diarrea
• Uso previo de AB (6-8 semanas)
Entra a criptas y
produce toxinas
INFECCIONES POR ANAEROBIOS.

C difficile.

Respuesta inmune:

Inespecífica mediada por PMN y C.


Celular específica por LT.

Tratamiento: Antibióticos.
*Metronidazol, ornidazol y clindamicina.
*Clindamicina para infecciones supradiafragmáticas.
*Bacteroides y prevotella producen β lactamasa.

Cirugía.

Antitoxinas.

Prevención: Aseo, técnica quirúrgica.


Clostridium difficille

Diarrea asociada a AB: C.difficile es solo una


causa

Diarrea por C.difficile: diarrea + toxina positiva

Colitis por C. difficile es el proceso patológico

Colitis pseudomembranosa es la demostración


endoscópica

Megacolon toxico es un diagnostico RX y QX


Clostridium difficille
Colitis Pseudomembranosa
INFECCIONES POR ANAEROBIOS.

CLOSTRIDIOS.

C Tetani: Bacilos gram + móviles, se encuentran en el suelo, heces


de caballos y otros animales.
 Tiene antígenos de dos tipos: Flagelares y somáticos.

 Patogenia:Produce dos toxinas: * Tetanolisina.


* Tetanospasmina: Fijarse a
receptores presináticos vía transporte axónico retrógrado a los
cuerpos de ellas , bloquea las celulas inhibidoras. El
resultado: Neuronas motoras no inhibidas lo que produce
hiperreflexia, espasmos musculares y parálisis espástica.

 Diagnóstico: Efectos citopáticos de la citotoxina en cultivos


celulares.
Detección de enterotoxina en heces mediante
inmunoanálisis.
INFECCIONES POR ANAEROBIOS.

CLOSTRIDIOS. C Tetani:
Patogenia: No es un microorganismo invasor, la infección
permanece localizada en el sitio del tejido desvitalizado – herida,
quemadura, punción, mordedura, muñón umbilical ó sutura – que
generalmente es pequeño y se produce una masiva toxinemia.
Período de incubación: De 4 dias a 4 semanas.
Clínica: Contracciones tónicas de músculos voluntarios, inicialmente
de la zona infectada y despues de maxilar inferior, MM SS, II,
paravertebrales y abdominales, generando los famosos, risa
sardónica y opistótonos.
Diagnóstico: HC, cuadro clínico y antecedente de una lesión.
Cultivo.
Tratamiento: 1-Antitoxina 250 a 500 unidades IM, protege durante 2
a 4 semanas neutralizando la toxina aún no fijada al tejido nervioso.
2 -Penicilina.
3 –Debridación.
Prevención: Vacuna.
Manejo adecuado de heridas.
Tetanos
TETANOS
VACUNA ANTITETÁNICA.
•El tétanos es una causa importante de
morbimortalidad en los países del tercer
mundo, especialmente el tétanos neonatal.

Eficacia.
La serie primaria logra casi un 100% de
protección, que se mantiene al menos 10 años.
Efectos secundarios.
 Inflamación en la zona de la inyección, fiebre
y malestar general.
 Excepcionalmente neuropatía periférica,
urticaria o anafilaxia.
TETANOS

VACUNA ANTITETANICA
Indicaciones.
 Inmunización a partir de los 2 meses de edad
y mantenimiento de la inmunización.
 Prevención del tétanos en heridas en
individuos no o mal vacunados o heridas de
riesgo:
 Heridas contaminadas (tierra, saliva, heces,
etc.).
 Heridas con gran destrucción o pérdida
tisular.
 Heridas que tarden más de 24 horas en ser
atendidas.
 Quemaduras y congelaciones.
 Pinchazos accidentales. AT.
PROFILAXIS EN HERIDAS

PROFILAXIS ANTITETÁNICA EN HERIDAS

TIPO DE HERIDA

VACUNACIÓN
PREVIA LIMPIA SUCIA

No, dudosa o Vacunación Vacunación más


incompleta inmunoglobulina

Completa Nada (vacunar si hace más de Nada (vacunar si hace más


10 años desde la última dosis) de 5 años desde la última
dosis)
Actinomyces
 anaerobio estricto o facultativo
 forma filamentos delgados
 crece lentamente
 infección crónica y lenta
 coloniza TRS, TGI, genital femenino

 Actinomicosis cervicofacial
infeccion granulomatosa crónica , forma
abscesos que fistulizan

 Forma gránulos de azufre


masas de filamentos de la bacteria
+ fosfato de calcio
Y QUE PRESCRIBO …

SNC: MTZ

Boca: amp/sulb
SPN: amp/sulb

Piel:
Pulmón: • amp/sulb
• amp/sulb • tigecilcina
• pip/taz

Abdomen:
• MTZ
• amp/sulb
• pip/taz •clinda
• carbapenem •Pip/taz
• tigeciclina •amp/sulb

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