IDENTIFICACION DE ESPECIES DE

COLLETOTRICHUM
RESPONSABLES DE LA
ANTRACNOSIS EN FRESA
BASADOS EN LOS ESPACIADORES
INTERNOS TRANSCRITOS DEL
REGIÓN RIBOSOMAL
• En los últimos años, diferentes técnicas
moleculares han llevado a un importante
avance en la caracterización de las especies
de Colletotrichum, pero no hay métodos
disponibles que permiten la fácil
identificación de las cepas de Colletotrichum
y su asignación a las especies clásicas.

Se utiliza para identificar un total de 80 cepas de

Colletotrichum, la mayoría de ellos aislamientos de fresa.
Uno de los resultados mas interesantes derivados de este
estudio fue la distinción fácil y fiable, usando la
endonucleasa MvnI, entre Colletotrichum y
Colletotrichum gloeosporioides fragariae, ambos
responsables de la antracnosis en fresa y fenotípicamente
indistinguibles.
• Además, proponemos los fragmentos de
restricción generados por el MvnI
endonucleasas, PvuII y ScrFI como un método
rápido para diferenciar especies del género
Colletotrichum.
 INTRODUCCION:
• El género Colletotrichum comprende algunos
los hongos patógenos de gran importancia
económica y destructivas de las plantas, tales
como
 Colletotrichum acutatum (Simmonds),
 Colletotrichum fragariae (Brooks)
 y Colletotrichum gloeosporioides (Penz)
Fig. 1 (A-C). Antracnosis causada por Colletotrichum acutatum en frutos de fresa. A,
síntomas en frutos infectados naturalmente. B, conidios tratados con lactofucsina
0,025%. X 661,5. C, Apresorios producidos en agua-agar acidificado con ácido láctico. X
1050.
• Colletotrichum acutatum (Simmonds),
• Colletotrichum fragariae (Brooks)
Host: strawberry (Fragaria spp. L.)
Colletotrichum gloeosporioides (Penz)
• Responsables de la antracnosis
en frutos de fresa y plantas .
Esta enfermedad causa
importantes daños a los cultivos
de fresa, tallo y de la corona de
podredumbres, y también como
después de la cosecha patógeno
• Tradicionalmente, la identificación, así como
la caracterización de especies de
Colletotrichum se han basado en
características morfológicas tales como la
forma de conidias y apresorios y tamaño, así
como pruebas de patogenicidad

La supuesta existencia de formas

intermedias entre las especies, las
características morfológicas
plasticidad y superposición de fenotipo,
hicieron que la clasificación sea difícil y
por lo tanto se complica el uso de los
criterios clásicos para la de
identificación, de estos patógenos.
• En contraste, las técnicas biológicas
moleculares proporcionan métodos
alternativos adicionales, que se están
convirtiendo en importantes
herramientas en la solución del
problemas de identificación de hongos
• Diferentes enfoques moleculares se han
utilizado para caracterizar Especies
Colletotrichum aislado de fresa. Se incluyen :
 Comparaciones de Isoenzimas
 Fragmentos De Restricción de ADN
Mitocondrail Polimorfismos de Longitud de
Fragmentos (RFLP)
 La Reacción en Cadena de Polimerasa (PCR) ,
 Análisis de Restricción del ADN Ribosomal
 Análisis y la Secuenciación del ADN Ribosomal
• Recientemente, el hongo de la antracnosis en
fresa ha sido examinado usando RFLPs del
ADN mitocondrial y ribosomal y perfiles de la
isoenzima

En este estudio dos especies principales

agregadas se han detectado, centrada en C.
acutatum y C. gloeosporioides, con la
subdivisión más importante
 2.-Materiales y métodos
2.1.-aislamientos de hongos
• Ochenta cepas Colletotrichum fueron examinados, todos ellos
fueron proporcionados por el Instituto Internacional de
Micología (IMI), Egham, Reino Unido , previamente
identificados.

Cincuenta y dos cepas pertenecen a la especie

C. acutatum, 16 a C. fragariae, seis a
gloeosporioides C., en el que un teleomorfo se
había informado anteriormente (G. cingulata),
dos a Colletotrichum coccodes y una cepa de
cada especie Colletotrichum crassipes,
Colletotrichum falcatum, C. gloeosporioides (a
partir de cítricos) y kahawae Colletotrichum
 la preparación de ADN
• Todas las cepas se cultivaron sobre agar dextrosa de
patata durante 6 ^ 8 días para obtener las esporas, y se
transfirieron a 100 ml de líquido medio (2% de glucosa,
0,01% NH4H2PO4, 0,002% KCl, 0,002% MgSO4b7H2O,
0,05% de extracto de levadura, 0,001% ZnSO4b7H2O,
0,001% CuSO4b5H2O) en 250 ml Erlenmeyer
•
Los medios líquidos se inocularon con una
suspensión de esporas (105 concentración final)
y se agitó a 150 rpm a C $ ³ $ 28 durante 24 h.
ADN genómico total se aisló
y purificada de acuerdo con los métodos
descritos en otra parte
[15], y se diluyó a una concentración nal de 50 ^
100
ng WL31.
 BIBLIOGRAFIA:
• Bernstein, B., Zehr, E. I., Dean, R. A., y Shabi, E. (1995): Characteristics of
Colletotrichum from peach, apple, pecan and other hosts, Plant Dis. 79: 478-
482.

• Bonde, M. R., Peterson, G.L. y Maas, J. L. (1991): Isozyme comparisons for

identification of Colletotrichum species pathogenic to strawberry.
Phytopathology 81.- 1523-1528.

• Brooks, A. N. (1931): Anthracnose of strawberry caused by Colletotrichum

fragariae n. sp, Phytopathology. 21:739 - 744.

• Cook, R. T. A. y Popple, S. C. (1984): Strawberry spot caused by Colletotrichum

sp. (Abstr.) Agric. Div. Advis. Serv. Plant Pathol. Tech. Conf, Harrogate, England